高齡妊產(chǎn)婦MTHFR C677T基因多態(tài)性與妊娠期焦慮的關(guān)系

張菘, 胥雄陽, 唐劍萍, 侯艾林, 嚴(yán)小玲, 虞寶中, 楊若涵, 羅敏, 冉雙銘, 唐瑛, 賀漢軍

(廣元市第一人民醫(yī)院，四川廣元628017)

目前，隨著國家生育政策、大眾生育觀念及醫(yī)學(xué)輔助生育技術(shù)的不斷進(jìn)步，高齡妊產(chǎn)婦(年齡≥35歲)人群大量增長[1, 2]。研究顯示，隨年齡增大人體主要器官以及生殖系統(tǒng)老化，許多妊娠期代謝相關(guān)性疾病逐步顯露，高齡妊產(chǎn)婦妊娠反應(yīng)、并發(fā)癥、不良妊娠發(fā)生率上升，新生兒神經(jīng)發(fā)育異常狀況增加[3, 4]。妊娠期焦慮是妊娠期和圍產(chǎn)期間發(fā)生的一種妊產(chǎn)婦的不良情緒反應(yīng)，高齡妊產(chǎn)婦更易形成妊娠期焦慮[5, 6]，嚴(yán)重者可導(dǎo)致流產(chǎn)、早產(chǎn)等不良事件的發(fā)生[7]。同型半胱氨酸(Hcy)是甲硫氨酸循環(huán)的正常代謝物質(zhì)，參與體內(nèi)多種重要代謝過程。目前，很多研究認(rèn)為體內(nèi)Hcy水平升高與焦慮發(fā)生關(guān)系較大。亞甲基四氫葉酸還原酶(MTHFR)是葉酸代謝過程中的關(guān)鍵酶，對人體血清Hcy水平有較大影響[8, 9]。本研究檢測高齡妊娠期慮患者血清Hcy水平變化，探討高齡妊娠焦慮與Hcy、MTHFR基因多態(tài)性的關(guān)系。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選取2016年7月～2018年10月本院行妊娠產(chǎn)檢漢族婦女600例，年齡35～45(38.56±4.37)歲；孕1～13周 532例，孕14～28周48例，孕28周以上20例；孕 1次 73 例，孕≥2 次 527 例；有既往不良孕產(chǎn)史163 例，無不良孕產(chǎn)史364例。納入標(biāo)準(zhǔn)：排除妊娠期高血壓、糖尿病、嚴(yán)重肝腎功能障礙及其他惡性疾??；有獨(dú)立行為能力；無先兆流產(chǎn)、無精神病史；近期未用抗焦慮或抗抑郁藥物。

1.2 妊娠期焦慮調(diào)查及評估 本研究在取得患者本人或家屬知情同意后，由臨床研究人員向高齡妊產(chǎn)婦發(fā)放調(diào)查問卷。本次研究設(shè)計(jì)調(diào)查問卷以焦慮自評量表為主,總共20項(xiàng)，其中包括正向評分15項(xiàng)，反向評分5項(xiàng)，每項(xiàng)分4級評分，評定過去l周內(nèi)的焦慮情況。評分50分以下為正常，50～59分為焦慮輕度，60～69分為焦慮中度，≥70分為焦慮重度。

1.3 血清Hcy水平測定 清晨采集測試者空腹靜脈血5.0 mL，放置低速離心機(jī)離心10 min后，留取上層血清，采用西門子全自動生化分析儀(ADVIA 2400)檢測Hcy水平。具體操作參照儀器及試劑說明書，遵循檢測實(shí)驗(yàn)質(zhì)控原則。Hcy測定試劑盒為北京九強(qiáng)生物技術(shù)股份有限公司產(chǎn)品。

1.4 MTHFR C677T基因多態(tài)性檢測 清晨采集測試者空腹靜脈血5.0 mL，采用MTHFR基因檢測試劑盒(武漢芝友醫(yī)療科技股份公司)進(jìn)行DNA提取。樣本經(jīng)PCR反應(yīng)釋放不同的熒光信號，監(jiān)測相應(yīng)通電信號強(qiáng)度，定性分析檢測結(jié)果[10]。

2 結(jié)果

2.1 高齡妊產(chǎn)婦焦慮發(fā)生情況 本研究總共發(fā)放600份調(diào)查問卷，回收596份。焦慮自評量表評分顯示無焦慮418例，存在妊娠期焦慮178例，焦慮發(fā)生率為 29.87%；其中輕度焦慮148例，中度焦慮27例，重度焦慮3例。隨機(jī)選取焦慮高齡妊產(chǎn)婦100例(焦慮組)及無焦慮高齡妊產(chǎn)婦100例(無焦慮組)進(jìn)行后續(xù)研究。

2.2 有無焦慮高齡妊產(chǎn)婦血清Hcy水平比較 焦慮組血清Hcy水平為(18.03±3.88)μmol/L，無焦慮組血清Hcy水平為(11.06±4.06)μmol/L，兩組血清Hcy水平比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。以血清Hcy水平超過10 μmol/L為高同型半胱氨酸血癥診斷標(biāo)準(zhǔn)，焦慮組高同型半胱氨酸血癥發(fā)生率為79%(79/100)，無焦慮組高同型半胱氨酸血癥發(fā)生率為32%(32/100)，兩組高同型半胱氨酸血癥發(fā)生率差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。

2.3 有無焦慮高齡妊產(chǎn)婦MTHFR C677T 基因多態(tài)性比較 兩組TT基因型及T等位基因頻率比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均<0.05)。見表1。焦慮組CC、CT、TT基因型患者血清Hcy水平分別為(13.89±2.74)、(16.76±2.82)、(20.01±3.30)μmol/L，攜帶TT基因型患者血清Hcy水平高于CC、CT基因型患者(P均<0.05)。

表1 兩組高齡妊產(chǎn)婦MTHFR C677T 基因檢測結(jié)果(%)

注：與無焦慮組比較，*P<0.05。

3 討論

焦慮是人處在各種危險(xiǎn)、威脅狀況下的一種必然反應(yīng)特殊情緒，是一種負(fù)面心理活動。妊娠期焦慮癥是一種復(fù)雜疾病，目前其發(fā)病機(jī)制尚不明確。國內(nèi)研究顯示，妊娠期焦慮發(fā)生率為12.5%～55.32%[11, 12]，本研究高齡妊產(chǎn)婦焦慮發(fā)生率為29.87%，與相關(guān)研究基本一致。高齡妊產(chǎn)婦妊娠期代謝相關(guān)性疾病增多，分娩時子宮破裂、胎兒缺氧等高危風(fēng)險(xiǎn)增加，剖宮產(chǎn)率升高，產(chǎn)婦生理壓力、心理壓力同步上升，易產(chǎn)生各種心理焦慮問題。因此關(guān)注高齡妊產(chǎn)婦易發(fā)心理焦慮人群，及時提供有針對性的心理健康指導(dǎo)十分必要。

Hcy是甲硫氨酸循環(huán)中S-腺苷甲硫氨酸(SAM)代謝中間產(chǎn)物， SAM是DNA甲基化不可或缺的物質(zhì)。體內(nèi)SAM去甲基化后代謝生成S-腺苷同型半胱氨酸，經(jīng)過脫去腺苷生成Hcy，Hcy在相關(guān)酶代謝下重新生成甲硫氨酸，形成一個循環(huán)過程，稱為甲硫氨酸循環(huán)。本研究顯示焦慮組血清Hcy水平、高同型半胱氨酸血癥發(fā)生率均高于無焦慮組，表明血清Hcy水平與高齡妊娠焦慮存在密切聯(lián)系，高同型半胱氨酸血癥是高齡妊娠焦慮發(fā)生的潛在危險(xiǎn)因素。研究表明，Hcy引起焦慮的機(jī)制可能涉及以下3個方面：①血清Hcy升高影響單胺遞質(zhì)的甲基化過程； ②血清Hcy升高影響胸腺嘌呤及 DNA 合成和修復(fù)；③Hcy及其相關(guān)代謝物可抑制離子通道和神經(jīng)遞質(zhì)，使其產(chǎn)生神經(jīng)毒性作用，誘發(fā)細(xì)胞凋亡導(dǎo)致焦慮癥。

Hcy在體內(nèi)代謝的關(guān)鍵酶分別是胱硫醚B合成酶和MTHFR。多項(xiàng)研究指出MTHFR C677T基因多態(tài)性是高同型半胱氨酸血癥發(fā)生的關(guān)鍵影響因素，TT基因型人群MTHFR活性僅有正常人水平的50%[13]。本研究MTHFR C677T基因多態(tài)性檢測顯示焦慮組TT基因型及T等位基因頻率升高，焦慮組攜帶TT基因型患者血清Hcy水平高于CC 、CT基因型患者。MTHFR C677T基因分型TT基因型高齡妊產(chǎn)婦可能易產(chǎn)生體內(nèi)葉酸代謝酶活性缺陷導(dǎo)致血清Hcy水平升高，高齡妊娠期焦慮發(fā)生率和發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)存在較大個體差異[14]。因此，對高齡妊產(chǎn)婦進(jìn)行MTHFR C677T基因多態(tài)性檢測，篩選易發(fā)焦慮人群早期干預(yù)有重要意義。