尿液中肌氨酸、PCA3mRNA在前列腺癌早期診斷中的應(yīng)用

王乾　孫賓　李殷南　沈儉

摘要：目的? 探討尿液中肌氨酸、PCA3mRNA，血清PSA在前列腺癌早期臨床診斷中的應(yīng)用。方法? 收集2016年9月～2017年12月在我院收治的前列腺增生患者62例以及前列腺癌患者62例（病理確診）作為研究對象，前列腺癌患者為研究組，前列腺增生患者為對照組。以兩組患者進行前列腺按摩后的初始尿液為標(biāo)本，采用實時熒光定量對肌氨酸、PCA3mRNA，血清PSA進行檢測，比較兩組患者肌氨酸、PCA3mRNA，血清PSA的差異并統(tǒng)計兩組患者的診斷準(zhǔn)確度。結(jié)果? 研究組患者診斷準(zhǔn)確度高于對照組，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）;研究組患者尿肌氨酸、PCA3mRNA，血清PSA水平分別為（13.51±2.54）ng/ml、（6.09±0.56）ng/ml、（0.53±0.07）μmol/L，高于對照組的（7.60±0.27）ng/ml、（2.03±0.21）ng/ml、（0.36±0.04）μmol/L，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。結(jié)論? 早期聯(lián)合監(jiān)測尿液中的肌氨酸、PCA3mRNA及血清PSA水平，可以提高前列腺癌的監(jiān)測有效率，為患者提供更為便利的診斷手段。

關(guān)鍵詞：肌氨酸;PCA3mRNA;前列腺癌;早期診斷

中圖分類號：R737.25? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?文獻標(biāo)識碼：A? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? DOI：10.3969/j.issn.1006-1959.2019.14.059

文章編號：1006-1959（2019）14-0175-03

Abstract：Objective? To investigate the application of sarcosine， PCA3mRNA and serum PSA in the early diagnosis of prostate cancer. Methods? A total of 62 patients with benign prostatic hyperplasia and 62 patients with prostate cancer （pathological diagnosis） were enrolled in our hospital from September 2016 to December 2017. The patients with prostate cancer were the study group and the patients with benign prostatic hyperplasia were the control group. The initial urine of the two groups of patients after prostate massage was used as the specimen. Real-time fluorescence quantification was used to detect sarcosine， PCA3mRNA and serum PSA. The differences of serum PSA between serum and PCA3mRNA were compared and the diagnostic accuracy of the two groups were statistically analyzed.Results? The diagnostic accuracy of the study group was higher than that of the control group，the difference was statistically significant （P<0.05）. The urinary creatinine， PCA3mRNA and serum PSA levels in the study group were （13.51±2.54） ng/ml， （6.09± 0.56） ng/ml， （0.53±0.07） μmol/L， higher than the control group （7.60±0.27） ng/ml， （2.03±0.21） ng/ml， （0.36±0.04） μmol/L，the difference was statistically significant （P<0.05）.Conclusion? Early monitoring of urinary creatinine， PCA3mRNA and serum PSA levels in urine can improve the efficiency of prostate cancer monitoring and provide a more convenient diagnostic tool for patients.

Key words：SarcoEsine;PCA3mRNA;Prostate cancer;Early diagnosis

目前腫瘤性疾病已成為社會日益關(guān)注的問題，因腫瘤帶來的社會問題日益突出，我國每年大概有2500萬腫瘤患者，美國前列腺癌的患者每年超過了100萬人。統(tǒng)計顯示前列腺癌患者的年齡化正逐漸降低，患者的人數(shù)不斷增加，據(jù)預(yù)測，10年后我國前列腺癌發(fā)病率在男性惡性腫瘤中的排行將晉升至前3位。目前臨床上最常用的前列腺癌腫瘤標(biāo)志物是血清前列腺特異抗原（PSA），盡管血清PSA檢測可以發(fā)現(xiàn)早期前列腺癌，但該方法特異度不高，特別是PSA水平處于4～10 ng/ml這個檢測灰區(qū)的患者，活檢陽性率僅有20.4%[1]。有報道通過肌氨酸、PCA3mRNA，血清PSA等特異性檢測方法對前列腺癌進行診斷，結(jié)果顯示其具有無創(chuàng)、精確度高等多種優(yōu)勢，成為了一種新起的檢測方法[2]。為此，本研究旨在觀察尿液中肌氨酸、PCA3mRNA、血清PSA水平在前列腺癌早期臨床診斷中的應(yīng)用價值，現(xiàn)報道如下。

1資料與方法

1.1一般資料? 收集2016年5月～2017年7月上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬新華醫(yī)院崇明分院泌尿外科收治的前列腺增生患者62例以及前列腺癌患者62例，前列腺癌患者設(shè)為研究組，前列腺增生患者為對照組。研究組年齡36～53歲，平均年齡（45.27±8.41）歲。對照組年齡35～55歲，平均年齡（46.53±9.56）歲。本研究經(jīng)過醫(yī)院倫理委員會批準(zhǔn)，患者均知情同意本研究并簽署知情同意書。兩組年齡等一般資料比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05），具有可比性。

1.2方法? 對兩組患者分別進行前列腺按摩后收集初始尿液標(biāo)本20～30 ml，放入冰水中冷卻，離心10 min，分離上清液，將尿液殘渣置于冷凍管中，-70℃保存，取離心后殘渣，檢測肌氨酸，采用同位素稀釋液相色譜法（LC/MS）對肌氨酸含量進行檢測[4]。按Takara法對總RNA進行提取，采用微量分光光度計對RNA的濃度與純度進行測定，對離心后的尿沉渣中PCA含量進行測定，常規(guī)檢測兩組患者血清PSA水平。

1.3觀察指標(biāo)? 比較兩組患者診斷的準(zhǔn)確度，尿液中肌氨酸含量、PCA3mRNA含量及血清PSA水平。

1.4統(tǒng)計學(xué)方法? 本次實驗數(shù)據(jù)使用SPSS 13.0統(tǒng)計學(xué)軟件進行分析，計數(shù)資料采用（n）表示，行？字2檢驗，計量資料采用（x±s）表示，行t檢驗，P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2結(jié)果

2.1兩組診斷準(zhǔn)確度比較? 研究組患者治療準(zhǔn)確度高于對照組，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05），見表1。

2.2兩組肌氨酸、PCA3mRNA及血清PSA水平比較? 研究組患者的肌氨酸、PCA3mRNA及血清PSA水平均高于對照組，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05），見表2。

3討論

隨著人民生活水平的提高、生活節(jié)奏的逐漸增快，前列腺癌發(fā)病率近年來呈現(xiàn)上升的趨勢，目前已成為常見的泌尿科外科疾病，嚴(yán)重威脅患者的身心健康及生命[5]。提高早期前列腺的診斷準(zhǔn)確性，一直是臨床上亟待解決的問題。前列腺癌早期無明顯癥狀，但隨著腫瘤的發(fā)展會出現(xiàn)急性精囊炎、輸精管炎、性功能障礙等多種并發(fā)癥[6]。本研究以肌氨酸氧化酶法檢測尿肌氨酸水平，不受丙氨酸的干擾，可有效解決其他檢測方法對肌氨酸檢測結(jié)果的影響。研究顯示，前列腺癌患者尿肌肌氨酸的檢測容易受到多種外在因素的影響，少部分前列腺患者的肌氨酸含量僅在正常范圍內(nèi)產(chǎn)生波動，肌氨酸在能量代謝上具有重要的作用，肌氨酸的含量與前列腺癌臨床分期、區(qū)域性淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移成正相關(guān)，與人類壽命成負(fù)相關(guān)[7，8]。

研究顯示，PCA3屬于前列腺癌的特異性標(biāo)記產(chǎn)物，PCA3在正常前列腺細(xì)胞中表達率低，會在前列腺癌細(xì)胞中出現(xiàn)較高程度的表達，在其他組織細(xì)胞、癌細(xì)胞中均不會被表達，因此PCA3被認(rèn)為是檢測前列腺癌的特異性基因，這為前列腺癌的診斷提供了新的方法，具有較高的臨床價值[9]。在患者尿液中，對PCA3的檢測可以采用轉(zhuǎn)錄介質(zhì)的擴增檢測法（TMATM），在有逆轉(zhuǎn)錄酶與RNA聚合酶的和恒溫環(huán)境下，對RNA或DNA分子進行擴增，利用TMATM測定男性尿液中的PCA3評分，PCA3的評分標(biāo)準(zhǔn)化數(shù)值為兩種mRNA的比值，PCA3mRNA與PSA mRNA含量的測定采用含有兩種特殊分析成分的試劑，通過對純化的mRNA進行捕捉，將捕捉到的mRNA與包被有把特異性寡核苷酸和轉(zhuǎn)錄介質(zhì)擴增的RNA序列的磁性粒子雜交，利用標(biāo)記有吖啶酯染料的共價鍵做探針特異性檢測擴增產(chǎn)物，再用標(biāo)準(zhǔn)光度計定量檢測[8]。PCA3在前列腺癌的早期診斷、治療等環(huán)節(jié)都具有潛在的應(yīng)用價值，且具有檢測方便、無創(chuàng)等優(yōu)勢，在臨床上具有廣闊的發(fā)展空間。但PCA3檢測對實驗的條件、試驗環(huán)境要求較高，目前仍然存在一定的難度[10]。

前列腺癌屬于異質(zhì)性疾病，需要經(jīng)過多項指標(biāo)共同檢測，隨著分子生物學(xué)的快速發(fā)展，mRNA也被運用在檢測當(dāng)中，這提高了對前列腺癌早期檢測的準(zhǔn)確性[10]。本研究中，研究組患者檢測準(zhǔn)確度高于對照組，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05），同時研究組患者的肌氨酸、PCA3mRNA及血清PSA水平均高于對照組，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05），說明聯(lián)合檢測肌氨酸、PCA3mRNA及血清PSA可有效提高前列腺癌的檢出率，但本研究存在樣本量小、研究方向局限等不足。

綜上所述，對患者前列腺的尿液進行監(jiān)測分析，聯(lián)合檢測肌氨酸、PCA3mRNA及血清PSA三個指標(biāo)，可以提高監(jiān)測的準(zhǔn)確度，為患者提供更為便利的診斷手段，有助于早期前列腺癌的臨床診斷。

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收稿日期：2019-3-5;修回日期：2019-3-19

編輯/錢洪飛