沙門菌檢驗(yàn)中不同培養(yǎng)基的檢出效果研究

謝利蓉

611330四川省大邑縣人民醫(yī)院

一大群寄生于人類和動(dòng)物腸道內(nèi)生化反應(yīng)和抗原構(gòu)造類似的革蘭陰性菌為沙門桿菌的統(tǒng)稱[1]。沙門桿菌大致分為對(duì)人致病、對(duì)動(dòng)物致病和對(duì)人、動(dòng)物均致病3種類型，急性腸胃炎是沙門菌中毒最主要的癥狀之一，它可在人體胃腸道中潛伏4～48 h左右，發(fā)生急性腸胃炎后，患者會(huì)出現(xiàn)惡心、頭暈、頭痛、全身乏力、冷汗、腹瀉、嘔吐、腹疼等癥狀，嚴(yán)重時(shí)還并發(fā)寒戰(zhàn)、驚厥、抽搐和昏迷，高齡、幼兒及其他原因?qū)е碌捏w弱患者若未及時(shí)接受治療，可有死亡的風(fēng)險(xiǎn)[2]。采取何種措施有效防止沙門菌傳染仍是當(dāng)前臨床研究的重點(diǎn)問題，本次研究使用3種不同培養(yǎng)基對(duì)收治的腸胃炎患者糞便標(biāo)本進(jìn)行檢測(cè)，探討沙門菌在不同培養(yǎng)基中的檢出效果，為臨床診斷提供依據(jù)，具體報(bào)告如下。

資料與方法

2016年10月-2017年12月收治急性腸胃炎患者98例，均確診為沙門菌感染。其中男54例，年齡21～51歲，平均(32.42±3.81)歲；女44例，年齡20～50歲，平均(33.01±3.42)歲。向所有患者講解研究?jī)?nèi)容，同意參與并簽署書面知情同意書后開展此次研究。所有患者一般資料比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。

納入標(biāo)準(zhǔn)：①符合沙門菌感染所致急性腸胃炎診斷標(biāo)準(zhǔn)。②了解研究?jī)?nèi)容，同意參與并簽署書面知情同意書。③未伴有其他嚴(yán)重心腦血管疾病、傳染性疾病及惡性腫瘤疾病。④未伴有嚴(yán)重精神類疾病，可清楚訴說(shuō)自身狀態(tài)。

排除標(biāo)準(zhǔn)：①不符合沙門菌感染所致急性腸胃炎診斷標(biāo)準(zhǔn)。②患者一方拒絕參與此次研究或未在知情同意書上簽字。③并發(fā)其他嚴(yán)重心腦血管疾病、傳染性疾病及惡性腫瘤疾病。④并發(fā)嚴(yán)重精神類疾病，無(wú)法清楚表述自身狀態(tài)。

方法：首先使用肛拭子收集所有患者糞便標(biāo)本，準(zhǔn)備好研究所需的3種不同培養(yǎng)基(XLD培養(yǎng)基、SS培養(yǎng)基和HE培養(yǎng)基)，所有培養(yǎng)基均購(gòu)自本市科技生物研究中心。肛拭子置入緩沖蛋白膠水中后放置的37℃保溫箱中培養(yǎng)，6 h后將SC、TTB增菌液加入其中，進(jìn)行持續(xù)時(shí)間為1 d的增菌培養(yǎng)。1 d后通過(guò)接種環(huán)提取少量標(biāo)本于XLD培養(yǎng)基、SS培養(yǎng)基和HE培養(yǎng)基中畫線接種，后將培養(yǎng)基放置在37℃的保溫箱中繼續(xù)培養(yǎng)24 h。24 h后檢測(cè)不同培養(yǎng)基上細(xì)菌生長(zhǎng)情況并比較。

觀察指標(biāo)：為減少誤差，所有培養(yǎng)基均由同組檢驗(yàn)科醫(yī)師進(jìn)行檢測(cè)，統(tǒng)計(jì)3種培養(yǎng)基中沙門菌假陽(yáng)性率及陽(yáng)性率。

統(tǒng)計(jì)學(xué)方法：數(shù)據(jù)使用SPSS 19.0軟件處理。計(jì)數(shù)資料采用n(%)表示，采用χ2檢驗(yàn)；P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

結(jié) 果

檢測(cè)結(jié)束后發(fā)現(xiàn)3種培養(yǎng)基中均出現(xiàn)數(shù)量不同的假陽(yáng)性菌落，其中，HE培養(yǎng)基沙門菌檢測(cè)假陽(yáng)性率明顯高于其他兩種培養(yǎng)基，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)；SS培養(yǎng)基沙門菌檢測(cè)陽(yáng)性率明顯高于其他兩種培養(yǎng)基，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，見表1。

討 論

沙門菌病經(jīng)糞口途徑傳播，攝入受沙門菌污染的食物或飲料是其感染的唯一方式[3]。沙門菌在自然界中有廣泛的宿主，絕大多數(shù)的人和動(dòng)物均適合其寄居，如爬行類、鳥類、昆蟲類、哺乳類及人的胃腸道中。家養(yǎng)和野生動(dòng)物感染沙門菌的概率最高可達(dá)20%，因此所有家禽、家畜等喂養(yǎng)、屠宰、運(yùn)輸和包裝加工過(guò)程中均有可能被沙門菌污染[4]。沙門菌感染引發(fā)的疾病雖然不多，但致病性較強(qiáng)，治療難度大，給患者帶來(lái)極大痛苦的同時(shí)威脅其生命安全，因此保持警惕，及早治療是關(guān)鍵。

目前臨床最常見的沙門菌即腸道沙門菌，而腸道沙門菌又可分為兩種，一種是可以自愈型的非傷寒性沙門菌，這種多為動(dòng)物攜帶，感染后不需服藥，基本能被自身免疫系統(tǒng)殺死，毒性不強(qiáng)，所以人體感染后也無(wú)明顯癥狀表現(xiàn)。第2種沙門菌感染會(huì)引起較為明顯的傷寒癥狀，首先是頭暈、腸胃不適，隨病情發(fā)展出現(xiàn)丘疹、持續(xù)高燒癥狀，嚴(yán)重時(shí)還會(huì)引起敗血癥，若未及時(shí)使用抗生素，可能威脅患者生命安全。應(yīng)及早進(jìn)行細(xì)菌培養(yǎng)，使用針對(duì)性抗生素治療對(duì)患者意義重大。隨著近年來(lái)醫(yī)療水平的不斷發(fā)展，沙門菌分離鑒定技術(shù)也在不斷創(chuàng)新，培養(yǎng)基培養(yǎng)是當(dāng)前臨床實(shí)驗(yàn)室診斷沙門菌感染最常用的方法之一。大量實(shí)驗(yàn)證明，使用平板培養(yǎng)基培養(yǎng)是檢測(cè)沙門菌感染最簡(jiǎn)便、最快捷、最經(jīng)濟(jì)實(shí)惠的方法，且該方法檢測(cè)準(zhǔn)確率較高，大大減少了人力資源和實(shí)驗(yàn)材料的浪費(fèi)，但在臨床研究中發(fā)現(xiàn)，使用不同培養(yǎng)基最終檢出率也有一定的差異，不同菌型的細(xì)菌區(qū)分較為困難，在實(shí)際應(yīng)用中也沒有明確的標(biāo)準(zhǔn)規(guī)范，因?yàn)椴煌牟≡]有適合其生長(zhǎng)的特定培養(yǎng)基。因此臨床在對(duì)沙門菌感染患者進(jìn)行檢測(cè)時(shí)，可使用兩種或多種培養(yǎng)基分別進(jìn)行細(xì)菌培養(yǎng)，以提高陽(yáng)性檢出率，減少漏診或誤診。

姜彥芬等使用兩種沙門菌顯色培養(yǎng)基、亞硫酸鉍瓊脂培養(yǎng)基、木糖耐氨酸脫氧膽鹽瓊脂培養(yǎng)基等四種臨床常用的培養(yǎng)基進(jìn)行沙門菌培養(yǎng)檢測(cè)[5]，結(jié)果顯示2種沙門菌顯色培養(yǎng)基和XLD培養(yǎng)基沙門菌陽(yáng)性檢出率比較無(wú)明顯差異，BS檢出率相對(duì)較低。所以在實(shí)際臨床應(yīng)用中，可根據(jù)樣品種類、污染程度聯(lián)合多種分離培養(yǎng)基進(jìn)行病原菌培養(yǎng)，以增加檢測(cè)陽(yáng)性率，提高準(zhǔn)確性。殷淑權(quán)等收集腸道患者糞便標(biāo)本200份、食品從業(yè)人員糞便標(biāo)本480份、肉蛋類食品標(biāo)本100份進(jìn)行研究[6]，采用2種沙門菌培養(yǎng)基(沙門菌顯色培養(yǎng)基和木糖賴氨酸脫氧膽鹽培養(yǎng)基)進(jìn)行沙門菌培養(yǎng)，并比較最終檢出率。結(jié)果更顯示，沙門菌顯色培養(yǎng)基檢測(cè)陽(yáng)性率顯著高于傳統(tǒng)木糖賴氨酸脫氧膽鹽培養(yǎng)基檢測(cè)陽(yáng)性率。得出結(jié)論：顯色培養(yǎng)基相較于傳統(tǒng)木糖賴氨酸脫氧膽鹽培養(yǎng)基對(duì)沙門菌的檢出率更高，值得臨床推廣。王萍等將沙門菌及銅綠假單胞菌、惡臭假單胞菌、施氏假單胞菌、熒光假單胞菌、斯氏普羅威登斯菌、摩氏摩根菌摩根亞種和糞產(chǎn)堿菌亞種共7種干擾菌分別接種在4種不同培養(yǎng)基(CAS、BS、XLD、HE)中[7]，觀察菌落形態(tài)特征，進(jìn)行生化試驗(yàn)分析，比較不同培養(yǎng)基上沙門菌及干擾菌的生長(zhǎng)情況及形態(tài)特征間的差異，用以作為鑒定沙門菌的依據(jù)。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，7種干擾菌在CAS培養(yǎng)基中的生長(zhǎng)形態(tài)與沙門菌有明顯差異，仔細(xì)觀察可明顯鑒別，TTB和SC培養(yǎng)基上干擾菌與沙門菌可通過(guò)生化檢驗(yàn)進(jìn)行鑒別，最終得出結(jié)論：不同培養(yǎng)基和增菌液互補(bǔ)使用，可明顯提升沙門菌的檢出率。以上學(xué)者研究結(jié)果與本次研究結(jié)論基本相同，可證明本次研究的準(zhǔn)確性。

表1 3種不同培養(yǎng)基沙門菌培養(yǎng)結(jié)果比較[n(%)]

病因治療和及時(shí)對(duì)癥處理是沙門菌感染治療的關(guān)鍵，及早使用抗生素可有效消滅病菌或抑制其繁殖，但由于近年來(lái)抗生素的濫用，很多沙門菌已對(duì)部分抗生素產(chǎn)生了耐藥性，使用不良反應(yīng)較少，效果較佳的抗生素非常關(guān)鍵。需要注意的是，早期治療時(shí)，需控制抗生素的使用劑量，尤其是部分直接殺滅病菌的抗生素，短期內(nèi)大量細(xì)菌死亡反而可能導(dǎo)致病情惡化。此外，日常預(yù)防也非常重要，因攝入污染食物是沙門菌感染的唯一途徑，所以在日常生活中要格外注意飲食衛(wèi)生，不合格食物、飲料等盡量不要食用，死亡動(dòng)物的血、肉、內(nèi)臟等不要食用，密切注意病從口入。

綜上所述，使用SS培養(yǎng)基進(jìn)行沙門菌培養(yǎng)檢測(cè)假陽(yáng)性較少，檢測(cè)準(zhǔn)確性較高，臨床操作時(shí)可根據(jù)實(shí)際情況選擇培養(yǎng)基類型。