血站核酸檢測(cè)關(guān)鍵控制點(diǎn)淺析

黃唯　來(lái)祝檁　韓惠云

[摘要] 血站是采集、儲(chǔ)存血液，并向臨床或血液制品生產(chǎn)單位供血的醫(yī)療衛(wèi)生機(jī)構(gòu)。隨著醫(yī)療行業(yè)的迅速發(fā)展，臨床獻(xiàn)血與血制品的管理與越來(lái)越走向正規(guī)化。血站的質(zhì)檢是血站的管理核心，血制品合格輸入關(guān)系著千千萬(wàn)萬(wàn)家庭的生命安全。目前臨床常見(jiàn)血液篩查方式是血清學(xué)檢測(cè)和核酸檢測(cè)兩類(lèi)，能夠檢測(cè)出獻(xiàn)血者是否感染艾滋病、梅毒、乙肝等病原體，確保血制品安全，本文探討核酸檢測(cè)在血站的應(yīng)用。核酸檢測(cè)可直接檢測(cè)出病原體的基因組，提高血液檢測(cè)的工作效率，降低病原體的傳播。開(kāi)展血站核酸檢測(cè)是保障血液安全的管基金措施，在血站核酸檢測(cè)中充分做好實(shí)驗(yàn)室管理，嚴(yán)格各項(xiàng)無(wú)菌操作，能夠保障檢測(cè)的精密度，不斷提高血液制品的質(zhì)量，確保臨床今后用血安全。

[關(guān)鍵詞] 血站;核酸檢測(cè);關(guān)鍵控制點(diǎn)

[中圖分類(lèi)號(hào)] R440 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] A [文章編號(hào)] 1672-5654（2019）04（b）-0145-02

Analysis of Key Control Points for Nucleic Acid Detection in Blood Stations

HUANG Wei， LAI Zhu-lin， HAN Hui-yun

Jiaozuo Downtown Blood Station， Jiaozuo， Henan Province， 454000 China

[Abstract] Blood station is a medical and health institution that collects and stores blood and supplies blood to clinical or blood product production units. With the rapid development of the medical industry， the management of clinical blood donation and blood products is becoming more and more formalized. The quality check of the blood station is the core of the blood station management， and the qualified input of blood products is related to the life safety of thousands of families. At present， the common clinical blood screening methods are serological detection and nucleic acid detection. It can detect whether blood donors are infected with AIDS， syphilis， hepatitis B and other pathogens to ensure the safety of blood products. This paper discusses the application of nucleic acid detection in blood stations. Nucleic acid detection can directly detect the genome of the pathogen， improve the efficiency of blood testing， and reduce the spread of pathogens. Carrying out blood bank nucleic acid testing is a fund-funding measure to ensure blood safety. In the blood station nucleic acid testing， the laboratory management is fully done， and strict aseptic operations can ensure the precision of testing， continuously improve the quality of blood products， and ensure clinical Use blood safely in the future.

[Key words] Blood station; Nucleic acid detection; Critical control points

隨著無(wú)償獻(xiàn)血事業(yè)的迅速發(fā)展，獻(xiàn)血人群也越來(lái)越多，輸血是搶救和治療危重患者的重要手段之一，臨床獻(xiàn)血人群也在逐年增加，為確保血液質(zhì)量的完好性，血液檢測(cè)十分重要[1]。血站依據(jù)相關(guān)規(guī)范將采血過(guò)程及管理分為很多細(xì)節(jié)內(nèi)容，要求每一個(gè)環(huán)節(jié)都應(yīng)嚴(yán)格管理，確保血制品質(zhì)量。該站從2014年5月至今已完成30萬(wàn)份核酸樣本檢測(cè)，現(xiàn)結(jié)合實(shí)際工作，淺談血站核酸檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室需要注意的關(guān)鍵控制點(diǎn)。

1? 核酸實(shí)驗(yàn)室各區(qū)域劃分

保證核酸檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確可靠，其重要一點(diǎn)就是防污染，因此要嚴(yán)格按照核酸實(shí)驗(yàn)室規(guī)范要求合理劃分實(shí)驗(yàn)室區(qū)域。目前該站已建成兩個(gè)核酸檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室，按要求和工作需要均分成三個(gè)區(qū)域：試劑儲(chǔ)存區(qū)（一區(qū)）、樣本處理區(qū)（二區(qū)）、擴(kuò)增區(qū)（三區(qū)）。各區(qū)域完全獨(dú)立，不能相通;各區(qū)域具有獨(dú)立的通風(fēng)系統(tǒng)：一區(qū)到三區(qū)壓力依次遞減，一區(qū)、二區(qū)保持正壓或常壓狀態(tài)，三區(qū)保持負(fù)壓狀態(tài)。兩個(gè)核酸實(shí)驗(yàn)室分別配備了浩源和華益美兩個(gè)廠家的核酸檢測(cè)系統(tǒng)，可以互為備份，以應(yīng)對(duì)緊急情況的發(fā)生。

工作人員在實(shí)驗(yàn)前應(yīng)檢查各區(qū)壓力，保持一區(qū)>二區(qū)>三區(qū)，一區(qū)、二區(qū)保持正壓或常壓狀態(tài)，三區(qū)處于負(fù)壓狀態(tài)。檢驗(yàn)人員和物品按照從一區(qū)到二區(qū)到三區(qū)單向流動(dòng)，不可逆向而行。各區(qū)都設(shè)有緩沖間，放置工作服和工作鞋，并專(zhuān)區(qū)專(zhuān)用，不可將工作服和工作鞋穿到所屬區(qū)域以外的地方。實(shí)驗(yàn)室內(nèi)所有物品專(zhuān)用，并貼上各區(qū)標(biāo)簽，防止混用。

2? 核酸實(shí)驗(yàn)室操作人員的管理

核酸檢測(cè)是新興的分子生物學(xué)技術(shù)，對(duì)檢驗(yàn)人員有著嚴(yán)格的要求。核酸室預(yù)備檢驗(yàn)人員應(yīng)進(jìn)行崗前培訓(xùn)，在獲得科室負(fù)責(zé)人同意后進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室學(xué)習(xí)，接受廠家的試劑及設(shè)備使用操作培訓(xùn)，可獨(dú)立操作并經(jīng)考核合格后方可進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室工作。并定期組織實(shí)驗(yàn)室功能人員進(jìn)行業(yè)務(wù)學(xué)校或進(jìn)修，定期要求每位工作人員進(jìn)行PPT講課，講課內(nèi)容為實(shí)驗(yàn)室工作內(nèi)容，共同探討平時(shí)工作中遇到的具體問(wèn)題，大家共同解決，共同提高工作質(zhì)量。

3? 核酸檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量管理體系

為保證受血者的用血安全以及檢驗(yàn)人員的安全，建立了核酸室質(zhì)量管理體系，它包括管理制度，崗位職責(zé)，標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程等。

①管理制度包括核酸實(shí)驗(yàn)室防污染及生物安全制度、準(zhǔn)入制度和核酸實(shí)驗(yàn)室管理制度;每班工作人員記錄本班工作任務(wù)，做到有據(jù)可依、有證可查。

②崗位職責(zé)包括標(biāo)本的接收、保存和處理、標(biāo)本的核酸檢測(cè)工作、檢驗(yàn)報(bào)告的發(fā)布、室內(nèi)質(zhì)控和室間質(zhì)評(píng)以及檢測(cè)結(jié)果陽(yáng)性者的告知。

③標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程包括試劑配制操作規(guī)程、清潔消毒以及核酸提取和擴(kuò)增等儀器操作規(guī)程。每班人員記錄溫濕度計(jì)的度數(shù)，記錄冰箱的溫度計(jì)度數(shù)，登記當(dāng)班標(biāo)本，取出當(dāng)天實(shí)驗(yàn)須配置和需要使用到的試劑，其余試劑收回冰箱放好。再準(zhǔn)備完畢后打開(kāi)紫外燈消毒，記錄消毒燈管使用情況。

④定期消毒處置，每隔段時(shí)間使用相關(guān)儀器檢測(cè)標(biāo)本室及實(shí)驗(yàn)室空氣指標(biāo)狀況，并根據(jù)檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行相應(yīng)消毒處置。并定期隨機(jī)抽查實(shí)驗(yàn)室工作人員手部衛(wèi)生狀況，對(duì)于手部衛(wèi)生消毒不合格者，實(shí)施懲罰制度，提高實(shí)驗(yàn)室工作人員無(wú)菌原則。

4? 核酸檢測(cè)操作過(guò)程

核酸檢測(cè)標(biāo)本的質(zhì)量直接影響檢驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性，因此應(yīng)采用內(nèi)含枸櫞酸鹽或是EDTA抗凝劑的無(wú)菌、無(wú)DNA酶、無(wú)RNA酶、帶分離膠的真空采血管。標(biāo)本留樣為5 mL，采集完畢后，應(yīng)立即慢且輕地顛倒混勻5～8次，4 h之內(nèi)在低溫離心機(jī)中進(jìn)行離心，后保存在2～8℃的冰箱。接收標(biāo)本的人員如發(fā)現(xiàn)標(biāo)本有嚴(yán)重溶血、脂血、量少以及標(biāo)本信息不對(duì)照的情況，應(yīng)拒絕接收。標(biāo)本應(yīng)在72 h內(nèi)進(jìn)行檢測(cè)，如若不能完成，應(yīng)將標(biāo)本置于-20℃以下凍存，再次拿出檢驗(yàn)前，標(biāo)本應(yīng)提前于2～8℃冰箱或室溫條件下復(fù)融[2]。

實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，檢驗(yàn)人員需注意觀察加樣吸頭是否有堵塞或吸入的標(biāo)本量不夠，有無(wú)錯(cuò)加或漏加，并及時(shí)處理[3]。拆分試劑包裝時(shí)注意檢查試劑包裝是否完好，有無(wú)異物，量是否足。切記整個(gè)實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，避免手從已開(kāi)蓋的血樣標(biāo)本及試劑上方經(jīng)過(guò)，污染血樣和試劑[4]。操作動(dòng)作輕緩，以免碰倒已開(kāi)蓋的血樣標(biāo)本，造成實(shí)驗(yàn)室的污染。處理標(biāo)本、陰陽(yáng)性對(duì)照、質(zhì)控品以及試劑耗材時(shí)不能使用同一雙手套，需及時(shí)更換，做到手套專(zhuān)用，不可混用以保證實(shí)驗(yàn)質(zhì)量[5]。嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)規(guī)定進(jìn)行檢測(cè)，對(duì)可以部分進(jìn)行復(fù)查，對(duì)于冰柜取出物品進(jìn)行檢查核對(duì)，檢查物品的質(zhì)量，核對(duì)物品的名稱及有效期。在每個(gè)關(guān)鍵位置貼上溫馨提示，減少差錯(cuò)發(fā)生率。對(duì)實(shí)驗(yàn)室物品進(jìn)行統(tǒng)一管理處置。

實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，用75%酒精對(duì)實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行密集噴灑可有效沉降氣溶膠，按比例配制好84消毒液擦拭桌面和地面，10 min后再用清水擦拭桌面清除殘留84消毒液。核酸檢測(cè)設(shè)備操作平臺(tái)用75%酒精噴濕的紗布擦拭完畢后用內(nèi)置紫外燈照射60 min。當(dāng)天實(shí)驗(yàn)室產(chǎn)生的醫(yī)療廢物垃圾應(yīng)及時(shí)處理，避免氣溶膠對(duì)實(shí)驗(yàn)室的污染。在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中使用一次性鞋套手套，將接受到的反應(yīng)管進(jìn)行擴(kuò)增分析，在分析完畢后，記錄具體結(jié)果，并及時(shí)發(fā)送報(bào)告，檢查報(bào)告無(wú)問(wèn)題時(shí)，及時(shí)簽字，對(duì)于檢驗(yàn)報(bào)告不完整時(shí)，及時(shí)收回給予糾正后及時(shí)發(fā)送，并檢查報(bào)告不全原因，給予針對(duì)性處置。實(shí)驗(yàn)結(jié)束后記錄儀器工作時(shí)間及完好狀況。檢驗(yàn)人員離開(kāi)實(shí)驗(yàn)室并開(kāi)啟紫外燈對(duì)實(shí)驗(yàn)室桌面和空氣照射60 min[6]。

血站核酸實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)工作的安全有效是血液質(zhì)量的重要保證。與臨床實(shí)驗(yàn)室不同，血站實(shí)驗(yàn)室出具的接測(cè)報(bào)告直接關(guān)系到血液是否可用于臨床，其結(jié)果具有非常重要的決策意義。因此應(yīng)得到檢驗(yàn)人員的高度重視，以確保核酸實(shí)驗(yàn)的檢測(cè)質(zhì)量，保障臨床用血安全。在完善各項(xiàng)步驟與物品的管理后，能夠有效確保血液制品的安全性，降低不良醫(yī)療事故的發(fā)生，確保臨床患者安全進(jìn)行輸血治療。

[參考文獻(xiàn)]

[1]? 中華人民共和國(guó)國(guó)家衛(wèi)生與計(jì)劃生育委員會(huì).衛(wèi)計(jì)生發(fā)[2013]22號(hào)，全面推進(jìn)血站核酸檢測(cè)工作實(shí)施方案.

[2]? 國(guó)家衛(wèi)生計(jì)生委.血站技術(shù)操作規(guī)程（2015版）（Z）.2015-12-17.

[3]? 王瑞，吳碩，高峰，等.血站實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量監(jiān)控指標(biāo)體系的建立及其應(yīng)用[J].中國(guó)輸血雜志，2011，24（8）：713-715.

[5]? 門(mén)守山，呂連智，陳元鋒，等.血站核酸檢測(cè)實(shí)施后獻(xiàn)血者血液檢測(cè)模式的研究[J].中國(guó)實(shí)驗(yàn)血液學(xué)雜志，2017，25（6）：1815-1819.

[6]? 李天官.核酸檢測(cè)技術(shù)在基層血站血液篩查中的應(yīng)用效果[J].臨床合理用藥雜志，2017，10（24）：107-109.