淫羊藿苷對哮喘影響的研究進(jìn)展

周桂明　肖波　姚冬

摘要：哮喘是常見的呼吸道疾病之一，激素類藥物因起效迅速、療效確切而被廣泛用于治療哮喘，但其不良反應(yīng)多，且哮喘的患病率仍呈逐年上升趨勢。尋求新型抗炎藥物用于聯(lián)合甚至替代激素成為目前藥物開發(fā)的主導(dǎo)方向。淫羊藿苷具有廣泛免疫調(diào)節(jié)作用，可明顯減輕氣道炎癥反應(yīng)、改善哮喘癥狀，為聯(lián)合用藥治療哮喘提供了新方向。本文結(jié)合國內(nèi)外研究，綜述淫羊藿苷在哮喘中的作用研究進(jìn)展，從淫羊藿苷對哮喘氣道高反應(yīng)性、炎癥反應(yīng)（包括炎癥類型、炎癥細(xì)胞因子、轉(zhuǎn)錄分化、趨化因子受體等）和氣道重塑等方面的影響進(jìn)行論述，以期為治療哮喘提供新思路。

關(guān)鍵詞：淫羊藿苷;哮喘;氣道高反應(yīng)性;炎癥反應(yīng);氣道重塑

中圖分類號：R285.5? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?文獻(xiàn)標(biāo)識碼：A? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?DOI：10.3969/j.issn.1006-1959.2019.14.011

文章編號：1006-1959（2019）14-0028-04

Abstract：Asthma is one of the common respiratory diseases. Hormone drugs are widely used in the treatment of asthma because of their rapid onset and curative effect. However， the adverse reactions are many and the prevalence of asthma is still increasing year by year. The search for new anti-inflammatory drugs for the joint or even replacement of hormones has become the leading direction of current drug development. Icariin has a wide range of immunomodulatory effects， can significantly reduce airway inflammation， improve asthma symptoms， and provides a new direction for the combination of drugs for asthma. In this paper， combined with research at home and abroad， this paper reviews the research progress of the role of icariin in asthma， and the high reactivity and inflammatory response （including inflammation type， inflammatory cytokine， transcriptional differentiation， chemokine factor） of icariin to asthma. The effects of body and other aspects of airway remodeling are discussed in order to provide new ideas for the treatment of asthma.

Key words：Icariin;Asthma;Airway hyperresponsiveness;Inflammatory response;Airway remodeling

支氣管哮喘（bronchial asthma，簡稱哮喘）是常見的呼吸道疾病之一，是由多種細(xì)胞包括氣道的炎性細(xì)胞（如嗜酸粒細(xì)胞、肥大細(xì)胞、T淋巴細(xì)胞、中性粒細(xì)胞等）和結(jié)構(gòu)細(xì)胞（如平滑肌細(xì)胞、氣道上皮細(xì)胞等）以及細(xì)胞組分參與的氣道慢性炎癥性疾病。其主要特征包括氣道慢性炎癥、氣道高反應(yīng)性、可逆性氣流受限以及氣道重塑。糖皮質(zhì)激素是目前治療哮喘的主要控制性藥物，然而這類藥物并不能治愈哮喘，且有部分患者對激素不敏感，使用激素治療效果欠佳，甚至無效。臨床應(yīng)用激素已有較長時間，但哮喘的患病率仍呈逐年上升趨勢，因此尋求新型抗炎藥物用于聯(lián)合甚至替代激素是目前藥物開發(fā)的主導(dǎo)方向。

相對于現(xiàn)代醫(yī)學(xué)，中醫(yī)藥學(xué)家在治療哮喘方面積累了豐富經(jīng)驗(yàn)，且中藥具有多途徑、多靶點(diǎn)的調(diào)控優(yōu)勢。臨床研究證明，天然植物藥物在哮喘治療中取得了顯著療效[1]。由于擁有豐富的資源和低廉的制造成本，天然植物藥物及其小分子提取物在哮喘藥物開發(fā)上具有巨大優(yōu)勢，傳統(tǒng)補(bǔ)益中藥淫羊藿便位列其中。在呼吸系統(tǒng)方面上，淫羊藿常用于治療慢性支氣管炎和支氣管哮喘等疾病。

淫羊藿，又名仙靈脾，味辛、甘，性溫，歸肝、腎經(jīng)?！侗静菥V目》謂其有“益精氣，堅筋骨，補(bǔ)腰膝，強(qiáng)心力”等功效?，F(xiàn)代研究證實(shí)，淫羊藿的主要有效成分為淫羊藿總黃酮，主含淫羊藿苷、淫羊藿多糖，淫羊藿苷是淫羊藿的主要有效成分之一，目前的藥理實(shí)驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)淫羊藿苷無明顯的長期毒性，臨床應(yīng)用安全可靠[2]，是一類很有應(yīng)用前景的中藥單體。本文就近年來淫羊藿苷對哮喘氣道高反應(yīng)性、炎癥反應(yīng)（包括炎癥類型、炎癥細(xì)胞因子、轉(zhuǎn)錄分化、趨化因子受體等）和氣道重塑等方面的影響進(jìn)行論述。

1對哮喘的氣道高反應(yīng)性影響

氣道高反應(yīng)性（airway hyperresponsiveness，AHR）指氣道對各種刺激因子出現(xiàn)過強(qiáng)或過早的收縮反應(yīng)，表現(xiàn)為咳嗽、喘息、呼吸困難。目前普遍認(rèn)為持續(xù)性慢性氣道炎癥是導(dǎo)致AHR最重要的發(fā)病機(jī)制。當(dāng)氣道受到變應(yīng)原或其他刺激后，由多種炎癥細(xì)胞（如嗜酸性粒細(xì)胞）、炎癥介質(zhì)和細(xì)胞因子的參與，氣道上皮和上皮內(nèi)神經(jīng)的損害等而導(dǎo)致AHR。Wei Y等[3]研究發(fā)現(xiàn)，淫羊藿苷可顯著降低嗜酸性粒細(xì)胞數(shù)目，并能抑制炎性細(xì)胞浸潤支氣管周圍組織，從而減輕哮喘氣道炎癥及AHR。蔡萃[4]的研究也證明，淫羊藿苷可明顯降低急性與慢性哮喘小鼠血清中趨化因子（如eotaxin、IL-3、IL-5、GM-CSF、MCP-3、RANTES）的水平，從而減少哮喘小鼠氣道中嗜酸性粒細(xì)胞的浸潤，改善哮喘小鼠的氣道炎癥和AHR。由此可見，淫羊藿苷可通過抑制趨化因子、減少炎性細(xì)胞浸潤達(dá)到改善AHR、減輕哮喘癥狀的目的。

2對哮喘氣道炎癥的影響

2.1對嗜酸性粒細(xì)胞的作用? 嗜酸性粒細(xì)胞（eosinophils，EOS）是哮喘發(fā)生發(fā)展的關(guān)鍵效應(yīng)細(xì)胞，以EOS浸潤為主的氣道炎癥是支氣管哮喘的主要特征。EOS生物學(xué)效應(yīng)復(fù)雜，其在氣道募集，并通過脫顆粒、釋放炎性介質(zhì)、合成釋放細(xì)胞因子（如IL-3，IL-5，GM-CSF等）直接損傷氣道上皮細(xì)胞，引起AHR。張素琴等[5]對卵白蛋白（ovalbumin，OVA）霧化誘導(dǎo)的小鼠哮喘模型的肺泡灌洗液（bronchoalveolar lavage fluid，BALF）進(jìn)行白細(xì)胞分類計數(shù)發(fā)現(xiàn)，哮喘模型組中的EOS數(shù)量明顯增加，而淫羊藿苷能有效抑制EOS的生成及浸潤。有研究報道，淫羊藿苷可影響哮喘小鼠肺組織中的EOS凋亡和相關(guān)基因蛋白Bcl-2、Bax表達(dá)，通過減少EOS，改善氣道炎癥[6]。因此，淫羊藿苷可通過抑制EOS的合成及對氣道的浸潤，有效改善哮喘癥狀。

2.2對Th1/Th2細(xì)胞分化調(diào)節(jié)作用? Th1主要介導(dǎo)細(xì)胞免疫應(yīng)答和遲發(fā)性超敏反應(yīng)（炎癥反應(yīng)），并輔助B細(xì)胞產(chǎn)生與吞噬作用有關(guān)的抗體（IgM、IgG、IgA），但不產(chǎn)生IgE。Th2主要介導(dǎo)體液免疫應(yīng)答，輔助B細(xì)胞合成IgE，主要負(fù)責(zé)非吞噬作用的宿主防御功能。近年的研究表明，Th1/Th2分化失衡與哮喘的發(fā)病及進(jìn)展關(guān)系密切[7]。T-bet（T box expressed in T cells）和GATA-3（GATA結(jié)合蛋白3）是兩種特異性轉(zhuǎn)錄因子，T-bet特異表達(dá)于Th1細(xì)胞，促進(jìn)幼稚CD4+T細(xì)胞向Th1細(xì)胞分化，而GATA-3能促使正在分化或已分化的Th細(xì)胞合成Th2細(xì)胞，是Th細(xì)胞分化的重要調(diào)節(jié)蛋白[8]。在T細(xì)胞中，GATA-3被T-bet的表達(dá)所抑制，通過阻斷GATA-3的功能，大部分哮喘癥狀可得到明顯緩解[9]。目前對于哮喘的藥物治療集中在改進(jìn)現(xiàn)有的藥物及發(fā)現(xiàn)以Th2特異性轉(zhuǎn)錄因子為靶向的新化合物。研究發(fā)現(xiàn)，在OVA誘導(dǎo)的哮喘模型中，淫羊藿苷能明顯抑制GATA-3基因及蛋白在肺組織中的表達(dá)，GATA-3表達(dá)的阻斷對氣道炎癥起到抑制作用[10]。Th2細(xì)胞因子的分泌受到抑制，從而阻斷Th2細(xì)胞因子促進(jìn)IgE和炎癥細(xì)胞的生成，有效地改善哮喘的癥狀，通過調(diào)節(jié)GATA-3/T-bet的平衡達(dá)到治療哮喘的目的。從而為哮喘的治療提供新的更經(jīng)濟(jì)高效的臨床藥物。

2.3對相關(guān)炎性細(xì)胞因子的影響

2.3.1對IL-4的影響? IL-4是Th2細(xì)胞分泌的細(xì)胞因子，能調(diào)控Th0細(xì)胞向Th2細(xì)胞分化，可促進(jìn)B細(xì)胞和單核/巨噬細(xì)胞CD23的合成及表達(dá)，可增強(qiáng)B細(xì)胞自分泌、調(diào)控IgE的合成、促進(jìn)巨噬細(xì)胞分泌炎性因子參與氣道炎癥的反應(yīng)，并能促進(jìn)EOS在炎癥部位的選擇性募集，導(dǎo)致氣道炎癥。研究證明，IL-4的表達(dá)在動物哮喘模型和哮喘患者的支氣管活檢標(biāo)本的BALF中被發(fā)現(xiàn)均有升高[11]。另有研究證實(shí)，淫羊藿苷在減輕氣道高反應(yīng)的同時，還能降低哮喘小鼠模型BALF中IL-4的水平，從而改善了實(shí)驗(yàn)小鼠的哮喘癥狀[12]。在細(xì)胞因子水平上的研究說明淫羊藿苷可減少Th2細(xì)胞的數(shù)目，抑制哮喘的Th2細(xì)胞及其細(xì)胞因子分泌優(yōu)勢，調(diào)節(jié)Th1/Th2的比值，避免了免疫失衡。

2.3.2對IL-10的影響? ?IL-10是一種抗炎因子，在炎癥反應(yīng)中表達(dá)降低，對T細(xì)胞兼有免疫抑制和免疫刺激的作用。IL-10可抑制許多促炎細(xì)胞因子、趨化因子和趨化因子受體的表達(dá)，并介導(dǎo)過敏原特異性免疫治療中的過敏原耐受性。研究證明，IL-10可抑制IgE分泌，降低氣道內(nèi)嗜酸粒細(xì)胞、肥大細(xì)胞等炎性細(xì)胞數(shù)目，減輕哮喘氣道炎癥及AHR[13]。在比較兩組同為OVA激發(fā)前1 h灌胃給藥的研究中，應(yīng)用淫羊藿苷的實(shí)驗(yàn)小鼠的血清中IL-10水平較地塞米松組升高，并證實(shí)淫羊藿苷可通過上調(diào)肺組織中CD4+ CD25+ Treg細(xì)胞組織Foxp3蛋白的表達(dá)，增加外周血IL-10的水平，從而達(dá)到調(diào)節(jié)機(jī)體免疫、改善哮喘小鼠氣道炎癥和AHR，最終緩解哮喘癥狀[14]。淫羊藿苷可促進(jìn)IL-10的合成和分泌治療哮喘，為哮喘治療奠定了理論依據(jù)。

2.3.3對IL-13的影響? IL-13是一種具有多種生物學(xué)活性的細(xì)胞因子，與機(jī)體的炎癥反應(yīng)和免疫調(diào)節(jié)有關(guān)，許多研究也證實(shí)IL-13與支氣管哮喘關(guān)系密切。IL-13作為一種主要的Th2細(xì)胞因子，影響著氣道炎癥和氣道重塑的多個方面。徐長青[10]研究發(fā)現(xiàn)，連續(xù)4周每天給予淫羊藿苷灌胃治療，能降低哮喘小鼠模型血清中Th2細(xì)胞因子IL-13的水平，并且明顯抑制支氣管粘膜下和周圍肺組織炎性細(xì)胞浸潤，并能減輕支氣管粘膜損傷，從而減輕氣道炎癥和改善氣道重塑。淫羊藿苷通過抑制IL-13對氣道炎癥和氣道重塑等方面的作用，為哮喘治療提供了新方法。

2.3.4對IFN-γ的影響? γ-干擾素（interferon-γ，IFN-γ）是一種對細(xì)胞功能具有調(diào)節(jié)作用的小分子多肽，主要由活化的CD4+Th1細(xì)胞、NK細(xì)胞和某些CD8+T細(xì)胞分泌，可抑制B細(xì)胞產(chǎn)生IgE、IgG，并能通過信號轉(zhuǎn)導(dǎo)、基因表達(dá)、吞噬作用以及細(xì)胞凋亡等參與適應(yīng)性免疫細(xì)胞間的相互作用[15]。IFN-γ有利于Th1細(xì)胞的分化，而抑制Th0向Th2的分化，達(dá)到Th1和Th2兩個細(xì)胞亞群的平衡狀態(tài)，并且抑制IL-4、IL-5、IL-13等細(xì)胞因子的產(chǎn)生，從而使哮喘患者的氣道炎癥得到控制。研究證明[10]，在OVA誘發(fā)的哮喘大鼠模型中，BALF及血清的IFN-γ水平明顯降低，而淫羊藿苷在抑制大鼠炎癥細(xì)胞募集的同時，還能提高BALF及血清中IFN-γ的水平，具有改善AHR、減輕哮喘大鼠肺組織炎癥的作用。淫羊藿苷促進(jìn)IFN-γ產(chǎn)生，控制了哮喘癥狀，這也為治療哮喘起到了良好借鑒作用。

2.3.5對其他細(xì)胞因子的影響? 活化的EOS能夠釋放大量促炎因子，其中也包括了導(dǎo)致病理性炎癥紊亂的粒細(xì)胞-巨噬細(xì)胞集落刺激因子（GM-CSF）、IL-5等。研究發(fā)現(xiàn)，淫羊藿苷可通過抑制IL-5、GM-CSF等細(xì)胞因子的水平，促進(jìn)嗜酸粒細(xì)胞的凋亡，同時淫羊藿苷還可以抑制抗凋亡基因蛋白Bcl-2的表達(dá)，促進(jìn)促凋亡基因蛋白Bax的表達(dá)，調(diào)節(jié)Bcl-2/Bax平衡，并且能抑制轉(zhuǎn)錄因子NF-κBp65蛋白的表達(dá)，促進(jìn)哮喘小鼠肺組織嗜酸粒細(xì)胞凋亡，減輕哮喘小鼠氣道嗜酸粒細(xì)胞浸潤，改善哮喘氣道炎癥[16]。

2.4對相關(guān)趨化因子受體的影響? 哮喘患者氣道中嗜酸粒細(xì)胞的活化、遷移及一系列效應(yīng)的產(chǎn)生主要依賴于其對嗜酸粒細(xì)胞趨化因子的反應(yīng)。而CCR3是EOS趨化因子的受體，它與EOS趨化因子結(jié)合，可介導(dǎo)細(xì)胞對某些趨化因子發(fā)生反應(yīng)及產(chǎn)生細(xì)胞遷移、活化等效應(yīng)。CCR3還表達(dá)于嗜堿性粒細(xì)胞、肥大細(xì)胞和Th2細(xì)胞表面，其與RANTES、MCP-3以低親和力結(jié)合，與eotaxin、eotaxin-2、eotaxin-3、MCP-4以高親和力結(jié)合。由于這些趨化因子均與氣道炎癥發(fā)病相關(guān)，而CCR3引發(fā)了哮喘動物模型中EOS向氣道的聚集、浸潤，故CCR3拮抗劑成為了近年來的研究熱門，為治療呼吸道過敏性疾病提供了頗有價值的借鑒。研究發(fā)現(xiàn)，淫羊藿苷可明顯降低急慢性哮喘小鼠血清中eotaxin的水平，抑制小鼠肺組織中CCR3的表達(dá)，從而減少哮喘小鼠氣道中EOS的浸潤[4]，進(jìn)而減輕哮喘小鼠的氣道炎癥和AHR。

2.5對Th17/Treg細(xì)胞功能的調(diào)節(jié)作用? 研究表明，有高達(dá)50%的哮喘表現(xiàn)為非IgE和嗜酸性粒細(xì)胞性炎癥依賴性，這類稱為激素不敏感性哮喘或嚴(yán)重性哮喘，對激素不敏感或激素治療效果欠佳。激素不敏感哮喘主要由中性粒細(xì)胞介導(dǎo)，釋放Th1和Th17細(xì)胞因子，或Treg細(xì)胞因子。而Th17細(xì)胞被證明在肺中性粒細(xì)胞和巨噬細(xì)胞炎癥中起調(diào)節(jié)作用，這提示了Th17細(xì)胞在嚴(yán)重的激素不敏感的哮喘中發(fā)揮作用[17]。Th17細(xì)胞是一種前炎性細(xì)胞因子，能夠促進(jìn)多種細(xì)胞釋放炎性因子介導(dǎo)免疫反應(yīng)，且能募集、活化中性粒細(xì)胞，導(dǎo)致粒細(xì)胞相關(guān)性炎癥和氣道重塑。而Foxp3屬于foxhead家族分叉頭/翼狀螺旋轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子，特異性地表達(dá)于CD4+CD25+Treg細(xì)胞，它在一定程度上反映了CD4+CD25+Treg細(xì)胞的水平及功能活性，故而Treg細(xì)胞功能與Foxp3表達(dá)水平緊密聯(lián)系，Treg細(xì)胞對Th1、Th2、Th17等效應(yīng)細(xì)胞介導(dǎo)的免疫反應(yīng)具有良好的調(diào)節(jié)作用，在抑制哮喘氣道炎癥方面具有重要作用[18]。Li B等[19]報道淫羊藿苷能夠降低OVA疊加反復(fù)心理應(yīng)激誘導(dǎo)的小鼠哮喘激素不敏感性，減少炎性細(xì)胞因子浸潤到肺和全身、逆轉(zhuǎn)AHR，并在一定程度上恢復(fù)機(jī)體對糖皮質(zhì)激素的敏感性。有學(xué)者證實(shí)淫羊藿苷能促進(jìn)Foxp3在肺組織中的表達(dá)，并顯著抑制IL-6、IL-17、TGF-β水平，修復(fù)了Th17/Treg失衡，改善AHR[3]。金華良等[14]研究也得出類似結(jié)論，他們發(fā)現(xiàn)淫羊藿苷主要通過促進(jìn)肺內(nèi)Treg細(xì)胞的增加，從而使Treg細(xì)胞表達(dá)Foxp3蛋白總量增加，即上調(diào)肺內(nèi)Foxp3蛋白水平，最終使哮喘AHR和氣道炎癥得到改善，起到治療哮喘的作用。

3在哮喘氣道重塑中的作用

氣道重塑表現(xiàn)為氣道上皮下基底膜增厚、膠原沉積、粘液分泌增加、血管生成和氣道平滑肌細(xì)胞（airway smooth muscle cells，ASMCs）增生和肥大。近年的研究表明，ASMCs不僅作為靶細(xì)胞參與氣道重塑，還作為免疫細(xì)胞參與氣道炎癥反應(yīng)。氣道平滑肌增生不僅使支氣管對刺激的收縮反應(yīng)更強(qiáng)烈，加重AHR，還可引起氣道壁增厚，導(dǎo)致基礎(chǔ)氣道阻力增加和不可逆性氣流受限的發(fā)生。抑制哮喘氣道重塑中ASMCs的惡性增殖，調(diào)節(jié)其正常凋亡是哮喘藥物開發(fā)的一個重要方向。安霞等[20]研究證明，Th17細(xì)胞分泌的細(xì)胞因子IL-17參與了氣道重塑，而已有研究顯示淫羊藿苷可明顯抑制IL-17水平[3]，為治療哮喘提供了新思路。另外，淫羊藿苷對IL-4的抑制作用與抑制支氣管平滑肌增厚、抑制杯狀細(xì)胞增生效應(yīng)相同，從而緩解哮喘癥狀[5]，這也證明淫羊藿苷能夠抑制ASMCs增殖，表明淫羊藿苷可以作用于哮喘氣道重塑。

4展望

中醫(yī)對哮喘的治療已有幾千年的寶貴經(jīng)驗(yàn)，多年來的臨床實(shí)踐證明，中藥治療哮喘療效好，且毒副作用小。國內(nèi)已有學(xué)者研制出能有效治療哮喘的補(bǔ)腎益氣方劑，其中便有淫羊藿，而淫羊藿苷是淫羊藿的主要有效成分之一。淫羊藿苷具有廣泛的免疫調(diào)節(jié)作用，可明顯減輕氣道炎癥反應(yīng)、改善哮喘癥狀?，F(xiàn)有的哮喘治療藥物主要為激素類藥物，這類藥物能夠控制哮喘癥狀、減少發(fā)作次數(shù)，起效迅速、療效確切，但不良反應(yīng)多，國內(nèi)臨床上已廣泛采用中西醫(yī)結(jié)合療法。中西藥物聯(lián)用不僅可以緩解哮喘癥狀、減少哮喘發(fā)作次數(shù)，還能減少因長期服用西藥引起的不良反應(yīng)，增強(qiáng)治療效果，提高生活質(zhì)量。淫羊藿苷以其獨(dú)特的藥理作用，為聯(lián)合用藥方面提供了一個值得深入研究的方向，其作為一種具有潛在治療價值的藥物，在新藥的開發(fā)、有效劑量以及毒性劑量等方面還需要進(jìn)行更多深入的探討。

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