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    基于電噴霧-四極桿-飛行時(shí)間質(zhì)譜的神經(jīng)節(jié)苷脂的結(jié)構(gòu)解析

    2019-07-01 10:17:32張華林郭志謀王聯(lián)芝金高娃鄒麗紅呂園園馬明輝閆競(jìng)宇段正超梁鑫淼
    分析化學(xué) 2019年6期
    關(guān)鍵詞:神經(jīng)節(jié)苷脂

    張華林 郭志謀 王聯(lián)芝 金高娃 鄒麗紅 呂園園 馬明輝 閆競(jìng)宇 段正超 梁鑫淼

    摘?要?神經(jīng)節(jié)苷脂(Ganglioside)是一種含有唾液酸的鞘糖脂化合物,是脊椎動(dòng)物細(xì)胞膜的天然成份,具有廣泛的生理功能。對(duì)神經(jīng)節(jié)苷脂進(jìn)行結(jié)構(gòu)鑒定,有助于深入了解藥物的組成,提高藥物的品質(zhì),但由于神經(jīng)節(jié)苷脂結(jié)構(gòu)復(fù)雜,異構(gòu)體眾多,質(zhì)譜規(guī)律變得多樣且復(fù)雜。本研究建立了一種利用電噴霧-四極桿-飛行時(shí)間質(zhì)譜的(ESI-Q-TOF-MS)解析神經(jīng)節(jié)苷脂結(jié)構(gòu)的方法。通過兩個(gè)神經(jīng)節(jié)苷脂對(duì)照品,優(yōu)化質(zhì)譜參數(shù)并總結(jié)質(zhì)譜規(guī)律,建立質(zhì)譜方法為:正離子模式; 3500 V毛細(xì)管電壓; 200 V Fragmentor電壓; 用40 eV的碰撞能獲得糖鏈的碎片結(jié)構(gòu), 用80 eV的碰撞能獲得神經(jīng)酰胺的碎片結(jié)構(gòu)。將本方法應(yīng)用于制備的9個(gè)神經(jīng)節(jié)苷脂的結(jié)構(gòu)解析中,通過與對(duì)照品分子量對(duì)比,對(duì)樣品進(jìn)行簡(jiǎn)單的歸屬和分類,再根據(jù)樣品的二級(jí)質(zhì)譜中的特征碎片進(jìn)行詳細(xì)的結(jié)構(gòu)解析。本研究結(jié)果表明,本方法可用于各類神經(jīng)節(jié)苷脂的質(zhì)譜鑒定中,為更復(fù)雜的神經(jīng)節(jié)苷脂質(zhì)譜解析奠定了基礎(chǔ)。

    關(guān)鍵詞?神經(jīng)節(jié)苷脂; 電噴霧-四極桿-飛行時(shí)間質(zhì)譜; 結(jié)構(gòu)解析

    1?引 言

    神經(jīng)節(jié)苷脂(Ganglioside)是一類含有唾液酸的鞘糖脂化合物,最初是由E.Klenk在患家族黑蒙性癡呆?。═ay-Sachs)的幼兒大腦中發(fā)現(xiàn)。由于在腦灰質(zhì)細(xì)胞中含量最高,于是將這類含唾液酸的鞘糖脂命名為神經(jīng)節(jié)苷脂。神經(jīng)節(jié)苷脂在正常細(xì)胞的生長(zhǎng)、分化、調(diào)節(jié)及信息傳遞過程中發(fā)揮著重要作用,尤其是在神經(jīng)元的成熟和損傷神經(jīng)的修復(fù)再生過程中的作用備受關(guān)注,同時(shí),神經(jīng)節(jié)苷脂在臨床上也具有很高的價(jià)值[1~5]?,如治療帕金森病、阿爾茲海默病、亨廷頓病等神經(jīng)性疾病。神經(jīng)節(jié)苷脂由親水性的寡糖鏈部分和親脂性的神經(jīng)酰胺(Ceramide,Cer)組成。寡糖鏈的單糖種類常包括D-葡萄糖(Glucose,Glc)、D-半乳糖(Galactose,Gal)、N-乙酰氨基半乳糖(N-acetylgalactosamine, GalNAc)、巖藻糖(Fucose,F(xiàn)uc)和唾液酸(N-Acetylneuraminic acid,NeuAc)。神經(jīng)酰胺結(jié)構(gòu)中包含一條脂肪酸鏈(Fatty acid chain)和一條鞘氨醇鏈(Sphingosine)。不同的單糖組成、數(shù)目和神經(jīng)酰胺鏈的長(zhǎng)度組成了一系列神經(jīng)節(jié)苷脂類化合物,據(jù)報(bào)道,在人腦病變組織中已發(fā)現(xiàn)和鑒定了73種神經(jīng)節(jié)苷脂[6]。為更加簡(jiǎn)單表述這類物質(zhì),Svennerhnolm創(chuàng)立了一個(gè)通俗命名規(guī)則[7]。G代表神經(jīng)節(jié)苷脂,大寫A、M、D、T、Q、P、H和S分別表示所含的0~7個(gè)唾液酸基團(tuán)數(shù)目,數(shù)字為5與糖基數(shù)之差,小寫字母a,b,c表示唾液酸不同的連接位置。神經(jīng)酰胺的結(jié)構(gòu)通常在糖鏈后的括號(hào)內(nèi)注明,如GM1(d 18∶1/18∶0),字母d表示在神經(jīng)酰胺中有2個(gè)羥基,18∶1描述的是鞘氨醇的結(jié)構(gòu),表示在鞘氨醇中有18個(gè)碳原子和1個(gè)雙鍵,18∶0是脂肪酸鏈的結(jié)構(gòu),表示在脂肪酸鏈中有18個(gè)碳原子且沒有雙鍵。本研究為了方便表示化合物結(jié)構(gòu),神經(jīng)酰胺部分直接以該部分的分子量表示,如GM1(565)表示該單唾液酸四己糖神經(jīng)節(jié)苷脂的神經(jīng)酰胺部分的分子量為565。

    電噴霧-四極桿-飛行時(shí)間質(zhì)譜(Electrospray ionization-quadrupole-time of flight mass spectrome,ESI-Q-TOF-MS)具有分辨率高、采樣速度快的優(yōu)點(diǎn),全掃描方式檢測(cè)的離子質(zhì)量準(zhǔn)確度比一般的質(zhì)譜高100倍以上[8],在推斷化合物結(jié)構(gòu)方面具有無可比擬的優(yōu)勢(shì),并且能選定一級(jí)質(zhì)譜中的目標(biāo)物進(jìn)行二級(jí)質(zhì)譜分析,更有利于解析化合物的結(jié)構(gòu)。目前已有許多采用液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用的方法分析神經(jīng)節(jié)苷脂的報(bào)道[9~21]。2010年,Zarei等[10]利用納升高效液相色譜(nanoHPLC)和電噴霧-四極桿-飛行時(shí)間質(zhì)譜(ESI-QTOF/MS)在線結(jié)合,用于分析YAC-1淋巴瘤細(xì)胞單唾液酸神經(jīng)節(jié)苷脂,發(fā)現(xiàn)YAC-1細(xì)胞系可表達(dá)GM1b和GalNAc-GM1b類型的神經(jīng)節(jié)苷脂。2012年,Lee等 [11]利用納升液相色譜-芯片/質(zhì)譜(nano-HPLCchip Q-TOF/MS)建立了極性脂質(zhì)分析方法,分析了小鼠腦的極性脂質(zhì),發(fā)現(xiàn)其含有17種神經(jīng)節(jié)苷脂和13種硫苷脂。2017年,Hajek等 [22]將親水相互作用液相色譜(HILIC)與負(fù)離子電噴霧電離串聯(lián)質(zhì)譜(ESI-MS/MS)方法相結(jié)合,用于豬腦、人腎、肺、血漿和紅細(xì)胞中的神經(jīng)節(jié)苷脂的分析,鑒定了145種神經(jīng)節(jié)苷脂,該方法具有通量高、靈敏度高等優(yōu)點(diǎn)。盡管這些研究在神經(jīng)節(jié)苷脂分析中取得了較好的進(jìn)展,但多數(shù)研究集中在利用該方法對(duì)動(dòng)物或人的器官和組織中神經(jīng)節(jié)苷脂的輪廓分析,利用Q-TOF方法研究神經(jīng)節(jié)苷脂的質(zhì)譜碎裂規(guī)律的工作未見文獻(xiàn)報(bào)道。本研究利用兩個(gè)已知結(jié)構(gòu)的神經(jīng)節(jié)苷脂對(duì)照品進(jìn)行質(zhì)譜條件的優(yōu)化及特征碎片的歸屬研究,在此基礎(chǔ)上,對(duì)制備得到的一系列的神經(jīng)節(jié)苷脂進(jìn)行質(zhì)譜結(jié)構(gòu)解析和鑒定,最后對(duì)神經(jīng)節(jié)苷脂的斷裂規(guī)律進(jìn)行了總結(jié),為解析復(fù)雜的神經(jīng)節(jié)苷脂結(jié)構(gòu)提供了理論依據(jù)。

    2?實(shí)驗(yàn)部分

    2.1?儀器與試劑

    Agilent 1290 infinity和6540 UHD Accurate-Mass Q-TOF LC/MS(Agilent Technologies公司),質(zhì)譜數(shù)據(jù)分析軟件采用Agilent Mass Hunter Qualitative Analysis B.04.00; XS105天平(Dual Range公司)。

    甲醇(色譜純,Merck公司); 乙腈(色譜純,Sigma公司); 氯仿(分析純,天津市凱信化學(xué)工業(yè)有限公司); 神經(jīng)節(jié)苷脂對(duì)照品GM1(d18∶1/18∶0)和GM1(d18∶1/20∶0)由齊魯制藥有限公司提供,純度≥99%; 其余神經(jīng)節(jié)苷脂樣品由實(shí)驗(yàn)室自制,純度≥98%。實(shí)驗(yàn)用水為Milli-Q超純水。

    2.2?實(shí)驗(yàn)方法

    準(zhǔn)確稱取各單體1 mg, 溶于1 mL氯仿-甲醇-水(25∶25∶8, V/V)中,取出100 μL,再用900 μL氯仿-甲醇-水(25∶25∶8, V/V)稀釋, 配制成100 μg/mL的溶液。(1)液相色譜條件?流動(dòng)相為0.1%甲酸-乙腈(50∶50,V/V),流速0.2 mL/min,進(jìn)樣量為0.5 μL(無色譜柱,二通連接)。(2)質(zhì)譜條件?正離子模式,毛細(xì)管電壓為3500 V,干燥氣溫度為350℃, 氣體流速為8.0 L/min。Fragmentor電壓參數(shù)的設(shè)置參見結(jié)果與討論部分。一級(jí)質(zhì)譜掃描范圍為m/z 300~2000,二級(jí)質(zhì)譜的掃描范圍為m/z 100~2000。在開展質(zhì)譜的二級(jí)碎裂時(shí),手動(dòng)設(shè)定一級(jí)質(zhì)譜獲得的豐度最高的質(zhì)荷比為前體離子,通過改變不同的碰撞能進(jìn)行譜圖優(yōu)化。

    3?結(jié)果與討論

    3.1?神經(jīng)節(jié)苷脂分子量的測(cè)定及結(jié)構(gòu)的簡(jiǎn)單歸屬

    神經(jīng)節(jié)苷脂結(jié)構(gòu)復(fù)雜,結(jié)構(gòu)相似物多,分離純化存在較大的挑戰(zhàn),本實(shí)驗(yàn)室在前期工作中通過多維制備液相色譜從豬腦粗提物中分離得到系列單體化合物。本研究選擇其中具有代表性的9種化合物,利用一級(jí)質(zhì)譜對(duì)其進(jìn)行分子量測(cè)定,通過與對(duì)照品GM1(565)和GM1(593)分子量比對(duì),根據(jù)分子量的變化進(jìn)行簡(jiǎn)單的歸屬和分類。如樣品的分子量與對(duì)照品分子量差值為291及291的倍數(shù),認(rèn)為是唾液酸數(shù)目的增減; 與對(duì)照品分子量相差146及146的倍數(shù),認(rèn)為是巖藻糖數(shù)目的增減; 與對(duì)照品的分子量相差14及14的倍數(shù),則可能是脂鏈部分發(fā)生了變化。表1給出了本研究涉及的11種神經(jīng)節(jié)苷脂化合物的信息。化合物1和2分別為兩個(gè)單唾液酸四己糖神經(jīng)節(jié)苷脂對(duì)照品GM1(565)和GM1(593)?;衔?~7與對(duì)照品相比,分子量的差異大,且除化合物3外都是唾液酸數(shù)目的增減,可根據(jù)之前的命名規(guī)則將其直接歸屬,其中化合物5和6是同分異構(gòu)體,分別用后綴區(qū)分兩種化合物?;衔?與GM1(593)相比,相差146,推測(cè)是糖鏈部分增加了一個(gè)巖藻糖?;衔?~11與對(duì)照品分子量差異小,不可能是糖鏈的結(jié)構(gòu)差異引起的,因此推測(cè)其神經(jīng)酰胺部分發(fā)生了變化。

    3.2?質(zhì)譜條件的優(yōu)化

    3.2.1?優(yōu)化質(zhì)譜離子模式?在質(zhì)譜分析中,尤其是二級(jí)質(zhì)譜,質(zhì)譜條件的設(shè)置對(duì)于獲取特征碎片信息具有重要影響,因此針對(duì)所使用的質(zhì)譜特點(diǎn),優(yōu)化質(zhì)譜參數(shù),獲得更多的碎片信息是本研究?jī)?yōu)先考慮的問題。本研究采用Agilent Technologies 6540質(zhì)譜儀,對(duì)毛細(xì)管電壓、離子模式、碎裂電壓和碰撞能等重要參數(shù)進(jìn)行優(yōu)化。

    首先對(duì)質(zhì)譜離子模式進(jìn)行優(yōu)化,結(jié)果見電子版文后支持信息圖S1A和S1B,負(fù)離子模式獲得的離子碎片明顯少于正離子模式獲得的碎片??紤]到碰撞能的影響,加大碰撞能到80 eV(電子版文后支持信息圖S1C和S1D),正離子模式下所獲得的離子碎片明顯比負(fù)離子模式下獲得的離子碎片多。由此確定,在正離子模式下會(huì)獲得更多的離子碎片峰,更有利于對(duì)神經(jīng)節(jié)苷脂的結(jié)構(gòu)解析。

    3.2.2?優(yōu)化碎裂電壓?考察了GM1(565)在不同的碎裂電壓下的電離和碎裂情況,結(jié)果如電子版文后支持信息圖S2所示,在正離子模式、毛細(xì)管電壓為3500 V、碰撞能為40 eV,以及進(jìn)樣量一致的條件下,碎裂電壓為30、50和100 V時(shí),母離子m/z 1568.9(加鈉峰)的豐度都偏低; 碎裂電壓為150、175和200 V時(shí),母離子豐度比較適中,且差異很小。本實(shí)驗(yàn)選擇碎裂電壓為200 V的條件下,對(duì)神經(jīng)節(jié)苷脂進(jìn)行裂解。

    3.2.3?碰撞能的優(yōu)化?二級(jí)質(zhì)譜是通過選擇特定質(zhì)荷比(m/z)的母離子,在儀器中利用誘導(dǎo)碰撞電壓(CID)進(jìn)行碎裂,得到二級(jí)質(zhì)譜圖。碰撞電壓過小,會(huì)使母離子斷裂不夠明顯,獲得的碎片少、豐度低,影響化合物推斷; 碰撞電壓過大,碎裂過于嚴(yán)重,也不利于解析結(jié)構(gòu)。神經(jīng)節(jié)苷脂結(jié)構(gòu)中包含易發(fā)生碎裂的糖鏈結(jié)構(gòu)和不易碎裂的神經(jīng)酰胺結(jié)構(gòu),希望通過調(diào)整碰撞能既可獲得糖鏈的結(jié)構(gòu)也可獲得神經(jīng)酰胺結(jié)構(gòu),因此,對(duì)碰撞能進(jìn)行了詳細(xì)的優(yōu)化。

    為了觀測(cè)到神經(jīng)節(jié)苷脂中糖鏈的結(jié)構(gòu)組成,采用對(duì)照品GM1(565)在正離子模式、毛細(xì)管電壓為3500 V、碎裂電壓為200 V、進(jìn)樣量一致的條件下,分別考察碰撞能為20、30、40 和50 eV時(shí)糖鏈碎片的豐度,結(jié)果如電子版文后支持信息圖S3所示。在碰撞能為20 eV和30 eV時(shí),母離子m/z 1568.9(加鈉峰)豐度較高,其余各碎片離子豐度較低; 當(dāng)碰撞能增加至40和50 eV時(shí),母離子m/z 1568.9(加鈉峰)豐度顯著降低,故本研究選取40 eV的碰撞能對(duì)糖鏈進(jìn)行檢測(cè)。神經(jīng)節(jié)苷脂中不易碎裂的神經(jīng)酰胺結(jié)構(gòu)需要在較高的碰撞能下才能裂解[26],分別考察碰撞能為60、70、80和90 eV時(shí)的結(jié)果(如電子版文后支持信息圖S4所示),神經(jīng)酰胺(m/z 548)的豐度隨著碰撞能增加,碎片離子m/z 264的豐度逐漸增加,m/z 548的豐度逐漸降低,故最終選取80 eV作為碎裂神經(jīng)酰胺的碰撞能。

    對(duì)質(zhì)譜各參數(shù)影響的考察后,確定測(cè)定神經(jīng)節(jié)苷脂的質(zhì)譜條件為正離子模式,毛細(xì)管電壓為3500 V, 碎裂電壓為200 V,用碰撞能40 eV的測(cè)定糖鏈的結(jié)構(gòu),用80 eV的碰撞能測(cè)定神經(jīng)酰胺的結(jié)構(gòu)。

    3.3?對(duì)照品質(zhì)譜碎片歸屬

    3.3.1?GM1(565)質(zhì)譜碎片歸屬?由神經(jīng)節(jié)苷脂的結(jié)構(gòu)可知,GM1的糖鏈部分含1個(gè)唾液酸和4個(gè)單糖組成。

    為方便進(jìn)行質(zhì)譜推斷,圖1標(biāo)識(shí)了對(duì)照品GM1(565)(即GM1(d18∶1/18∶0))結(jié)構(gòu)中各組成部分的分子量[9]。在優(yōu)化條件下,GM1(565)在40和80 eV碰撞能下的實(shí)驗(yàn)譜圖見圖2。在40 eV碰撞能下(圖2A),可依次看到分子離子峰、失掉唾液酸和糖單元的峰及神經(jīng)酰胺失水峰等,這些特征碎片很好的展示了糖鏈結(jié)構(gòu)。在80 eV碰撞能下(圖2B),除糖鏈部分的結(jié)構(gòu)外, 有個(gè)較為明顯的碎片峰為m/z 264, 通過查閱文獻(xiàn)[24,25],其形成與鞘氨醇結(jié)構(gòu)有關(guān)(表2中R所示),通過其碎片可推測(cè)出神經(jīng)酰胺的結(jié)構(gòu)。表2詳細(xì)歸屬了GM1(565)在優(yōu)化質(zhì)譜條件下產(chǎn)生的碎片結(jié)構(gòu)。

    3.3.2?GM1(593)質(zhì)譜碎片歸屬?為進(jìn)一步考察神經(jīng)節(jié)苷脂在此條件下的裂解規(guī)律,再次用另一個(gè)對(duì)照品GM1(593)進(jìn)行驗(yàn)證。圖S5A顯示,在40 eV碰撞能下,GM1(593)譜圖與GM1(565)譜圖一致,說明二者都含有單唾液酸四己糖結(jié)構(gòu)。圖S5B中清晰可見m/z 264峰,說明神經(jīng)酰胺中鞘氨醇的結(jié)構(gòu)兩個(gè)對(duì)照品是一致的,主要差異來源于脂肪酸鏈的不同,與GM1(565)相比,GM1(593)在脂肪酸鏈上有兩個(gè)碳的延長(zhǎng),其余結(jié)構(gòu)都一致。推測(cè)結(jié)果與GM1(593)的實(shí)際結(jié)構(gòu)完全一致,表明本方法可用于神經(jīng)節(jié)苷脂類物質(zhì)的結(jié)構(gòu)推測(cè)。電子版文后支持信息表S1對(duì)GM1(593)的主要碎片進(jìn)行了歸屬。

    3.3.3?解析糖鏈發(fā)生變化的神經(jīng)節(jié)苷脂?通過一級(jí)質(zhì)譜可知,化合物3~7與GM1(593)相比,主要是糖鏈上發(fā)生了變化。以高碰撞能對(duì)這些化合物進(jìn)行裂解,發(fā)現(xiàn)其神經(jīng)酰胺產(chǎn)生的碎片結(jié)構(gòu)與GM1(593)一致,均為d18∶1/20∶0的結(jié)構(gòu),再一次證明主要差異來自于糖鏈部分。在優(yōu)化后的條件下,上述神經(jīng)節(jié)苷脂的糖鏈質(zhì)譜以及對(duì)照品GM1(593)糖鏈部分譜圖見圖3A。在糖鏈變化中比較容易推斷結(jié)構(gòu)的是糖數(shù)目和種類的變化,如GA1(593)(圖3B)和Fuc-GM1(593)(圖3C),較難推斷的是異構(gòu)體及多個(gè)唾液酸時(shí)唾液酸的連接位置和連接方式,在本研究中將重點(diǎn)討論異構(gòu)體GD1(593)-1(圖3D)和GD1(593)-2(圖3E)異構(gòu)體的結(jié)構(gòu)推斷,以及GT1(593)中3個(gè)唾液酸的連接位置和方式。對(duì)比圖3D和3E,譜圖差異性較大,在圖3E中m/z 583碎片是2個(gè)唾液酸通過α-2,8連接鍵首尾相連的特征碎片,說明GD1(593)-2中2個(gè)唾液酸是在連在一起的,結(jié)合其它碎片,可進(jìn)一步歸屬其為GD1b的糖鏈結(jié)構(gòu)。在圖3D中未發(fā)現(xiàn)m/z 583特征碎片,說明兩個(gè)唾液酸未連在一起,同時(shí)m/z 657顯示其中1個(gè)唾液酸與末端半乳糖相連,由此推斷出GD1(593)-1中糖鏈的結(jié)構(gòu)為GD1a。同理可以推測(cè)出GT1(593)中的糖鏈結(jié)構(gòu)為GT1b。上述糖鏈變化的神經(jīng)節(jié)苷脂糖鏈碎片歸屬及推測(cè)得到的化合物精確結(jié)構(gòu)見表3。

    3.4?解析神經(jīng)酰胺鏈發(fā)生變化的神經(jīng)節(jié)苷脂

    如前所述,推測(cè)神經(jīng)節(jié)苷脂化合物8~11與對(duì)照品相比主要是神經(jīng)酰胺部分發(fā)生了變化。通過標(biāo)準(zhǔn)品質(zhì)譜裂解規(guī)律可知,在80 eV的碰撞能下,可根據(jù)鞘氨醇鏈的特征碎片m/z 264推斷出神經(jīng)酰胺的結(jié)構(gòu)。4種化合物的該部分結(jié)構(gòu)的質(zhì)譜見圖4。在圖4A和4B中均可見特征碎片m/z 264,說明GM1(607)和GM1(621)的鞘氨醇鏈未變化,神經(jīng)酰胺結(jié)構(gòu)的改變主要發(fā)生在脂肪酸鏈上的碳數(shù)目的延長(zhǎng)上。在圖4C和4D中未見m/z 264特征碎片,但都有m/z 284的未知碎片,同時(shí),GM1(567)、GM1(595)與對(duì)照品GM1(565)、GM1(593)相比,分子量分別增加了2,推測(cè)其是鞘氨醇部分的雙鍵被還原。通過與文獻(xiàn)[26, 27]比對(duì),m/z 284確定為鞘氨醇鏈的雙鍵被還原后產(chǎn)生的特征碎片,具體結(jié)構(gòu)見圖4,表4列出了神經(jīng)節(jié)苷脂8~11的特征碎片的精確結(jié)構(gòu)。

    4?結(jié) 論

    建立了一種基于ESI-Q-TOF-MS的神經(jīng)節(jié)苷脂類化合物結(jié)構(gòu)解析方法。在優(yōu)化條件下獲取對(duì)照品的特征碎片及裂解規(guī)律,進(jìn)而將此裂解規(guī)律應(yīng)用到制備得到的9種神經(jīng)節(jié)苷脂的結(jié)構(gòu)解析中。制備得到的神經(jīng)節(jié)苷脂與對(duì)照品相比,有些化合物在糖鏈部分發(fā)生了變化,例如唾液酸和巖藻糖的個(gè)數(shù)、位置的變化,有些化合物在神經(jīng)酰胺鏈上發(fā)生了變化,如脂肪酸鏈碳數(shù)目和鞘氨醇鏈飽和程度,均具有一定的代表性。在對(duì)這些化合物質(zhì)譜解析中,發(fā)現(xiàn)和總結(jié)了不同類型神經(jīng)節(jié)苷脂獨(dú)特的結(jié)構(gòu)碎片,為更復(fù)雜的神經(jīng)節(jié)苷脂的質(zhì)譜解析奠定了基礎(chǔ)。

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