益氣養(yǎng)陰湯聯(lián)合貝伐珠單抗治療卵巢癌對患者免疫功能、炎性因子及腫瘤標(biāo)志物的影響

古力米熱·布然江，熱孜亞·庫爾班，艾力克木·阿不都玩克，李小文，古麗娜·庫爾班

新疆醫(yī)科大學(xué)附屬腫瘤醫(yī)院1婦科腫瘤放射治療（二病區(qū)），2婦科專病門診，4婦科腫瘤放射治療（一病區(qū)），烏魯木齊830011

3新疆維吾爾自治區(qū)人民醫(yī)院兒科病區(qū)，烏魯木齊8300110

卵巢癌是婦科臨床常見的惡性腫瘤之一，發(fā)病率近年來一直呈升高趨勢，該病多發(fā)于盆腔深部，起病隱匿，早期癥狀不明顯，且目前仍缺少有效的篩查手段，導(dǎo)致疾病早期的發(fā)生、發(fā)展極易被忽視，超過70%的患者確診時已發(fā)展至晚期，且已發(fā)生轉(zhuǎn)移，遠(yuǎn)期生存率極低，居婦科腫瘤病死率首位，嚴(yán)重威脅女性健康[1]。以往臨床治療多以腫瘤細(xì)胞減滅術(shù)和放化療為主，臨床緩解率約為50%[2]，且不良反應(yīng)較多。貝伐珠單抗屬于靶向治療藥物，可強(qiáng)烈抑制腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移相關(guān)因子的表達(dá)；而益氣養(yǎng)陰湯是一種傳統(tǒng)中藥，目前用于卵巢癌等多種腫瘤的治療。新疆醫(yī)科大學(xué)附屬腫瘤醫(yī)院應(yīng)用益氣養(yǎng)陰湯聯(lián)合貝伐珠單抗治療卵巢癌取得較好療效，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

收集新疆醫(yī)科大學(xué)附屬腫瘤醫(yī)院2014年3月至2017年5月因卵巢癌住院治療患者的病歷資料。納入標(biāo)準(zhǔn)：①所有患者均符合卵巢癌的診斷標(biāo)準(zhǔn)[3]，經(jīng)影像學(xué)和病理學(xué)檢查確診，存在可測量病灶，病灶直徑≥2 cm；②患者生存時間均＞6個月；③既往未接受手術(shù)、化療及貝伐珠單抗治療。排除標(biāo)準(zhǔn)：①患有嚴(yán)重心、腦、腎、肝和肺部疾病者；②合并嚴(yán)重感染、免疫功能缺陷者；③有藥物過敏史者；④精神異常。根據(jù)納入排除標(biāo)準(zhǔn)共納入80例患者，按照治療方法的不同分為觀察組（n=43）和對照組（n=37）。觀察組患者給予益氣養(yǎng)陰湯聯(lián)合貝伐珠單抗治療，年齡37～65歲，平均（51.3±14.1）歲；腫瘤類型：漿液性癌20例，黏液性癌14例，子宮內(nèi)膜癌5例，未分化癌4例；臨床分期：Ⅲ期33例，Ⅳ期10例。對照組患者給予貝伐珠單抗治療，年齡39～66歲，平均（52.8±13.0）歲；腫瘤類型：漿液性癌13例，黏液性癌11例，子宮內(nèi)膜癌6例，未分化癌7例；臨床分期：Ⅲ期30例，Ⅳ期7例。兩組患者年齡、腫瘤類型、臨床分期比較，差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05），具有可比性。

1.2 治療方法

對照組患者給予貝伐珠單抗治療，貝伐珠單抗7.5 mg/kg+0.9%氯化鈉溶液250 ml，靜脈滴注，首次靜脈滴注需在1.5 h內(nèi)完成，從第2次開始每次靜脈滴注時間不少于1 h，每2周靜脈滴注1次，4周為一個療程。

觀察組患者在對照組基礎(chǔ)上給予益氣養(yǎng)陰湯，藥物組成包括山藥25 g、黃芪35 g、生地20 g、黃精15 g、玄參20 g、女貞子20 g、莪術(shù)15 g、山慈菇20 g、夏枯草15 g、桔梗10 g、大棗10 g，根據(jù)癥狀加減藥量，水煎服，每日1劑，分早晚兩次口服，4周為一個療程。

1.3 觀察指標(biāo)

于治療前和治療后4周分別抽取患者清晨空腹靜脈血，抗凝，離心，收集血清。采用流式細(xì)胞儀熒光抗體堿性磷酸酶染色法檢測免疫細(xì)胞水平[4]，包括總T淋巴細(xì)胞（CD3+）、輔助性T細(xì)胞（CD3+CD4+）、免疫狀態(tài)（CD4+/CD8+）、調(diào)節(jié)性T細(xì)胞（CD4+CD25+）和自然殺傷（natural killer，NK）細(xì)胞；采用酶聯(lián)免疫吸附法（enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA）[5]檢測炎性因子、血管內(nèi)皮生長因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）和腫瘤標(biāo)志物水平，炎性因子包括白細(xì)胞介素-2（interleukin-2，IL-2）、白細(xì)胞介素-6（interleukin-6，IL-6）、白細(xì)胞介素-10（interleukin-10，IL-10）和干擾素-γ（interferon-γ，INF-γ），腫瘤標(biāo)志物包括CD133、生殖細(xì)胞特異性蛋白DDX4（DEAD-box helicase 4，DDX4）、糖類抗原153（carbohydrate antigen 153，CA153）、糖類抗原19-9（carbohydrate antigen 19-9，CA19-9）、糖類抗原125（carbohydrate antigen 125，CA125）和癌胚抗原（carcinoembryonic antigen，CEA）。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法

采用SPSS 17.0統(tǒng)計軟件對所有數(shù)據(jù)進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。計數(shù)資料以例數(shù)表示，組間比較采用χ2檢驗(yàn)；計量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，組間比較采用兩獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)，組內(nèi)比較采用配對樣本t檢驗(yàn)。以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 治療前后免疫細(xì)胞水平的比較

治療前兩組患者 CD3+、CD3+CD4+、CD4+/CD8+、CD4+CD25+和NK細(xì)胞水平比較，差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）；治療后觀察組患者CD3+、CD3+CD4+、CD4+/CD8+和NK細(xì)胞水平均明顯高于本組治療前和對照組治療后，CD4+CD25+水平明顯低于本組治療前和對照組治療后，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.01）。（表1）

2.2 治療前后炎性因子和VEGF水平的比較

治療前兩組患者 IL-2、IL-6、IL-10、INF-γ和VEGF水平比較，差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）；治療后觀察組患者IL-2和INF-γ水平均明顯高于治療前和對照組治療后，IL-6、IL-10和VEGF水平均明顯低于治療前和對照組治療后，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。（表2）

表1 治療前后兩組患者免疫細(xì)胞水平的比較

表2 治療前后兩組患者炎性因子和VEGF水平的比較

2.3 治療前后腫瘤標(biāo)志物水平的比較

治療前兩組患者CD133、DDX4、CA153、CA19-9、CA125和CEA水平比較，差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）；治療后觀察組患者CD133、DDX4、CA153、CA19-9、CA125和CEA水平均明顯低于本組治療前和對照組治療后，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.01）。（表3）

表3 治療前后兩組患者腫瘤標(biāo)志物水平的比較

3 討論

近年來，中國經(jīng)濟(jì)迅速發(fā)展，人們生活水平不斷提高，女性工作、生活壓力增加和環(huán)境污染等因素導(dǎo)致卵巢癌每年新發(fā)病例逐漸增多，且呈年輕化趨勢，病死率高達(dá)60%以上，居女性生殖系統(tǒng)惡性腫瘤病死率首位[6]。該病早期發(fā)病隱匿，且部位隱蔽，很多患者就診時已發(fā)展至中晚期，失去手術(shù)治療的最佳時機(jī)，病死率極高，嚴(yán)重影響女性生命健康。以往臨床多以腫瘤減滅術(shù)或放化療為主要治療方法，但統(tǒng)計數(shù)據(jù)發(fā)現(xiàn)，腫瘤細(xì)胞仍可快速擴(kuò)散至血液和淋巴系統(tǒng)，復(fù)發(fā)率較高，且放化療的不良反應(yīng)強(qiáng)烈，大部分患者可出現(xiàn)惡心嘔吐、腹瀉等消化道反應(yīng)，以及肝腎不同程度的損傷和骨髓抑制等多種嚴(yán)重不良反應(yīng)[7-8]。本研究經(jīng)過長期臨床經(jīng)驗(yàn)總結(jié)，在貝伐珠單抗基礎(chǔ)上應(yīng)用益氣養(yǎng)陰湯治療，取得較好療效。

貝伐珠單抗是目前臨床一線抗腫瘤靶向藥物，其選擇性結(jié)合VEGF，通過抑制其與表面受體相互作用，繼而降低其活性，阻斷細(xì)胞增殖和腫瘤組織新生血管生成[9-10]。由于體內(nèi)正常組織自然狀態(tài)下新生血管概率很低，但腫瘤的生長在一定程度上依賴血管生成，因此，有效的抗血管生成治療可以起到有效的抗腫瘤作用。另外，多項(xiàng)研究指出，貝伐珠單抗還可有效阻斷VEGF向下游轉(zhuǎn)導(dǎo)的信號，促進(jìn)腫瘤血管系統(tǒng)趨于“正?；?，提高藥物在細(xì)胞內(nèi)的利用率，減少耐藥性的發(fā)生[11-12]。隨著中醫(yī)學(xué)的迅速發(fā)展，中藥制劑聯(lián)合靶向藥物治療腫瘤已逐漸成為研究的熱點(diǎn)。卵巢癌在中醫(yī)學(xué)屬“積聚”“癥瘕”等范疇，靶向治療后，癌毒去除，但正氣耗損，氣血津液嚴(yán)重匱乏，機(jī)體陰陽俱衰，繼而形成痰凝、氣滯、瘀毒內(nèi)結(jié)[13]。若不及時消解，極易造成嚴(yán)重影響，誘發(fā)腫瘤復(fù)發(fā)。該治療以驅(qū)邪攻毒、扶正固本為主。益氣養(yǎng)陰湯以清熱解毒、益氣養(yǎng)陰、散結(jié)扶正為主要功效，方中黃芪益氣健脾、升陽固表、消腫利尿；山藥健脾補(bǔ)腎、明目安神，山藥中的多糖成分可有效抗腫瘤，抑制腫瘤細(xì)胞進(jìn)入S期；生地清熱生津、潤燥涼血；玄參滋陰涼血、清熱解毒；女貞子補(bǔ)益肝腎，提高對抗腫瘤的免疫作用；莪術(shù)行氣止痛、消積散結(jié)；山慈菇和夏枯草清熱解毒、散結(jié)消癰，兩藥合用可加快腫瘤細(xì)胞的凋亡。在現(xiàn)代藥理學(xué)中，諸藥合用可有效促進(jìn)機(jī)體分泌免疫因子，治療效果得到臨床一致認(rèn)可[14]。

有報道稱，惡性腫瘤的生長和機(jī)體免疫功能關(guān)系密切，指出免疫功能是評估惡性腫瘤治療效果的重要指標(biāo)[15]。腫瘤患者機(jī)體免疫功能異常，抗腫瘤作用以細(xì)胞免疫為主，其中T淋巴細(xì)胞發(fā)揮主要效應(yīng)，其變化是人體細(xì)胞免疫功能狀態(tài)的有效體現(xiàn)。腫瘤細(xì)胞可分泌生物活性因子抑制T細(xì)胞增殖，破壞免疫細(xì)胞，繼而進(jìn)一步降低免疫功能。CD3+和CD4+能夠增強(qiáng)機(jī)體抗腫瘤免疫反應(yīng)，有效殺滅腫瘤細(xì)胞，CD8+可反映細(xì)胞免疫損傷，屬于關(guān)鍵性的抑制性T細(xì)胞，對細(xì)胞免疫反應(yīng)具有抑制作用，CD4+/CD8+主要反映腫瘤細(xì)胞殺傷活性，CD4+CD25+細(xì)胞通過對細(xì)胞毒性T細(xì)胞的激活，發(fā)揮免疫調(diào)節(jié)功能。從本研究結(jié)果可見，治療后觀察組患者CD3+、CD3+CD4+、CD4+/CD8+和NK細(xì)胞水平均明顯高于治療前和對照組治療后，CD4+CD25+水平明顯低于本組治療前和對照組治療后，表明聯(lián)合用藥可有效加強(qiáng)機(jī)體免疫功能，改善卵巢癌患者免疫狀態(tài)，提高抗腫瘤療效。當(dāng)機(jī)體免疫功能下降時易受感染，IL-2和INF-γ通過介導(dǎo)免疫炎性反應(yīng)，調(diào)理細(xì)胞抗體和補(bǔ)體，促進(jìn)細(xì)胞免疫；IL-6和IL-10兩種白細(xì)胞介素具有較強(qiáng)的細(xì)胞免疫調(diào)節(jié)作用，可有效抑制產(chǎn)生NK細(xì)胞，抑制T細(xì)胞功能。從本研究結(jié)果可見，觀察組患者治療后IL-2和INF-γ水平均較治療前明顯升高，且明顯高于對照組治療后，而IL-6和IL-10水平在治療后明顯低于治療前，且明顯低于對照組治療后，表明觀察組抗炎性反應(yīng)更明顯，免疫細(xì)胞因子釋放更快[16]。VEGF水平對卵巢癌的預(yù)后具有一定影響，其水平越高，患者預(yù)后越差，有效抑制該因子活性對卵巢癌的治療具有關(guān)鍵作用。VEGF是刺激血管內(nèi)皮細(xì)胞增殖的細(xì)胞因子，當(dāng)腫瘤直徑＞2 cm時，進(jìn)一步加重缺氧，不斷促進(jìn)VEGF升高，形成惡性循環(huán)[17-18]。從本研究結(jié)果可見，兩組患者治療后VEGF水平均較治療前降低，且觀察組治療后VEGF水平較對照組更低，表明聯(lián)合用藥可有效抑制血管新生以及VEGF的生成，減緩腫瘤生長，對腫瘤的治療具有重要意義。腫瘤標(biāo)志物是腫瘤細(xì)胞增殖過程中所生成的，對腫瘤的診斷和預(yù)后具有重要意義。CD133和DDX4是腫瘤干細(xì)胞標(biāo)志物，其表達(dá)水平越高，腫瘤病理分級越高；CA153屬上皮糖蛋白，在大部分卵巢癌患者中呈高表達(dá)狀態(tài)；CA19-9是一種與多種腫瘤相關(guān)的標(biāo)志物，尤其在黏液性卵巢癌診斷中具有較高靈敏度；CA125是目前臨床診斷卵巢癌應(yīng)用最廣泛、最具價值的標(biāo)志物，是一種抗原糖蛋白，對漿液性卵巢癌診斷靈敏度極高[19-20]；CEA屬于廣譜腫瘤標(biāo)志物，于卵巢癌早期即可見升高。從本研究結(jié)果可見，兩組患者治療后各標(biāo)志物水平均較治療前下降，且觀察組患者治療后 CD133、DDX4、CA153、CA19-9、CA125和CEA水平均明顯低于對照組，表明聯(lián)合用藥可更有效地降低腫瘤標(biāo)志物水平，繼而控制腫瘤生長，提高療效。綜上所述，益氣養(yǎng)陰湯聯(lián)合貝伐珠單抗治療卵巢癌臨床效果顯著，可有效提高患者免疫功能，降低炎性反應(yīng)，控制VEGF表達(dá)，降低腫瘤標(biāo)志物水平，推薦臨床廣泛應(yīng)用。