Ki-67在基底細(xì)胞樣型三陰乳腺癌中的表達(dá)及意義

程新宇 周成美 王露雪 王翠芳

(1沈陽醫(yī)學(xué)院附屬中心醫(yī)院病理科，遼寧 沈陽 110024；2錦州醫(yī)科大學(xué))

三陰乳腺癌(TNBC)是一種特殊的乳腺癌，組織學(xué)分級惡性程度高，內(nèi)分泌和靶向治療效果不明顯〔1〕，5年生存率低。隨著分子生物學(xué)技術(shù)飛速發(fā)展，乳腺癌基因表達(dá)譜提出了基底細(xì)胞樣型乳腺癌的概念，多數(shù)學(xué)者認(rèn)為其屬于三陰性〔即雌激素受體(ER)、孕激素受體(PR)和人表皮生長因子受體(HER)2均陰性〕并表達(dá)基底細(xì)胞免疫表型細(xì)胞角蛋白(CK)5/6和表皮生長因子受體(EGFR)等標(biāo)志物〔2〕。Ki-67是細(xì)胞增殖特異相關(guān)核抗原，臨床上常用作判斷腫瘤惡性程度及預(yù)后。本文研究基底或非基底細(xì)胞樣型TNBC中Ki-67的表達(dá)及意義。

1 材料與方法

1.1臨床資料 收集2015年1月至2017年12月沈陽醫(yī)學(xué)院附屬中心醫(yī)院病理科診斷為TNBC的病例42例，其中基底細(xì)胞樣型TNBC 24例為試驗組，非基底細(xì)胞樣型TNBC 18例為對照組。年齡30～78歲，中位年齡63歲；組織學(xué)分級：Ⅰ級1例，Ⅱ級19例，Ⅲ級22例；有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移16例，無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移26例?；颊呷颖厩熬葱蟹呕?。

1.2試劑 即用型鼠抗人單克隆抗體Ki-67，檸檬酸緩沖液pH6.0，鏈霉菌抗生物素蛋白-過氧化物酶鏈接法(SP)檢測試劑盒及二氨基聯(lián)苯胺(DAB)均購自福州邁新生物技術(shù)有限公司。

1.3方法 所有標(biāo)本用10%中性甲醛固定，常規(guī)石蠟包埋，4 μm連續(xù)切片，常規(guī)石蠟脫水，檸檬酸緩沖液pH6.0，抗原高壓修復(fù)后,采用免疫組織化學(xué)SP法操作，DAB顯色。選取臨床病理工作中已知陽性組織片作陽性對照，磷酸鹽緩沖液(PBS)(pH7.2)代替一抗作為陰性對照。

1.4結(jié)果判定 免疫組化片均由兩位經(jīng)驗豐富的病理科醫(yī)師采用雙盲法單獨(dú)判讀。Ki-67陽性判斷標(biāo)準(zhǔn)：陽性表達(dá)定位于腫瘤細(xì)胞核，高倍鏡下任意計數(shù)5個視野，每次選取200個細(xì)胞進(jìn)行觀察，按陽性細(xì)胞所占比例的平均值定義Ki-67陽性指數(shù)，≤10%為陰性(-)，10%～29%為低表達(dá)(+)，30%～49%為中表達(dá)()，≥50%為強(qiáng)陽性表達(dá)()〔3〕。為統(tǒng)計學(xué)方便，-～+為陰性，～為陽性。

1.5統(tǒng)計學(xué)處理 應(yīng)用SPSS17.0軟件行χ2檢驗。

2 結(jié) 果

2.1兩組臨床病理特征比較 兩組組織學(xué)分級比較有統(tǒng)計學(xué)差異(P<0.01)，其余臨床特征比較無顯著差異(P>0.05)。見表1。

表1 基底細(xì)胞樣型TNBC與臨床病理特征的相關(guān)性(n)

2.2形態(tài)學(xué)特征 基底細(xì)胞樣型TNBC多由實性巢狀、片狀的癌細(xì)胞組成，腫瘤呈推進(jìn)性生長；腫瘤周邊有不同程度淋巴細(xì)胞浸潤；伴有大片不規(guī)則壞死；核/質(zhì)比高，核呈卵圓形，核分裂多見。見圖1。

圖1 TNBC形態(tài)學(xué)特征(×100)

2.3Ki-67在兩組中的表達(dá) 實驗組Ki-67陽性表達(dá)率為95.8%(23/24)，明顯高于對照組的50.0%(9/18，χ2=11.911,P=0.001)。

3 討 論

乳腺癌是高度異質(zhì)性的惡性腫瘤?；准?xì)胞樣型是乳腺癌的一種特殊亞型，Banerjee等〔4〕研究顯示其ER、PR、HER2表達(dá)陰性，屬TNBC范疇。雖然二者組織形態(tài)、免疫表型及預(yù)后有諸多相似，但基底細(xì)胞樣型是一種同質(zhì)性腫瘤，并在三陰基礎(chǔ)上表達(dá)CK5/6或EGFR〔2〕。TNBC 臨床表現(xiàn)為發(fā)病年齡小，侵襲力強(qiáng)，無有效治療藥物導(dǎo)致預(yù)后較差。本研究結(jié)果說明基底細(xì)胞樣型較非基底細(xì)胞樣型惡性程度高，預(yù)后差；且基底細(xì)胞樣型較非基底細(xì)胞樣型患者發(fā)病年齡早，腫瘤體積大，惡性程度高，易發(fā)生遠(yuǎn)端轉(zhuǎn)移。Ki-67單克隆抗體在1983年由Gerdes等〔5〕發(fā)現(xiàn)，可特異性識別增殖細(xì)胞核抗原，是評價惡性腫瘤細(xì)胞增殖程度最可靠的指標(biāo)。有文獻(xiàn)報道〔6〕，Ki-67的表達(dá)陽性率與TNBC組織學(xué)分級相關(guān)，Ki-67高表達(dá)>35%能增加患者死亡風(fēng)險，與本研究結(jié)果相似。本研究結(jié)果提示Ki-67可能參與乳腺癌發(fā)生發(fā)展，在基底細(xì)胞樣型TNBC中增殖活性強(qiáng)，組織學(xué)分級高，細(xì)胞增生活躍，預(yù)后差；Ki-67高表達(dá)可能是一個不良的預(yù)后因素。