劉明月,崔璐,李曉楓,馬莉,陳欣,金星,高曉虹
(大連醫(yī)科大學公共衛(wèi)生學院 流行病教研室,遼寧 大連 116044)
宮頸癌是一種嚴重危害女性生殖健康的惡性腫瘤,在全世界女性惡性腫瘤中發(fā)病率居第3位[1]。2012年,全球宮頸癌新發(fā)病例約527 600例,死亡人數(shù)約265 700例[2]。人類自身免疫功能可消除≥90%人乳頭瘤病毒(human papilloma virus, HPV)感染[3],高危型HPV持續(xù)感染是宮頸癌發(fā)生、發(fā)展的主要原因。本研究對2 000例婦女進行HPV篩查,并且2年后對其進行隨訪。探討高危型HPV持續(xù)感染因素,為降低高危型HPV持續(xù)感染和宮頸癌的發(fā)生提供參考依據(jù)。
本研究依托2015年國家公益性行業(yè)科研專項“適合中國農(nóng)村地區(qū)的宮頸癌篩查技術與示范研究”,采用多中心人群篩查隊列研究。為保證研究對象的代表性,采取多階段抽樣方法,選取2015年1月—2015年 12月(第1年)大連市某地區(qū)的宮頸癌篩查項目點抽取當?shù)貞艏虺W∪丝诘? 000例婦女作為篩查對象,選擇過去3年中未參加過篩查的人群。第3年 (2017年度)對已被篩查對象進行隨訪。納入標準:①年齡35~64歲;②無宮頸癌疾病史,宮頸完整;③無臨床懷孕可疑癥狀;④理解研究程序,自愿參與。排除標準:①懷孕或哺乳期婦女;②月經(jīng)期或任何情況導致的引導出血;③患有宮頸癌或因宮頸疾病切除宮頸。本研究通過北京協(xié)和醫(yī)院倫理委員會審查(編號S-705),篩查對象簽署知情同意書。
SLAN-96P型熒光定量PCR儀(上海宏石醫(yī)療科技有限公司),高危型HPV核酸分型測定試劑盒(上海之江生物科技股份有限公司,Z-TD-0324-04-24)。共有15種高危HPV亞型,依次為HPV16、18、31、33、35、39、45、51、52、56、58、59、66、68及 82型。
1.3.1 問卷調查研究對象在研究人員指導下完成宮頸癌篩查調查表,調查表內(nèi)容包括年齡、疾病史及月經(jīng)等基本信息。為保證參與者的個人隱私及問卷答案的真實性,本研究將采取調查員及婦女一對一、面對面訪談式問卷調查,之后進行婦科檢查、樣本采集及臨床檢查相關表格填寫。根據(jù)檢查結果填寫臨床檢查表、診斷結果表。
1.3.2 宮頸細胞取樣①婦科醫(yī)生將窺陰器或陰道張開器暴露宮頸,將宮頸分泌黏液拭去;②將宮頸刷輕輕插入宮頸口1.0~1.5 cm,順時針緩慢轉動宮頸刷3~5圈;③將專用細胞保存液置于有樣本的取樣管中,取出宮頸刷放入取樣管后,擰緊瓶蓋;④樣本應盡快送檢,若不能則在室溫保存<24 h。
1.3.3 宮頸脫落細胞樣本處理樣本細胞保存液充分震蕩搖勻,吸取1 ml液體轉至1.5 ml離心管中13 000 r/min離心5 min。沉淀加無菌生理鹽水1 ml混勻,13 000 r/min離心5 min,小心吸棄上清。沉淀直接加入100 μl核酸提取液充分混勻,100℃水浴或99℃干浴10 min,13 000 r/min離心5 min,取上清4 μl作為聚合酶鏈反應(PCR)模板。
1.3.4 HPV脫氧核糖核酸(DNA)分型檢測檢測方法及結果判定按照高危型HPV核酸分型測定試劑盒(熒光PCR法)說明書嚴格執(zhí)行。PCR反應條件:94℃預變性2 min,94℃變性2 min,93℃退火10 s,62℃延伸31 s,共40個循環(huán);單點熒光檢測在62℃,反應體系為40μl。
正式調查開始前培訓調查員,并運用調查問卷進行預調查。為保證整個研究過程高質量,進行婦科檢查的醫(yī)護人員將按統(tǒng)一標準接受培訓。在整個初篩當天流程未結束前,知情同意書、調查問卷及臨床檢查表全程交由婦女本人保管。參與者完成所有項目后,質量控制組工作人員需對上述用表進行質量控制。
數(shù)據(jù)分析采用SPSS 24.0統(tǒng)計軟件。計數(shù)資料以率(%)表示,比較用χ2檢驗,影響因素的分析用多因素Logistics回歸模型,P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。
2015年度對2 000例農(nóng)村婦女進行HPV篩查,感染型別共有14種,陽性191例,陽性率為9.55%。2017年隨訪1 432例婦女,進行HPV檢查,感染型別共有15種,陽性151例,陽性率為10.54%。見 表1。
表1 2015年、2017年HR-HPV感染型別分布
2017年對1 432例研究對象完成隨訪,隨訪率為71.6%。2015年篩查的191例陽性患者中,2017年篩查中有50例失訪、51例持續(xù)感染、90例自然清除。141例感染高危型HPV隨訪對象中,51例為持續(xù)感染高危型HPV,持續(xù)感染率為36.17%;90例為自然清除高危型HPV,自然清除率為63.83%。
高危型HPV持續(xù)感染的甲狀腺疾病、高血壓、陰道分泌物異常、宮頸炎及尿道感染因素比較,經(jīng)χ2檢驗,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05);而年齡、吸煙、采取避孕措施、腫瘤及懷孕次數(shù)比較,經(jīng)χ2檢驗,差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。見 表2。
表2 高危型HPV持續(xù)感染的單因素分析
將單因素分析中有差異的影響因素納入多因素Logistics回歸模型中,按照引入標準0.05和排除標準0.10進行分析。結果顯示,甲狀腺疾病和宮頸炎是高危型HPV持續(xù)感染的危險因素(P<0.05)。見表3。
表3 影響高危型HPV持續(xù)感染的多因素Logistics回歸分析參數(shù)
HPV是一種雙鏈環(huán)狀的DNA病毒,可特異感染人皮膚及黏膜。目前已發(fā)現(xiàn)的HPV亞型有200余種,分為高危型和低危型,其中最常見的致癌亞型是HPV16和HPV18[4-6]。近年來,HPV發(fā)病率呈年輕化趨勢,尤其是在經(jīng)濟欠發(fā)達的國家和地區(qū),對女性生殖健康帶來極大的危害[7]。隨著病因學研究的不斷發(fā)展、發(fā)現(xiàn),持續(xù)的高危型HPV感染是引起宮頸癌重要因素,研究高危HPV持續(xù)感染的影響因素具有重要意義。
本研究結果得出,高危型HPV感染在2015、2017年度感染率分別為9.55%和10.54%,此結果低于趙佳[8]和鐘威達[9]等的17.5%和25.96%,與郭月環(huán)[10]的11.17%接近。我國女性宮頸癌的發(fā)病率和病死率呈逐年上升趨勢,且具有地域差異[9]。本研究調查結果顯示,高危型HPV持續(xù)感染率為36.17%,這一結果高于鐘興明等[11]和寧尼亞[12]的25.76%和19.55%,可能是由于本研究的研究對象來源于農(nóng)村婦女,醫(yī)療水平和個人衛(wèi)生有差異所造成。因此,需要在以后研究中進一步探討。
高危型HPV感染作為造成宮頸癌的發(fā)生、發(fā)展主要的致病因素,除此之外,還有多種致病因素也同時存在。如能在早期有針對性地對引起宮頸癌發(fā)病的高危影響因素進行預防,對降低宮頸癌的發(fā)病率具有重要的意義。高危型HPV感染發(fā)生在子宮頸癌病變前,并且是引起宮頸癌病變的主要因素。宮頸癌在發(fā)生高危型HPV感染前治愈率高達85%[13],而在發(fā)生高危型HPV感染后患者的治愈率下降,甚至在持續(xù)出現(xiàn)HPV感染的患者中治愈率<50%??刂聘腥靖呶P虷PV非常重要,預防持續(xù)感染HPV病毒也極其重要,所以本研究通過對141例感染高危型HPV研究對象進行影響因素分析。
通過單因素分析結果得出,年齡、吸煙、腫瘤及懷孕次數(shù)方面比較無差異,其中年齡因素與寧尼亞[12]和張?zhí)N蕊[14]的研究結果相反。張?zhí)N蕊的研究指出,持續(xù)感染的高危型HPV主要分布在31~50歲年齡段[14],造成本研究結果原因可能是年齡的納入范圍有缺陷。本研究年齡集中在40~60歲,缺少20~30歲年齡段女性。吸煙因素與覃小敏等[15]的研究結果一致,張?zhí)N蕊[14]的研究呈現(xiàn)出被動吸煙不是高危型HPV持續(xù)感染的危險因素。甲狀腺疾病、高血壓、陰道分泌物異常、宮頸炎癥或陰道治療及尿道感染方面比較有差異,說明這5種影響因素可能是高危型HPV持續(xù)感染影響因素。通過多因素Logistics回歸模型分析結果顯示,宮頸炎和甲狀腺疾病是高危型HPV持續(xù)感染的危險因素。HPV感染是導致宮頸炎最常見的因素,一般情況下宮頸炎都是與HPV感染有關,宮頸癌的發(fā)病過程相對緩慢且連續(xù),在宮頸炎癥的患者中持續(xù)的HPV感染更容易導致患者發(fā)生宮頸癌的患病概率,早期治療宮頸炎癥對預防宮頸癌具有重要作用。甲狀腺是調節(jié)機體代謝的重要內(nèi)分泌器官,其分泌異常會引起機體多種系統(tǒng)疾病。由于甲狀腺疾病是高危型HPV持續(xù)感染的危險因素文獻過少,需要更多的研究結果支持本研究結果。
綜上所述,宮頸炎和甲狀腺疾病因素是影響感染者高危HPV持續(xù)感染的危險因素,此結果可為感染者持續(xù)感染高危型HPV的預防提供依據(jù)。