大連市某農(nóng)村婦女高危型HPV持續(xù)感染的 影響因素分析*

劉明月，崔璐，李曉楓，馬莉，陳欣，金星，高曉虹

（大連醫(yī)科大學(xué)公共衛(wèi)生學(xué)院 流行病教研室，遼寧 大連 116044）

宮頸癌是一種嚴(yán)重危害女性生殖健康的惡性腫瘤，在全世界女性惡性腫瘤中發(fā)病率居第3位[1]。2012年，全球?qū)m頸癌新發(fā)病例約527 600例，死亡人數(shù)約265 700例[2]。人類自身免疫功能可消除≥90%人乳頭瘤病毒（human papilloma virus, HPV）感染[3]，高危型HPV持續(xù)感染是宮頸癌發(fā)生、發(fā)展的主要原因。本研究對2 000例婦女進行HPV篩查，并且2年后對其進行隨訪。探討高危型HPV持續(xù)感染因素，為降低高危型HPV持續(xù)感染和宮頸癌的發(fā)生提供參考依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 一般資料

本研究依托2015年國家公益性行業(yè)科研專項“適合中國農(nóng)村地區(qū)的宮頸癌篩查技術(shù)與示范研究”，采用多中心人群篩查隊列研究。為保證研究對象的代表性，采取多階段抽樣方法，選取2015年1月—2015年 12月（第1年）大連市某地區(qū)的宮頸癌篩查項目點抽取當(dāng)?shù)貞艏虺Ｗ∪丝诘? 000例婦女作為篩查對象，選擇過去3年中未參加過篩查的人群。第3年 （2017年度）對已被篩查對象進行隨訪。納入標(biāo)準(zhǔn)：①年齡35～64歲；②無宮頸癌疾病史，宮頸完整；③無臨床懷孕可疑癥狀；④理解研究程序，自愿參與。排除標(biāo)準(zhǔn)：①懷孕或哺乳期婦女；②月經(jīng)期或任何情況導(dǎo)致的引導(dǎo)出血；③患有宮頸癌或因?qū)m頸疾病切除宮頸。本研究通過北京協(xié)和醫(yī)院倫理委員會審查（編號S-705），篩查對象簽署知情同意書。

1.2 儀器與試劑

SLAN-96P型熒光定量PCR儀（上海宏石醫(yī)療科技有限公司），高危型HPV核酸分型測定試劑盒（上海之江生物科技股份有限公司，Z-TD-0324-04-24）。共有15種高危HPV亞型，依次為HPV16、18、31、33、35、39、45、51、52、56、58、59、66、68及 82型。

1.3 方法

1.3.1 問卷調(diào)查研究對象在研究人員指導(dǎo)下完成宮頸癌篩查調(diào)查表，調(diào)查表內(nèi)容包括年齡、疾病史及月經(jīng)等基本信息。為保證參與者的個人隱私及問卷答案的真實性，本研究將采取調(diào)查員及婦女一對一、面對面訪談式問卷調(diào)查，之后進行婦科檢查、樣本采集及臨床檢查相關(guān)表格填寫。根據(jù)檢查結(jié)果填寫臨床檢查表、診斷結(jié)果表。

1.3.2 宮頸細(xì)胞取樣①婦科醫(yī)生將窺陰器或陰道張開器暴露宮頸，將宮頸分泌黏液拭去；②將宮頸刷輕輕插入宮頸口1.0～1.5 cm，順時針緩慢轉(zhuǎn)動宮頸刷3～5圈；③將專用細(xì)胞保存液置于有樣本的取樣管中，取出宮頸刷放入取樣管后，擰緊瓶蓋；④樣本應(yīng)盡快送檢，若不能則在室溫保存＜24 h。

1.3.3 宮頸脫落細(xì)胞樣本處理樣本細(xì)胞保存液充分震蕩搖勻，吸取1 ml液體轉(zhuǎn)至1.5 ml離心管中13 000 r/min離心5 min。沉淀加無菌生理鹽水1 ml混勻，13 000 r/min離心5 min，小心吸棄上清。沉淀直接加入100 μl核酸提取液充分混勻，100℃水浴或99℃干浴10 min，13 000 r/min離心5 min，取上清4 μl作為聚合酶鏈反應(yīng)（PCR）模板。

1.3.4 HPV脫氧核糖核酸（DNA）分型檢測檢測方法及結(jié)果判定按照高危型HPV核酸分型測定試劑盒（熒光PCR法）說明書嚴(yán)格執(zhí)行。PCR反應(yīng)條件：94℃預(yù)變性2 min,94℃變性2 min，93℃退火10 s，62℃延伸31 s，共40個循環(huán)；單點熒光檢測在62℃，反應(yīng)體系為40μl。

1.4 質(zhì)量控制

正式調(diào)查開始前培訓(xùn)調(diào)查員，并運用調(diào)查問卷進行預(yù)調(diào)查。為保證整個研究過程高質(zhì)量，進行婦科檢查的醫(yī)護人員將按統(tǒng)一標(biāo)準(zhǔn)接受培訓(xùn)。在整個初篩當(dāng)天流程未結(jié)束前，知情同意書、調(diào)查問卷及臨床檢查表全程交由婦女本人保管。參與者完成所有項目后，質(zhì)量控制組工作人員需對上述用表進行質(zhì)量控制。

1.5 統(tǒng)計學(xué)方法

數(shù)據(jù)分析采用SPSS 24.0統(tǒng)計軟件。計數(shù)資料以率（%）表示，比較用χ2檢驗，影響因素的分析用多因素Logistics回歸模型，P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 基本情況

2015年度對2 000例農(nóng)村婦女進行HPV篩查，感染型別共有14種，陽性191例，陽性率為9.55%。2017年隨訪1 432例婦女，進行HPV檢查，感染型別共有15種，陽性151例，陽性率為10.54%。見 表1。

表1 2015年、2017年HR-HPV感染型別分布

2.2 隨訪及感染情況

2017年對1 432例研究對象完成隨訪，隨訪率為71.6%。2015年篩查的191例陽性患者中，2017年篩查中有50例失訪、51例持續(xù)感染、90例自然清除。141例感染高危型HPV隨訪對象中，51例為持續(xù)感染高危型HPV，持續(xù)感染率為36.17%；90例為自然清除高危型HPV，自然清除率為63.83%。

2.3 高危型HPV持續(xù)感染的單因素分析

高危型HPV持續(xù)感染的甲狀腺疾病、高血壓、陰道分泌物異常、宮頸炎及尿道感染因素比較，經(jīng)χ2檢驗，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）；而年齡、吸煙、采取避孕措施、腫瘤及懷孕次數(shù)比較，經(jīng)χ2檢驗，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。見 表2。

表2 高危型HPV持續(xù)感染的單因素分析

2.4 高危型HPV持續(xù)感染的多因素Logistics回歸分析

將單因素分析中有差異的影響因素納入多因素Logistics回歸模型中，按照引入標(biāo)準(zhǔn)0.05和排除標(biāo)準(zhǔn)0.10進行分析。結(jié)果顯示，甲狀腺疾病和宮頸炎是高危型HPV持續(xù)感染的危險因素（P＜0.05）。見表3。

表3 影響高危型HPV持續(xù)感染的多因素Logistics回歸分析參數(shù)

3 討論

HPV是一種雙鏈環(huán)狀的DNA病毒，可特異感染人皮膚及黏膜。目前已發(fā)現(xiàn)的HPV亞型有200余種，分為高危型和低危型，其中最常見的致癌亞型是HPV16和HPV18[4-6]。近年來，HPV發(fā)病率呈年輕化趨勢，尤其是在經(jīng)濟欠發(fā)達(dá)的國家和地區(qū)，對女性生殖健康帶來極大的危害[7]。隨著病因?qū)W研究的不斷發(fā)展、發(fā)現(xiàn)，持續(xù)的高危型HPV感染是引起宮頸癌重要因素，研究高危HPV持續(xù)感染的影響因素具有重要意義。

本研究結(jié)果得出，高危型HPV感染在2015、2017年度感染率分別為9.55%和10.54%，此結(jié)果低于趙佳[8]和鐘威達(dá)[9]等的17.5%和25.96%，與郭月環(huán)[10]的11.17%接近。我國女性宮頸癌的發(fā)病率和病死率呈逐年上升趨勢，且具有地域差異[9]。本研究調(diào)查結(jié)果顯示，高危型HPV持續(xù)感染率為36.17%，這一結(jié)果高于鐘興明等[11]和寧尼亞[12]的25.76%和19.55%，可能是由于本研究的研究對象來源于農(nóng)村婦女，醫(yī)療水平和個人衛(wèi)生有差異所造成。因此，需要在以后研究中進一步探討。

高危型HPV感染作為造成宮頸癌的發(fā)生、發(fā)展主要的致病因素，除此之外，還有多種致病因素也同時存在。如能在早期有針對性地對引起宮頸癌發(fā)病的高危影響因素進行預(yù)防，對降低宮頸癌的發(fā)病率具有重要的意義。高危型HPV感染發(fā)生在子宮頸癌病變前，并且是引起宮頸癌病變的主要因素。宮頸癌在發(fā)生高危型HPV感染前治愈率高達(dá)85%[13]，而在發(fā)生高危型HPV感染后患者的治愈率下降，甚至在持續(xù)出現(xiàn)HPV感染的患者中治愈率＜50%?？刂聘腥靖呶Ｐ虷PV非常重要，預(yù)防持續(xù)感染HPV病毒也極其重要，所以本研究通過對141例感染高危型HPV研究對象進行影響因素分析。

通過單因素分析結(jié)果得出，年齡、吸煙、腫瘤及懷孕次數(shù)方面比較無差異，其中年齡因素與寧尼亞[12]和張?zhí)N蕊[14]的研究結(jié)果相反。張?zhí)N蕊的研究指出，持續(xù)感染的高危型HPV主要分布在31～50歲年齡段[14]，造成本研究結(jié)果原因可能是年齡的納入范圍有缺陷。本研究年齡集中在40～60歲，缺少20～30歲年齡段女性。吸煙因素與覃小敏等[15]的研究結(jié)果一致，張?zhí)N蕊[14]的研究呈現(xiàn)出被動吸煙不是高危型HPV持續(xù)感染的危險因素。甲狀腺疾病、高血壓、陰道分泌物異常、宮頸炎癥或陰道治療及尿道感染方面比較有差異，說明這5種影響因素可能是高危型HPV持續(xù)感染影響因素。通過多因素Logistics回歸模型分析結(jié)果顯示，宮頸炎和甲狀腺疾病是高危型HPV持續(xù)感染的危險因素。HPV感染是導(dǎo)致宮頸炎最常見的因素，一般情況下宮頸炎都是與HPV感染有關(guān)，宮頸癌的發(fā)病過程相對緩慢且連續(xù)，在宮頸炎癥的患者中持續(xù)的HPV感染更容易導(dǎo)致患者發(fā)生宮頸癌的患病概率，早期治療宮頸炎癥對預(yù)防宮頸癌具有重要作用。甲狀腺是調(diào)節(jié)機體代謝的重要內(nèi)分泌器官，其分泌異常會引起機體多種系統(tǒng)疾病。由于甲狀腺疾病是高危型HPV持續(xù)感染的危險因素文獻過少，需要更多的研究結(jié)果支持本研究結(jié)果。

綜上所述，宮頸炎和甲狀腺疾病因素是影響感染者高危HPV持續(xù)感染的危險因素，此結(jié)果可為感染者持續(xù)感染高危型HPV的預(yù)防提供依據(jù)。