羅氏cobas c 702全自動生化分析儀性能驗證

唐妮娜

(泰州市中醫(yī)院檢驗科，江蘇 泰州 225300)

我院于2017年下半年新裝了羅氏cobas 8000全自動流水線，根據(jù)《醫(yī)療機構(gòu)臨床實驗室管理辦法》[1]和CNAS-CL02《醫(yī)學(xué)實驗室質(zhì)量和能力認可準(zhǔn)則》[2]的要求，檢測系統(tǒng)在應(yīng)用于臨床之前應(yīng)對其性能進行驗證，證明系統(tǒng)性能達到臨床檢測要求的標(biāo)準(zhǔn)[3]。本文對該流水線生化模塊c 702的檢測項目總膽紅素（TBIL）、總蛋白（TP）、丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶 （ALT）、γ-谷氨?；D(zhuǎn)移酶 （GGT）、 尿素（UREA）、葡萄糖（GLU）、氯（Cl-）、甘油三酯（TRIG）的分析性能進行驗證，現(xiàn)報道如下。

1 材料與方法

1．1 儀器與試劑 儀器為羅氏cobas 8000全自動流水線的生化模塊c 702，試劑、校準(zhǔn)品為原裝羅氏生化試劑。

1．2 樣本來源 羅氏多項生化質(zhì)控物 （低值：PCCC1，批號 132859；高值：PCCC2，批號 144527）；2018年全國臨檢中心常規(guī)化學(xué)第一次室間質(zhì)評樣本（201811-201815）；我科臨床病人標(biāo)本的剩余血清，排除脂血、溶血、黃疸。

1．3 方法

1．3．1 精密度 采用傳統(tǒng)穩(wěn)定樣品多次測量的方法[4，5]，以羅氏多項生化質(zhì)控物為評價樣本。批內(nèi)精密度：兩個水平的質(zhì)控物連續(xù)重復(fù)檢測20次，記錄結(jié)果并計算`X、SD、CV。批間精密度：兩個水平的質(zhì)控物復(fù)溶后分裝20份，-20℃保存，連續(xù)20個工作日各取一份，平衡至室溫機檢，記錄結(jié)果并計算`X、SD、CV。以衛(wèi)生行業(yè)標(biāo)準(zhǔn) WS/T 403-2012《臨床生物化學(xué)檢驗常規(guī)項目分析質(zhì)量指標(biāo)》[6]為評價依據(jù)，批內(nèi)精密度＜1/2CV，日間精密度＜CV進行驗證。

1．3．2 正確度 參考 CLSI EPl5-A2文件[7]， 檢測2018年全國臨檢中心發(fā)放的第一次生化室間質(zhì)評樣本3次，記錄結(jié)果并計算均值與靶值的相對偏倚，以＜TEa（WS/T 403-2012）評價正確度。

1．3．3 線性范圍 參考行標(biāo)文件 WS/T 408-2012《臨床化學(xué)設(shè)備線性評價指南》[8]的多項式線性評價方法，選取接近廠家申明的線性范圍上下限的高值（H）和低值（L）樣本，將 H和 L樣本按 6H、5H+1L、4H+2L、3H+3L、2H+4L、H+5L、6L 的比例進行配制，充分混勻后機檢，每個濃度測定兩次，記錄結(jié)果并進行多項回歸分析。對非線性回歸系數(shù)作t檢驗，選擇最優(yōu)擬合方程。如非線性系數(shù)無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0．05），則數(shù)據(jù)組為符合統(tǒng)計學(xué)標(biāo)準(zhǔn)的線性（一階線性）。如任一非線性系數(shù)有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0．05），則作臨床標(biāo)準(zhǔn)的線性與非線性檢驗，計算ADL（最優(yōu)擬合曲線與直線的平均差異值），查 ADL 臨界值表（WS/T 408-2012 文件表 5、6），如ADL小于臨界值且未標(biāo)注字母“P”，則判定為臨床可接受的非線性，反之為臨床不可接受的非線性。同時，根據(jù)測定的平均濃度（C）和最優(yōu)擬合方程的回歸標(biāo)準(zhǔn)誤（σ）計算不精密度（σ/C），對數(shù)據(jù)作精密度檢驗。

1．3．4 統(tǒng)計學(xué)處理 采用EXCEL 2003辦公軟件和SPSS 19．0統(tǒng)計軟件進行數(shù)據(jù)處理和統(tǒng)計分析。

2 結(jié)果

2．1 精密度驗證 各項目兩個水平的批內(nèi)CV均小于行標(biāo)文件WS/T 403-2012的分析質(zhì)量指標(biāo)1/2 CV，批間CV均小于分析質(zhì)量指標(biāo)CV，驗證通過。見表 1、表 2。

2．2 正確度驗證 2018年全國臨檢中心發(fā)放的第一次生化室間質(zhì)評樣本檢測結(jié)果的偏倚均小于行標(biāo)文件WS/T 403-2012的分析質(zhì)量指標(biāo)TEa驗證通過。見表3。

2．3 線性范圍驗證 八個項目的最優(yōu)擬合方程分別是：TBIL、BUN、GLU 為一階方程，TP、ALT、K+為二階方程，GGT、TRIG為三階方程。測定數(shù)據(jù)的精密度檢驗，根據(jù)PctBnd（有臨床意義的臨界相關(guān)界值）小于5%為臨床可允許的誤差，PctBnd取0．05，測定次數(shù)為12次，計算出不精密度判斷界值分別為 6．9%（一階和二階）、6．79%（三階），各項目的不精密度均小于界值，說明試驗數(shù)據(jù)精密度好，可用作線性評價。查臨界值表，各項目最優(yōu)擬合方程的ADL值均小于臨界且未標(biāo)注字母“P”，廠家聲明的線性范圍驗證通過。其中，TBIL、BUN、GLU為具有統(tǒng)計學(xué)標(biāo)準(zhǔn)的一階線性，TP、ALT、K+為臨床可接受的二階線性，GGT、TRIG為臨床可接受的三階線性。見表4。

表1 批內(nèi)精密度實驗統(tǒng)計結(jié)果

表2 批間精密度實驗統(tǒng)計結(jié)果

表4 線性范圍實驗統(tǒng)計結(jié)果

3 討論

定量試驗的性能驗證包括精密度、正確度及線性范圍的驗證等[9，10]。精密度是指在規(guī)定條件下，對被測對象重復(fù)測量所得測量值間的一致程度[11]，反映檢測系統(tǒng)的隨機誤差，是評價檢驗方法、儀器或試劑盒分析性能的首要指標(biāo)[12]。表1、表2結(jié)果顯示本試驗中八個項目的批內(nèi)精密度為0．40%～1．21%，批間精密度為 0．61%～3．42%，分別均小于行標(biāo)文件WS/T 403-2012的分析質(zhì)量指標(biāo)1/2CV和CV水平，說明該流水線的c702生化模塊重復(fù)性良好，精密度高。正確度是指多次檢測均值與參考值的一致程度[11]，用“偏倚”表示，反映系統(tǒng)誤差大小的程度。本試驗采用2018年全國臨檢中心發(fā)放的第一次生化室間質(zhì)評樣本進行正確度測定，所有結(jié)果的偏倚均小于WS/T 403-2012的分析質(zhì)量指標(biāo)TEa，說明正確度符合臨床要求。

線性范圍是指在給定的測量范圍內(nèi)，使測定結(jié)果與樣本中分析物的量直接成比例的能力[8]，是評價檢測系統(tǒng)的重要指標(biāo)之一[13]，可以認為，線性范圍越寬越適用于臨床[14]。本次線性評價使用了衛(wèi)生行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)的多項式回歸分析法，分析結(jié)果表明廠家聲明的線性范圍均為臨床可接受。多項式回歸分析法首先假定數(shù)據(jù)組為非線性，檢驗非線性多項式是否較線性多項式與數(shù)據(jù)更為相符，評估最適非線性多項式與線性多項式間的差異是否小于預(yù)先設(shè)定的允許誤差，同時檢驗測定結(jié)果的精密度[8]。此方法能夠敏感的檢出非線性關(guān)系，避免低功效的統(tǒng)計學(xué)分析，并且計算簡單，可操作性強，具有較好的臨床實用性[15，16]。

羅氏cobas 8000全自動流水線的c 702模塊是羅氏最新的生化檢測設(shè)備，采用封閉的檢測系統(tǒng)，所用的試劑和耗材均為羅氏原裝，使檢測的穩(wěn)定性更加可控。本次試驗所分析的結(jié)果表明該系統(tǒng)的精密度、正確度及線性范圍能夠滿足臨床檢測要求。