天門市活禽調(diào)運(yùn)禽流感抗體監(jiān)測與分析

陳文濤　陳如意　盧文兵　何艷峰　呼鳳麗

摘要：為監(jiān)測天門市活禽調(diào)運(yùn)禽流感免疫情況和病毒的分布狀況，對該市轄區(qū)2018年8月至12月調(diào)運(yùn)送檢的禽類養(yǎng)殖場樣品，采用血凝抑制試驗檢測禽流感H7亞型、普通PCR技術(shù)檢測禽流感通用型及H5、H7亞型，并進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析。結(jié)果共檢測1 830份血清和對應(yīng)的禽拭子，樣品來源于61個養(yǎng)殖場， 禽流感H7亞型免疫陽性率按禽種類分類分別是種鵝100%、蛋雞90.52%、蛋鴨33.00%;禽流感通用型及H5、H7亞型的病毒核酸陽性率分別為0.18%、0.00%、0.00%。表明該市活禽調(diào)運(yùn)中，水禽禽流感H7N9的免疫抗體群體合格率低，有禽流感通用型病毒存在。加強(qiáng)水禽調(diào)運(yùn)前免疫、運(yùn)輸車輛消毒及宣教工作是預(yù)防和控制H7N9禽流感在流通環(huán)節(jié)發(fā)生的有效手段。該結(jié)果為及時發(fā)現(xiàn)疫情隱患和防控薄弱環(huán)節(jié)提供了指導(dǎo)依據(jù)。

關(guān)鍵詞：禽流感;調(diào)運(yùn);抗體陽性率;防控;天門市

中圖分類號：S858.3? ? ? ? 文獻(xiàn)標(biāo)識碼：A? ? ? ? 文章編號：1007-273X（2019）06-0005-02

隨著社會的高速發(fā)展，人們的生活水平有了很大的提高，對膳食的要求也越來越高，這在很大程度上促進(jìn)了活禽的調(diào)入和調(diào)出。禽流感是禽流行性感冒的簡稱，屬于RNA病毒的正黏病毒科，依據(jù)其外膜血凝素（H）和神經(jīng)氨酸酶（N）蛋白抗原性的不同，H又可分為16個亞型（H1-H16）、N分9個亞型（N1-N9），是引起禽業(yè)重大經(jīng)濟(jì)損失的主要動物疫病之一，高度重視其免疫情況和病毒分布情況是必不可少的監(jiān)測環(huán)節(jié)和防控該病的重要手段。因禽流感H5、H7、H9可以傳染人，湖北省2017年秋季開始接種H7N9疫苗預(yù)防禽流感的發(fā)生與傳播。本研究通過評估調(diào)運(yùn)期間家禽H7亞型禽流感疫苗的免疫效果和病毒的分布狀況，可為及時發(fā)現(xiàn)疫情隱患和防控薄弱環(huán)節(jié)提供理論依據(jù)。

1? 材料與方法

1.1? 免疫疫苗

新禽二聯(lián)，批號2018016，哈爾濱維科生物技術(shù)開發(fā)公司;H5+H7二價滅活疫苗，批號：201898，中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院哈爾濱獸醫(yī)研究所。

1.2? 試驗材料

樣品：天門市轄區(qū)2018年6～12月調(diào)動送檢40個規(guī)模養(yǎng)鴨場、19個規(guī)模養(yǎng)雞場、2個規(guī)模養(yǎng)鵝場。每個禽類養(yǎng)殖場30份血清和30份禽拭子。

1.3? 檢測方法及試劑

血清學(xué)檢測方法采用血凝抑制試驗（HI），檢測血清中H7亞型禽流感病毒血凝素抗體，具體操作參照《高致病性禽流感診斷技術(shù)》（GB/T 18936-2003），檢測試劑為H7亞型禽流感抗原（生產(chǎn)批號：2018001），由中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院哈爾濱獸醫(yī)研究所提供。

病原學(xué)檢測方法采用RT-PCR試驗，檢測禽拭子中禽流感病毒HA基因片段核糖核酸，陽性樣品進(jìn)一步做H5、H7亞型分型檢測，具體操作參照《禽流感病毒RT-PCR檢測方法》（NY/T772-2013），檢測試劑為禽流感通用型RT-PCR 病毒試劑盒、禽流感H5亞型RT-PCR 病毒試劑盒、禽流感H7亞型RT-PCR 病毒試劑盒，均購自北京世紀(jì)元亨動物防疫技術(shù)有限公司（生產(chǎn)批號：AI20180910P）。

1.4? 試驗家禽分組

不同種類的家禽（雞、鴨、鵝等）各分為一組。

2? 結(jié)果與分析

2018年8～12月對天門市活禽調(diào)運(yùn)開展了H7亞型禽流感血清學(xué)和禽流感通用型及H5、H7亞型病原學(xué)監(jiān)測，共檢測各類樣品3 660份，其中血清學(xué)樣品1 830份。檢測H7亞型禽流感抗體陽性數(shù)972份，抗體陽性合格率53.11%，低于70%的合格標(biāo)準(zhǔn)。具體結(jié)果見表1。

蛋雞場血凝抗體效價在7～10 log2滴度區(qū)間內(nèi)，蛋鴨場血凝抗體效價在4～7 log2滴度區(qū)間內(nèi)，種鵝場血凝抗體效價在4～7 log2滴度區(qū)間。具體結(jié)果見表2。

病原學(xué)樣品1 830份，檢測禽流感通用型病毒核酸陽性數(shù)5份，對這5份陽性樣品進(jìn)一步做H5、H7亞型分型檢測，結(jié)果全部陰性。病毒核酸陽性率分別為0.18%、0.00%、0.00%。檢測群體61個，免疫抗體群體合格數(shù)26個，群體合格率42.62%，群體合格率排序為種鵝場>蛋雞場>蛋鴨場;禽流感通用型病毒核酸陽性群體數(shù)2個，均來自2個蛋鴨場，群體陽性率3.28%。具體結(jié)果見表3。

3? 討論與結(jié)論

（1）活禽調(diào)運(yùn)期間淘汰的蛋鴨免疫抗體水平明顯低于產(chǎn)蛋期，原因可能是活禽要進(jìn)入銷售環(huán)節(jié)時，大部分都是免疫時間過長，隨著時間推移，免疫抗體水平已降低。而蛋雞免疫效果很好，抗體陽性率為90.52%，比蛋鴨高57.52個百分點(diǎn)。說明不同種類的家禽對疫苗的敏感性不一致，免疫保護(hù)期存在一定的差異。在實際調(diào)運(yùn)前可以對蛋鴨加強(qiáng)免疫，增加其抗體水平，延長保護(hù)期，這是預(yù)防和控制H7N9禽流感在流通環(huán)節(jié)發(fā)生的有效手段之一。

（2）從血清學(xué)監(jiān)測結(jié)果看，抗體陽性蛋雞場血凝效價在7～10 log2滴度區(qū)間內(nèi)，高于蛋鴨場（4～7 log2）和種鵝場（4～7 log2）。HA抗體水平越高，家禽對病毒感染的抵抗力越強(qiáng)。

（3）通過病原學(xué)檢測在蛋鴨的拭子中檢出2個場禽流感通用型核酸陽性，從地理分布看2個陽性場均位于本市北部，這里有眾多的河流、湖泊、灘涂，是天然的水禽養(yǎng)殖場，并常有侯鳥遷移，由于禽流感病毒在不同物種之間傳播，通過侯鳥傳染水禽、人的風(fēng)險越來越高，因此對侯鳥遷移地水禽養(yǎng)殖場應(yīng)設(shè)置固定監(jiān)測點(diǎn)，定期送樣進(jìn)行血清學(xué)和病原學(xué)檢測，及時補(bǔ)免，對發(fā)現(xiàn)的禽流感疫情馬上處置，遏制疫病的暴發(fā)和流行。

（4）隨著養(yǎng)殖模式向規(guī)?；?、集團(tuán)化發(fā)展，跨省調(diào)運(yùn)活禽會越來越多。農(nóng)業(yè)部最新發(fā)布的《動物跨省調(diào)運(yùn)監(jiān)督管理辦法》指出：調(diào)查顯示70%的動物疫病發(fā)生都與動物的移動相關(guān)。本次檢出禽流感通用型陽性樣本雖然不是H5、H7高致病性的，但針對禽流感病毒變異性特點(diǎn)，要引起同樣的重視。對運(yùn)輸車輛、工具進(jìn)行徹底消毒，同時做好記錄備案人員宣教工作。