中藥抗皮膚光老化實(shí)驗(yàn)研究十年進(jìn)展*

上海中醫(yī)藥大學(xué)（上海，003） 王 璐 杜 沛 陳高敏 李中平 沈紅藝

·文獻(xiàn)綜述·

中藥抗皮膚光老化實(shí)驗(yàn)研究十年進(jìn)展*

上海中醫(yī)藥大學(xué)（上海，201203） 王 璐 杜 沛 陳高敏 李中平1沈紅藝2

皮膚光老化是指長(zhǎng)期日光紫外線照射導(dǎo)致皮膚干燥松弛、皺紋增多、色素沉著異常等皮膚衰老癥狀。近年來(lái)，國(guó)內(nèi)外對(duì)中醫(yī)藥防治皮膚光老化的研究日益增多，并從分子機(jī)制上肯定了其作用，顯示出中醫(yī)藥在光老化預(yù)防及治療方面的巨大潛力。本文對(duì)近十年來(lái)國(guó)內(nèi)外相關(guān)研究進(jìn)行綜述，以期為中醫(yī)藥防治皮膚光老化的深入研究提供文獻(xiàn)參考。

皮膚光老化 中醫(yī) 中藥 綜述

紫外線導(dǎo)致皮膚外源性老化，簡(jiǎn)稱光老化。紫外線透過(guò)皮膚作用于膠原纖維和彈力纖維，使膠原纖維硬化、彈力纖維變性和斷裂，加重皮膚角化，減少皮下脂肪［1］。光老化最為顯著的臨床特征是皮膚粗細(xì)皺紋的形成和皮膚彈性的下降。導(dǎo)致其發(fā)生的原因主要為活性氧簇的過(guò)度蓄積及真皮細(xì)胞外基質(zhì)成分的改變［2-6］?，F(xiàn)代醫(yī)學(xué)對(duì)光老化發(fā)病機(jī)制的研究已深達(dá)基因水平。

中醫(yī)認(rèn)為皮膚光老化的發(fā)病主要是由于五臟虛損、氣血不足、津液不布及痰濁瘀阻肌膚，復(fù)感光毒所致［7-9］。其發(fā)病與脾肺腎的關(guān)系最為密切。有學(xué)者提出日光中的紫外線，即光毒是人們?nèi)粘＝佑|最多的一種邪氣，性質(zhì)屬陽(yáng)，陽(yáng)邪傷陰，故光毒傷人，灼傷陰津，陰津虧損，無(wú)以制火，則邪熱更盛，“津液被火灼竭，則血行愈滯”，從而引發(fā)津虧熱盛血疲的病理變化，損傷機(jī)體的皮膚組織而導(dǎo)致光老化［10］。

依據(jù)中醫(yī)理論的指導(dǎo)，近年來(lái)對(duì)抗光老化天然藥物的開(kāi)發(fā)研究多圍繞著具有清熱解毒、活血化瘀、生津潤(rùn)燥、益氣生血及補(bǔ)腎填精功效的藥物開(kāi)展［11］，并已從分子機(jī)制上肯定了中藥防治皮膚光老化的作用。有學(xué)者不拘泥于傳統(tǒng)的藥物功效分類(lèi)，探索性地發(fā)現(xiàn)具有收斂固澀功效的五倍子、五味子、肉豆蔻亦具有抗光老化活性，為中醫(yī)藥抗光老化的預(yù)防及治療提供了更為廣闊的視角。

收斂固澀類(lèi)中藥

1.五倍子

藥理學(xué)研究發(fā)現(xiàn)，五倍子對(duì)變形鏈球菌和放線菌有抑制和殺滅作用［12］。Hwang，E.等研究發(fā)現(xiàn)在皮膚成纖維細(xì)胞和角質(zhì)形成細(xì)胞光老化模型中，五倍子提取物可抑制UVB光照引起的ROS、MMP-1及IL-6增多，同時(shí)促進(jìn)TGF-β1表達(dá)及彈性蛋白、I型膠原生成；同時(shí)，在無(wú)毛小鼠（SKH：HR-1）光老化模型中，五倍子提取物亦能抑制MMP-1的分泌，促進(jìn)彈性蛋白的生成，抑制皮膚增厚及皺紋的形成［13］。

2.五味子

五味子中最主要的藥理活性成分是木脂素類(lèi)化合物［14］，其中的五味子乙素（SchB）可抑制由30m J/cm2UVB輻射引起的人表皮角質(zhì)永生化細(xì)胞（HaCat）凋亡，并降低UVB誘導(dǎo)的p53、p21、Caspase-3等與凋亡相關(guān)基因的表達(dá)，從而拮抗UVB對(duì)皮膚細(xì)胞的損傷［15］。

3.肉豆蔻

肉豆蔻具有抗炎、抗腫瘤、抑菌止痢等藥理作用。Hwang，J.K.［16］發(fā)現(xiàn)，肉豆蔻中的主要成分肉豆蔻木酚素可通過(guò)對(duì)MAPK和TGFβ/Smad兩個(gè)信號(hào)通路的調(diào)節(jié)抑制UVB引起的ROS增多及MMP-1高表達(dá)并促進(jìn)前膠原蛋白的形成。

清熱解毒類(lèi)中藥

1.黃芩

Zhang，J.A.［17］等建立體內(nèi)與體外光老化模型，發(fā)現(xiàn)外用黃芩苷可抑制UVB引起的小鼠皮膚增厚和MMP-1、MMP-3異常表達(dá)，抑制膠原蛋白的降解；體外實(shí)驗(yàn)中經(jīng)流式細(xì)胞儀檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)黃芩甲苷給藥組細(xì)胞G1期比例下降，并下調(diào)衰老相關(guān)蛋白γ-H2AX的表達(dá)。

2.金銀花

金銀花的平均紫外吸收率高達(dá)20.9（UVA）、51.1 （UVB）、70.4（UVC）。馮承恩［18］通過(guò)UVA+UVB紫外線聯(lián)合光照建立KM小鼠光老化模型，觀察金銀花60％乙醇提取物外用對(duì)皮膚光老化的保護(hù)作用。HE染色結(jié)果顯示，金銀花高、低劑量組小鼠皮膚真皮層彈性纖維呈波浪狀，少見(jiàn)斷裂、破碎，與模型組比較有所改善，并發(fā)現(xiàn)外用金銀花小鼠皮膚內(nèi)抗氧化酶活性均高于模型組。

活血通絡(luò)化瘀類(lèi)中藥

1.平臥菊三七

平臥菊三七（Gynura procumbens（Lour.）Merr.）為菊科菊三七屬植物，具有通經(jīng)活絡(luò)、消腫止痛、消炎止咳、降血糖等功效［19］。Kim，J.發(fā)現(xiàn)在30mJ/cm2UVB照射人表皮角質(zhì)形成細(xì)胞（HaCaT）光老化模型中，20μg/mL的平臥菊三七醇提物能夠顯著抑制光老化引起細(xì)胞內(nèi)ROS增多。MMP-1抑制率達(dá)70％，MMP-9抑制率達(dá)73％，高于模型組。并抑制炎癥因子IL-6和IL-8的釋放［20］。

2.郁金

郁金95％乙醇提物在體外細(xì)胞氧化應(yīng)激模型中，可顯著提高SOD活性，下調(diào)MDA、LDH含量，降低ROS產(chǎn)物，具有抗氧化應(yīng)激活性［21］。郁金主要成分姜黃素［22］可通過(guò)MAPK-p38/JNK通路調(diào)控UVB引起的MMP-1/3高表達(dá)，對(duì)成纖維細(xì)胞具有保護(hù)作用。

3.雷公藤

研究者發(fā)現(xiàn)雷公藤紅素對(duì)紫外線老化模型中的真皮成纖維細(xì)胞的代謝和功能有顯著調(diào)節(jié)作用，調(diào)控作用通過(guò)調(diào)節(jié)成纖維細(xì)胞MMP-1和MMP-3的表達(dá)完成，在10mg/L-40mg/L質(zhì)量濃度范圍內(nèi)，雷公藤紅素對(duì)成纖維細(xì)胞的一般功能可能沒(méi)有毒副作用或者毒副作用極?。?3］。

4.乳香

1％乳香提取物外用可提高8-甲氧沙林溶液（8-MOP）聯(lián)合長(zhǎng)波紫外線光老化模型小鼠血清中SOD活力并降低MDA含量。模型組小鼠的真皮層彈性纖維發(fā)生變性，纖維出現(xiàn)斷裂、破碎甚至消失；1％乳香提取物組小鼠真皮層可見(jiàn)波浪狀彈性纖維，纖維少見(jiàn)斷裂、破碎［24］。

5.益母草

現(xiàn)代藥理學(xué)研究發(fā)現(xiàn)益母草可通過(guò)清除自由基，提高機(jī)體抗氧化酶活力，減輕小鼠皮膚組織的氧化損傷，促進(jìn)膠原蛋白合成，減緩細(xì)胞凋亡等途徑，預(yù)防皮膚光老化，并對(duì)光老化皮膚具有修復(fù)作用；其機(jī)理可能與TGF-β1上調(diào)促進(jìn)膠原蛋白合成有關(guān)［25］。

生津潤(rùn)燥類(lèi)中藥

1.麥冬

麥冬水煎劑能顯著提高模型大鼠的紅細(xì)胞SOD活性，血清TAA及紅細(xì)胞免疫功能，顯著降低血清MDA含量，表明其具有一定的抗衰老活性［26］。麥冬的主要活性成分麥冬皂苷D可通過(guò)調(diào)節(jié)NF-κB和ERK信號(hào)通路抑制過(guò)氧化氫引起的人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞過(guò)氧化損傷［27］。15μM和10μM的麥冬皂苷D可促進(jìn)衰老細(xì)胞的增殖，下調(diào)凋亡因子caspase-3的蛋白表達(dá)，調(diào)控細(xì)胞的周期和凋亡，使G1期細(xì)胞比例下調(diào)，促進(jìn)細(xì)胞進(jìn)入S期，降低細(xì)胞凋亡率［28］。

2.玉竹

玉竹“久服，去黑面，好顏色潤(rùn)澤，輕身不老”。玉竹提取物可提高細(xì)胞活力并抑制UVA造成的抗氧化酶活性下降［29］，進(jìn)一步研究表明在UVB照射人皮膚角質(zhì)形成細(xì)胞光老化模型中100μg/m l及200μg/m l玉竹水提液劑量組能顯著提高SOD、GSH-Px活性，降低MDA含量，減少炎癥因子TNF-α、IL-6的分泌，在一定程度上減輕UVB對(duì)角質(zhì)形成細(xì)胞的損傷［30］。

3.地黃

研究者發(fā)現(xiàn)生地黃的石油醚、氯仿、乙酸乙酯及正丁醇提取物均具有抗老化功效［31］。體外人角質(zhì)形成細(xì)胞光照實(shí)驗(yàn)研究表明［32］，毛地黃黃酮可調(diào)節(jié)MAPKs通路AP-1的活化，從而抑制MMP-1表達(dá)，對(duì)光老化有抑制作用。

4.葛根

用葛根的主要成分葛根素預(yù)處理HaCaT細(xì)胞，然后進(jìn)行30mJ/cm2UVB照射，24h后彗星電泳實(shí)驗(yàn)檢測(cè)發(fā)現(xiàn)模型組細(xì)胞DNA損傷、細(xì)胞內(nèi)游鈣離子、磷酸化p38蛋白和神經(jīng)酰胺顯著增加；與UVB模型組相比，葛根素處理組可減輕UVB造成的DNA損傷并抑制細(xì)胞內(nèi)游鈣離子、磷酸化p38蛋白和神經(jīng)酰胺的增加，提示其具有抗光老化活性［33］。

5.沙參麥冬湯

體內(nèi)實(shí)驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)［34］，2g生藥/m l沙參麥冬湯灌胃可提高煙熏大鼠肺臟的抗氧化功能，減少氧化應(yīng)激損傷，并可通過(guò)增加衰老時(shí)機(jī)體的胸腺指數(shù)和脾指數(shù)，增強(qiáng)衰老時(shí)體內(nèi)下降的免疫功能，還可以抑制衰老機(jī)體內(nèi)caspase-3蛋白表達(dá)同時(shí)增加抑凋亡基因bcl-2的表達(dá)，從而抑制內(nèi)源性衰老［28］。另有研究發(fā)現(xiàn)沙參麥冬湯可提高光老化ICR小鼠自身抗氧化酶活性，降低皮膚中MDA含量，從而抑制皮膚中重要保濕物質(zhì)透明質(zhì)酸的降解［35］。

益氣生血類(lèi)中藥

1.人參

人參皂苷Rb及人參皂苷Rd可抑制8-甲氧補(bǔ)骨脂素誘導(dǎo)的真皮成纖維細(xì)胞光老化模型MMP-1和MMP-3表達(dá)［23，36-37］。Hwang，Y.P.［38］發(fā)現(xiàn)，在UVB誘導(dǎo)的成纖維細(xì)胞光老化模型中，人參提取物可同時(shí)調(diào)節(jié)MAPKs及NF-kB信號(hào)通路，抑制MMP-1與MMP-13的異常分泌，達(dá)到抗光老化作用。

2.絞股藍(lán)

體內(nèi)研究發(fā)現(xiàn)，絞股藍(lán)提取液灌胃光老化模型小鼠，可提高其SOD，降低MDA，中高濃度給藥還可以提高HYP含量［39］，體外研究顯示，絞股藍(lán)總皂苷提取物含藥血清可調(diào)節(jié)光老化成纖維細(xì)胞模型中相關(guān)細(xì)胞因子（IL-1α、IL-6以及TNF-α）的分泌及NF-κB蛋白的表達(dá)，其抗光老化機(jī)制可能與抑制NF-κB信號(hào)通路蛋白的表達(dá)相關(guān)［40-41］。

3.黃芪

黃芪總黃酮具有清除自由基抗氧化的藥理作用。研究表明在UVA+UVB照射昆明種無(wú)毛小鼠光老化模型中黃芪8g生藥/Kg及16g生藥/Kg灌胃組，可減輕UV照射造成的SOD活性降低及MDA含量增加［42］。0.08％黃芪甲苷外用亦顯示出抗光老化活性［43］。另有研究表明黃芪甲苷可提高成纖維細(xì)胞的活性，且濃度為40μg/m l時(shí)最顯著，并可同時(shí)上調(diào)TGFβRIImRNA、蛋白水平，下調(diào)Smad 7mRNA、蛋白水平的表達(dá)以對(duì)抗紫外線所造成的損傷［44］。此外，有研究者發(fā)現(xiàn)濃度為20mg/L的黃芪甲苷可以明顯緩解成纖維細(xì)胞光老化進(jìn)程，包括下調(diào)MMP-1增強(qiáng)TIMP-1的表達(dá)［45］，并抑制UVA引起的細(xì)胞周期阻滯，調(diào)控p53、p16和c-myc等老化基因表達(dá)［46］。

4.玉屏風(fēng)散

研究者采用血清藥理學(xué)方法制備玉屏風(fēng)散含藥血清并以不同濃度含藥血清培養(yǎng)光老化角質(zhì)形成細(xì)胞。發(fā)現(xiàn)紫外線顯著損傷細(xì)胞形態(tài)，造成角質(zhì)形成細(xì)胞皺縮、碎片增多，懸浮細(xì)胞增多，MTT檢測(cè)顯示UVA和UVB對(duì)體外培養(yǎng)的角質(zhì)形成細(xì)胞生長(zhǎng)均有顯著的抑制作用，細(xì)胞克隆形成率結(jié)果表明UVA和UVB的照射顯著抑制了角質(zhì)形成細(xì)胞的增殖能力，而玉屏風(fēng)散8g生藥/kg和16g生藥/kg劑量組均可促進(jìn)皮膚角質(zhì)形成細(xì)胞的生長(zhǎng)與增殖，同時(shí)發(fā)現(xiàn)照射24h后給藥組效果最為明顯［47-48］。

補(bǔ)腎填精類(lèi)中藥

1.杜仲

研究者對(duì)杜仲醇提物分別進(jìn)行抗UVA、UVB致HaCaT細(xì)胞和UVB致ESF細(xì)胞光老化作用的研究，結(jié)果表明給藥組可提高光老化模型中細(xì)胞活性和SOD活力、降低培養(yǎng)液中LDH活力和MDA含量［49-51］。同時(shí)，在體實(shí)驗(yàn)亦顯示杜仲醇提物對(duì)小鼠皮膚光老化具有保護(hù)作用［52］。深入研究發(fā)現(xiàn)，杜仲醇提物能抑制UVA引起的MMP-1及MMP-3的異常分泌，并拮抗I型膠原蛋白的降解［53］。

2.冬蟲(chóng)夏草

蟲(chóng)草多糖可使8-甲氧補(bǔ)骨脂素聯(lián)合UVA（8-MOP/UVA）誘導(dǎo)皮膚成纖維細(xì)胞致光老化模型中羥脯氨酸含量上升，MDA含量降低，SOD活力升高［54-55］。Lee Young-Rae發(fā)現(xiàn)在人皮膚成纖維細(xì)胞光老化模型中，蟲(chóng)草多糖可通過(guò)調(diào)節(jié)NF-kB信號(hào)通路以調(diào)控MMP1、MMP3的表達(dá)而發(fā)揮抗光老化作用［56］。

3.紅景天

紅景天苷可有效抑制H2O2誘導(dǎo)的人胚肺成纖維細(xì)胞衰老模型中p53、p21和p16蛋白的表達(dá)，表明其具有較強(qiáng)的抗氧化及抗衰老活性［57］，并能夠促進(jìn)光老化角質(zhì)形成細(xì)胞的增殖，提高SOD、GSH、CAT等抗氧化酶的活性，對(duì)UVB輻射所造成的皮膚光老化具有保護(hù)作用［58］。

4.十精丸

十精丸出自《普濟(jì)方》，由枸杞、熟地、肉桂、菊花、山茱萸等10味中藥組成。研究發(fā)現(xiàn)，十精丸水提取物100μg/ml及200μg/ml均能顯著提高UVA光照后ESF-1培養(yǎng)液中SOD、GSH-Px活性，降低MDA含量，增強(qiáng)細(xì)胞活力，有效地對(duì)抗UVA對(duì)成纖維細(xì)胞的氧化損傷［59］。

小結(jié)

隨著人們對(duì)皮膚抗衰老的關(guān)注持續(xù)增強(qiáng)，國(guó)內(nèi)外對(duì)防曬劑的研究不再停留于遮光劑的開(kāi)發(fā)，而是更關(guān)注具有抗氧化、促進(jìn)膠原合成等抗光老化藥理活性的藥物。隨著中藥抗皮膚光老化的深入研究，很多中藥的有效成分可以通過(guò)清除自由基、提高抗氧化酶活性來(lái)抑制UV誘導(dǎo)的膠原蛋白降解，從分子水平肯定了中藥抗皮膚光老化的效果，顯示出中醫(yī)藥在皮膚光老化的預(yù)防及治療方面尚有巨大的潛力。中藥具有天然、毒副作用小的優(yōu)勢(shì)，今后的研究中，在中醫(yī)理論的指導(dǎo)下，結(jié)合現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)的實(shí)驗(yàn)方法，進(jìn)一步探索中藥復(fù)方防治光老化的作用機(jī)制，明確量效關(guān)系，將具有重要的臨床價(jià)值及廣闊的應(yīng)用前景。

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Decade Progress o f Experimen tal Researches：An ti Sk in photoaging w ith Chinese Medical Herbs

WANG Lu，DU Pei，CHEN Gao-m in，LIZhong-ping，SHEN Hong-yi （ShanghaiUniversity of TraditionalChinese Medicine，Shanghai201203，China）

Skin photoaging refers to symptoms including dryness，w rinklesand pigmentation，caused by long- time exposure to UB rays of natural sunlight.Relating to anti skin photoaging w ith Chinese medical herbs，increasing researches have agreed on molecular mechanism of herbs in recent years.Thisphenomenon demonstratesgreat potential of Chinesemedicalherbson prevention and treatment in skin photoaging.Thus，the article is to give a comprehensive summary on relevant researches for decadesallover theworld for profound studiesby literature reference.

skin photoaging；TraditionalChineseMedicine；Chinesemedicalherbs；summary

R275.9

A

1006-4737（2015）02-0064-05

2014-12-30）

上海市教委資助項(xiàng)目（編號(hào)：2012JW23）；上海中醫(yī)藥大學(xué)基礎(chǔ)營(yíng)養(yǎng)基金(編號(hào)：D463);上海中醫(yī)藥大學(xué)研究生“創(chuàng)新能力培養(yǎng)”專(zhuān) 項(xiàng)科研項(xiàng)目（編號(hào)：P291030101）

1 通訊作者，E-mail:lizhongping 163@sina.com

2 通訊作者，E-mail:xhhc1503@sina.com

·醫(yī)家詩(shī)文選摘·