郭 健
(白城中醫(yī)院,吉林 白城 137000)
巴戟天屬于“四大南藥”之一,耐斯糖屬于寡糖。巴戟天耐斯糖能夠起到抗抑郁的作用,在醫(yī)學(xué)上廣為應(yīng)用[1]。本次研究分別采用潤(rùn)法、泡后蒸法、清蒸法、煮法、泡法以及鹽蒸法對(duì)巴戟天進(jìn)行處理,從而得出不同炮制去心法對(duì)巴戟天耐斯糖含量的影響。
1.1 試藥與儀器:為順利完成本次研究,需要在研究之前提前將所需儀器準(zhǔn)備好,本次研究需要用到純凈水、巴戟天、1200高效液相色譜儀、耐斯糖對(duì)照品、流動(dòng)相、衛(wèi)星植物粉碎機(jī)、電子天平、SEDERESEDEX85 ELSD檢測(cè)器[2]。
1.2 方法:將200 g巴戟天清洗干凈,平均分為6份,設(shè)為A組、B組、C組、D組、E組、F組,A組采用清蒸法,將巴戟天放至置蒸器內(nèi)蒸至濕潤(rùn)狀態(tài)。B組采用潤(rùn)法,用純凈水慢慢將巴戟天潤(rùn)透。C組采用泡后蒸法,先將對(duì)巴戟天浸泡一段時(shí)間,泡至4成透就可取出,再將巴戟天放到置蒸器內(nèi)蒸透。D組采用泡法,用熱水將對(duì)巴戟天泡透。E組采用鹽蒸法,用鹽水將處理好的巴戟天攪拌均勻,然后將其密封悶潤(rùn),等到鹽水被吸收完后,將巴戟天和食用鹽放至置蒸器內(nèi),巴戟天、水、食用鹽的比例為50∶5∶1。F組采用煮法,將巴戟天內(nèi)加入甘草汁攪拌均勻,然后放入煮制容器內(nèi),加之煎湯,用小火煮至容器內(nèi)的湯被吸收完即可。每100 kg巴戟天需要放入6 kg甘草和50 kg煎湯[3]。
制好巴戟天就需要制備相關(guān)溶液,首先設(shè)定適合的色譜條件,色譜柱為Welch AQ_C18,以甲醇和水為3∶97的比例配置流動(dòng)相,進(jìn)樣量為10 μL,色譜柱和漂移管的溫度分為25 ℃和40 ℃。然后需要配置供試品的溶液,稱取0.5 g上述各組的樣品,在稱取時(shí)要確保精準(zhǔn),切不可存在偏差。稱取后放入具塞錐形瓶中,加入提前配置好的等量流動(dòng)相,隔水加熱30 min,放至常溫,稱量每組前后的質(zhì)量變化,記錄下來(lái),用流動(dòng)相將缺失的質(zhì)量補(bǔ)上,搖晃均勻后靜置,最后用上清液過(guò)濾,取續(xù)濾液。在制備供試品時(shí)只需要取25 mL耐斯糖對(duì)照品于容量瓶中,添加流動(dòng)相將溶液溶解成0.2148 mg/mL的溶液[4]。制作好需要的溶液后則需要運(yùn)用方法學(xué)考察,按照原先設(shè)定的色譜條件,取10 μL的對(duì)照品溶液,進(jìn)行5次峰面積檢測(cè),得到精密度狀況RSD為1.0%,證明精密度較好。在進(jìn)行重復(fù)性檢測(cè)時(shí),選取5份0.5 g的采用潤(rùn)法進(jìn)行處理的樣品粉末,測(cè)定峰面積,RSD為0.9%,證明重復(fù)性較好。在進(jìn)行穩(wěn)定性檢測(cè)時(shí),將選取的潤(rùn)發(fā)樣品溶液放置在室溫內(nèi),在每隔5 h測(cè)峰面積,RSD為1.5%,證明穩(wěn)定性較好。在進(jìn)行回收率檢測(cè)時(shí),選取5份0.1 g的潤(rùn)法樣品粉末,加入等量的耐斯糖對(duì)照品,按照制備供試品溶液的方法進(jìn)行處理,測(cè)定峰面積為0.5%,平均回收率為100.02%。分別取3份0.5 g采用潤(rùn)法、泡后蒸法、清蒸法、煮法、泡法以及鹽蒸法對(duì)巴戟天進(jìn)行處理的樣品,按照制備樣品溶液的辦法進(jìn)行處理,并測(cè)定其各自的峰面積[5]。
1.3 評(píng)價(jià)指標(biāo):比較經(jīng)過(guò)潤(rùn)法、泡后蒸法、清蒸法、煮法、泡法以及鹽蒸法對(duì)處理后的巴戟天含糖量,得出不同炮制去心法對(duì)巴戟天耐斯糖含量的影響。
1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法:使用SPSS 21.0軟件對(duì)研究得到的數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)處理,得到的統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)用來(lái)進(jìn)行表示,用t來(lái)對(duì)計(jì)量資料檢驗(yàn),計(jì)數(shù)資料的檢驗(yàn)則通過(guò)χ2,率(%)為計(jì)數(shù)資料,得到的差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
鹽蒸法的樣品含量為(4.365±0.056),峰面積RSD為1.2%,清蒸法的樣品含量為(4.286±0.018),峰面積RSD為0.4%,泡法的樣品含量為(3.184±0.017),峰面積RSD為0.5%,泡后蒸餾法的樣品含量為(4.201±0.036),峰面積RSD為0.8%,煮法的樣品含量為(4.784±0.052),峰面積RSD為1.2%,潤(rùn)法的樣品含量為(5.234±0.052),峰面積RSD為1.1%,經(jīng)過(guò)方法學(xué)檢測(cè)后可以得出精密度、重復(fù)性、穩(wěn)定性都較好。差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見(jiàn)表1。
耐斯糖屬于巴戟天寡糖,是易溶于水的白色結(jié)晶體,因此,在進(jìn)行炮制去心時(shí)采用水泡的方法往往使巴戟天的含糖量減少過(guò)多,最好采用潤(rùn)的方式對(duì)巴戟天進(jìn)行處理。泡法和泡后蒸法就是將巴戟天直接泡在水中,在水中浸泡的過(guò)程中許多的耐斯糖就會(huì)溶解,因此采用這兩種方法處理后的巴戟天含糖量偏小。采用清蒸法和鹽蒸法這種蒸的方法幾乎不會(huì)造成耐斯糖的溶解,但耐斯糖會(huì)因高溫蒸汽而分解,含糖量也偏小。潤(rùn)法去心過(guò)程中,能夠使細(xì)胞結(jié)構(gòu)疏松,且巴戟天會(huì)將水分吸收,雖然耐斯糖會(huì)溶解,但并不會(huì)流失。因此,采用潤(rùn)法去心進(jìn)行處理巴戟天耐斯糖含量消耗丟失的最少。
表1 巴戟天耐斯糖的含量