順鉑配置過程中的殘留量分析*

許微微，彭竹竹，劉剛

（中南大學(xué)湘雅醫(yī)院 1.藥學(xué)部靜脈配置中心；2.肝膽胰外科，湖南 長(zhǎng)沙 410008）

靜脈藥物配置中心配置項(xiàng)目主要包括腸外營(yíng)養(yǎng)液、抗腫瘤藥物及抗生素等靜脈用藥，而臨床上抗腫瘤藥物多為細(xì)胞毒性藥物，在對(duì)抗腫瘤細(xì)胞的同時(shí)，對(duì)正常的人體組織細(xì)胞也具有一定的殺傷作用[1-2]。靜脈藥物配置中心的配置人員必須經(jīng)過正規(guī)的培訓(xùn)才能上崗，并且嚴(yán)守操作規(guī)程，盡量防止因操作不當(dāng)導(dǎo)致意外發(fā)生。本研究以配置順鉑為例，了解化療藥物配置過程中的藥物殘留情況。

1 資料與方法

1.1 儀器與試劑

LC-10A高效液相色譜儀（日本島津公司），包括二極管陣列式檢測(cè)器、CLASS-VP色譜軟件、旋渦混合器、臺(tái)式離心機(jī)及ATX324分析天平；C-R7Ae Plus色譜數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)（日本島津公司）；避光袋（銀膠涂層尼龍材料，北京富爾特醫(yī)療科技有限公司）；BSC-1600IIA2型生物安全柜（百級(jí)凈化級(jí)別，蘇州安泰空氣技術(shù)有限公司），配置間為擁有萬(wàn)級(jí)凈化能力的操作間。配置化療藥物的人員要求有3年以上的相關(guān)經(jīng)驗(yàn)且責(zé)任心強(qiáng)，經(jīng)過處理突發(fā)事件能力的培訓(xùn)，在配置過程中使用雙層手套和雙層口罩。醫(yī)用外科口罩（黃岡市穩(wěn)健醫(yī)療用品有限公司）。注射于順鉑凍干粉針（8M0514B02，10 mg，山東齊魯制藥有限公司），乙腈為色譜純，水為純化水（自制）。250 ml 0.9%氯化鈉注射液（A19032003-2，湖南科倫制藥有限公司）。

1.2 方法

1.2.1 色譜條件色譜柱：Brava NH2柱（4.6 mm× 250 mm，5μm）；檢測(cè)波長(zhǎng)：210 nm；流動(dòng)相：乙腈-水（85∶15）；流速：1.0 ml/min；進(jìn)樣量：10μl；柱溫：25℃。按《中國(guó)藥典》附錄進(jìn)行系統(tǒng)適用性實(shí)驗(yàn)[3]。

1.2.2 樣品制備精密稱取順鉑對(duì)照品適量，置于100 ml棕色容量瓶中，加二甲基甲酰胺（dimethyl formamide, DMF）溶解并稀釋至刻度，搖勻并制成質(zhì)量濃度為1 mg/ml的溶液，搖勻作為儲(chǔ)備液。再精密量取1 ml，置于100 ml容量瓶中，制成質(zhì)量濃度為10μg/ml的儲(chǔ)備液溶液。臨用前量取1 ml樣品加入100 ml棕色容量瓶，制備質(zhì)量濃度為0.1μg/ml的溶液。按照設(shè)定的色譜條件進(jìn)樣10μl，記錄譜圖做后續(xù)分析，在保留時(shí)間為4.1 min處有明顯譜峰，峰形尖銳無(wú)雜峰干擾（見圖1）。

圖1 順鉑樣品色譜圖

2 結(jié)果

2.1 線性關(guān)系考察

精密量取順鉑0.005 g，置于50 ml容量瓶中，再加入0.9%氯化鈉溶液超聲溶解，并且定容，充分搖勻。再取0.9%氯化鈉溶液將其分別稀釋成質(zhì)量濃度為1、5、10、50、100及200μg/ml的順鉑標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液，分別過微孔濾膜后避光保存。立即取10μl注入液相色譜儀，記錄色譜圖。按照1.2.2色譜條件進(jìn)行測(cè)定，重復(fù)2次，記錄各個(gè)樣品測(cè)定結(jié)果及色譜圖。以順鉑的質(zhì)量濃度（A）為橫坐標(biāo)，以其峰面積（Y）為縱坐標(biāo)進(jìn)行線性回歸分析，得到回歸方程Y=1423.5A+3528.8（r =0.9999），說(shuō)明在1～200μg/ml 范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。

2.2 重復(fù)性考察

取同一批次順鉑，按照1.2.2方法配制并制成質(zhì)量濃度為1 mg/ml的標(biāo)準(zhǔn)溶液，平行6份，按1.2.1色譜條件測(cè)定，每個(gè)樣品重復(fù)測(cè)定2次并以峰面積計(jì)算，結(jié)果顯示6個(gè)樣品的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（relative standard deviation, RSD）為0.12%，表明該方法重復(fù)性良好。

2.3 外層手套上順鉑殘留量

分別收集靜脈藥物配置中心同一人員配置不同數(shù)量的順鉑注射液后的手套并且密封保存，分別設(shè)為10、20、40、60、80及120支，外層手套殘留量分別為83.4、235.6、662.7、1109.8、1854.6及2987.5μg/雙。各組外層手套加入0.2 mol/L、pH 8.00醋酸-醋酸鈉緩沖溶液，超聲15 min，溶液加入旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀濃縮至4 ml左右。見圖2。

2.4 內(nèi)層手套對(duì)比實(shí)驗(yàn)

對(duì)各組內(nèi)層手套采用前述方法測(cè)定順鉑殘留藥量，結(jié)果顯示各組內(nèi)層手套色譜圖像均未檢測(cè)到順鉑吸收峰，即表明內(nèi)層手術(shù)上順鉑殘留藥量未達(dá)檢測(cè)下限。

圖2 配置120支順鉑注射液外層手套色譜圖

2.5 口罩上順鉑殘留量

分別收集靜脈藥物配置中心同一人員配置不同數(shù)量順鉑注射液后的口罩并且密封保存，分別設(shè)為20、40、80及120支，考慮到內(nèi)層口罩順鉑殘留量較少，本研究?jī)H考察配置不同數(shù)量順鉑注射液化療藥物對(duì)外層口罩殘留藥量的關(guān)系。將配置了不同數(shù)量順鉑注射液的外層口罩置于燒杯，剪碎，超聲后旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)，測(cè)定順鉑殘留量的實(shí)驗(yàn)和前述方法相同，僅在配置 120支順鉑注射液時(shí)檢測(cè)到特征性吸收峰，其口罩殘留量為1.2 587μg/雙，說(shuō)明外層口罩有微量順鉑殘余。

2.6 空氣中順鉑殘留量

將FQC-1000空氣采樣器放置于生物安全柜內(nèi)，測(cè)定流速為1 L/min，采用蒸餾水為吸收液，取10 ml的0.2 mol/L、pH 8.00醋酸-醋酸鈉緩沖溶液至氣泡吸收管。然后以1 L/min的流速采集配置120支順鉑注射液過程中的空氣，時(shí)長(zhǎng)為60 min。并且設(shè)定5個(gè)采樣點(diǎn)循環(huán)采樣以保證測(cè)試結(jié)果的可靠性和有效性。采集后的空氣樣品立即用前述方法測(cè)定順鉑的殘留量。結(jié)果表明順鉑殘留量均未達(dá)到檢測(cè)下限。

3 討論

靜脈藥物配置中心使臨床藥師的職業(yè)潛能得到有效激發(fā)，也使醫(yī)療廢棄物得到有效的集中處理，避免污染周邊環(huán)境，而且提供了生物安全柜等無(wú)菌層流設(shè)備，在藥物配制時(shí)，減少了藥物微粒、粉塵的吸入，提高了醫(yī)護(hù)人員的職業(yè)防護(hù)技能[3]。靜脈藥物配置中心與生物安全柜的操作使用有嚴(yán)格的規(guī)章制度與操作規(guī)范，配置前30 min提前啟動(dòng)柜內(nèi)循環(huán)風(fēng)機(jī)并打開紫外燈。配置人員需先按照七步洗手法清潔雙手，戴雙層手套，雙層口罩和帽子，使用化學(xué)防護(hù)目鏡、穿防護(hù)服及鞋套入內(nèi)。

有研究報(bào)道C18柱的分離效果并不理想[4]。筆者通過對(duì)文獻(xiàn)的進(jìn)一步挖掘決定采用氨基柱[5]。順鉑微溶于水，易溶于DMF，配置時(shí)常留下黃色沉渣。因此，要求進(jìn)倉(cāng)的護(hù)理人員操作盡量熟練。在溶解化療藥物時(shí)，溶媒應(yīng)緩慢注入防止粉末、藥液溢出。若操作中發(fā)現(xiàn)有化療藥物濺出，應(yīng)該及時(shí)更換外層手套和口罩[6]。 使用生物安全柜能有效降低化療藥物配置過程對(duì)人體的危害。

本研究結(jié)果顯示，隨著配置順鉑注射液數(shù)量的增加，外層手套的順鉑殘留量也逐漸增多。外層手套上的殘留量與配置過程中注射液的偶然性濺出有關(guān)。外層口罩的順鉑注射液殘留量較低，在配置數(shù)量為20、40及80支時(shí)均檢測(cè)到明顯的順鉑注射液殘留，當(dāng)配置數(shù)量為120支時(shí)，檢測(cè)到微量的順鉑注射液殘留，這主要與配置過程中的偶然噴濺有關(guān)?？赡苁且?yàn)榕渲萌藛T長(zhǎng)期處于密閉環(huán)境里重復(fù)勞動(dòng)引起的注意力下降。通過對(duì)操作人員加強(qiáng)崗前培訓(xùn)、以老帶新，以及設(shè)置合理的工作時(shí)間與輪崗制度，盡量避免單人長(zhǎng)時(shí)間重復(fù)勞動(dòng)，能減少化療藥物配置帶來(lái)的環(huán)境污染。

本文通過建立高效液相色譜法檢測(cè)順鉑注射液配置過程藥物殘留量，方法靈敏度高，重復(fù)性好，結(jié)果可靠，操作簡(jiǎn)單易行。不僅可以用來(lái)檢測(cè)順鉑配置過程中藥物殘留量，而且可以用于其他化療藥物殘留的檢測(cè)及空間污染分析，并針對(duì)不同的污染程度制定恰當(dāng)?shù)奶幚硪?guī)范，以此全面提高靜脈配置中心醫(yī)務(wù)人員的安全防護(hù)水平。