卵巢癌患者外周血CK7mRNA、CXCL12檢測的臨床意義

劉金威　阮友琴　祝英杰

【摘要】 目的：探討外周血CK7mRNA、趨化因子CXCL12表達(dá)水平與卵巢癌的組織分級、病理分期及腹膜后淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移等的關(guān)系。方法：本次數(shù)據(jù)分析對象昆明醫(yī)科大學(xué)第三附屬醫(yī)院婦瘤科從2014年7月-2016年5月納入且收治的44例卵巢癌住院患者的外周血標(biāo)本，將其作為試驗(yàn)組，良性組為15例上皮性卵巢良性腫瘤患者外周血標(biāo)本，健康組為18例體檢健康女性外周血標(biāo)本。通過實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)檢測外周血中CK7mRNA的表達(dá)水平，采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)測定外周血中CXCL12的含量。結(jié)果：在試驗(yàn)組、健康組及良性組中外周血CK7mRNA的表達(dá)中，試驗(yàn)組最高，其次為良性組，健康組最低（P<0.05）;在試驗(yàn)組、健康組及良性組中外周血CXCL12檢測中，試驗(yàn)組最高，其次為良性組，健康組最低（P<0.05）。試驗(yàn)組腹膜后淋巴結(jié)有轉(zhuǎn)移的卵巢癌住院患者外周血CK7mRNA的表達(dá)高于無轉(zhuǎn)移患者，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），外周血CXCL12在病理分期Ⅲ+Ⅳ期、腹膜后淋巴結(jié)有轉(zhuǎn)移患者中表達(dá)較高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。CK7mRNA聯(lián)合CXCL12檢測在淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移中差異顯著（P<0.05）。卵巢癌患者外周血中CXCL12和CK7mRNA表達(dá)之間不存在相關(guān)性（r=0.222，P=0.148）。結(jié)論：在卵巢癌患者外周血中CK7mRNA及CXCL12表達(dá)對比健康女性、卵巢良性上皮性腫瘤患者顯著更高，且兩者之間極有可能對卵巢癌的發(fā)展和發(fā)生過程進(jìn)行參與。評估卵巢癌患者術(shù)前病情和腹膜后淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移預(yù)測中可以外周血檢測CK7mRNA和CXCL12指標(biāo)為參考依據(jù)。

【關(guān)鍵詞】 卵巢癌; 外周血; CK7mRNA; CXCL12

doi：10.14033/j.cnki.cfmr.2019.04.038 文獻(xiàn)標(biāo)識碼 B 文章編號 1674-6805（2019）04-00-03

在女性生殖系統(tǒng)惡性腫瘤中，卵巢惡性腫瘤是女性生殖系統(tǒng)惡性腫瘤中常見的一類惡性腫瘤，發(fā)病率較高，且惡性程度較大[1]。卵巢惡性腫瘤患者中大約有90%可能發(fā)生上皮性癌。上皮細(xì)胞中存在細(xì)胞角蛋白（CK）。健康人外周血不存在細(xì)胞角蛋白表達(dá)，如外周血存在陽性細(xì)胞角蛋白基因表達(dá)[2]，此時(shí)表示外周循環(huán)中已經(jīng)進(jìn)入惡性腫瘤細(xì)胞?；诖?，本文就對卵巢癌患者外周血CK7mRNA、CXCL12檢測的臨床意義進(jìn)行分析，具體報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

本次研究對象為昆明醫(yī)科大學(xué)第三附屬醫(yī)院婦瘤科2014年7月-2016年5月收治且研究的住院卵巢腫瘤患者的外周血標(biāo)本59例，最大年齡73歲，最小年齡14歲，平均（48.62±3.21）歲。卵巢腫瘤患者中良性患者15例，惡性患者44例;惡性患者臨床分期：Ⅰ期患者8例，Ⅱ期患者8例，Ⅲ期患者19例，Ⅳ期患者9例;惡性患者病理分級：5例高分化，6例中分化，33例低分化。卵巢惡性腫瘤患者中有28例存在淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移，

16例無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移。收集2014年7月-2016年5月18例體檢健康女性志愿者外周血標(biāo)本為對照組，最大年齡50歲，最小年齡18歲，平均（40.21±6.211）歲。

1.2 方法

1.2.1 試劑 選取北京天根生化科技有限公司研發(fā)且提供的新鮮血總RNA提取試劑盒，美國BIO-RAD公司研發(fā)且提供的q PCR試劑盒和c DNA合成試劑盒。光晟生物科技股份有限公司研發(fā)且提供的人SDF-1α ELISA試劑盒。

1.2.2 檢測CK7mRNA及CXCL12 實(shí)施外周血總RNA的提取及逆轉(zhuǎn)錄;q PCR采用15 μl的反應(yīng)體系進(jìn)行q PCR檢測，在美國ABI-7500實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀上進(jìn)行擴(kuò)增及檢測，其反應(yīng)條件為：95 ℃預(yù)變性3 min，95 ℃變性15 s，60 ℃退火及延伸30 s，40個(gè)循環(huán)進(jìn)行。實(shí)施CXCL12的檢測：使用人SDF-1α ELISA試劑盒對血清進(jìn)行酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)（ELISA）[3-4]，全部操作嚴(yán)格按照說明書要求進(jìn)行，操作結(jié)束時(shí)觀察顏色變化，試驗(yàn)完畢后采用全波長酶標(biāo)儀進(jìn)行測定。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

使用SPSS 17.0軟件處理59例住院卵巢腫瘤患者的外周血標(biāo)本和18例體檢健康女性志愿者外周血標(biāo)本涉及的數(shù)據(jù)，計(jì)量資料以（x±s）表示，采用卡方t檢驗(yàn)，多組比較采用方差分析，多組間兩兩比較采用LSD-t進(jìn)行檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料以率（%）表示，采用字2檢驗(yàn)，采用Spearman等級相關(guān)分析兩變量間相關(guān)性，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 三組CK7mRNA、CXCL12指標(biāo)在外周血中的表達(dá)情況對比

在試驗(yàn)組、健康組及良性組中外周血CK7mRNA的表達(dá)中，試驗(yàn)組最高，其次為良性組，健康組最低（P<0.05）;在試驗(yàn)組、健康組以及良性組中外周血CXCL12檢測濃度中，試驗(yàn)組最高，其次為良性組，健康組最低（P<0.05），見表1。

2.2 卵巢癌臨床病理特征和外周血CXCL12、CK7mRNA表達(dá)

試驗(yàn)組腹膜后淋巴結(jié)有轉(zhuǎn)移的卵巢癌住院患者外周血CK7mRNA的表達(dá)高于無轉(zhuǎn)移患者，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），外周血CXCL12在病理分期Ⅲ+Ⅳ期、腹膜后淋巴結(jié)有轉(zhuǎn)移患者中表達(dá)較高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），見表2。

2.3 CXCL12和CK7mRNA之間的相關(guān)性

卵巢癌患者外周血中CXCL12和CK7mRNA表達(dá)之間不存在相關(guān)性（r=0.222，P=0.148）。

2.4 CK7mRNA聯(lián)合CXCL12檢測結(jié)果與卵巢癌臨床病理特征

試驗(yàn)組卵巢癌患者CXCL12檢測結(jié)果中位數(shù)（3.25）和CK7mRNA表達(dá)水平中位數(shù)（8.85）設(shè)置為CUT OFF值，聯(lián)合CK7mRNA與CXCL12檢測結(jié)果對比CUT OFF值視更高顯示為陽性，對比CUT OFF值更低顯示為陰性。CK7mRNA聯(lián)合CXCL12檢測在淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移中差異顯著（P<0.05），見表3。