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    蛋黃果 ‘云熱-205’果實(shí)品質(zhì)及有機(jī)酸含量分析①

    2019-08-23 11:10:40高賢玉張發(fā)明柏天琦熊賢坤葉松林尼章光羅心平
    熱帶農(nóng)業(yè)科學(xué) 2019年5期
    關(guān)鍵詞:蘋果酸酒石酸總酸

    高賢玉 張發(fā)明 柏天琦 熊賢坤葉松林 尼章光 羅心平③

    (1云南省農(nóng)業(yè)科學(xué)院熱帶亞熱經(jīng)濟(jì)作物研究所 云南保山 678025;2云南農(nóng)業(yè)大學(xué)資源與環(huán)境學(xué)院 云南昆明 650201;3云南省雙柏縣大莊鎮(zhèn)農(nóng)業(yè)綜合服務(wù)中心 云南楚雄 675103)

    蛋黃果(Lucuma nervosaA.DC.)為山欖科蛋黃果屬多年生常綠小喬木。原產(chǎn)北美州古巴及南美州等熱帶地區(qū)。在我國(guó)廣東、廣西、福建和云南等熱帶亞熱帶地區(qū)零星種植[1]。蛋黃果果形美觀,風(fēng)味獨(dú)特,營(yíng)養(yǎng)豐富,果實(shí)內(nèi)含有鉀、鈉、鎂、鈣、鐵、鋅、錳等多種人體必需的微量元素及礦物元素,還含量較高的水溶性多糖、碳水化合物、膳食纖維、多種維生素及少量的蛋白質(zhì)和脂肪。因此,蛋黃果具有消食、化痰、鎮(zhèn)靜止痛、減脂和美容等藥用保健等功效[2-4]。目前,國(guó)內(nèi)專家對(duì)蛋黃果的研究大多集中在品種選育、引種觀察、栽培技術(shù)、嫁接、種子萌發(fā)率,果實(shí)水溶性多糖、糖組分、微量元素及蛋黃果產(chǎn)業(yè)分析等方面[5-12]。有機(jī)酸是決定植物果實(shí)品質(zhì)及風(fēng)味的重要元素,不同有機(jī)酸的組分及含量使不同物種果實(shí)風(fēng)味存在明顯差異。但迄今為止,對(duì)蛋黃果果實(shí)中有機(jī)酸含量及組分的測(cè)定則未見報(bào)道。因此,本研究以云南省農(nóng)業(yè)科學(xué)院熱帶亞熱帶經(jīng)濟(jì)作物研究所自主選育的優(yōu)良栽培品種蛋黃果 ‘云熱-205’為試材,采用常規(guī)品質(zhì)分析及HPLC方法對(duì)3個(gè)不同栽培點(diǎn)的 ‘云熱-205’蛋黃果果實(shí)性狀及有機(jī)酸組分、含量進(jìn)行測(cè)定與分析,以期為蛋黃果后續(xù)的品種選育和栽培技術(shù)的制定提供理論依據(jù)。

    1 材料與方法

    1.1 材料

    1.1.1 試材

    蛋黃果 ‘云熱-205’果實(shí)分別取樣于以下3個(gè)試驗(yàn)樣地。栽培方法均參照陳于福[6]的方法。

    (1)云南省保山市隆陽區(qū)潞江鎮(zhèn)莫卡1號(hào):該地位于怒江干熱河谷,海拔695 m,土壤為磚紅壤,年均溫23.1℃,年降雨量1 000 mm。該地蛋黃果‘云熱-205’開花期:5月上旬至6月中旬,果實(shí)成熟期:11月下旬至翌年1月下旬。

    (2)云南省農(nóng)業(yè)科學(xué)院熱帶亞熱帶經(jīng)濟(jì)作物研究所種質(zhì)資源圃:海拔756 m,土壤為磚紅壤,年均溫21.3℃,年降雨量755.3 mm。該地蛋黃果‘云熱-205’開花期:5月中旬至6月下旬,果實(shí)成熟期:12月上旬至3月上旬。

    (3)云南省保山市隆陽區(qū)芒寬鄉(xiāng)崗黨村:海拔848 m,土壤為褐紅壤,年均溫21.6℃,年降雨量663 mm,常年無霜。該地蛋黃果 ‘云熱-205’開花期:5月下旬至6月下旬,果實(shí)成熟期:1月上旬至3月下旬。

    1.1.2 儀器與試劑

    (1)儀器 JJ500精密電子天平(常熟雙杰測(cè)試儀器廠);0-200電子數(shù)顯卡尺(桂林量具刃具廠);美國(guó)ThermoFisherscientificU-3000高效液相色譜儀;Thermo-U3000/3000RS DAD檢測(cè)器及Alltech ELSD2000ES示差檢測(cè)器,TheromoFisherscientific Chromeleon色譜數(shù)據(jù)處理系統(tǒng);Eppendorf微量進(jìn)樣槍;美國(guó)Millipore-DirectQ-8UV-R超純水儀;TP-214萬分之一天平(丹佛儀器有限公司);TGL-16aR高速離心機(jī)(上海安亭)。

    (2)試劑 藥品及標(biāo)樣:H3P03(色譜純,美國(guó)Tedia,純度85%),甲醇(色譜純,德國(guó)默克)。酒石酸(Tartaric acid)、 琥珀酸(Succinic acid)、 富馬酸(Fumaric acid),沒食子酸(Gallic acid),L-蘋果酸(L-Malicacid)、檸檬酸(Citric acid)等標(biāo)樣購自Sigma-Aldrich公司,純度99.5%以上,實(shí)驗(yàn)室用水為自制超純水。

    1.2 方法

    1.2.1 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

    試驗(yàn)于2008年選擇生長(zhǎng)健壯,無病蟲害的蛋黃果 ‘云熱-205’幼苗30株分別定植于上述3個(gè)地點(diǎn);2013年果樹進(jìn)入投產(chǎn)期;2016年進(jìn)入盛產(chǎn)期;在2014~2017年對(duì)果樹進(jìn)行物候期觀察;2018年對(duì)3個(gè)地點(diǎn)的果實(shí)進(jìn)行果實(shí)性狀與有酸含量的測(cè)定。試(實(shí))驗(yàn)除標(biāo)明外,均重復(fù)3次。

    1.2.2 采樣及處理

    于3個(gè)采樣點(diǎn)分別選擇5株長(zhǎng)勢(shì)健壯、豐產(chǎn)、穩(wěn)產(chǎn)10年生果樹,每株按東、南、西、北4個(gè)方向的樹冠中部、內(nèi)堂及外圍隨機(jī)采摘果形均勻、飽滿,無機(jī)械損傷、無病蟲害綠熟果10個(gè),共200個(gè)。所有樣品采摘后送回實(shí)驗(yàn)室平均分為2份,一份于當(dāng)天進(jìn)行果實(shí)性狀及有機(jī)酸測(cè)定,另一份果實(shí)放入長(zhǎng)×寬×高為28.5 cm×5.5 cm×22.5 cm的紙箱中,置于室溫下進(jìn)行貯藏,待完熟后進(jìn)行有機(jī)酸含量測(cè)定。

    采摘當(dāng)天隨機(jī)選取綠熟期10枚果實(shí)參照國(guó)標(biāo)GB 5009.157-2016中樣品處理方法,進(jìn)行處理。樣品液經(jīng)0.45 μm水相膜過濾后待測(cè)。貯藏果實(shí)則于儲(chǔ)藏至完熟后再以相同方法進(jìn)行樣品處理。

    綠熟果為果實(shí)果皮顏色80%變黃時(shí)進(jìn)行采摘的果實(shí)[8]。完熟果為果實(shí)采收后在室溫下進(jìn)行儲(chǔ)藏至果皮完全變黃,果肉變軟可食用時(shí)為完熟果實(shí)[1]。

    1.2.3 項(xiàng)目測(cè)定

    (1)果實(shí)性狀

    隨機(jī)選取綠熟期果實(shí)進(jìn)行單果重、果實(shí)縱徑和果實(shí)橫徑等綜合性狀測(cè)定。每20個(gè)果為一組,重復(fù)3次,共60個(gè)果。

    (2)有機(jī)酸

    色譜條件:AcclaimTH120 C18色譜柱(4.6×250mm,5 μm); 紫外檢測(cè)波長(zhǎng)為 210 nm, 柱溫 30℃,進(jìn)樣量為20 μL,以峰面積外標(biāo)法定量。

    流動(dòng)相:參照食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)食品中有機(jī)酸測(cè)定(GB 5009.157—2016)方法,即為甲醇0.1%磷酸水溶液(97.5∶2.5),等度洗脫,流速為1 mL/min。

    標(biāo)液配制:根據(jù)國(guó)標(biāo)(GB 5009.157—2016)中的方法進(jìn)行配制,定容至刻度后,封口,作為標(biāo)準(zhǔn)貯備液,在4℃保存?zhèn)溆?。使用前,根?jù)實(shí)驗(yàn)需要將此標(biāo)準(zhǔn)貯備液用流動(dòng)相稀釋至適宜含量,以配制標(biāo)準(zhǔn)工作液和混合標(biāo)準(zhǔn)工作液。

    (3)果實(shí)中的總酸的計(jì)算方法

    1.2.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析

    所有測(cè)定數(shù)據(jù)采用Excel2010進(jìn)行統(tǒng)計(jì),SPSS 19.0進(jìn)行方差分析。

    2 結(jié)果與分析

    2.1 果實(shí)性狀比較

    如表1,平均單果重最大為崗黨村所采集的樣品,顯著高于莫卡1號(hào)和熱經(jīng)所樣品,其比值分別為1.34和1.39;種子重最大為崗黨村,與莫卡1號(hào)相比差異不顯著,與熱經(jīng)所相比差異顯著,其比值分別為1.23和1.56;可食率最大為熱經(jīng)所采集樣品,與莫卡1號(hào)和熱經(jīng)所樣品相比,差異不顯著。結(jié)果顯示,隨著海拔的升高,對(duì)蛋黃果的平均單果重、縱橫徑、果形指數(shù)、可食率等果實(shí)性狀影響不顯著。

    表1 不同地點(diǎn)蛋黃果果實(shí)性狀比較

    2.2 有機(jī)酸組分及含量分析

    經(jīng)HPLC檢測(cè)結(jié)果顯示(表2),檢測(cè)出酒石酸、蘋果酸、檸檬酸、沒食子酸、富馬酸5種有機(jī)酸,而琥珀酸則未檢測(cè)出。

    在綠熟時(shí),崗黨村果實(shí)中酒石酸、蘋果酸與檸檬酸相加占總酸含量的86.96%;莫卡1號(hào)果實(shí)中酒石酸、蘋果酸和檸檬酸相加占總酸含量的87.89%;熱經(jīng)所果實(shí)中的酒石酸和蘋果酸相加占總酸含量的82.98%。完熟時(shí),崗黨村果實(shí)中的酒石酸、蘋果酸和檸檬酸相加占總酸含量的73.35%;莫卡1號(hào)果實(shí)中的酒石酸、蘋果酸和檸檬酸占總酸含量的76.97%;熱經(jīng)所果實(shí)中的酒石酸和蘋果酸相加占總酸含量的64.88%。因此,崗黨村和莫卡1號(hào) ‘云熱-205’蛋黃果主要包括的有機(jī)酸為酒石酸、蘋果酸和檸檬酸;熱經(jīng)所 ‘云熱-205’蛋黃果主要包括的有機(jī)酸為酒石酸和蘋果酸。

    在室溫貯藏條件下,綠熟至完熟時(shí),3個(gè)栽培地點(diǎn) ‘云熱-205’蛋黃果(崗黨村、莫卡1號(hào)和熱經(jīng)所)果實(shí)中的總酸含量分別下降了44.06%、2.61%和30.93%;酒石酸分別下降了 36.38%、9.99%和40.82%;蘋果酸分別下降了56.39%、11.95%和49.92%;檸檬酸分別下降了36.79%、20.84%和28.44%;而在3個(gè)栽培地點(diǎn) ‘云熱-205’蛋黃果果實(shí)中的富馬酸呈現(xiàn)出了增加趨勢(shì),分別增加了31.74%、 118.98%和 91.21%。

    結(jié)果顯示:在綠熟時(shí),蛋黃果總酸含量隨海拔的升高而升高,至完熟時(shí),由于果實(shí)有機(jī)酸在后熟過程中做為代謝底物而被消耗,使其含量在完熟時(shí)下降且不同地點(diǎn)間差異顯著。

    表2 不同地點(diǎn)蛋黃果果實(shí)有機(jī)酸含量 單位:mg/g

    3 討論

    海拔和光、熱、水、土及生物等因子對(duì)植物果實(shí)的內(nèi)外品質(zhì)均存在較大影響。在一定海拔范圍內(nèi),溫度隨海拔的升高,日均溫降低,晝夜溫差增大,呼吸作用減緩,有利于成熟期果實(shí)干物質(zhì)的積累[13]。曹永華等[14]在對(duì)不同海拔的紅富士蘋果的果實(shí)品質(zhì)研究發(fā)現(xiàn),果實(shí)縱橫徑隨著海拔的升高而減小,果形指數(shù)差異不明顯。本試驗(yàn)結(jié)果顯示:海拔最高的崗黨村平均單果重及種子重最大,果實(shí)縱橫徑最小,同時(shí)3個(gè)試驗(yàn)點(diǎn)的果實(shí)果形指數(shù)差異不明顯。

    植物有機(jī)酸組分及含量是構(gòu)成果實(shí)風(fēng)味的重要因素之一。有機(jī)酸在果實(shí)生長(zhǎng)過程中積累,在成熟或后熟過程中則作為呼吸作用的基質(zhì)被消耗[15]。果實(shí)在生理成熟時(shí)自植株上采摘后,植株對(duì)果實(shí)的營(yíng)養(yǎng)供給中斷,而果實(shí)在后熟時(shí)期,由于其生理生化作用,使果實(shí)發(fā)育時(shí)期所儲(chǔ)存的有機(jī)酸等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)被消耗。前人研究發(fā)現(xiàn),果實(shí)有機(jī)酸含量的多少受環(huán)境條件和栽培措施的調(diào)控[15]。不同產(chǎn)地的富士蘋果果實(shí)中主要有機(jī)酸組分及含量存在差異[16];無籽刺梨在不同的產(chǎn)區(qū)其果實(shí)中的有機(jī)酸含量存在差異[17];柑橘果實(shí)有機(jī)酸在果實(shí)生長(zhǎng)發(fā)育過程中積累;在貯藏過程中,檸檬酸、蘋果酸是三羧酸循環(huán)(TCA)的底物,直接參與線粒體中的呼吸作用,蘋果酸在線粒體中的氧化途徑可以增強(qiáng)植物對(duì)環(huán)境的適應(yīng)能力,因此果實(shí)中的蘋果酸、檸檬酸的分解速度遠(yuǎn)遠(yuǎn)大于其合成速度,所以果實(shí)在貯藏后期酸含量下降[18-22]。羅顯揚(yáng)[23]、彭良志[13]等研究發(fā)現(xiàn),錦橙、臍橙果實(shí)中有機(jī)酸的含量與海拔呈極顯著正相關(guān),但對(duì)果實(shí)的其它品質(zhì)影響并不顯著。

    本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示:在崗黨村(海拔848 m)、莫卡1號(hào)(海拔695 m)和熱經(jīng)所(海拔756 m)3個(gè)不同栽培地點(diǎn),蛋黃果 ‘云熱-205’主要包括的有機(jī)酸為酒石酸、蘋果酸和檸檬酸,且不同栽培地點(diǎn)的有機(jī)酸組分及含量存在差異;綠熟時(shí),其總酸含量隨著海拔的升高而增加;室溫貯藏條件下, ‘云熱-205’蛋黃果,從綠熟至完熟,其總酸、酒石酸、蘋果酸、檸檬酸和沒食子酸均呈下降趨勢(shì),由此推斷,蛋黃果 ‘云熱-205’果實(shí)在室溫貯藏過程中,有機(jī)酸作為呼吸或其他代謝途徑的基質(zhì)而被消耗,因此使其含酸量下降。

    植物果實(shí)的品質(zhì)也可通過一些栽培措施來改善,而 ‘云熱-205’蛋黃果此類研究還需進(jìn)一步研究得以完善。

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