利用高效液相色譜法區(qū)分纖維筆與簽名章形成字跡的探究

宋朝陽

（安徽公安職業(yè)學院 安徽合肥 230031）

目前，纖維筆越來越多的被用于簽署文件、書寫信函、修改文字材料等[1]。用簽名章偽造形成簽名筆跡屬于新興的簽名筆跡偽造方法，由于鑒定人對這種新興的簽名筆跡造假手段和偽造方法認識不清，缺乏檢驗經驗和檢驗技能，在筆跡檢驗實際案例中，出現(xiàn)了簽名章蓋印簽名字跡與纖維筆書寫形成的簽名字跡混淆不清的情況，這是造成鑒定意見出現(xiàn)分歧的一個原因。目前為止，還沒有針對簽名章與纖維筆形成字跡的區(qū)分方法進行的研究，為了解決鑒定意見分歧，筆跡檢驗鑒定實踐急需在這一方面進行研究，以提供一個可供大家參考的檢驗技術指導。

高效液相色譜法的特點是：分離效能高、靈敏度高和樣品用量少[2]，因此在區(qū)分油墨種類方面倍受關注。本實驗研究了高效液相色譜法區(qū)分纖維筆油墨印跡和光敏簽名章油墨印跡、纖維筆油墨印跡和原子簽名章油墨印跡的實驗方法和分析條件，并在此條件下分析了高效液相色譜法區(qū)分纖維筆油墨印跡和光敏簽名章油墨印跡、纖維筆油墨印跡和原子簽名章油墨印跡的可行性。

一、實驗部分

（一）實驗樣品

10種不同牌號、生產廠家或生產批次的纖維筆（如表1所示）；7枚光敏簽名章，7種不同牌號、生產廠家或生產批次的光敏印章油（如表2所示）；2枚原子簽名章，2種不同牌號、生產廠家或生產批次的原子印章油（如表3所示）。

表1 纖維筆樣品表

表2 光敏印油樣品表

表3 原子印油樣品表

（二）實驗儀器

日立L-7200液相色譜儀，L-7420紫外檢測器，L-7300柱溫箱，D-7000型高效液相色譜管理系統(tǒng)，真空泵。

（三）實驗試劑

甲醇；N，N-二甲基甲酰胺；乙酸。

（四）實驗條件

色譜柱：Nova-Pak?C18 60A 4um 3.9×150（mm）

柱溫：35℃

檢測波長：580nm

流動相：甲醇：10%甲醇的水溶液（v/v）（80：20）

甲醇：水：冰乙酸：堿（70：30：1.5/100：0.5/100）

流速：0.9m l/min

（五）實驗過程

在避光的條件下，在有纖維筆油墨、光敏油墨和原子油墨的復印紙上制備相應的油墨印跡樣品。用潔凈的剪刀剪取包含油墨色痕的印跡適量，小心剪取后放入容器中，清洗剪刀，擦拭干凈后制備下一個油墨印跡樣品，重復上述步驟，直至制備完成所有的油墨印跡樣品。滴入適量的濃度為100%的甲醇，震蕩均勻后靜置提取30分鐘，用取樣針取10ul上清液待高效液相色譜分析。

二、結果與討論

（一）條件優(yōu)化實驗

1.提取劑的選擇。提取劑的選擇至關重要，不僅跟提取樣品的效果有關，跟流動相的選擇也密不可分[3]。在提取劑的選擇方面，試驗了N，N-二甲基甲酰胺、甲醇、乙酸的提取效果。N，N-二甲基甲酰胺的提取效果最好，甲醇的提取效果次之，乙酸的提取效果最差。根據實驗室的條件，選擇了甲醇做流動相，因而選擇了甲醇作為提取劑。用甲醇做提取劑，30min后提取劑顏色幾乎全部發(fā)生變化。

2.溫度的選擇。試驗了20-35℃柱溫條件，發(fā)現(xiàn)溫度的變化對結果基本沒有影響，最終選擇了常溫35℃，實驗過程用恒溫柱溫箱保持此溫度，以保證實驗結果的穩(wěn)定性。

3.檢測波長的選擇。纖維筆油墨色痕提取液均為有色溶液，故選擇在可見光區(qū)進行分析。纖維筆油墨色痕提取液有藍色、淡紫色、淡紅色、灰色等幾種顏色，通過在240nm紫外光波長和580nm可見光波長條件下的測定分析，確定檢測波長為580nm可見光波長。

4.流動相的選擇。在色譜分離中選擇理想的流動相，可提供所需的選擇性、柱效能，并在最短時間內完成分析。流動相的選擇與待測物質的結構和性質有關。HPLC對流動相的基本要求有：高純度且不與固定相反應；對樣品有適當溶解度；滿足檢測器要求，當使用紫外檢測器時，流動相不能有紫外吸收；粘度小。本實驗選擇了5種流動相體系，即：Ⅰ：甲醇-10%甲醇的水溶液（90：10）；Ⅱ：甲醇-10%甲醇的水溶液（80：20）；Ⅲ：甲醇-10%甲醇的水溶液（70：30）；Ⅳ：甲醇-水-酸（85：15：250ml/200m l）；Ⅴ：甲醇-水-冰乙酸-堿（70：30：1.5/100：0.5/100）。分別取纖維筆油墨字跡色痕樣品、光敏簽名章油墨字跡色痕樣品和原子簽名章油墨字跡色痕樣品的提取液，在上述5種流動相條件下進樣、分析，結果發(fā)現(xiàn)，甲醇-水-冰乙酸-堿（70：30：1.5/100：0.5/100）體系、甲醇-10%甲醇的水溶液（80：20）體系和甲醇-水-酸（85：15：250m l/200m l）體系各對一部分樣品分離度較好且分析時間短。因而，確定出最佳流動相體系為：甲醇-水-冰乙酸-堿（70：30：1.5/100：0.5/100）、甲醇-10%甲醇的水溶液（80：20）和甲醇-水-酸（85：15：250m l/200ml）體系。

5.提取劑的影響。在每一個流動相體系下，對油墨印跡樣品進行高效液相色譜分析前，先對甲醇提取液進行高效液相色譜分析。實驗結果表明，甲醇提取液對纖維筆油墨、光敏油墨和原子油墨的色譜峰基本不產生干擾，如圖1、圖2、圖3所示。

圖1 甲醇提取劑在甲醇-10%甲醇的水溶液（80：20）體系下的高效液相色譜圖

圖2 甲醇提取劑在甲醇-水-冰乙酸-堿（70：30：1.5/100：0.5/100）體系下的高效液相色譜圖

圖3 甲醇提取劑在甲醇-水-酸（85：15：250m l/200m l）體系下的高效液相色譜圖

（二）實驗結果

由于不同的樣品所含溶劑、著色劑、表面活性劑和其它添加劑等成分不同，因而對提取劑的反應也不同。部分樣品經甲醇提取后上清液顏色不同。纖維筆油墨印跡經甲醇提取后上清液呈現(xiàn)藍色、淡紫色、淡紅色、灰色等顏色，光敏簽名章油墨印跡經甲醇提取后上清液呈現(xiàn)藍色、灰色等顏色，原子簽名章油墨印跡經甲醇提取后上清液顏色不發(fā)生變化。因而從上清液顏色變化上能對實驗用部分纖維筆和部分光敏簽名章、纖維筆和原子簽名章進行初步區(qū)分。

采用上述HPLC分析條件，得到纖維筆油墨印跡、光敏簽名章油墨印跡和原子簽名章油墨印跡的色譜圖。通過色譜圖分析可知，纖維筆油墨印跡、光敏簽名章油墨印跡和原子簽名章油墨印跡樣品之間的主要色譜峰個數(shù)、保留時間均不一樣。纖維筆油墨印跡樣品之間、光敏簽名章油墨印跡樣品之間和原子簽名章油墨印跡樣品之間的主要色譜峰個數(shù)、保留時間也有差別。對纖維筆油墨印跡和光敏簽名章油墨印跡、纖維筆油墨印跡和原子簽名章油墨印跡進行多譜圖分析，根據油墨印跡的主要色譜峰個數(shù)和保留時間特征，可以對纖維筆油墨印跡和光敏簽名章油墨印跡、纖維筆油墨印跡和原子簽名章油墨印跡進行種類區(qū)分。

8號纖維筆油墨印跡、9號纖維筆油墨印跡和1號光敏簽名章油墨印跡、2號光敏簽名章油墨印跡、4號光敏簽名章油墨印跡、5號光敏簽名章油墨印跡、6號光敏簽名章油墨印跡和7號光敏簽名章油墨印跡在HPLC流動相為甲醇：10%甲醇的水溶液（v/v）（80：20）的條件下能進行種類區(qū)分，如圖4所示。

10號纖維筆油墨印跡和3號光敏簽名章油墨印跡在HPLC流動相為甲醇：水：冰乙酸：堿（70：30：1.5/100：0.5/100）的條件下能進行種類區(qū)分，如圖5所示。

1號至10號纖維筆油墨印跡和1號原子簽名章油墨印跡、2號原子簽名章油墨印跡能在HPLC流動相為甲醇-水-酸（85：15：250ml/200m l）的條件下能進行種類區(qū)分，如圖6所示。

圖4 纖維筆油墨印跡和光敏簽名章油墨印跡在甲醇-10%甲醇的水溶液（80：20）體系下的高效液相色譜圖

圖5 纖維筆油墨印跡和光敏簽名章油墨印跡在甲醇-水-冰乙酸-堿（70：30：1.5/100：0.5/100）體系下的高效液相色譜圖

圖6 纖維筆油墨印跡和原子簽名章油墨印跡在甲醇-水-酸（85：15：250m l/200m l）體系下的高效液相色譜圖

三、結論

（一）高效液相色譜法為纖維筆與簽名章形成字跡的區(qū)分提供了一種有效的檢驗方法。

（二）從上清液顏色變化上能對部分纖維筆和部分光敏簽名章、部分纖維筆和部分原子簽名章進行初步區(qū)分。

（三）根據色譜圖中的主要特征峰和保留時間，可以對纖維筆油墨印跡和光敏簽名章油墨印跡、纖維筆油墨印跡和原子簽名章油墨印跡進行種類區(qū)分。