外周血白細(xì)胞VCS參數(shù)在老年細(xì)菌性肺炎診斷中的應(yīng)用價(jià)值

朱琳超 俞穎 汪浙炯

肺炎是指由細(xì)菌、真菌、支原體、衣原體等病原微生物，以及放射線、藥物過敏、免疫損傷等因素導(dǎo)致終末氣道、肺泡及肺間質(zhì)引起的炎癥，其中最常見是細(xì)菌感染引起的細(xì)菌性肺炎[1]。老年人肺部細(xì)菌感染是主要死亡原因之一[2]。老年肺部感染患者的臨床癥狀不典型，而且大部分患者WBC并不升高，易誤診、漏診，影響及時(shí)治療[3]。因此，早期、及時(shí)對老年細(xì)菌性肺炎患者進(jìn)行診斷與鑒別至關(guān)重要。VCS激光散射技術(shù)是血細(xì)胞分析儀對WBC進(jìn)行分類的方法，以電阻抗原理檢測容量（volume，V）反映細(xì)胞體積，以高頻探針檢測電導(dǎo)（conductivity，C）反映細(xì)胞核內(nèi)部結(jié)構(gòu)，以激光檢測光散射（scatter，S）反映細(xì)胞質(zhì)內(nèi)顆粒特性，對WBC在接近原始狀態(tài)下進(jìn)行分析，除了檢測常規(guī)血細(xì)胞參數(shù)外，還能提供定量的WBC體積、傳導(dǎo)率、激光散射率等VCS參數(shù)，在一定程度上能反映WBC的形態(tài)特征和內(nèi)部結(jié)構(gòu)[4-5]，這些參數(shù)是直接測得的電子信號，沒有單位[6]。有報(bào)道在感染性疾病中VCS參數(shù)能反映中性粒細(xì)胞、淋巴細(xì)胞和單核細(xì)胞的形態(tài)學(xué)改變[7-8]。本研究通過觀察細(xì)菌性肺炎患者中性粒細(xì)胞和淋巴細(xì)胞VCS參數(shù)變化，找出對疾病診斷有幫助的參數(shù)，旨在發(fā)現(xiàn)對老年細(xì)菌性肺炎有診斷價(jià)值的生物標(biāo)志物。

1 對象和方法

1.1 對象 收集2016年1月至2018年2月我院收治的細(xì)菌性肺炎老年患者300例（平均年齡＞60歲），男140 例，女 160 例，年齡 61～84（73.5±8.7）歲，其中年齡70歲以上的患者占85%。所有患者根據(jù)臨床癥狀、體征、病原學(xué)及胸部X線等檢查明確診斷為細(xì)菌性肺炎，于入院24h內(nèi)檢測血常規(guī)和C反應(yīng)蛋白（C-reaction protein，CRP），根據(jù)WBC水平分為 WBC≥10×109/L肺炎組134例和WBC＜10×109/L肺炎組166例；另選取同期本院健康體檢者220例作為健康對照組，男100例，女 120 例，年齡 60～75（68.3±7.9）歲。臨床和實(shí)驗(yàn)室檢查排除感染性疾病、糖尿病、晚期腫瘤、使用激素和免疫抑制劑等因素，WBC和分類在正常范圍內(nèi)。肺炎組和健康對照組性別、年齡比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。本研究經(jīng)我院倫理委員會批準(zhǔn)，所有患者均知情同意。

1.2 方法 采用乙二胺四乙酸二鉀抗凝的非可替真空采血管于早上9:00前空腹采集2ml靜脈血，采用Beckman-Coulter Gen.S LH780全自動分析儀檢測外周血WBC VCS參數(shù)，于2h內(nèi)完成檢測，收集中性粒細(xì)胞平均體積（neutrophils volume，NV）、中性粒細(xì)胞平均傳導(dǎo)率（neutrophils conductivity，NC）、中性粒細(xì)胞平均激光散射率（neutrophils light scatter，NS）、淋巴細(xì)胞平均體積（lymphocyte volume，LV）、淋巴細(xì)胞平均傳導(dǎo)率（lymphocyte conductivity，LC）、淋巴細(xì)胞平均激光散射率（lymphocyte light scatter，LS），以及各自平均分布寬度（NV-SD、NC-SD、NS-SD、LV-SD、LC-SD、LS-SD）。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SPSS 16.0統(tǒng)計(jì)軟件。正態(tài)分布的計(jì)量資料以表示，多組間比較采用單因素方差分析，方差齊性時(shí)兩兩比較采用LSD-t法，方差不齊性時(shí)兩兩比較采用Tamhane法。VCS參數(shù)與CRP的相關(guān)性分析采用Person相關(guān)。繪制ROC曲線評價(jià)各個(gè)指標(biāo)對細(xì)菌性肺炎的診斷價(jià)值。P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 肺炎患者與健康對照者中性粒細(xì)胞VCS參數(shù)的比較 WBC≥10×109/L肺炎組和WBC＜10×109/L肺炎組NV、NV-SD均明顯高于健康對照組，NC明顯低于健康對照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P＜0.05）；WBC≥10×109/L肺炎組NV、NV-SD高于WBC＜10×109/L肺炎組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P＜0.05）；3 組間 NS、NC-SD、NS-SD比較差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P＞0.05）；見表1。2.2 肺炎患者與健康對照者淋巴細(xì)胞VCS參數(shù)的比較WBC≥10×109/L肺炎組和WBC＜10×109/L肺炎組LV、LV-SD、LS-SD均明顯高于健康對照組，LC明顯低于健康對照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P＜0.05）；3組間LS、LC-SD比較差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P＞0.05）。WBC≥10×109/L肺炎組與WBC＜10×109/L肺炎組淋巴細(xì)胞各項(xiàng)VCS參數(shù)比較差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P＞0.05）；見表 2。

2.3 肺炎患者中性粒細(xì)胞和淋巴細(xì)胞VCS參數(shù)與CRP的相關(guān)性 肺炎患者NV-SD、LV-SD與CRP均呈正相關(guān)（r=0.319、0.350，均P＜0.05），其余均無相關(guān)性，見表3。

表1 肺炎患者與健康對照者中性粒細(xì)胞VCS參數(shù)結(jié)果的比較

表2 肺炎患者與健康對照者淋巴細(xì)胞VCS參數(shù)結(jié)果的比較

表3 肺炎患者VCS參數(shù)與CRP之間的相關(guān)性

2.4 肺炎患者VCS參數(shù)的ROC曲線分析 繪制肺炎患者與健康對照組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異的VCS參數(shù)（NV、NC、NV-SD、LV、LC、LV-SD） 的 ROC 曲線。根據(jù)AUC可以得出NV、NV-SD、LV、LV-SD對于肺炎的診斷效能較好，其中NV-SD診斷價(jià)值最好。見圖1和表4。

圖1 肺炎患者NV、NC、NV-SD、LV、LC、LV-SD診斷的ROC曲線

表4 肺炎患者NV、NV-SD、LV、LV-SD的AUC、靈敏度、特異度和cut-off值

3 討論

細(xì)菌感染機(jī)體后，WBC作為機(jī)體免疫系統(tǒng)的一道重要防線，除數(shù)量發(fā)生變化外，其形態(tài)也伴隨著改變，如中性粒細(xì)胞核左移、中毒顆粒、空泡、包涵體，淋巴細(xì)胞體積變化、核染色質(zhì)疏松等，均有助于診斷細(xì)菌感染[9-10]。血常規(guī)WBC和中性粒細(xì)胞升高是判斷細(xì)菌性感染的常用指標(biāo)之一，但易受患者年齡、時(shí)間、運(yùn)動、情緒、月經(jīng)、妊娠等生理因素影響[11]。因此尋找一種或幾種在細(xì)菌性肺炎時(shí)能反應(yīng)WBC形態(tài)學(xué)改變的指標(biāo)，將對疾病的早期診斷和及時(shí)治療具有重要臨床意義，VCS技術(shù)與傳統(tǒng)手工形態(tài)學(xué)檢查相比，具有快速、準(zhǔn)確、客觀等優(yōu)點(diǎn)。

研究顯示典型的細(xì)菌性肺炎患者常有WBC升高[12]，但有一部分細(xì)菌性肺炎患者WBC并不升高，這與本次實(shí)驗(yàn)結(jié)果一致，46%細(xì)菌性肺炎患者WBC增高，而54%的患者WBC無明顯變化。此外，血液病、惡性腫瘤、酒精中毒、服用兒茶酚胺類藥物或某些抗生素等，均可影響炎癥反應(yīng)時(shí)WBC的變化。因此，影響WBC的因素較多，以它作為細(xì)菌感染的診斷指標(biāo)有一定的局限性。而VCS參數(shù)能具體反映細(xì)胞內(nèi)部的變化，比細(xì)胞計(jì)數(shù)更加敏感和特異。張靈玲等[13]研究發(fā)現(xiàn)，細(xì)菌感染患者中性粒細(xì)胞VCS參數(shù)有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，并且差異不受性別的影響。本研究分析300例細(xì)菌性肺炎患者中性粒細(xì)胞和淋巴細(xì)胞VCS參數(shù)，發(fā)現(xiàn)NV、NV-SD、LV、LV-SD顯著升高，說明細(xì)菌性肺炎患者中性粒細(xì)胞和淋巴細(xì)胞體積增大，體積差異性大。因?yàn)榧?xì)菌感染時(shí)，中性粒細(xì)胞具有趨化運(yùn)動和吞噬殺傷作用，出現(xiàn)核左移、吞噬細(xì)菌、空泡變性、包涵體、中毒顆粒等，引起中性粒細(xì)胞體積變化，VCS參數(shù)中的NV、NV-SD可以定量地檢測細(xì)胞體積的變化；淋巴細(xì)胞的數(shù)量在細(xì)菌感染時(shí)一般會受到抑制，但影響因素較多，VCS參數(shù)中的LV、LV-SD可以較直觀的反應(yīng)細(xì)胞體積的變化。通過比較WBC≥10×109/L肺炎組和WBC＜10×109/L肺炎組，可以發(fā)現(xiàn)細(xì)菌性肺炎患者WBC不一定升高，但NV、NV-SD、LV、LV-SD有顯著性升高，說明中性粒細(xì)胞和淋巴細(xì)胞體積的變化比數(shù)量變化更加靈敏，有利于疾病的早期診斷。VCS與CRP相關(guān)性分析，發(fā)現(xiàn)NV-SD和LV-SD與CRP呈正相關(guān)，ROC曲線分析可以看出，用于指示細(xì)菌性肺炎最佳的指標(biāo)是NV-SD，其靈敏度和特異度為0.839和0.882；其次是 LV-SD，其靈敏度和特異度為 0.857 和0.676；再次是NV和LV，因此提示NV-SD和LV-SD與CRP聯(lián)合觀察可以更好的提示細(xì)菌性肺炎。Zhou等[14]研究細(xì)菌感染的腫瘤患者外周血白細(xì)胞VCS參數(shù)發(fā)現(xiàn)NV、MS、LV、LS和NV-SD聯(lián)合診斷價(jià)值較高，靈敏度和特異度可達(dá) 0.758 和 0.6472。

綜上所述，中性粒細(xì)胞和淋巴細(xì)胞VCS參數(shù)能較好的反應(yīng)細(xì)菌性肺炎時(shí)白細(xì)胞的形態(tài)學(xué)變化，對臨床診斷具有參考價(jià)值。而且VCS參數(shù)來源于血常規(guī)分析，不需要額外檢測，具有快速、經(jīng)濟(jì)、簡便等優(yōu)點(diǎn)，是一種新的診斷細(xì)菌感染的實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)。