水產(chǎn)品中鉛的檢測能力驗證實操

□ 馬莉 楊帆 新疆維吾爾自治區(qū)水產(chǎn)科學研究所 農(nóng)業(yè)部西北地區(qū)漁業(yè)資源環(huán)境科學觀測實驗站

能力驗證是利用實驗室間比對，按照預先制定的準則評價參加者的能力［1］。其為判斷和監(jiān)控實驗室能力的有效手段，是實驗室通過外部措施補充其內(nèi)部質(zhì)量控制方法的技術(shù)，也是確保實驗室質(zhì)量管理體系持續(xù)改進的有效措施之一［2］。

鉛元素廣泛存在于自然界中，人類會通過食物鏈攝取鉛，也會從被污染的空氣中吸入鉛。鉛對神經(jīng)系統(tǒng)的損害主要是能夠引發(fā)末梢神經(jīng)炎，使人出現(xiàn)運動和感覺障礙。當兒童血液中的鉛含量超過60μg/100mL時，將會出現(xiàn)智能發(fā)育障礙和行為異常的癥狀，同時，鉛對兒童的骨骼生長發(fā)育也會造成損害。無公害食品及綠色食品的認證過程中都將鉛設為必檢項目：GB 2762-2017《食品安全國家標準 食品中污染物限量》中和NY 5073-2006《無公害食品 水產(chǎn)品中有毒有害物質(zhì)限量》中均規(guī)定，水產(chǎn)品中鉛的限量指標為≤0.5mg/kg［3-4］；NY/T 842-2012《綠色食品 魚》中規(guī)定水產(chǎn)品中鉛的限量指標為≤0.2mg/kg［5］。因此，提高對水產(chǎn)品中鉛的檢測準確度十分必要，參加能力驗證也是反映檢測數(shù)據(jù)是否準確的一種有效手段。

1 材料與方法

1.1 主要儀器與設備

原子吸收分光光度計（賽默飛，CE 3500）；微波消解儀（CEM，MARS 6）；超純水儀(Millipore，Q10)；天平（賽多利斯，BS124S）。

1.2 主要試劑

1000μg/mL鉛標準溶液（中國計量科學研究院，GBW 08619-15073）；硝酸（國藥集團化學試劑有限公司，優(yōu)級純）；過氧化氫（國藥集團化學試劑有限公司，分析純）；磷酸二氫銨（國藥集團化學試劑有限公司，優(yōu)級純）。

本次能力驗證樣品共2份，各10g左右，且均為肉糜狀鮮樣，分別裝于棕色玻璃瓶中。兩份樣品中，一份為考核樣本，另一份為干擾樣本，能力驗證工作要求發(fā)放樣品96小時內(nèi)報告測試結(jié)果。2份樣品結(jié)果判定時，僅評價考核樣本的檢測結(jié)果，干擾樣本不作判定。本單位樣品編號分別為Pb48和 Pb57。

1.3 方法

1.3.1 檢測依據(jù)

采用國標方法GB 5009.12-2017《食品安全國家標準 食品中鉛的測定》第一法，石墨爐原子吸收光譜法進行鉛的檢測。

表1 樣品微波消解程序

表2 石墨爐升溫程序

1.3.2 檢測前的準備工作

所有實驗中使用的玻璃器皿均經(jīng)硝酸溶液（1+4）浸泡過夜，超純水沖洗干凈后晾干備用，注意要充分沖洗，以避免污染，從而降低樣品空白值，提高檢測時的穩(wěn)定性。試驗用水按照GB/T 6682-2008《分析實驗室用水規(guī)格和試驗方法》的規(guī)定使用一級水。

1.3.3 標準溶液的配制

準確吸取2.50mL濃度為1000μg/mL的鉛標準溶液置于25.00mL容量瓶中，用1%硝酸溶液稀釋至刻度并搖勻，此時溶液濃度為100.00μg/mL；再經(jīng)多次稀釋至濃度為20.00μg/L的鉛標準溶液，備用。

1.3.4 樣品前處理

準確稱取肉糜樣品1.000g，同時做3個平行樣，放入聚四氟乙烯消解罐中，加8.00mL硝酸過夜（冷消解）。次日，加入2.00mL硝酸和1.00mL過氧化氫（30%），裝罐后放入微波消解儀中進行消解（消解程序見表1）。冷卻后開蓋于150℃的電熱板上繼續(xù)趕酸，至罐內(nèi)液體剩余約0.25mL左右，用超純水定容至10.00mL容量瓶中，混勻待測。同時做樣品空白對照和標準樣品消解。標準樣品（縊蟶：國家海洋局第一海洋研究所，AK0248）稱樣量為0.150g，做7個平行樣，消解趕酸后定容至25.00mL容量瓶中。

2 測定與結(jié)果

2.1 上機測定

主標液：20.00μg/L鉛標準工作溶液；稀釋劑：1%硝酸溶液；基體改進劑：20g/L磷酸二氫銨溶液；標準品及樣品進樣體積：20μL；基體改進劑進樣體積：5μL。波長：283.3nm；通帶：0.5nm；信號類型：峰高；背景較正：塞曼。標準工作曲線繪制為儀器自動稀釋配制，石墨爐升溫程序見表2。

干燥階段分兩步進行，選用80℃和100℃進行兩步干燥?；一驮踊A段采用儀器自帶的搜索最佳優(yōu)化條件，選用700℃為灰化溫度，1400℃為原子化溫度。

圖1 工作曲線

2.2 檢測結(jié)果

依照上述方法條件，建立工作曲線方程Abs=0.01427C+0.0060，相關(guān)系數(shù)r=0.9996（見圖1）。對樣品進行測定，編號為Pb48的樣品3平行結(jié)果為17μg/kg，相對標準偏差為6.9%；編號為Pb57的樣品3平行結(jié)果為54μg/kg，相對標準偏差為3.9%，結(jié)果見表3；國家標準樣品縊蟶（AK0248）6平行樣品檢測結(jié)果為1.36mg/kg，相對標準偏差為3.8%，檢測結(jié)果在標準樣品的標準值區(qū)間1.29±0.13mg/kg范圍內(nèi)，見表4。結(jié)果表明，該驗證實驗的精密度、準確度都能達到國家標準的要求，測定結(jié)果準確可靠。

2.3 能力驗證結(jié)果

本次能力驗證中，重金屬檢測結(jié)果按Z比分數(shù)法統(tǒng)計，∣Z∣≤3判定為滿意結(jié)果，∣Z∣＞3判定為不滿意結(jié)果，3≥∣Z∣＞2需開展自查。

表3 樣品測定結(jié)果（n=3）

表4 標準樣品測定結(jié)果（n=6）

本單位樣品編號為Pb57的樣品檢測結(jié)果54μg/kg的∣Z∣為1.75，判定結(jié)果為滿意。編號為Pb48的樣品為干擾樣品，不做判定。

因此得出結(jié)論，本實驗通過了農(nóng)業(yè)部2018年水產(chǎn)品中鉛的檢測能力驗證。

3 檢測注意事項

能力驗證樣品與其他常規(guī)樣品差異較大，原因為能力驗證樣品的某種成分可能含量較高，故檢測的稱樣量和消解后定容體積往往具有不確定性，所以推薦在正式測定前進行預實驗。在樣品量足夠的情況下，可先做3個平行樣，上機確定樣品大概濃度范圍后再進行正式檢測，避免一次性將樣品用完，由于稱樣量以及定容體積不合適，造成檢測結(jié)果有偏差。

鉛廣泛存在于環(huán)境中，檢測時極易受到污染，因此整個實驗過程中一定要防止污染，例如化妝品中也可能含有鉛，這就要避免其他人員接觸對樣品檢測造成污染。同時，所用到的試劑溶液可上機測試鉛含量，若發(fā)現(xiàn)樣品空白值較高（一般來說，鉛的空白測定吸光度在0.02以下）則應考慮實驗用水和試劑是否受到污染。用水最好為實驗室一級水，所用試劑除要考慮試劑級別外，不同生產(chǎn)廠家的試劑也具有一定差異，同一廠家不同批次的藥品試劑可能也會存在差異。

檢測樣品若發(fā)現(xiàn)重現(xiàn)性、平行性不好等情況，在排除樣品處理過程受污染的前提下，可考慮是否是進樣問題，此時可檢查進樣針注入位置是否合適；進樣結(jié)束，針頭是否有溶液掛壁現(xiàn)象，如有掛壁，則表明實際進樣體積不準，這關(guān)系到樣品檢測結(jié)果準確性，因此在檢測過程中，要經(jīng)常注意進樣情況。

如測定標準樣品的結(jié)果與實際值不符，則應考慮浸泡容器的酸液是否受到污染。最簡單的檢查方式，即取一只燒杯，加入少許硝酸放在電熱板上加熱至近干，用水沖洗燒杯壁合并洗液定容后上機測定，若此溶液鉛含量高，則推斷浸泡容器的酸液被污染。

檢測過程所用的標準樣品，最好通過改變稱樣量和定容體積的方法，將溶液測定濃度調(diào)節(jié)至與能力驗證樣品濃度相近，這樣更能反映樣品檢測結(jié)果的準確性。實驗中，可考慮購買不同濃度的標準樣品，從中選取一種與能力驗證樣品濃度接近的標準樣品進行同步檢測。

檢測時，通過改變樣品稱樣量以及定容體積的方式，盡量使樣品的檢測濃度位于標準曲線中段，此時樣品結(jié)果較為可靠。如樣品檢測濃度靠近標準曲線下端，接近檢出限準確度不高；如樣品濃度靠近標準曲線上端，吸光度過高時，樣品檢測濃度可能偏低。

設定石墨爐程序時，由于消解后的樣品具有一定的酸度且加入了基體改進劑，為避免樣品在干燥階段發(fā)生液體暴沸飛濺，可選取進樣溶液沸點附近溫度，將干燥溫度分別設為兩步，采取緩慢階段升溫和延長保溫時間的方式保證檢測結(jié)果的準確性?；一瘻囟群驮踊瘻囟茸詈眠M行優(yōu)化條件搜索，選取在保證吸光度穩(wěn)定且儀器響應信號值高的溫度，在響應值接近的溫度區(qū)間選取較低的溫度，因為灰化溫度和原子化溫度會直接影響石墨管的使用壽命。

4 小結(jié)

本次能力驗證采用國標方法GB 5009.12-2017《食品安全國家標準 食品中鉛的測定》進行測定，采用方法包括石墨爐原子吸收光譜法、電感耦合等離子體質(zhì)譜法、火焰原子吸收光譜法和二硫腙比色法4種檢測方法［6］。本單位采用石墨爐原子吸收光譜法進行水產(chǎn)品中鉛的檢測，用標準樣品同步實驗作為實驗室內(nèi)部質(zhì)量控制手段，在能力驗證舉辦方發(fā)放樣品的96小時內(nèi)按時提交了檢測結(jié)果并獲得滿意評定結(jié)果。這表明，用此方法進行鉛的檢測，數(shù)據(jù)可靠有效。

通過參加能力驗證活動，有利于實驗室實現(xiàn)自我評定，是實驗室檢測質(zhì)量的反映。參加能力驗證獲得通過，是增強用戶對實驗室檢測能力信任度的一個有力證明，同時增強了實驗室對所出具數(shù)據(jù)的自信心。