血清分泌型卷曲相關(guān)蛋白4與糖尿病腎病的關(guān)系分析

廖歡 羅敏虹 張偉勇 楊美蘭 程佳

DN作為DM特異性微血管并發(fā)癥之一， 現(xiàn)已成為終末期腎臟病第二位原因。DN病因尚不完全清楚， 且其發(fā)病機(jī)制復(fù)雜。相關(guān)研究表明［1］， 在慢性炎癥及胰島素抵抗(IR)共同作用下加速了DM患者微血管病變發(fā)展。胰島β細(xì)胞功能紊亂在糖尿病早期形成過程中起到了重要作用， SFRP4作為Wnt信號通路調(diào)節(jié)因子， 在胰島β細(xì)胞功能受損中起到了重要作用 ， 推測 SFRP4 同樣參與了 DN 形成［2，3］。目前 ，臨床鮮少有關(guān)于SFRP4與DN相關(guān)性研究， 為此， 本研究對本院104例DM患者進(jìn)行觀察分析， 報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇本院2016年6月～2018年4月收治的DM患者104例作為研究對象， 根據(jù)是否合并DN分為單純DM組(63例)和DN組(41例)。單純DM組中， 男37例，女26例；年齡42～73歲， 平均年齡(57.53±5.18)歲；DM病程2～8 年 ， 平均 DM 病程 (5.00±1.00)年。DN 組中 ， 男 26 例 ， 女15例；年齡41～75歲， 平均年齡 (58.14±5.72)歲 ；DN病程2～11年， 平均DM病程(6.17±1.61)年。單純DM組和DN組患者一般資料對比差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)， 具有可比性。根據(jù)DN患者血清GA水平分為正常白蛋白尿組(GA＜3 mg， 18例，GA1 組 )、微量白蛋白尿組 (GA：30～300 mg， 14 例 ， GA2 組 )、大量白蛋白尿組(GA≥300 mg， 9例， GA3組)。

1.2 納入及排除標(biāo)準(zhǔn) 納入標(biāo)準(zhǔn)：初次診斷為DM和DN患者；入組前未接受藥物治療及飲食、運動干預(yù)；入組前3個月內(nèi)未服用過類固醇類藥物；近2周未服用過血管緊張素轉(zhuǎn)化酶抑制劑、胰島素增敏劑；入組前1個月無急性、慢性感染疾病史；心、肝功能正常。排除標(biāo)準(zhǔn)：既往腫瘤病史；伴有心肺系統(tǒng)疾病或自身免疫性疾??；精神異常者。

1.3 方法 所有患者檢測前戒煙、戒酒7 d， 禁體力勞動， 檢測前3 d碳水化合物攝入量≥250 g/d， 保持飲食和體重相對穩(wěn)定。所有患者隔夜禁食8 h， 次日清晨采集空腹肘靜脈血5 ml，室溫內(nèi)靜置2 h后， 按1000×g轉(zhuǎn)速離心15 min， 分離血清儲存在-80℃冰箱內(nèi)待檢。采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)測定SFRP4水平， 試劑盒購自武漢中美科技有限公司， 批間差：CV＜12%；批內(nèi)差：CV＜10%；嚴(yán)格按照試劑盒操作步驟執(zhí)行。

1.4 觀察指標(biāo) 分別檢測單純DM組和DN組SFRP4水平，并作組間比較。不同GA水平患者的SFRP4水平對比， 經(jīng)Pearson相關(guān)性分析分析SFRP4水平與DN的關(guān)系。

1.5 統(tǒng)計學(xué)方法 采用SPSS23.0統(tǒng)計學(xué)軟件對數(shù)據(jù)進(jìn)行處理。計量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(±s)表示， 采用t檢驗；計數(shù)資料以率(%)表示， 采用χ2檢驗；相關(guān)性分析采用Pearson分析。P＜0.05表示差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 單純DM組和DN組患者的SFRP4水平對比 單純DM 組 SFRP4水平為 (191.43±56.43)ng/ml， DN 組 SFRP4水平為(314.27±67.47)ng/ml；DN組SFRP4水平顯著高于單純DM組， 差異具有統(tǒng)計學(xué)意義 (P＜0.05)。

2.2 不同GA水平患者的SFRP4水平對比 隨著GA水平升高， SFRP4水平也隨之升高， GA1組、GA2組、GA3組SFRP4水平兩兩對比差異均具有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。見表1。

表1 不同GA水平患者的SFRP4水平對比( ±s)

表1 不同GA水平患者的SFRP4水平對比( ±s)

注：與GA1組對比, aP＜0.05, 與GA2組對比, bP＜0.05

組別 例數(shù) SFRP4水平(ng/ml)GA1組 18 264.15±38.97 GA2組 14 301.46±30.07a GA3組 9 329.76±33.71ab

2.3 Pearson相關(guān)性分析 Pearson相關(guān)性分析結(jié)果顯示，SFRP4水平與DN患者病情嚴(yán)重程度呈正相關(guān)(r=0.785，P＜0.05)。

3 討論

DN是DM嚴(yán)重并發(fā)癥， 該并發(fā)癥可造成患者腎功能持續(xù)惡化， 盡早診斷， 判斷其嚴(yán)重程度對于指導(dǎo)臨床治療方案及優(yōu)化治療結(jié)局具有重要意義。

SFRP4是分泌型卷曲相關(guān)蛋白家族(SFRPs)中成員，SFRPs由獨立N端及C端組成， N端由富含半胱氨酸片段組成， 形成一個保守區(qū)域(CRD)， CRD在結(jié)構(gòu)上與Wnt特異性Fz受體類似， 能夠與Wnt配合或Frz受體競爭性結(jié)合， 同時提供軸突靶向信息 ， 最終阻斷 Wnt信號通路［4，5］。C 端則是類神經(jīng)生長因子區(qū)域， 其作用是誘發(fā)細(xì)胞凋亡。SFRP4為Wnt信號通路的抑制因子， 在細(xì)胞遷移、分化、增殖、血管形成、腫瘤發(fā)生、維持無機(jī)磷酸鹽在體內(nèi)平衡中具有重要作用。近年來， 相關(guān)文獻(xiàn)提出［6］， SFRP4與糖尿病發(fā)生及胰島素分泌有關(guān)。劉芳等［7］研究指出， SFRP4通過作用于Wnt通路抑制胰島β細(xì)胞鈣通道表達(dá)， 從而減少Ca2+內(nèi)流， 并抑制胰島素胞吐， 影響胰島素分泌， 不僅如此， 該研究還表明，SFRP4水平與糖尿病患者空腹血糖及糖化血紅蛋白水平呈正相關(guān)。但SFRP4水平是否與DN有關(guān)尚不明確。本研究結(jié)果提示， 單純DM組患者SFRP4水平低于DN組(P＜0.05)， 提示SFRP4與DN同樣存在關(guān)聯(lián)。

GA是反應(yīng)早期腎病及腎損傷情況的指標(biāo)。吳冀川等［8］研究表明， GA在DN發(fā)病中起到了重要作用， 且GA水平與DN嚴(yán)重程度呈正相關(guān)。本研究中， 根據(jù)GA水平不同分為不同亞組， 結(jié)果提示， GA3組和GA2組SFRP4水平顯著高于GA1組， GA3組SFRP4水平明顯高于GA2組， 差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)， 提示隨著GA水平升高， SFRP4水平亦隨之上升。提示SFRP4水平與DN病情嚴(yán)重程度密切相關(guān)，Pearson相關(guān)性分析結(jié)果提示， SFRP4水平與DN病情嚴(yán)重程度呈正相關(guān)性。原因可能是SFRP4通過Wnt信號通路影響第一時相胰島素分泌， 造成DM患者胰島β細(xì)胞功能受損，加重DM病情， 參與DN發(fā)生和發(fā)展。

綜上所述， SFRP4參與了DN發(fā)展， 同時其水平與DN病情嚴(yán)重程度呈正相關(guān)性。