HPLC-MS/MS測(cè)定氧化型染發(fā)劑中11種染料成分

文/張鵬，廣東中科樂(lè)活環(huán)境科技有限公司

關(guān)鍵字：HPLC-MS/MS測(cè)定；染發(fā)劑；燃料成分

近些年，染發(fā)已經(jīng)成為人們追求年輕、時(shí)尚的首要選擇。根據(jù)染色后可以持續(xù)的時(shí)間，染發(fā)劑劃分為暫時(shí)性、半永久性、永久性三類(lèi)，其中，永久性包含植物、金屬和氧化三類(lèi)永久性染發(fā)劑[1]。其中，氧化型染發(fā)劑內(nèi)包含苯胺類(lèi)物質(zhì)，存在一定的毒性、致敏性，長(zhǎng)時(shí)間使用，會(huì)導(dǎo)致患者出現(xiàn)皮膚過(guò)敏、誘發(fā)各類(lèi)癌癥等危害[2]。如今，用于檢測(cè)染發(fā)劑內(nèi)染料的方法包含高效液相色譜法（HPLC）、高效液相色譜-質(zhì)譜法（HPLC-MS）等[3]。本文以氧化型染發(fā)劑內(nèi)11種成分為對(duì)象，探究實(shí)施HPLC-MS/MS測(cè)定的方法，以期為類(lèi)似研究提供一定的參考。

1 實(shí)驗(yàn)儀器與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)儀器與材料

所選11種燃料標(biāo)準(zhǔn)品純度均超過(guò)98%，其中，染料（5）、（7）分別選購(gòu)與比利時(shí)、瑞士；其它燃料購(gòu)于百靈威科技有限公司，具體見(jiàn)表1。實(shí)驗(yàn)用水通過(guò)Milli-Q超純水機(jī)制備完成；混合春被溶液劑量為100mg/L,依次稱(chēng)取標(biāo)準(zhǔn)品各0.0100g，添加0.10g抗壞血酸，以5%甲醇溶解以后，定容為100mL棕色容量屏內(nèi).這一溶液避光保存在4oC,限定一周使用，并利用水稀釋到所需的濃度。

表1 實(shí)驗(yàn)使用產(chǎn)品規(guī)格、性狀

表2 實(shí)驗(yàn)所有部分儀器

1.2 方法

稱(chēng)取0.10g市場(chǎng)上發(fā)售的染發(fā)劑樣品、抗壞血酸0.05g置入25mL具塞比色管內(nèi),添加10mL甲醇(5%)及10mL正乙烷,實(shí)施渦旋振蕩、超聲振蕩分別為30s、10min。選取4000r/min離心處理5min，除去正乙烷層。添加10mL正乙烷,重復(fù)上述操作.選取經(jīng)上述處理得甲醇水溶液1mL讓其過(guò)SPEC18小柱，以5%甲醇洗脫，定容到100mL。這一溶液經(jīng)濾膜過(guò)濾，待測(cè)。

2 結(jié)果

2.1 萃取劑及條件的選擇

本次研究使用的11種待測(cè)染料均是苯的硝基、甲基及氨基等物質(zhì)的替代物，需要使用極性強(qiáng)的溶劑完成提取操作。本次使用使用水與甲醇、乙醇或者乙酸以此混合開(kāi)展萃取實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)種，還深入分析抗壞血酸、亞硫酸鈉等抗氧化劑對(duì)于目標(biāo)組分的保護(hù)功能。氧化型染發(fā)劑大多為膏狀或者粉狀，在液體介質(zhì)內(nèi)分散性比較差。開(kāi)展實(shí)驗(yàn)時(shí)，先要挑選渦旋振蕩促使樣品和溶劑充分均勻，并通過(guò)超聲抽提，利用正交、單因子實(shí)驗(yàn)對(duì)樣品潮濕萃取條件進(jìn)行優(yōu)化出來(lái)。選取抗壞血酸為抗氧化劑，超聲提取時(shí)間控制為10min。

2.2 HPLC條件確定

11種有待檢測(cè)組分極性比較強(qiáng)，因此，挑選較小的分子量物質(zhì)分離的反相C18柱當(dāng)做分離柱。采用EC-C18色譜柱，這些待測(cè)樣品能夠在10min之內(nèi)獲取滿(mǎn)意的分離效果。依次考察甲醇-水、乙腈-水這兩種流動(dòng)相狀態(tài)下組分的分離度極其響應(yīng)值。研究結(jié)果證實(shí)，所用甲醇-水流動(dòng)相展開(kāi)梯度洗脫，部分組分響應(yīng)數(shù)值略高于乙腈-水。采用10mmol/L乙酸銨-甲醇作為流動(dòng)相可有效抑制拖尾,有效改善色譜的峰形.為促使11種目標(biāo)組分同時(shí)展開(kāi)測(cè)定,并把原有梯度開(kāi)展適當(dāng)?shù)姆侄?從而獲取HPLC-MS/MS譜,見(jiàn)圖1.根據(jù)該圖可知,并未實(shí)施完全分離的染料3和11、染料1和10均可利用不同定量粒子實(shí)施分離和測(cè)定操作。

圖1 HPLC-MS/MS譜效果圖

2.3 實(shí)際樣品測(cè)試結(jié)果分析

通過(guò)本文提到的方法對(duì)5種不同品牌的氧化型染發(fā)劑樣品展開(kāi)成分分析，研究結(jié)果表明，被檢測(cè)的染料3、8、11含量均沒(méi)有大于標(biāo)準(zhǔn)的限定值。研究結(jié)果證實(shí)，本文使用的方法用于氧化型染發(fā)劑染料成分檢測(cè)中在監(jiān)測(cè)范圍、條件等方面均有獨(dú)特的優(yōu)勢(shì)，具有良好的應(yīng)用前景。