原發(fā)性肝細胞癌抗血管生成治療后血管內(nèi)皮生長因子及血流灌注參數(shù)變化

仲 康, 張亦青, 陳 華

仲康, 杭州余杭婦幼保健院檢驗科 浙江省杭州市 311100

張亦青, 浙江蕭山醫(yī)院超聲科 浙江省杭州市 311200

陳華, 浙江蕭山醫(yī)院檢驗科 浙江省杭州市 311200

核心提要： 超聲造影能實時反映腫瘤組織的微循環(huán)血流灌注狀態(tài). 運用超聲造影評估經(jīng)肝動脈化療栓塞術(shù)聯(lián)合沙利度胺治療原發(fā)性肝細胞癌前后病灶組織的血流灌注參數(shù)變化, 從而評估早期療效.

0 引言

原發(fā)性肝細胞癌(hepatocellular carcinoma, HCC)是一種有著富血供特征的肝臟惡性腫瘤[1]. 對于不能手術(shù)切除的晚期HCC患者臨床常采用經(jīng)肝動脈化療栓塞術(shù)(transcatheter arterial chemoembolization, TACE)聯(lián)合抗血管生成藥物進行治療, 并在HCC非手術(shù)治療中日益受到重視[2,3]. 因此, 尋找有效的療效評估手段對于指導(dǎo)臨床治療意義重大. 本研究運用超聲造影定量分析HCC患者經(jīng)TACE聯(lián)合沙利度胺治療后血流灌注參數(shù)變化, 探討超聲造影在評估HCC抗腫瘤血管生成療效中的應(yīng)用價值.

1 材料和方法

1.1 材料 選取2016-07/2018-12期間, 浙江蕭山醫(yī)院收治并經(jīng)肝穿刺活檢病理證實的72例HCC患者作為研究對象, 其中男58例, 女14例, 年齡31-68歲, 平均年齡50.64歲±8.32歲, 共計72個病灶, 病灶最大直徑2.3-7.1 cm, 平均4.01 cm±1.33 cm. 入選標準: (1)均經(jīng)肝穿刺活檢病理證實為HCC; (2)均未接受過任何形式的放療或化療; (3)均存在轉(zhuǎn)移, 不適合手術(shù)切除治療; (4)估計生存期＞3 mo;(5)非妊娠或哺乳期. 排除標準: (1)嚴重肝腎功能障礙;(2)對化療藥物過敏者; (3)肝功能為Child-Pugh C級. 隨機分為兩組: A組, 接受TACE治療, 36例, 男28例, 女8例,年齡31-68歲, 平均年齡51.89歲±8.58歲, 病灶最大直徑2.3-7.1 cm, 平均4.08 cm±1.36 cm; B組, 接受TACE聯(lián)合沙利度胺治療, 36例, 男30例, 女6例, 年齡33～66歲, 平均年齡49.40歲±7.98歲, 病灶最大直徑2.6-6.8 cm, 平均3.93 cm±1.32 cm. 兩組間年齡(t = 1.272, P = 0.208)、性別(χ2= 0.355, P = 0.551)、病灶最大直徑(t = 0.484, P =0.630)等一般資料比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05). 本研究經(jīng)浙江蕭山醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會審批同意, 患者均簽署知情同意書.

1.2 方法 A組患者接受TACE治療: 局部浸潤麻醉后, 采用Seldinger方法, 選取右側(cè)股動脈進行穿刺, 置入導(dǎo)管至肝總動脈, 采用Yashiro導(dǎo)管行動脈造影, 觀察病灶位置、大小及血供等情況. 采用2.7 F Progreat微導(dǎo)管超選插管病灶供血動脈, 采用20-50 mg鹽酸阿霉素、5-20 mL碘油行化療栓塞. 所有患者均接受1次TACE治療. B組患者在A組基礎(chǔ)上接受沙利度胺抗血管生成治療:TACE治療1 wk后, 每晚睡前頓服沙利度胺片(江蘇常州制藥廠), 以100 mg/d作為起始劑量, 1 wk后服用劑量增加至200 mg/d, 連續(xù)治療12 wk.

使用Acuson S2000超聲診斷儀, 4C1探頭, 探頭頻率4.0 MHz, 配有對比脈沖系列成像技術(shù). 采用Bracco公司生產(chǎn)的Sono Vue作為超聲造影劑, 按說明書制備成混懸液. 常規(guī)肝臟超聲掃查, 明確病灶位置、形態(tài)、大小、邊界等情況, 選擇最佳顯示切面, 進入超聲造影模式, 以團注法經(jīng)肘部淺靜脈推注超聲造影劑2.4 mL, 同步計時,儲存圖像. 通過時間-強度曲線測定并記錄病灶的曲線下面積、峰值強度(圖1).

清晨, 空腹狀態(tài), 采用乙二胺四乙酸二鉀抗凝管收集5 mL肘部靜脈血, 低溫狀態(tài)下離心15 min(3000 r/min)分離血清, 保存于-20 ℃冰箱. 采用酶聯(lián)免疫吸附試驗測定血清VEGF水平.

統(tǒng)計學(xué)處理采用SPSS 19.0版本軟件包處理數(shù)據(jù).采用mean±SD表示計量資料, 組間比較用獨立樣本t檢驗, 組內(nèi)治療前后比較用配對樣本t檢驗. 采用(%)表示計數(shù)資料, 組間比較用χ2檢驗. P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義.

2 結(jié)果

2.1 治療前后AUC、PI比較 治療前兩組間AUC以及PI比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05); A、B組治療后AUC、PI分別低于各組治療前, 差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05); B組治療后AUC、PI明顯低于A組治療后, 差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05). 見表1.

2.2 治療前后血清VEGF水平比較 治療前兩組間血清

VEGF水平比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05); A、B組治療后血清VEGF水平分別低于各組治療前, 差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05); B組治療后血清VEGF水平明顯低于A組治療后, 差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05). 見表2.

3 討論

HCC在全球范圍內(nèi)有著較高發(fā)病率及死亡率, 在我國尤為突出, HBV/HCV感染是其主要致病因素[4]. HCC發(fā)病較為隱匿, 部分患者被確診時已處于晚期, 無法行手術(shù)切除治療. 對于不可切除性HCC, TACE是其主要治療手段之一[5]. TACE將抗腫瘤藥物經(jīng)動脈灌注入病灶組織, 不僅阻斷病灶血液及營養(yǎng)供應(yīng), 而且使抗腫瘤藥物滯留在病灶組織內(nèi)緩慢釋放, 以達到有效殺滅腫瘤細胞目的[6]. 單獨TACE可取得的治療效果有限, 臨床常在TACE 基礎(chǔ)上聯(lián)合抗腫瘤血管生成治療以進一步提高療效. 因此有效的療效評估手段有著重要臨床意義.

大量病理研究證實HCC屬于富血供腫瘤, 病灶內(nèi)存在大量新生微小血管, 這些新生微小血管在結(jié)構(gòu)上與正常血管存在顯著差異, 如血管異常分支眾多、扭曲、擴張, 血管網(wǎng)結(jié)構(gòu)紊亂, 內(nèi)皮細胞間隙大, 血管通透性強, 血管發(fā)育不成熟, 管內(nèi)支持結(jié)構(gòu)缺失, 基底膜缺失, 動靜脈短路大量存在等, 上述病理結(jié)構(gòu)特征可導(dǎo)致HCC病灶內(nèi)血流灌注異常[7]. 抗腫瘤血管生成治療主要針對腫瘤新生血管發(fā)揮作用, 可導(dǎo)致腫瘤內(nèi)血流動力學(xué)參數(shù)發(fā)生改變, 通過監(jiān)測上述參數(shù)變化有助于臨床評價療效[8]. 超聲造影所使用的微泡造影劑屬于純血池造影劑, 能實時動態(tài)顯示灌注組織的微循環(huán)血流灌注狀態(tài),且通過時間-強度曲線能定量分析感興趣區(qū)域組織微血管的血流動力學(xué)參數(shù)變化. 本研究結(jié)果顯示: A、B組治療后AUC、PI分別低于各組治療前(P＜0.05), 而B組治療后AUC、PI明顯低于A組治療后(P＜0.05), 證實了TACE聯(lián)合沙利度胺治療HCC有助于進一步提高治療效果, 使HCC患者取得更為顯著的治療收益. 原因可能是沙利度胺是一種強力有效的抗腫瘤血管生成藥物, 其一方面可通過抑制腫瘤組織的血管生成, 減少腫瘤組織的血液供應(yīng), 從而發(fā)揮抑制腫瘤生長作用[9], 另一方面可通過阻滯細胞生長周期, 使其停止于G1期, 并誘導(dǎo)腫瘤細胞凋亡, 從而實現(xiàn)抗腫瘤作用[10]. 本研究結(jié)果同時提示超聲造影能通過定量監(jiān)測HCC抗血管生成治療前后血流灌注參數(shù)變化, 有效評估HCC抗血管生成療效, 從而為臨床評估治療效果提供一種無創(chuàng)性影像學(xué)方法.

VEGF是一種作用強、特異性高且針對血管內(nèi)皮細胞的促血管生成因子, 可降解血管外基質(zhì), 刺激血管內(nèi)皮細胞增殖, 使內(nèi)皮細胞發(fā)生分裂并遷移繼而促進新生血管形成. VEGF在腫瘤發(fā)生發(fā)展、侵襲浸潤、遠處轉(zhuǎn)移的各階段發(fā)揮著重要作用, 可增加血管通透性,致使病灶組織血流動力學(xué)發(fā)生改變[11]. 既往研究證實,HCC增強CT掃描時動脈相強化程度, 血管造影時染色程度, 增強MRI時血流等級均與VEGF表達密切相關(guān)[12-14],而血清VEGF水平可作為評估TACE療效的有效監(jiān)測指標[15]. 本研究結(jié)果顯示: A、B組治療后血清VEGF水平分別低于各組治療前(P＜0.05), 而B組治療后血清VEGF水平明顯低于A組治療后(P＜0.05), 進一步說明TACE聯(lián)合沙利度胺治療HCC的療效明顯優(yōu)于單純TACE治療. 同時提示沙利度胺通過抑制HCC的微小血管生成發(fā)揮著抗腫瘤作用, 伴隨著血清VEGF水平的下降, 反映HCC血流量的超聲造影血流灌注參數(shù)(AUC、PI)隨之下降, 從另一個側(cè)面反映了運用超聲造影評估HCC抗血管生成療效具有可行性.

表1 治療前后曲線下面積和峰值強度比較(mean ± SD, n = 36)

表2 治療前后血清管內(nèi)皮生長因子水平比較(mean ± SD, n = 36)

圖1 肝細胞癌超聲造影圖.

總之, 超聲造影能定量分析HCC抗血管生成治療后血流灌注參數(shù)變化, 有效評估HCC抗血管生成療效, 具有一定臨床應(yīng)用價值.

文章亮點

實驗背景

抗血管生成治療是原發(fā)性肝細胞癌(hepatocellular carcinoma, HCC)的重要治療方法之一, 準確的療效評估有助于指導(dǎo)臨床用藥, 而影像學(xué)以及檢驗學(xué)指標在其早期療效評估方面發(fā)揮著重要作用.

實驗動機

本研究運用超聲造影分析HCC經(jīng)肝動脈化療栓塞術(shù)(transcatheter arterial chemoembolization, TACE)聯(lián)合沙利度胺治療前后血流灌注變化, 探討超聲造影在評估HCC抗血管生成療效中的應(yīng)用價值, 以期為臨床評估療效提供無創(chuàng)性影像學(xué)方法.

實驗?zāi)繕?/p>

探討HCC經(jīng)抗血管生成治療后超聲造影血流灌注參數(shù)以及血清血管內(nèi)皮生長因子(vascular endothelial growth factor, VEGF)水平變化. 結(jié)果顯示HCC經(jīng)抗血管生成治療后超聲造影血流灌注參數(shù)以及血清VEGF水平發(fā)生明顯變化, 可為臨床早期評估療效提供有價值參考.

實驗方法

本研究采用了超聲造影以及血清VEGF水平測定來評估HCC抗血管生成療效. 超聲造影能無創(chuàng)性定量反映腫瘤組織的微循環(huán)血流灌注狀態(tài), 而血清VEGF水平能有效反映腫瘤微小血管的生成狀態(tài).

實驗結(jié)果

本篇論文的研究達到實驗?zāi)繕瞬⑷〉靡韵卵芯拷Y(jié)果:HCC經(jīng)抗血管生成治療后曲線下面積、峰值強度以及血清VEGF水平明顯下降. 說明超聲造影能有效反映病灶血流灌注狀態(tài)變化, 聯(lián)合血清VEGF水平測定能為臨床評估HCC抗血管生成療效提供有價值參考.

實驗結(jié)論

HCC經(jīng)抗血管生成治療后超聲造影血流灌注參數(shù)以及血清VEGF水平發(fā)生明顯變化, 證實了超聲造影結(jié)合血清VEGF水平監(jiān)測能有效評估HCC抗血管生成療效.超聲造影能反映腫瘤的微循環(huán)血流灌注狀態(tài), 而血清VEGF水平能反映腫瘤微小血管生成狀態(tài). 兩者結(jié)合能從不同角度有效反映HCC抗血管生成療效, 可為臨床療效評估提供一種可靠方法, 具有一定應(yīng)用價值.

展望前景

超聲造影時病灶位置靠近胃腸道或膈頂, 容易受氣體干擾而導(dǎo)致圖像質(zhì)量下降, 影響觀察結(jié)果. 未來我們將運用動態(tài)三維超聲造影結(jié)合其它監(jiān)測指標評估TACE聯(lián)合沙利度胺對HCC的療效.