ELISA法在診斷梅毒螺旋體感染中的臨床檢驗(yàn)作用分析

張春英

【摘要】 目的 研究酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）法在診斷梅毒螺旋體感染中的臨床價(jià)值。方法 45例梅毒螺旋體感染患者， 均實(shí)施甲苯胺紅不加熱血清試驗(yàn)（TRUST）和ELISA檢測(cè)， 比較兩種檢驗(yàn)方法的診斷準(zhǔn)確率。結(jié)果 45例患者經(jīng)TRUST法檢驗(yàn)：陽(yáng)性38例， 陰性7例， 敏感性為84.44%（38/45）， 診斷準(zhǔn)確率為84.44%（38/45）;經(jīng)ELISA法檢驗(yàn)：陽(yáng)性44例， 陰性1例， 敏感性為97.78%（44/45）， 診斷準(zhǔn)確率為97.78%（44/45）。ELISA法的敏感性及診斷準(zhǔn)確率明顯高于TRUST法， 差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=4.9390、4.9390， P=0.0262、0.0262<0.05）。結(jié)論 ELISA法檢驗(yàn)應(yīng)用于診斷梅毒螺旋體感染中具有顯著作用， 可將診斷準(zhǔn)確率顯著提升。

【關(guān)鍵詞】 酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法;梅毒螺旋體感染;臨床檢驗(yàn)

DOI：10.14163/j.cnki.11-5547/r.2019.07.027

梅毒屬于性傳播疾病的關(guān)鍵因素， 梅毒螺旋體即為主要病原體， 包括性梅毒、胎傳梅毒2種傳染方式， 透明狀和不易著色是主要臨床檢測(cè)特點(diǎn)， 隨著近年來(lái)人口流動(dòng)量的不斷增加促使梅毒螺旋體感染發(fā)生率不斷提升[1]。血清學(xué)檢驗(yàn)是臨床對(duì)梅毒診斷的常見(jiàn)實(shí)驗(yàn)室方法， 包括梅毒螺旋體抗原血清試驗(yàn)以及非梅毒螺旋體抗原血清試驗(yàn)。非梅毒螺旋體抗原血清試驗(yàn)主要有不加熱血清反應(yīng)素試驗(yàn)、TRUST等， 具有較高敏感性， 存在假陰性率、假陽(yáng)性率， 對(duì)于初步篩查大樣本比較適用。ELISA是一種梅毒螺旋抗原血清試驗(yàn)， 存在較強(qiáng)敏感性， 是梅毒臨床確診的關(guān)鍵試驗(yàn)， 操作方便以及全自動(dòng)化等臨床優(yōu)勢(shì)， 對(duì)于檢測(cè)大樣本十分適合。本文研究ELISA法在診斷梅毒螺旋體感染中的臨床價(jià)值， 現(xiàn)報(bào)告如下。

1 資料與方法

1. 1 一般資料 選取2017年7月～2018年7月本院收治的45例梅毒螺旋體感染患者作為研究對(duì)象， 女22例， 男23例， 年齡最大60歲， 最小20歲， 平均年齡（45.23±4.94）歲。納入標(biāo)準(zhǔn)：滿(mǎn)足臨床判斷梅毒螺旋體感染疾病的標(biāo)準(zhǔn)， 呈現(xiàn)出不同程度的硬下疳， 且陰莖與陰道附近存在丘疹或者斑塊， 腹股溝存在淋巴結(jié)腫大?；颊呔私獗敬瓮鈺?shū)治療內(nèi)容以后自愿簽署， 并且獲得本院相關(guān)倫理委員會(huì)的認(rèn)可。排除標(biāo)準(zhǔn)：存在惡性腫瘤患者、代謝系統(tǒng)障礙患者、血液系統(tǒng)疾病患者、重要器官器質(zhì)性疾病患者、內(nèi)分泌障礙患者、不配合治療患者。

1. 2 方法 患者均實(shí)施TRUST和ELISA檢測(cè)， 選擇奧地利TECAN公司研發(fā)團(tuán)提供的全自動(dòng)酶標(biāo)儀、美國(guó)BIO-RAD洗板機(jī)以及恒溫水浴箱、廣州中山生物公司研發(fā)以及提供的ELISA試劑盒、上海榮盛生物技術(shù)有限公司研發(fā)以及提供的TRUST試劑盒。采集3～5 ml血清樣本放置到試管中， 予以血清分離， 依據(jù)試劑盒上操作說(shuō)明開(kāi)展規(guī)范TRUST、ELISA檢測(cè)。

1. 3 觀察指標(biāo) 比較兩種檢驗(yàn)方法的診斷準(zhǔn)確率。

1. 4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS19.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。計(jì)數(shù)資料以率（%）表示， 采用χ2檢驗(yàn)。P<0.05表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

45例患者經(jīng)TRUST法檢驗(yàn)：陽(yáng)性38例， 陰性7例， 敏感性為84.44%（38/45）， 診斷準(zhǔn)確率為84.44%（38/45）;經(jīng)ELISA法檢驗(yàn)：陽(yáng)性44例， 陰性1例， 敏感性為97.78%（44/45）， 診斷準(zhǔn)確率為97.78%（44/45）。ELISA法的敏感性及診斷準(zhǔn)確率明顯高于TRUST法， 差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=4.9390、4.9390， P=0.0262、0.0262<0.05）。

3 討論

梅毒一般是因梅毒螺旋體導(dǎo)致的， 屬于常見(jiàn)的一種性傳播疾病， 發(fā)病率較高， 梅毒主要包括Ⅰ期、Ⅱ期、Ⅲ期三個(gè)階段， 早期=Ⅰ期+Ⅱ期， 存在較小的傳染性， 也很少破壞患者機(jī)體[2， 3]。Ⅲ期屬于晚期梅毒， 存在較大傳染性， 并且具有較長(zhǎng)病程時(shí)間， 增加破壞機(jī)體的程度， 目前臨床上還沒(méi)有獲得明確的梅毒發(fā)病機(jī)制， 但如果發(fā)生梅毒螺旋體感染， 可能對(duì)其生存質(zhì)量帶來(lái)嚴(yán)重威脅， 甚至產(chǎn)生嚴(yán)重的心理影響， 所以， 早期診斷梅毒螺旋體感染患者十分重要。梅毒螺旋體抗原血清試驗(yàn)在目前主要有熒光梅毒螺旋體吸收試驗(yàn)、梅毒螺旋體血球凝集試驗(yàn)、梅毒螺旋體抗原血清試驗(yàn)、梅毒螺旋體明膠顆粒凝集試驗(yàn)等[4]。

TRUST實(shí)際上是一種非梅毒螺旋體抗原血清檢驗(yàn)方法， 在篩查梅毒和觀察療效中得到廣泛應(yīng)用， 因TRUST檢驗(yàn)存在沒(méi)有特異性的抗原， 因此， 在對(duì)梅毒螺旋體感染患者檢驗(yàn)中不少非梅毒患者也可能發(fā)生反應(yīng)素[5]。近年來(lái)ELISA法成為最廣泛應(yīng)用的酶免疫測(cè)定技術(shù)， 是在固相載體表面吸附已知的抗體或者抗原， 在固相表面通過(guò)酶對(duì)抗原抗體反應(yīng)進(jìn)行標(biāo)記， 依據(jù)洗滌法將液相中游離成分進(jìn)行有效洗除， 所以， 采取底物顏色變化情況可對(duì)是否存在免疫反應(yīng)進(jìn)行有效判斷， 特別是不同的顏色變化和標(biāo)本中抗原或者抗體量呈正相關(guān)。ELISA法檢驗(yàn)實(shí)際上是依據(jù)酶化學(xué)反應(yīng)的敏感性結(jié)合抗原抗體反應(yīng)的特異性， 促使形成敏感且存在特異性的一種臨床檢測(cè)方法[6-8]。此外， ELISA法檢驗(yàn)也存在范圍廣、操作簡(jiǎn)單、不需特殊設(shè)備等臨床特點(diǎn)， 有利于提升梅毒螺旋體感染臨床診斷準(zhǔn)確率， 但也可能因操作人員影響， 因此存在假陰性和假陽(yáng)性， 影響診斷結(jié)果[9-11]。

本研究結(jié)果顯示， 45例患者經(jīng)TRUST法檢驗(yàn)：陽(yáng)性38例， 陰性7例， 敏感性為84.44%（38/45）， 診斷準(zhǔn)確率為84.44%（38/45）;經(jīng)ELISA法檢驗(yàn)：陽(yáng)性44例， 陰性1例， 敏感性為97.78%（44/45）， 診斷準(zhǔn)確率為97.78%（44/45）。ELISA法的敏感性及診斷準(zhǔn)確率明顯高于TRUST法， 差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=4.9390、4.9390， P=0.0262、0.0262<0.05）。證實(shí)ELISA法在臨床診斷梅毒螺旋體感染過(guò)程中存在較強(qiáng)敏感性， 是因ELISA主要應(yīng)用酶， 其是一種有機(jī)催化劑， 少量酶可能產(chǎn)生較大催化反應(yīng)， 方便顯色觀察， 并且ELISA法可對(duì)在亞細(xì)胞或者細(xì)胞水平上示蹤抗體以及抗原位置進(jìn)行顯示， 方便開(kāi)展定量分析， 進(jìn)而有利于提升臨床高敏感性。此外， 相關(guān)研究顯示， ELISA法對(duì)梅毒螺旋體感染臨床檢驗(yàn)中較強(qiáng)的特異性強(qiáng)， 是因抗原抗體只和存在抗體抗原的結(jié)合位點(diǎn)以及抗原的決定簇進(jìn)行結(jié)合， 可對(duì)化學(xué)結(jié)構(gòu)以及空間結(jié)構(gòu)進(jìn)行有效利用， 提升抗原抗體反應(yīng)檢查的特異性， 且臨床操作簡(jiǎn)單， 實(shí)際應(yīng)用過(guò)程中不需要應(yīng)用特殊設(shè)備實(shí)施相關(guān)輔助檢查， 存在比較廣泛的臨床應(yīng)用范圍。

綜上所述， ELISA法檢驗(yàn)應(yīng)用于診斷梅毒螺旋體感染中具有顯著作用， 可將診斷準(zhǔn)確率顯著提升。

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[收稿日期：2018-09-29]