• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    酶解法提取紫薯原花青素工藝優(yōu)化

    2019-08-27 10:08:26韓卓李慧馬龍
    中國(guó)調(diào)味品 2019年8期
    關(guān)鍵詞:紫薯花青素優(yōu)化

    韓卓,李慧,馬龍

    (蚌埠學(xué)院 食品與生物工程學(xué)院,安徽 蚌埠 233030)

    紫薯,又叫黑薯、紫心甘薯等,于20世紀(jì)90年代從日本引進(jìn)[1],肉質(zhì)呈紫色至深紫色。紫薯中含有的人體必需的賴氨酸和礦物質(zhì)元素銅、錳、鋅等含量較普通的甘薯高3~8倍,而硒元素含量高達(dá)20倍左右[2]。除含有普通甘薯所含的多糖、氨基酸、維生素等營(yíng)養(yǎng)成分外,還富含原花青素、黃酮等生物活性成分,營(yíng)養(yǎng)價(jià)值遠(yuǎn)高于普通甘薯,具有預(yù)防高血壓、減輕肝機(jī)能障礙、預(yù)防心血管疾病、清除人體自由基、抗癌等多種保健功能[3-8]。目前對(duì)于紫薯的利用仍以鮮食為主,對(duì)紫薯生物活性成分的研究和深加工報(bào)道并不多。

    原花青素(proanthocyanidins,PC) 是一種有著特殊結(jié)構(gòu)的生物類(lèi)黃酮混合物,主要存在于偏紅色或紫色的植物中,是一種強(qiáng)效的天然自由基清除劑[9],廣泛應(yīng)用于食品、藥品、保健品等領(lǐng)域。作為食品調(diào)料,廣泛添加于飲料、酒等食品中,不僅具有防腐抑菌的功效,還可提升食品的營(yíng)養(yǎng)保健功能[10]。目前市售的商品原花青素基本來(lái)源于葡萄籽提取物,而葡萄籽原花青素的穩(wěn)定性相對(duì)較差。因此,本研究以紫薯塊根為原料,采用酶解法提取再經(jīng)響應(yīng)面法進(jìn)行優(yōu)化,期望對(duì)紫薯原花青素的開(kāi)發(fā)利用提供一定的參考價(jià)值。

    1 材料與方法

    1.1 材料與試劑

    紫薯:市售,低溫烘干后粉碎備用。

    無(wú)水乙醇(分析純):安徽安特食品股份有限公司;檸檬酸、鹽酸(分析純):國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司;氫氧化鈉(分析純):天津市永大化學(xué)試劑有限公司;正丁醇、甲醇(分析純):天津市大茂化學(xué)試劑廠;硫酸鐵氨(分析純):上海展云化工有限公司;原花青素標(biāo)準(zhǔn)品(HPLC≥95%):上海金穗生物科技有限公司;纖維素酶(10000 U/g):上海原生態(tài)生物科技有限公司;中性蛋白酶(100000 U/g):上海凱爾生物科技有限公司;α-淀粉酶(40000 U/g):索萊寶公司。

    1.2 儀器與設(shè)備

    722可見(jiàn)分光光度計(jì) 上海菁華科技儀器有限公司;XFB-200高速中藥粉碎機(jī) 吉首市中誠(chéng)制藥機(jī)械廠;電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱 上海一恒科學(xué)儀器有限公司;FA-14電子天平 上海??惦娮觾x器廠;PHS-25型酸度計(jì) 上海宵盛儀器制造有限公司;KQ-300E型超聲波清洗器 昆山市超聲儀器有限公司;H4-20KR離心機(jī) 湖南可成儀器設(shè)備有限公司。

    1.3 試驗(yàn)方法

    1.3.1 原花青素標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作[11]

    配制0.2 mg/mL的原花青素標(biāo)準(zhǔn)溶液,吸取0,2,4,6,8,10 mL分別置于10 mL容量瓶中,加甲醇稀釋成濃度分別為0,0.02,0.04,0.06,0.08,0.10,0.12,0.14 mg/mL。吸取每個(gè)容量瓶中的溶液1~10 mL具塞試管中加入0.2 mL的2%硫酸鐵氨溶液、6 mL的鹽酸-正丁醇溶液,搖勻,放置沸水中水浴30 min,取出放入冷水中冷卻10 min。然后用紫外分光光度計(jì)在546 nm處測(cè)其吸光度,以原花青素質(zhì)量濃度(x)為橫坐標(biāo),對(duì)應(yīng)檢測(cè)的吸光度值(y)為縱坐標(biāo),繪制原花青素標(biāo)準(zhǔn)曲線。

    1.3.2 原花青素的提取工藝流程

    新鮮的紫薯清洗切片,烘干粉碎過(guò)篩,準(zhǔn)確稱(chēng)量1 g紫薯粉于錐形瓶中,加入一定體積純水,加入一定量的酶,加檸檬酸調(diào)節(jié)pH后,置于超聲波清洗機(jī)中提取功率400 W、一定溫度下酶解提取一定時(shí)間,提取液4000 r/min離心15 min,濾液經(jīng)旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀低溫減壓濃縮[12],用甲醇定容至25 mL,即得到樣品提取液。

    根據(jù)原花青素標(biāo)準(zhǔn)曲線回歸方程計(jì)算出樣品提取液中的原花青素濃度,計(jì)算原花青素的提取率,計(jì)算公式如下:

    式中:C為紫薯花青素質(zhì)量濃度,mg/mL;V為溶液體積,mL;M為樣品質(zhì)量,g;P為原花青素提取率。

    1.3.3 單因素試驗(yàn)

    分別考察不同酶種類(lèi)(纖維素酶、α-淀粉酶、中性蛋白酶)及濃度(50,100,150,200,250 μg/mL)、酶解溫度(25,35,45,55,65 ℃)、酶解時(shí)間(20,35,50,65,80 min)、料液比(1∶10、1∶20、1∶30、1∶40、1∶50)、pH(4,5,6,7,8)對(duì)紫薯中原花青素提取率的影響。

    在單因素試驗(yàn)結(jié)果分析基礎(chǔ)上,基于Box-Behnken設(shè)計(jì)的響應(yīng)曲面法對(duì)紫薯中原花青素提取工藝進(jìn)行優(yōu)化,選取3個(gè)因子pH(C)、酶解時(shí)間(A)、酶解溫度(B)為自變量,以原花青素提取率(Y)為響應(yīng)面值,并以1,0,-1分別代表自變量的高、中、低水平,響應(yīng)面試驗(yàn)設(shè)計(jì)因素與水平見(jiàn)表1。

    表1 響應(yīng)面因子與水平表Table 1 Factors and levels of response surface methodology

    2 結(jié)果與分析

    2.1 原花青素標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制

    以原花青素質(zhì)量濃度(x)為橫坐標(biāo),對(duì)應(yīng)檢測(cè)的吸光度值(y)為縱坐標(biāo),繪制原花青素標(biāo)準(zhǔn)曲線,結(jié)果見(jiàn)圖1。

    圖1 原花青素含量標(biāo)準(zhǔn)曲線Fig.1 Standard curve of procyanidians content

    由圖1可知,原花青素標(biāo)準(zhǔn)曲線回歸方程為y=3.4196x-0.0005,相關(guān)系數(shù)R2=0.9996,表明原花青素質(zhì)量濃度在0~0.04 mg/mL范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系。

    2.2 單因素試驗(yàn)結(jié)果分析

    2.2.1 不同酶類(lèi)及用量對(duì)提取率的影響

    不同酶類(lèi)及用量對(duì)提取率的影響結(jié)果見(jiàn)圖2。

    圖2 不同酶類(lèi)及用量對(duì)提取率的影響Fig.2 Effect of different enzyme types and dosage on extraction rate

    由圖2可知,3種酶類(lèi)對(duì)紫薯原花青素提取率r 影響為纖維素酶>α-淀粉酶>中性蛋白酶,中性蛋白酶對(duì)原花青素提取率的影響最小,這與紫薯所含蛋白質(zhì)成分較少有關(guān),纖維素酶對(duì)原花青素提取率的影響最大,這是因?yàn)槔w維素酶能夠酶解植物細(xì)胞壁,有利于細(xì)胞內(nèi)容物的溶出。隨著纖維素酶濃度的增加,原花青素提取率也逐漸增大,當(dāng)纖維素酶添加量達(dá)到150 μg/mL時(shí),提取率達(dá)到5.025%,加酶量繼續(xù)增加時(shí)原花青素提取率呈現(xiàn)下降趨勢(shì),表明紫薯細(xì)胞壁中纖維素酶酶解完全,過(guò)多的酶量反而會(huì)影響原花青素的溶出,故選擇纖維素酶濃度為150 μg/mL做進(jìn)一步優(yōu)化。

    2.2.2 酶解溫度對(duì)提取率的影響

    酶解溫度對(duì)提取率的影響結(jié)果見(jiàn)圖3。

    圖3 酶解溫度對(duì)提取率的影響Fig.3 Effect of enzymatic hydrolysis temperature on extraction rate

    由圖3可知,酶解溫度在30~40 ℃范圍時(shí),紫薯原花青素提取率隨溫度升高而呈上升趨勢(shì),當(dāng)酶解溫度達(dá)40 ℃時(shí),提取率為5.035%;溫度繼續(xù)升高時(shí)提取率呈現(xiàn)下降趨勢(shì),可能是由于溫度過(guò)高會(huì)影響酶的活性,此外原花青素?zé)岱€(wěn)定性較差,導(dǎo)致提取率下降,故選擇40 ℃做進(jìn)一步優(yōu)化。

    2.2.3 酶解時(shí)間對(duì)提取率的影響

    酶解時(shí)間對(duì)提取率的影響結(jié)果見(jiàn)圖4。

    圖4 酶解時(shí)間對(duì)提取率的影響Fig.4 Effect of enzymatic hydrolysis time on extraction rate

    由圖4可知,酶解時(shí)間在20~65 min范圍時(shí),紫薯原花青素提取率隨時(shí)間延長(zhǎng)而呈上升趨勢(shì),當(dāng)酶解時(shí)間達(dá)65 min時(shí),提取率為5.027%;隨著時(shí)間繼續(xù)增加,提取率趨于穩(wěn)定,說(shuō)明紫薯細(xì)胞壁基本酶解完全,原花青素有效溶出,故選擇65 min做進(jìn)一步優(yōu)化。

    2.2.4 料液比對(duì)提取率的影響

    料液比對(duì)提取率的影響結(jié)果見(jiàn)圖5。

    圖5 料液比對(duì)提取率的影響Fig.5 Effect of ratio of solid to liquid on extraction rate

    由圖5可知,料液比在1∶10~1∶30范圍時(shí),紫薯原花青素提取率隨料液比增加而升高,當(dāng)料液比達(dá)到1∶30時(shí),提取率達(dá)5.019%;隨著料液比的增加,提取率呈現(xiàn)下降趨勢(shì),可能是因?yàn)楫?dāng)提取劑量過(guò)多時(shí),反而會(huì)影響酶的催化作用,故選擇1∶30做進(jìn)一步優(yōu)化。

    2.2.5 pH對(duì)提取率的影響

    pH對(duì)提取率的影響結(jié)果見(jiàn)圖6。

    圖6 pH對(duì)提取率的影響Fig.6 Effect of pH on extraction rate

    由圖6可知,pH在4~6范圍時(shí),紫薯原花青素隨著pH增加而升高,當(dāng)pH為6時(shí),提取率達(dá)5.031%;隨著pH增加,提取率呈現(xiàn)下降趨勢(shì),可能是因?yàn)檫^(guò)高的pH影響了纖維素酶的活性,使得細(xì)胞壁酶解不完全,導(dǎo)致提取率下降,故選擇pH為6做進(jìn)一步優(yōu)化。

    2.3 響應(yīng)面試驗(yàn)結(jié)果

    2.3.1 響應(yīng)面試驗(yàn)設(shè)計(jì)因素水平和結(jié)果

    響應(yīng)面試驗(yàn)設(shè)計(jì)因素水平和結(jié)果見(jiàn)表2。

    表2 響應(yīng)面試驗(yàn)設(shè)計(jì)因素水平及結(jié)果Table 2 Factors and levels and results of response surface experimental design

    續(xù) 表

    通過(guò)Design-Expert 10.0.7軟件對(duì)表2數(shù)據(jù)進(jìn)行二次多項(xiàng)式擬合,得到原花青素提取率與酶解時(shí)間(A)、酶解溫度(B)、pH(C)的二次多項(xiàng)回歸方程:

    Y=-4.45134+0.041727A+0.17658B+1.36348C+4.05000E-004AB-8.66667E-004AC-7.12500E-003BC-4.08667E-004A2-1.82200E-003B2-0.079450C2。

    2.3.2 模型建立與方差分析

    表3 回歸模型方差分析Table 3 Variance analysis of regression model

    注: “*”表示對(duì)結(jié)果影響顯著(P<0.05);“**”表示對(duì)結(jié)果影響極顯著(P<0.0001)。

    表3回歸模型和方差分析結(jié)果顯示,因素A、B、C、AB、BC、A2、C2對(duì)紫薯原花青素提取率的影響達(dá)到顯著水平(P<0.005),因素B2對(duì)紫薯原花青素提取率的影響極顯著(P<0.0001)。模型F值為54.20,P<0.0001,失擬項(xiàng)P值為0.0867>0.05,表明該模型顯著性極高,失擬項(xiàng)不顯著,說(shuō)明預(yù)估值和實(shí)測(cè)值之間擬合度較好。模型的相關(guān)系數(shù)R2=0.9857、校正確定系數(shù)RAdj2=0.9677,表明該模型能夠解釋96.77%響應(yīng)值的變化,因此該模型可用于對(duì)紫薯原花青素提取率的分析和預(yù)測(cè)。根據(jù)F值大小判定,3個(gè)因素對(duì)響應(yīng)值影響的順序?yàn)锽(酶解溫度)>C(pH)>A(酶解時(shí)間)。

    2.3.3 響應(yīng)面分析與優(yōu)化

    根據(jù)上述回歸方程繪制響應(yīng)面及等高線圖,分析酶解溫度、酶解時(shí)間和pH 3個(gè)因素對(duì)紫薯原花青素提取率的影響,響應(yīng)面及等高線見(jiàn)圖7。

    圖7 酶解溫度、酶解時(shí)間和pH交互作用對(duì)提取率影響的響應(yīng)曲面圖Fig.7 Response surface plots of the effects of interaction between enzymatic hydrolysis temperature, enzymatic hydrolysis time and pH on extraction rate of proanthocyanidins

    由圖7可知,酶解溫度和pH對(duì)應(yīng)的響應(yīng)曲面陡峭,說(shuō)明兩者交互作用較強(qiáng);酶解時(shí)間和pH對(duì)應(yīng)的響應(yīng)曲面較為平緩,說(shuō)明這兩因素交互作用較弱,這與表3顯著性分析結(jié)果一致。在酶解溫度和pH對(duì)應(yīng)等高線圖中,等高線沿酶解溫度降低方向密集,增高方向稀疏,說(shuō)明降低溫度會(huì)顯著影響紫薯原花青素的提取率。

    2.3.4 驗(yàn)證試驗(yàn)結(jié)果

    在單因素試驗(yàn)的基礎(chǔ)上,采用響應(yīng)面軟件Design-Expert 10.0.7進(jìn)行優(yōu)化,最佳提取工藝條件為酶解時(shí)間65.957 min、酶解溫度43.538 ℃、pH 6.269。根據(jù)實(shí)際操作情況做相應(yīng)調(diào)整,確定最佳提取工藝條件為:酶解時(shí)間65 min、酶解溫度43 ℃、pH 6.2,在此條件下進(jìn)行驗(yàn)證,實(shí)際提取率為5.039%,與預(yù)測(cè)值接近,說(shuō)明該模型建立可靠,可用于對(duì)紫薯原花青素提取條件的優(yōu)化。

    3 結(jié)論

    本研究采用酶解法提取紫薯原花青素,纖維素酶的加入有利于紫薯細(xì)胞壁的破碎,促進(jìn)胞內(nèi)原花青素的溶出。在單因素試驗(yàn)結(jié)果基礎(chǔ)上,通過(guò)Box-Behnken中心試驗(yàn)設(shè)計(jì)原理,以提取率為響應(yīng)值,建立紫薯原花青素提取率的二次回歸模型,確定最佳工藝條件為酶解時(shí)間65 min、酶解溫度43 ℃、pH 6.2,在此條件下進(jìn)行驗(yàn)證測(cè)得原花青素提取率為5.039%,與預(yù)測(cè)值接近,說(shuō)明采用此工藝條件參數(shù)可靠,適合于提取紫薯中原花青素的工業(yè)化生產(chǎn)。

    猜你喜歡
    紫薯花青素優(yōu)化
    超限高層建筑結(jié)構(gòu)設(shè)計(jì)與優(yōu)化思考
    紫薯蒸米糕
    幼兒100(2021年31期)2021-10-30 03:43:02
    民用建筑防煙排煙設(shè)計(jì)優(yōu)化探討
    關(guān)于優(yōu)化消防安全告知承諾的一些思考
    一道優(yōu)化題的幾何解法
    紫薯雞蛋卷
    紫薯變“紅薯”
    原花青素B2通過(guò)Akt/FoxO4通路拮抗內(nèi)皮細(xì)胞衰老的實(shí)驗(yàn)研究
    花青素對(duì)非小細(xì)胞肺癌組織細(xì)胞GST-π表達(dá)的影響
    中成藥(2017年5期)2017-06-13 13:01:12
    山楸梅漿果中花青素提取方法的優(yōu)化和測(cè)定
    中成藥(2016年8期)2016-05-17 06:08:41
    亚洲,欧美精品.| 街头女战士在线观看网站| av.在线天堂| 人人妻人人澡人人爽人人夜夜| 日韩精品免费视频一区二区三区 | 久久精品国产鲁丝片午夜精品| 纯流量卡能插随身wifi吗| a级毛片黄视频| 免费日韩欧美在线观看| av播播在线观看一区| 免费人妻精品一区二区三区视频| av一本久久久久| 国产老妇伦熟女老妇高清| 久久精品国产a三级三级三级| 十八禁网站网址无遮挡| 日本午夜av视频| 久久综合国产亚洲精品| 婷婷成人精品国产| 黄色配什么色好看| 亚洲欧洲国产日韩| 亚洲色图综合在线观看| 一级黄片播放器| 精品亚洲乱码少妇综合久久| 国产精品久久久久久久电影| 久久久久久伊人网av| 黄色毛片三级朝国网站| 国产精品国产三级国产专区5o| 日韩欧美一区视频在线观看| 亚洲av中文av极速乱| 黑人高潮一二区| 午夜91福利影院| 久久人人97超碰香蕉20202| 亚洲精品美女久久av网站| 91国产中文字幕| 国产视频首页在线观看| 国产69精品久久久久777片| 国产精品国产av在线观看| 纵有疾风起免费观看全集完整版| 我的女老师完整版在线观看| 热re99久久国产66热| 中文字幕亚洲精品专区| 色网站视频免费| 草草在线视频免费看| 卡戴珊不雅视频在线播放| 亚洲精品456在线播放app| 中国美白少妇内射xxxbb| 婷婷色麻豆天堂久久| 亚洲伊人久久精品综合| 国产国语露脸激情在线看| 亚洲一区二区三区欧美精品| 日韩av在线免费看完整版不卡| 最新的欧美精品一区二区| 这个男人来自地球电影免费观看 | 女人被躁到高潮嗷嗷叫费观| 国产一级毛片在线| 激情视频va一区二区三区| 久久久久久久国产电影| 丝袜喷水一区| 啦啦啦在线观看免费高清www| 国产激情久久老熟女| 日本欧美国产在线视频| 国产又爽黄色视频| 在线看a的网站| 少妇的逼好多水| a级毛片黄视频| 老女人水多毛片| av线在线观看网站| 涩涩av久久男人的天堂| 日韩制服丝袜自拍偷拍| 日本91视频免费播放| 国产免费又黄又爽又色| 人妻一区二区av| 久久av网站| videosex国产| 香蕉丝袜av| 中文天堂在线官网| 亚洲精品自拍成人| 26uuu在线亚洲综合色| 日日撸夜夜添| 大码成人一级视频| 久久热在线av| 亚洲精品中文字幕在线视频| 免费高清在线观看日韩| 亚洲国产欧美在线一区| 99热全是精品| 女人久久www免费人成看片| 亚洲美女视频黄频| 老司机亚洲免费影院| 男人添女人高潮全过程视频| av播播在线观看一区| 啦啦啦中文免费视频观看日本| 如何舔出高潮| 成年动漫av网址| 熟女电影av网| freevideosex欧美| 国产黄频视频在线观看| 99热国产这里只有精品6| 菩萨蛮人人尽说江南好唐韦庄| 国产精品三级大全| 久久人人爽av亚洲精品天堂| 毛片一级片免费看久久久久| 国语对白做爰xxxⅹ性视频网站| 老司机影院成人| 国产亚洲一区二区精品| 亚洲欧美色中文字幕在线| 久久久久久久久久成人| 中文天堂在线官网| 亚洲天堂av无毛| 少妇人妻 视频| 亚洲精品色激情综合| 青青草视频在线视频观看| 又黄又粗又硬又大视频| 亚洲国产成人一精品久久久| 成人午夜精彩视频在线观看| 亚洲精品久久成人aⅴ小说| 宅男免费午夜| 成人亚洲欧美一区二区av| 亚洲精品乱码久久久久久按摩| 精品国产乱码久久久久久小说| 日韩中文字幕视频在线看片| 男女国产视频网站| 9色porny在线观看| 亚洲四区av| 午夜激情av网站| 久久精品国产鲁丝片午夜精品| 久久亚洲国产成人精品v| 国产福利在线免费观看视频| 国产精品一国产av| 一本大道久久a久久精品| 日韩精品免费视频一区二区三区 | 久久 成人 亚洲| 国产深夜福利视频在线观看| 纵有疾风起免费观看全集完整版| 国产片内射在线| 性色av一级| 国产在线免费精品| 免费不卡的大黄色大毛片视频在线观看| www日本在线高清视频| 日韩精品免费视频一区二区三区 | 亚洲,一卡二卡三卡| 18禁动态无遮挡网站| 黑丝袜美女国产一区| 七月丁香在线播放| 亚洲五月色婷婷综合| 亚洲,欧美,日韩| 婷婷色综合大香蕉| 国产亚洲精品久久久com| 男女无遮挡免费网站观看| 亚洲一区二区三区欧美精品| 美女福利国产在线| h视频一区二区三区| 视频在线观看一区二区三区| 日日爽夜夜爽网站| av黄色大香蕉| 国产黄色免费在线视频| 91在线精品国自产拍蜜月| 免费黄网站久久成人精品| 国产男女超爽视频在线观看| √禁漫天堂资源中文www| 青春草国产在线视频| 国产在线视频一区二区| 各种免费的搞黄视频| 在线观看免费高清a一片| 自线自在国产av| 精品熟女少妇av免费看| 日韩中文字幕视频在线看片| 精品卡一卡二卡四卡免费| 亚洲精品456在线播放app| 成人综合一区亚洲| 人妻一区二区av| 天堂中文最新版在线下载| 69精品国产乱码久久久| 亚洲一级一片aⅴ在线观看| 久久人人爽av亚洲精品天堂| 在现免费观看毛片| 在线亚洲精品国产二区图片欧美| 国产日韩欧美在线精品| 国产精品国产av在线观看| 日本黄大片高清| 国产成人免费观看mmmm| 制服丝袜香蕉在线| 国产 一区精品| 亚洲国产精品专区欧美| 男女国产视频网站| 我要看黄色一级片免费的| 久久人人爽人人片av| 亚洲少妇的诱惑av| 97超碰精品成人国产| 日本-黄色视频高清免费观看| 91国产中文字幕| 一本—道久久a久久精品蜜桃钙片| 亚洲内射少妇av| 成人无遮挡网站| 中文字幕亚洲精品专区| 黄色配什么色好看| 国产 一区精品| 一二三四中文在线观看免费高清| 久久精品国产亚洲av天美| 免费av不卡在线播放| 亚洲色图 男人天堂 中文字幕 | 亚洲高清免费不卡视频| 激情视频va一区二区三区| 久久精品熟女亚洲av麻豆精品| 看十八女毛片水多多多| 免费高清在线观看视频在线观看| 亚洲综合色惰| 啦啦啦视频在线资源免费观看| 99热6这里只有精品| 国产又爽黄色视频| 欧美日韩一区二区视频在线观看视频在线| 少妇人妻 视频| 久久 成人 亚洲| 成人二区视频| 不卡视频在线观看欧美| 亚洲熟女精品中文字幕| av国产精品久久久久影院| 黄网站色视频无遮挡免费观看| 涩涩av久久男人的天堂| 女人久久www免费人成看片| 中文欧美无线码| 国产亚洲午夜精品一区二区久久| 国产老妇伦熟女老妇高清| 极品少妇高潮喷水抽搐| 亚洲成色77777| 亚洲精品,欧美精品| √禁漫天堂资源中文www| 亚洲综合精品二区| 久久人人97超碰香蕉20202| 不卡视频在线观看欧美| 一区在线观看完整版| 日韩成人av中文字幕在线观看| 免费看av在线观看网站| 久久人人爽人人片av| 久久午夜综合久久蜜桃| 99热这里只有是精品在线观看| 成年动漫av网址| 天天躁夜夜躁狠狠久久av| 久久影院123| 国产 精品1| 18禁国产床啪视频网站| 免费高清在线观看视频在线观看| av免费在线看不卡| 日本av手机在线免费观看| 久久人人爽人人片av| 午夜视频国产福利| 精品熟女少妇av免费看| 美女国产视频在线观看| 黄色毛片三级朝国网站| 亚洲五月色婷婷综合| 青春草视频在线免费观看| 熟女电影av网| 亚洲国产精品专区欧美| 精品卡一卡二卡四卡免费| 老熟女久久久| 免费大片黄手机在线观看| 国产精品欧美亚洲77777| 丝瓜视频免费看黄片| 国产极品天堂在线| 亚洲人与动物交配视频| 亚洲精品aⅴ在线观看| 好男人视频免费观看在线| 尾随美女入室| 国产精品欧美亚洲77777| videos熟女内射| 婷婷色综合大香蕉| 久久久精品区二区三区| a级毛片在线看网站| 成人无遮挡网站| 亚洲精品美女久久久久99蜜臀 | 男女午夜视频在线观看 | 老女人水多毛片| av福利片在线| 亚洲精品中文字幕在线视频| 日本与韩国留学比较| 色婷婷久久久亚洲欧美| 免费女性裸体啪啪无遮挡网站| 久久 成人 亚洲| 午夜福利,免费看| 午夜久久久在线观看| 日本91视频免费播放| 看非洲黑人一级黄片| 国产精品国产三级国产专区5o| 永久免费av网站大全| 一级毛片我不卡| 欧美日本中文国产一区发布| 搡老乐熟女国产| 男人添女人高潮全过程视频| xxx大片免费视频| 十八禁高潮呻吟视频| 哪个播放器可以免费观看大片| 亚洲精品第二区| 亚洲欧美一区二区三区黑人 | 在线观看人妻少妇| 桃花免费在线播放| 精品亚洲成a人片在线观看| 少妇被粗大猛烈的视频| 晚上一个人看的免费电影| 最新的欧美精品一区二区| 久久久久网色| 国产成人精品无人区| videossex国产| 国产一区二区激情短视频 | 中文字幕制服av| 国产黄频视频在线观看| 建设人人有责人人尽责人人享有的| 精品福利永久在线观看| 人妻少妇偷人精品九色| 精品人妻偷拍中文字幕| 最近2019中文字幕mv第一页| 交换朋友夫妻互换小说| 美女国产高潮福利片在线看| 制服丝袜香蕉在线| 国产精品嫩草影院av在线观看| 99国产综合亚洲精品| 一二三四中文在线观看免费高清| 岛国毛片在线播放| 中文字幕av电影在线播放| 亚洲成av片中文字幕在线观看 | 日本91视频免费播放| 草草在线视频免费看| 中文字幕制服av| 日本av免费视频播放| 一级黄片播放器| 国产永久视频网站| 欧美xxxx性猛交bbbb| 永久免费av网站大全| 2021少妇久久久久久久久久久| 波野结衣二区三区在线| 午夜91福利影院| 人人妻人人澡人人爽人人夜夜| 一区二区三区四区激情视频| 亚洲中文av在线| 日本av手机在线免费观看| 国产成人一区二区在线| 青青草视频在线视频观看| 18禁国产床啪视频网站| 亚洲情色 制服丝袜| 亚洲人成网站在线观看播放| 搡老乐熟女国产| 亚洲人成网站在线观看播放| av天堂久久9| 久久毛片免费看一区二区三区| 男女边吃奶边做爰视频| 久久久欧美国产精品| 一级毛片电影观看| 日韩成人伦理影院| 综合色丁香网| 亚洲国产日韩一区二区| 中文字幕av电影在线播放| 久久久久国产网址| 一二三四中文在线观看免费高清| 久久女婷五月综合色啪小说| 国语对白做爰xxxⅹ性视频网站| 黑丝袜美女国产一区| 王馨瑶露胸无遮挡在线观看| 99国产综合亚洲精品| 久久午夜福利片| 亚洲成色77777| 99久久综合免费| av有码第一页| 国产av国产精品国产| 亚洲精品美女久久久久99蜜臀 | 亚洲欧美一区二区三区黑人 | 成年动漫av网址| 免费久久久久久久精品成人欧美视频 | 国产成人精品福利久久| 久久韩国三级中文字幕| 99国产综合亚洲精品| 人妻人人澡人人爽人人| 亚洲欧美一区二区三区黑人 | 成年女人在线观看亚洲视频| 伦理电影免费视频| 久久久久久久久久成人| 一二三四中文在线观看免费高清| 国产男女超爽视频在线观看| 最近手机中文字幕大全| 永久免费av网站大全| 亚洲国产精品成人久久小说| 亚洲精品日韩在线中文字幕| 久久精品久久久久久久性| 国产精品一国产av| 自线自在国产av| 免费播放大片免费观看视频在线观看| 精品人妻一区二区三区麻豆| 亚洲av福利一区| 成年女人在线观看亚洲视频| 国产高清国产精品国产三级| 久久精品国产亚洲av涩爱| 国产av国产精品国产| 女性生殖器流出的白浆| 国产在视频线精品| 男的添女的下面高潮视频| 51国产日韩欧美| 亚洲精品自拍成人| 国产精品久久久久久精品古装| 五月伊人婷婷丁香| 十八禁高潮呻吟视频| 18禁裸乳无遮挡动漫免费视频| 新久久久久国产一级毛片| 我的女老师完整版在线观看| 成年动漫av网址| 国产亚洲最大av| kizo精华| 日日爽夜夜爽网站| 香蕉丝袜av| 国产精品久久久久成人av| 午夜福利在线观看免费完整高清在| 五月天丁香电影| 日韩一本色道免费dvd| 在线免费观看不下载黄p国产| 免费人妻精品一区二区三区视频| 国产欧美日韩一区二区三区在线| 美女国产视频在线观看| 久久狼人影院| 久久影院123| 91精品三级在线观看| 久久 成人 亚洲| 欧美日韩综合久久久久久| 一本久久精品| 精品福利永久在线观看| 久久精品久久久久久久性| 最黄视频免费看| 亚洲精品一区蜜桃| 自拍欧美九色日韩亚洲蝌蚪91| 精品人妻在线不人妻| 9色porny在线观看| 90打野战视频偷拍视频| 五月天丁香电影| 亚洲av中文av极速乱| 另类精品久久| 菩萨蛮人人尽说江南好唐韦庄| 又黄又爽又刺激的免费视频.| 午夜激情久久久久久久| 亚洲,欧美精品.| 亚洲精品av麻豆狂野| 欧美日韩综合久久久久久| 国产精品熟女久久久久浪| 日韩一本色道免费dvd| 妹子高潮喷水视频| 亚洲国产av影院在线观看| 一个人免费看片子| 久久久精品94久久精品| 十八禁网站网址无遮挡| 国语对白做爰xxxⅹ性视频网站| 国产女主播在线喷水免费视频网站| 99热6这里只有精品| 免费观看a级毛片全部| 久久精品国产鲁丝片午夜精品| xxx大片免费视频| 热99久久久久精品小说推荐| 最近中文字幕高清免费大全6| 亚洲人成77777在线视频| 免费日韩欧美在线观看| 国产精品偷伦视频观看了| 18禁观看日本| 啦啦啦在线观看免费高清www| 蜜桃在线观看..| 黄片播放在线免费| 大陆偷拍与自拍| 人妻少妇偷人精品九色| 亚洲天堂av无毛| av在线app专区| 国产精品免费大片| 日本黄色日本黄色录像| 高清欧美精品videossex| 亚洲精品视频女| 欧美日韩亚洲高清精品| 日韩制服骚丝袜av| 亚洲伊人色综图| 少妇人妻 视频| 一级爰片在线观看| 亚洲欧洲精品一区二区精品久久久 | 最近最新中文字幕免费大全7| 国产亚洲一区二区精品| 精品国产乱码久久久久久小说| 老女人水多毛片| 黑人猛操日本美女一级片| 十八禁网站网址无遮挡| 中文字幕精品免费在线观看视频 | 成年av动漫网址| 五月玫瑰六月丁香| 97超碰精品成人国产| 国产免费视频播放在线视频| 国产免费一级a男人的天堂| 丰满饥渴人妻一区二区三| 日本wwww免费看| 亚洲国产看品久久| 最近中文字幕高清免费大全6| 全区人妻精品视频| 亚洲五月色婷婷综合| 免费播放大片免费观看视频在线观看| 国产免费又黄又爽又色| 人人妻人人添人人爽欧美一区卜| 99精国产麻豆久久婷婷| 免费黄色在线免费观看| 免费播放大片免费观看视频在线观看| 国产色婷婷99| 综合色丁香网| 午夜福利在线观看免费完整高清在| 欧美成人午夜精品| 久久这里只有精品19| 日韩精品免费视频一区二区三区 | 午夜免费男女啪啪视频观看| 男男h啪啪无遮挡| 久久99一区二区三区| 婷婷成人精品国产| 大码成人一级视频| 久久精品国产亚洲av涩爱| 春色校园在线视频观看| 国产精品成人在线| 涩涩av久久男人的天堂| 亚洲av电影在线观看一区二区三区| 女性生殖器流出的白浆| 熟女人妻精品中文字幕| 亚洲久久久国产精品| 久久午夜福利片| 久久久亚洲精品成人影院| 天天躁夜夜躁狠狠躁躁| 一边亲一边摸免费视频| 久久鲁丝午夜福利片| 国产精品嫩草影院av在线观看| 国产精品一国产av| 亚洲第一av免费看| 日韩成人av中文字幕在线观看| 精品熟女少妇av免费看| 婷婷成人精品国产| 午夜激情久久久久久久| 免费看光身美女| 春色校园在线视频观看| 91aial.com中文字幕在线观看| 亚洲国产毛片av蜜桃av| 久久久久久久精品精品| 在线看a的网站| 欧美 日韩 精品 国产| 午夜激情久久久久久久| 国产成人精品福利久久| 国产精品99久久99久久久不卡 | 街头女战士在线观看网站| 午夜福利视频在线观看免费| 亚洲情色 制服丝袜| 国产精品久久久久久久电影| 国产老妇伦熟女老妇高清| 人成视频在线观看免费观看| 国产亚洲精品久久久com| 亚洲一码二码三码区别大吗| 国产 精品1| 在线观看免费日韩欧美大片| 如何舔出高潮| 99久久中文字幕三级久久日本| 尾随美女入室| 免费日韩欧美在线观看| av福利片在线| 考比视频在线观看| 精品久久久精品久久久| 91aial.com中文字幕在线观看| 国产一区有黄有色的免费视频| 日本av手机在线免费观看| 国产成人精品无人区| 天天躁夜夜躁狠狠躁躁| 欧美国产精品一级二级三级| 黑丝袜美女国产一区| 久久久精品区二区三区| av又黄又爽大尺度在线免费看| 亚洲国产日韩一区二区| 最近2019中文字幕mv第一页| 亚洲av.av天堂| 亚洲久久久国产精品| 男人爽女人下面视频在线观看| 又大又黄又爽视频免费| 国产精品人妻久久久久久| 亚洲综合精品二区| 日产精品乱码卡一卡2卡三| 国产高清三级在线| 久久久久久久精品精品| 伊人亚洲综合成人网| 国产成人欧美| 多毛熟女@视频| 99国产综合亚洲精品| 热re99久久精品国产66热6| 久久人人爽人人爽人人片va| 国产白丝娇喘喷水9色精品| 久久人人爽人人片av| 国产精品秋霞免费鲁丝片| 免费看不卡的av| av电影中文网址| av免费观看日本| 日韩欧美一区视频在线观看| 午夜老司机福利剧场| 亚洲熟女精品中文字幕| 免费不卡的大黄色大毛片视频在线观看| av女优亚洲男人天堂| 如日韩欧美国产精品一区二区三区| 久久国产精品男人的天堂亚洲 | 寂寞人妻少妇视频99o| 三上悠亚av全集在线观看| 欧美国产精品一级二级三级| 熟女电影av网| 久久久久久久大尺度免费视频| 男女国产视频网站| 久久人妻熟女aⅴ| 中文字幕制服av| 久久午夜综合久久蜜桃| 亚洲国产精品一区二区三区在线| 三上悠亚av全集在线观看| av天堂久久9| 久久99一区二区三区| 亚洲精品一区蜜桃| 免费高清在线观看日韩| 欧美丝袜亚洲另类| 一级a做视频免费观看| 99视频精品全部免费 在线| 亚洲av综合色区一区| 高清不卡的av网站| 日韩人妻精品一区2区三区| 男女午夜视频在线观看 |