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      雞腎臟對微囊藻毒素-LR氧化脅迫的響應(yīng)

      2019-08-22 02:08:58張大文袁麗娟張莉向建軍廖且根羅林廣邱素艷
      關(guān)鍵詞:染毒藍(lán)藻谷胱甘肽

      張大文,袁麗娟,張莉,向建軍,廖且根,羅林廣,邱素艷

      江西省農(nóng)業(yè)科學(xué)院農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全與標(biāo)準(zhǔn)研究所,江西 南昌 330200

      湖泊富營養(yǎng)化引起的藍(lán)藻水華暴發(fā)已經(jīng)成為一個(gè)世界性的水環(huán)境問題,近年來呈現(xiàn)出大范圍、高頻次、高生物量的特征(Huisman et al.,2018)。由其中部分水華藍(lán)藻產(chǎn)生的一系列生物毒素對水生態(tài)系統(tǒng)和人類健康的危害已成為水環(huán)境研究的焦點(diǎn)(Buratti et al.,2017)。自然水體最常見、毒性較大的生物毒素為微囊藻毒素(Microcystins,MCs),迄今為止已發(fā)現(xiàn)了100多種MCs的同分異構(gòu)體(Puddick et al.,2015),其中最常見的是微囊藻毒素-LR(MC-LR)(Buratti et al.,2017)。MC-LR腹腔注射小白鼠的半致死劑量(LD50值)一般在50-60 μg·kg-1體質(zhì)量(bm)之間,其毒性與化學(xué)類有機(jī)磷神經(jīng)毒劑相當(dāng)(Kuiper-Goodman et al.,1999)。

      我國富營養(yǎng)湖泊中藍(lán)藻生物量巨大,以大型淡水湖泊為例,據(jù)統(tǒng)計(jì),巢湖水華暴發(fā)總藍(lán)藻量(干重)可達(dá) 50-70萬噸(蔣雪英,2000),滇池中每年可用于資源化的藍(lán)藻量(干重)約為5000 t(周婧斐等,2011)。如此巨大資源的利用已經(jīng)是一個(gè)亟待解決的問題。藍(lán)藻細(xì)胞雖然能產(chǎn)生一系列的生物毒素,但是其營養(yǎng)成分豐富,營養(yǎng)價(jià)值較高。天然藍(lán)藻中有機(jī)質(zhì)達(dá)65%以上,藻泥的蛋白質(zhì)含量達(dá)40%,與大豆的蛋白質(zhì)含量相當(dāng),同時(shí)具有豐富的氨基酸和維生素,營養(yǎng)價(jià)值極高(丁艷華,2008;許玲等,2010;楊蘇等,2006),是優(yōu)質(zhì)的飼料蛋白源和飼料添加劑。

      已有研究表明,MCs能過誘導(dǎo)細(xì)胞產(chǎn)生氧化脅迫,并進(jìn)一步造成細(xì)胞損傷,這可能是 MCs的致毒機(jī)理的一個(gè)重要方面(朱楓等,2010)。為抵抗氧化損傷,機(jī)體內(nèi)會(huì)有一個(gè)抗氧化系統(tǒng),這個(gè)系統(tǒng)會(huì)利用酶或非酶機(jī)制來對抗氧化壓力。這個(gè)抗氧化系統(tǒng)的酶主要有超氧化物歧化酶(SOD)、過氧化氫酶(CAT)、谷胱甘肽過氧化物酶(GPX)、谷胱甘肽還原酶(GR)等,而非酶物質(zhì)主要包括維生素E、維生素E、維生素A、谷胱甘肽(GSH)等(Ming et al.,2012;Prieto et al.,2008)。

      然而,目前關(guān)于 MCs對動(dòng)物體的氧化脅迫方面的研究主要集中在魚類和哺乳動(dòng)物(Li et al.,2010;Li et al.,2003;Mclellan et al.,2017),MCs對家禽毒性效應(yīng)的研究基本上是一片空白,僅王春雨(2010)在其碩士論文中初步開展了 MCs對鴨的急性和亞慢性毒性研究以及張曉波等(2011)研究了MCs對鴨胚的毒性和半致死劑量。

      腎臟是動(dòng)物體重要的排泄器官,在MCs的清除過程中起著非常重要的作用。本文采用腹腔注射的方式研究MC-LR對崇仁麻雞腎臟氧化損傷的影響,為藍(lán)藻在家禽養(yǎng)殖中的飼料化利用提供理論依據(jù)。

      1 材料與方法

      1.1 試劑與儀器

      試劑:MC-LR(純度≥95%,HPLC)購自ZEN-U Biotechnology公司(臺(tái)灣),超氧化物歧化酶(SOD)、過氧化氫酶(CAT)、谷胱甘肽過氧化物酶(GPX)、谷胱甘肽—S轉(zhuǎn)移酶(GST)、谷胱甘肽(GSH)、考馬斯亮蘭總蛋白和標(biāo)準(zhǔn)蛋白均由南京建成生物工程研究所提供。

      儀器:U-3900紫外-可見分光光度計(jì)(HITACHI公司,日本);SH-1000酶標(biāo)儀(CORONA公司,日本),組織勻漿機(jī);恒溫水浴鍋;CR22N低溫冷凍高速離心機(jī)(HITACHI公司,日本);DW-HL218-86 ℃超低溫冰箱(中科美菱,中國)。

      1.2 試驗(yàn)動(dòng)物

      健康成年崇仁麻雞,由江西省農(nóng)業(yè)科學(xué)院畜牧獸醫(yī)研究所提供,平均體質(zhì)量1.15 kg。

      1.3 腹腔注射毒性試驗(yàn)

      選取124日齡的健康崇仁麻雞60只,平均體質(zhì)量為1.15 kg,平均分為4組,每組15只雞。試驗(yàn)設(shè)置3個(gè)MC-LR染毒劑量組以及1個(gè)對照組。每個(gè) MC-LR染毒劑量組一次性注射不同劑量的MC-LR。注射劑量的選擇根據(jù)本試驗(yàn)獲得的 LD50值進(jìn)行設(shè)定,分別為20(高劑量組,HD),10(中劑量組,MD),和 5 μg·kg-1bm(低劑量組,LD),注射體積為1 mL左右。對照組(Control)每只雞注射1 mL生理鹽水。試驗(yàn)期間未發(fā)現(xiàn)雞的死亡。

      1.4 雞組織取樣

      雞經(jīng)腹腔注射后,分別于1、3、12、24、48 h進(jìn)行取樣。每個(gè)時(shí)間點(diǎn)從對照組和3個(gè)染毒組各取出3只雞,解剖取出完整的腎臟,生理鹽水漂洗,除去血液,用濾紙擦干后,稱重,用錫箔紙包裹后現(xiàn)場放入液氮中保存,24 h后放入-80 ℃的超低溫冰箱中冷凍保存。

      1.5 腎臟系數(shù)的測定

      根據(jù)稱量雞只體質(zhì)量和腎臟質(zhì)量,計(jì)算腎臟系數(shù)(KI)。計(jì)算公式如下:

      式中:KI為腎臟系數(shù),%;kb為腎臟濕質(zhì)量,kg;bm為雞只體質(zhì)量,kg。

      1.6 分析方法

      按照不同酶試劑盒上的方法對腎臟組織進(jìn)行勻漿以及處理,CAT、GST和GPX采用紫外-可見分光光度計(jì)進(jìn)行測定,SOD、GSH均采用酶標(biāo)儀進(jìn)行測定,并用考馬斯亮蘭總蛋白試劑盒和標(biāo)準(zhǔn)蛋白測定組織的蛋白質(zhì)含量,測試方法為比色法。CAT、SOD、GPX和GST酶活性單位為U·mg-1,GSH的酶活性單位為 μmol·g-1。

      1.7 數(shù)據(jù)處理

      運(yùn)用SPSS 13.0軟件對數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)處理,采用t檢驗(yàn)分析處理組與對照組之間的差異顯著性。

      2 結(jié)果與分析

      2.1 MC-LR對腎臟系數(shù)的影響

      圖1 腹腔注射不同劑量的MC-LR后雞腎臟系數(shù)的變化趨勢Fig. 1 Changes of kidney body weight index in chicken injected intraperitoneally with different dose of MC-LR

      腹腔注射MC-LR后,雞腎臟系數(shù)的變化情況如圖1所示。與對照組相比,試驗(yàn)組的雞腎臟系數(shù)從1 h后就開始呈現(xiàn)上升趨勢。在1 h和3h時(shí),對照組雞腎臟系數(shù)為(0.64%±0.13%)和(0.64%±0.02%),低劑量組、中劑量組和高劑量組分別為(0.65%±0.04%)和(0.68%±0.07%)、(0.67%±0.01%)和(0.81%±0.22%)、(0.75%±0.03%)和(0.77%±0.04%),各試驗(yàn)組與對照組的腎臟系數(shù)之間并無統(tǒng)計(jì)學(xué)上的差異(t=-1.111--0.151;P=0.348-0.903);從12 h開始直至試驗(yàn)結(jié)束(48 h),MC-LR染毒組的腎臟系數(shù)較對照組顯著上升。12 h時(shí),對照組、低、中和高劑量組腎臟系 數(shù) 分 別 為 (0.58%±0.06%)、 (0.83%±0.15%)、(0.79%±0.11%)和(0.80%±0.12%);24 h時(shí),各組腎臟系 數(shù) 分 別 為 (0.61%±0.01%)、 (0.80%±0.16%)、(0.79%±0.11%)和(0.86%±0.05%);48 h,各組腎臟系數(shù)分別為(0.70%±0.07%)、(0.86%±0.09%)、(0.84%±0.06%)和(0.87%±0.04%);3個(gè)時(shí)間點(diǎn)各染毒組的腎臟系數(shù)均顯著高于對照組(t=-6.687--3.495;P=0.018-0.036)。

      2.2 谷胱甘肽(GSH)含量變化

      不同注射劑量下雞腎臟中谷胱甘肽(GSH)的含量隨時(shí)間變化如圖2所示。與對照組相比,雞腎臟中GSH含量在1 h時(shí),染毒組有下降趨勢(對照組、低、中和高劑量組GSH含量分別為(6.06±1.11)、(5.05±0.50)、(5.65±0.85)和(5.19±1.21) μmol·g-1),然后從3 h開始出現(xiàn)不同程度的上升(對照組、低、中和高劑量組 GSH 含量分別為(6.49±1.03)、(6.38±0.82)、(6.85±2.81)、(7.18±1.73) μmol·g-1),到48 h時(shí),染毒組略低于對照組(對照組、低、中和 高 劑 量 組 GSH 含 量 分 別 為(8.83±1.06)、(7.10±0.52)、(7.46±3.22)、(8.33±2.29) μmol·g-1),但各染毒組和對照組之間的差異均未達(dá)到統(tǒng)計(jì)學(xué)水平(t=-3.192-1.854;P=0.069-0.921)。

      圖2 不同注射劑量下雞腎臟中GSH含量隨時(shí)間的變化Fig. 2 Temporal changes of GSH concentrations in kidney of chicken injected intraperitoneally with different dose of MC-LR

      2.3 谷胱甘肽轉(zhuǎn)移酶(GST)活性變化

      圖3 不同注射劑量下雞腎臟中GST酶活性隨時(shí)間的變化Fig. 3 Temporal variations of GST activity in kidney of chicken injected intraperitoneally with different dose of MC-LR

      雞注射MC-LR后,與對照組相比,染毒組雞腎臟中GST酶活性無顯著變化(圖3)。雞腹腔注射MC-LR后1 h時(shí),高劑量組GST酶活性略高于對照組(對照組和高劑量組 GST酶活性分別為(22.04±4.91)和(25.24±5.75) U·mg-1);3 h 時(shí),3 個(gè)劑量組GST酶活性均高于對照組(對照組、低、中和高劑量組 GST酶活性分別為(23.11±1.34)、(24.97±2.64)、(23.39±3.33)和(27.44±5.35) U·mg-1),但未達(dá)到統(tǒng)計(jì)學(xué)上的差異(t=-0.892--0.110;P=0.363-0.927);12 h時(shí),3個(gè)染毒組的GST酶活性呈現(xiàn)隨著劑量增加而下降的趨勢(低、中和高劑 量 組 GST 酶 活 性 分 別 為(35.51±3.82)、(32.31±3.80)和(21.81±5.78) U·mg-1),但與對照組(28.22±0.90)之間均未有顯著差異(t=-2.630-2.220;P=0.113-0.361);24 h時(shí),對照組和低、中、高3個(gè)染毒組之間的GST酶活性相當(dāng)(值分別為 (22.53±5.31)、 (24.44±3.60)、 (23.34±1.56)和(21.82±0.33) U·mg-1);至 48 h,3 個(gè)染毒組 GST酶活性(低、中、高劑量組 GST酶活性分別為(27.02.±1.37)、(26.66±5.69)和(26.25±0.66) U·mg-1)高于對照組(21.30±3.27) U·mg-1,但均未達(dá)到顯著水平(t=-2.342--1.171;P=0.136-0.224)。

      2.4 谷胱甘肽過氧化物酶(GPX)活性變化

      圖4 不同注射劑量下雞腎臟中GPX酶活性隨時(shí)間的變化Fig. 4 Temporal variations of GPX activity in kidney of chicken injected intraperitoneally with different dose of MC-LR

      不同注射劑量下雞腎臟中谷胱甘肽過氧化物酶(GPX)的活性隨時(shí)間變化如圖4所示。1 h、3 h和 12 h時(shí),低劑量組 GPX酶活性(值分別為(15.68±2.48)、(16.88±0.89)和(17.37±1.80) U·mg-1)與對照組(值分別為(15.33±0.16)、(17.92±0.66)和(17.99±4.91) U·mg-1)相當(dāng),24 h (21.17±3.53) U·mg-1和48 h (18.22±4.34) U·mg-1時(shí)高于對照組(分別為(16.33±0.83) U·mg-1和(17.35±0.74) U·mg-1);中劑量組GPX酶活性在1 h (15.51±1.49) U·mg-1和48 h(17.41±1.52) U·mg-1時(shí)與對照組相當(dāng),其它時(shí)間點(diǎn)GPX酶活性(3、12和24 h時(shí)分別為(20.40±1.94)、(21.07±1.9)5 和(18.50±1.82) U·mg-1)均高于對照組;高劑量組GPX酶活性在1 h (17.20±1.82) U·mg-1和3 h (19.88±3.37) U·mg-1時(shí)高于對照組,其它時(shí)間點(diǎn)GPX酶活性(12、24和48 h分別為(16.32±0.92)、(15.67±1.17)、(15.63±0.53) U·mg-1)低于對照組。除了24 h低劑量組的雞腎臟中GPX酶活性顯著高于對照組之外(t=-3.265;P=0.031),其它組別和時(shí)間點(diǎn)中的腎臟中 GPX酶活性與對照組之間無統(tǒng)計(jì)學(xué)上的差異(t=-2.156-1.810;P=0.097-0.918)。

      2.5 超氧化物歧化酶(SOD)活性變化

      雞注射MC-LR后,雞腎臟中SOD酶活性的變化情況如圖5所示。SOD酶活性除了3 h時(shí)的低劑量 組 (129.94±12.28) U·mg-1和 中 劑 量 組(117.47±2.00) U·mg-1低于對照組(133.15±20.90)U·mg-1外,其它各組SOD酶活性(127.15-169.65 U·mg-1)均高于對照組(121.70-149.16 U·mg-1),但所有染毒組別腎臟中 SOD酶活性與對照組之間的差異均未達(dá)到統(tǒng)計(jì)學(xué)上的顯著水平(t=-5.761-1.058;P=0.056-0.837)。

      圖5 不同注射劑量下雞腎臟中SOD酶活性隨時(shí)間的變化Fig. 5 Temporal variations of SOD activity in kidney of chicken injected intraperitoneally with different dose of MC-LR

      2.6 過氧化氫酶(CAT)活性變化

      圖6 不同注射劑量下雞腎臟中CAT酶活性隨時(shí)間的變化Fig. 6 Temporal changes of CAT activity in kidney of chicken injected intraperitoneally with different dose of MC-LR

      不同注射劑量下雞腎臟中過氧化氫酶(CAT)的活性隨時(shí)間變化如圖6所示。除了3 h,低、中和高劑量3個(gè)染毒組腎臟中CAT酶活性(值分別為 (116.64±4.29) 、 (96.66±1.13) 、 (74.01±11.20)U·mg-1)低于對照組(123.58±11.33) U·mg-1,且中劑量和高劑量組 CAT酶活性與對照組的差異達(dá)到了顯著水平(t=4.253;P=0.024和t=4.432;P=0.022)外,其它時(shí)間點(diǎn),染毒組(104.70-125.70 U·mg-1)與對照組(113.55-123.58 U·mg-1)的CAT酶活性無明顯差異(t=-1.777-2.950;P=0.112-0.913)。

      3 討論

      3.1 MC-LR對雞腎臟抗氧化酶系統(tǒng)的影響

      已有的研究證實(shí),MC-LR能促進(jìn)腎臟的生理和病理的變化(Nobre et al.,2003),而腎臟也參與了機(jī)體對 MCs的清除排泄。因此,腎臟抗氧化系統(tǒng)的功能可能會(huì)受到 MCs的影響。生物體中的抗氧化系統(tǒng)包括酶和非酶物質(zhì)??寡趸锩钢饕蠸OD、CAT、GPX等,而非酶物質(zhì)主要包括維生素E、維生素E、維生素A、GSH等(Amado et al.,2010;Lushchak,2011;Yuan et al.,2016)。

      抗氧化酶系統(tǒng)發(fā)生作用首先是引 GSH系統(tǒng)的反應(yīng),GSH直接參與氧自由基(ROS)的清除及MCs的解毒(Goncalves-Soares et al.,2012),GSH與MCs在GST的催化下形成極性較強(qiáng)的結(jié)合產(chǎn)物而易于排出體外,被認(rèn)為 MCs在動(dòng)物體內(nèi)解毒的第一步(Kondo et al.,1992;Pflugmacher et al.,1998)。在本研究中,不同染毒組雞腎臟中 GSH含量與對照組之間無顯著差異,這可能是雞腎臟中GSH的重新合成和/或谷胱甘肽還原酶(GR)將氧化型谷胱甘肽(GSSG)還原為GSH補(bǔ)充了其消耗。眾所周知,細(xì)胞內(nèi) GSH的合成與消耗處于一種動(dòng)態(tài)平衡。首先,GSH與進(jìn)入體內(nèi)異物的結(jié)合或在GPX特異性的催化下與ROS的反應(yīng)消耗,接著機(jī)體會(huì)從新合成GSH或GR催化將GSSG還原為GSH補(bǔ)充消耗,從而保持體內(nèi) GSH水平的平衡。不同動(dòng)物以及同一動(dòng)物不同組織中GSH對MCs的響應(yīng)存在較大差異。譬如,Gehringer et al.(2004)研究發(fā)現(xiàn),小鼠暴露于MCs后,會(huì)引起小鼠肝臟中GSH含量水平的上升;鰱魚暴露于自然水體的藍(lán)藻水華(Blaha et al.,2004)以及淡水螺(Radix swinhoei)經(jīng)MC-LR染毒后(Zhang et al.,2016)也得出了相同的研究結(jié)果;而培養(yǎng)的鯉魚肝細(xì)胞(Li et al.,2003)、金魚肝臟(Malbrouck et al.,2004)、小龍蝦(Yuan et al.,2016)暴露于MCs時(shí)導(dǎo)致了GSH含量的下降;鳙魚腹腔注射含有 MCs的藍(lán)藻提取物后,肝臟中 GSH含量水平在整個(gè)試驗(yàn)過程中保持穩(wěn)定(Li et al.,2003),其它作者對丁鯛魚(Tinca tinca)(Atencio et al.,2008)和金魚(Carassius auratus)(Malbrouck et al.,2004)經(jīng) MCs染毒后的研究發(fā)現(xiàn),肝臟中 GSH含量沒有明顯變化。巴西的 Brycon amazonicus 魚腹腔注射 100 μg·kg-1的MC-LR 48 h后,肝臟中GSH含量沒有顯著變化,而鰓中GSH含量相對于對照組下降了43%(Martins et al.,2017)。

      GST在MCs的解毒過程中起著非常重要的作用,其催化GSH與MCs結(jié)合(Pflugmacher et al.,1998),但是,不同動(dòng)物試驗(yàn)、不同器官中 GST酶活性對MCs的響應(yīng)存在較大差異(Best et al.,2002;Cazenave et al.,2006;Malbrouck et al.,2004;Martins et al.,2017;Wiegand et al.,2005;Yuan et al.,2016;Li et al.,2003)。譬如,Yuan et al.(2016)對小龍蝦暴露于MC-LR的研究指出,小龍蝦肝臟中GST酶活性隨著暴露時(shí)間的增加呈現(xiàn)上升趨勢,在斑馬魚早期發(fā)育期的研究中也得出了相似的研究結(jié)論(Wiegand et al.,2005);而當(dāng)斑馬魚胚胎暴露于 0.5 μg·L-1的 MC-LR和藍(lán)藻脂多糖混合物時(shí),GST酶活性受到了抑制(Best et al.,2002),鯰魚(Corydoras paleatus)的MC-RR暴露試驗(yàn)也得出了類似的研究結(jié)果(Cazenave et al.,2006);巴西的Brycon amazonicus 魚經(jīng)MC-LR染毒后,其肝臟中GST酶活性顯著上升,而腮中GST酶活性顯著下降(Martins et al.,2017);Li et al.(2003)等對鳙魚的藍(lán)藻提取物的腹腔注射試驗(yàn)結(jié)果顯示,其肝臟中GST呈現(xiàn)先上升后下降的趨勢;金魚幼魚暴露于MC-LR 96 h時(shí),GST酶活性在整個(gè)試驗(yàn)期間未發(fā)生顯著改變(Malbrouck et al.,2004)。在本研究中,與對照組相比,3個(gè)染毒組雞腎臟中GST酶活性在整個(gè)試驗(yàn)期間無顯著變化。

      已有的研究結(jié)果顯示,SOD、CAT和GPX等酶在機(jī)體清除過量 ROS中起著非常重要的作用(Amado et al.,2010;Lushchak,2011),但是,這3種酶活性的變化會(huì)隨著MCs的種類、物種類別、劑量以及處理時(shí)間的不同而存在較大差異,其變化曲線可能是多階段的(Li et al.,2003;Li et al.,2010;Moreno et al.,2005;Prieto et al.,2006,2007)。譬如,Li et al.(2003)研究結(jié)果顯示,MC-LR處理培養(yǎng)的鯉魚肝細(xì)胞后,CAT、SOD和GPX酶的活性隨著處理時(shí)間的延長而逐漸升高;大鼠經(jīng)腹腔注射MC-LR,其肝臟和腎臟中CAT、SOD和GPX酶的活性顯著降低(Moreno et al.,2005);羅非魚腹腔注射含MCs的藍(lán)藻提取物后,腎臟中的CAT、SOD 和 GPX 酶的活性顯著降低(Prieto et al.,2007);鳙魚腹腔注射藍(lán)藻粗提物后,其肝臟中SOD、CAT和GPX酶活性均呈現(xiàn)先上升后下降的趨勢(Li et al.,2010);羅非魚分別用 500 μg·kg-1MC-LR 和 500 μg·kg-1腹腔注射后,MC-LR 處理組肝臟、腎臟和鰓組織中的 SOD酶活性顯著上升,而MC-RR處理組僅腎臟中SOD酶顯著增加,而腎臟和鰓中未見明顯改變;MC-LR和MC-RR處理的羅非魚肝臟、腎臟和鰓中CAT酶活性均顯著上升;肝臟和鰓中 GPX酶活性在兩種毒素處理過程中均無明顯變化,而MC-LR染毒引起了腎臟GPX酶活性的顯著上升,MC-RR染毒未發(fā)生顯著變化(Prieto et al.,2006)。在本研究中,雞腎臟各染毒組中SOD酶活性均略高于對照組,但未達(dá)到統(tǒng)計(jì)學(xué)差異水平,這說明SOD酶參與了腎臟中過量ROS的清除;除3 h時(shí),中、高劑量組雞腎臟中CAT酶活性明顯下降,其它時(shí)間點(diǎn),染毒組與對照組 CAT酶活性無明顯差異,這說明雞腎臟中CAT酶活性在3 h時(shí)受到了抑制,同時(shí)也參與 ROS的清除;雞腎臟中GPX酶活性在整個(gè)試驗(yàn)期間無明顯變化,對照組與染毒組之間酶活性差異不顯著。

      3.2 MC-LR對雞腎臟系數(shù)的影響

      臟器系數(shù)變化是毒理學(xué)試驗(yàn)中較為敏感的指標(biāo)(Zenick et al.,1989)。在本研究中,雞腎臟系數(shù)從 1 h就開始呈現(xiàn)毒素處理組高于對照組的趨勢,并在12 h之后直至48 h,染毒組的腎臟系數(shù)顯著高于對照組。這說明,MC-LR注射后導(dǎo)致了雞腎臟充血、腫脹等生理學(xué)反應(yīng),使腎臟質(zhì)量增加。這一結(jié)果與李哲等(2010)及楊黎江等(2013)對大鼠肝臟和王春雨(2010)對鴨肝臟的研究結(jié)果一致。在本研究中,腎臟抗氧化酶系統(tǒng)CAT、GST、SOD和 GPX酶活性以及 GSH含量存在一定程度的變化,雖然未達(dá)到統(tǒng)計(jì)學(xué)上的顯著性水平,這說明,在MC-LR作用下,雞腎臟產(chǎn)生了氧化應(yīng)激現(xiàn)象,但其抗氧化酶系統(tǒng)可能難以抵御MC-LR危害。

      4 結(jié)論

      (1)在MC-LR作用下,腎臟系數(shù)從1 h就開始呈現(xiàn)毒素處理組高于對照組,并在12、24和48 h時(shí),毒素處理組腎臟系數(shù)顯著高于對照組的趨勢。

      (2)在 MC-LR的作用下,抗氧化酶系統(tǒng)中,除中劑量和高劑量組CAT在3 h時(shí)酶活性受到明顯的抑制外,GSH含量和GST、SOD和GPX酶活性在整個(gè)試驗(yàn)期間沒有明顯的變化。

      (3)在 MC-LR作用下,雞腎臟產(chǎn)生了氧化應(yīng)激現(xiàn)象,但是其抗氧化酶系統(tǒng)可能難以抵御MC-LR危害。

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