湘西地區(qū)獼猴桃細(xì)菌性潰瘍病抗性資源篩選及其抗性機(jī)理研究

崔麗紅 高小寧 張迪

摘要 由Pseudomonas syringae pv. actinidiae （Psa）引起的潰瘍病是獼猴桃生產(chǎn)中威脅最大的細(xì)菌性病害。種植抗病品種是防治獼猴桃潰瘍病最有效途徑，獼猴桃抗源是抗病育種的物質(zhì)基礎(chǔ)。本試驗(yàn)通過離體接種，在室內(nèi)評價了4個不同種的7個獼猴桃資源及品種對潰瘍病的抗性。結(jié)果表明：供試材料離體葉片、枝條接種潰瘍病菌后，其發(fā)病時間、病斑大小、發(fā)病率差異明顯。按病斑大小排序，其抗性強(qiáng)弱依次為毛花獼猴桃‘M9808>對萼獼猴桃‘S9801>美味獼猴桃‘M06>美味獼猴桃‘米良1號>中華獼猴桃‘Z12>中華獼猴桃‘東紅>中華獼猴桃‘紅陽（CK）。其中，毛花獼猴桃‘M9808抗病性最強(qiáng)，表現(xiàn)為發(fā)病最晚，離體葉片、枝條分別于接種后10 d、20 d發(fā)病，比對照推遲了8 d、10 d;病斑最小，為對照的1/25、1/11;發(fā)病率最低，為對照的1/28、1/10?？共⌒韵嚓P(guān)酶活性比對發(fā)現(xiàn)，不同材料的PAL、CAT、POD酶活性差異較大，抗性材料均高于感病材料，且峰值出現(xiàn)時間早于感病材料。其中，毛花獼猴桃‘M9808的PAL峰值最高，接種后5 d出現(xiàn)，比對照早10 d;CAT、POD峰值接種后10 d出現(xiàn)，比對照早5 d。說明毛花獼猴桃‘M9808對潰瘍病抗性最強(qiáng)，可作為今后獼猴桃抗病育種或抗性砧木的理想材料。這為獼猴桃抗病育種提供了理論依據(jù)，為獼猴桃潰瘍病的防控提供了參考。

關(guān)鍵詞 湘西地區(qū); 獼猴桃細(xì)菌性潰瘍病; 抗性資源

中圖分類號： S 435.482.2

文獻(xiàn)標(biāo)識碼： ADOI： 10.16688/j.zwbh.2018269

Abstract The bacterial canker caused by Pseudomonas syringae pv. actinidiae（Psa） is the most dangerous disease in the production of kiwifruit. Planting resistant varieties is the most effective way to control kiwifruit canker disease. In this study， we evaluated the resistance of seven kiwifruit resources and varieties by inoculation Psa in detached leaves and shoots. The results showed that the time of lesion appearance， lesion size， and incidence rate were significantly different in the tested materials. The tested kiwifruit resources and varieties were ranked according to the lesions size as follows： Actinidia eriantha ‘M9808>A.valvata ‘S9801>A.chinensis var. deliciosa ‘M06>A.chinensis var. deliciosa ‘Miliang 1>A.chinensis ‘Z12>A.chinensis ‘Donghong>A.chinensis ‘Hongyang（CK）. Among these resource varieties， A.eriantha ‘M9808 had the strongest resistance to Psa. The symptoms occurred on the 10th and 20th day after inoculation in detached leaves and shoot respectively， which was delayed by 8 days and 10 days compared with the CK. The lesions were 1/25 and 1/11 and the incidence rates were 1/28 and 1/10 the CK in detached leaves and shoots， respectively. Meanwhile， its enzyme activities of PAL， CAT， and POD were significantly higher in resistant materials than the susceptible materials. Among these tested materials， the PAL activities were the highest and reached the maximum value at 5 days after inoculation in A.eriantha ‘M9808， 10 days ahead of the CK， and the peak of CAT and POD activities appeared at 10 days after inoculation， 5 days ahead of the CK. Therefore， A.eriantha ‘M9808 can be used as an ideal material for resistance breeding or resistant rootstock of kiwifruit.

Key words Xiangxi area; kiwifruit bacterial canker; resistance resource

獼猴桃細(xì)菌性潰瘍病是由丁香假單胞菌獼猴桃致病變種Pseudomonas syringae pv. actinidiae （Psa）引起的毀滅性病害。自1984年在日本被發(fā)現(xiàn)[1]以來，現(xiàn)已有很多國家陸續(xù)發(fā)現(xiàn)該病，如意大利[2]、法國[3]、新西蘭[4]等。我國1985年首次在湖南東山峰農(nóng)場發(fā)現(xiàn)，3年間就致使該農(nóng)場栽培的約133.3 hm2獼猴桃果園被毀[5]。此后該病連年發(fā)生，全國很多獼猴桃產(chǎn)區(qū)感染此病，損失嚴(yán)重。2015年湘西永順、鳳凰獼猴桃主栽區(qū) ‘紅陽果園發(fā)病率高達(dá)95.32%[6]。2016年重慶5個獼猴桃主要生產(chǎn)區(qū)中，‘紅陽果園發(fā)病最重，有的果園發(fā)病率高達(dá)100%[7]。2017年四川14個獼猴桃主產(chǎn)區(qū)中，潰瘍病發(fā)病面積占種植面積的26%[8]。

植物抗病性是植物減輕或抑制病菌侵染的遺傳特性，現(xiàn)代農(nóng)業(yè)中，利用植物抗病性是防治病害的重要措施。Psa是獼猴桃生產(chǎn)中最重要的病害，其危害程度與獼猴桃品種有關(guān)。李淼等[9]、申哲等[10]、張慧琴等[11]田間調(diào)查發(fā)現(xiàn)，不同獼猴桃品種潰瘍病發(fā)病程度有明顯差異。林文力等[6]通過隨機(jī)抽樣調(diào)查發(fā)現(xiàn)，湖南鳳凰、永順、吉首獼猴桃園的栽培品種中，‘金魁發(fā)病較輕，‘紅陽發(fā)病最重。一般植物抗病性有固有和誘導(dǎo)兩種類型，其中植物誘導(dǎo)抗性是因真菌、細(xì)菌、病毒等誘導(dǎo)因子侵襲而引起的，可使植物體內(nèi)POD、PAL、SOD、CAT等抗病性相關(guān)酶活性發(fā)生一系列變化[12]。李庚飛[13]、李淼[14]、石志軍等[15]、易盼盼[16]研究表明，獼猴桃體內(nèi)相關(guān)酶活性與植株抗病性密切相關(guān)，感病品種感病后酶活性顯著低于抗病品種。

湘西是湖南獼猴桃重要的生產(chǎn)基地，截至2014年，種植面積約為1萬hm2，占全省種植面積的90%[17]。近年來，潰瘍病致使當(dāng)?shù)睾芏喃J猴桃園被毀，損失十分嚴(yán)重。為此，筆者特開展湘西地區(qū)獼猴桃潰瘍病抗性資源篩選及其抗性機(jī)理研究，旨在篩選抗性強(qiáng)的獼猴桃資源，為湘西地區(qū)獼猴桃抗病育種提供理論依據(jù)，為獼猴桃潰瘍病防控提供參考。

1 材料與方法

1.1 材料

試驗(yàn)材料均來自湘西民族職業(yè)技術(shù)學(xué)院試驗(yàn)園，包括：美味獼猴桃Actinidia chinensis var. deliciosa，品種‘米良1號和育種材料‘M06;中華獼猴桃A.chinensis Planch.，品種‘東紅、‘紅陽（對照）和育種材料‘Z12;對萼獼猴桃A.valvata Dunn，育種材料‘S9801;毛花獼猴桃A.eriantha Benth.，育種材料‘M9808。接種枝條為長勢一致的一年生枝條，直徑0.8 cm;葉片為當(dāng)年生的健康嫩葉。

接種菌株為P.syringae pv. actinidia str. shaanxiM228（GCA 000344475.2），由西北農(nóng)林科技大學(xué)植物保護(hù)學(xué)院果樹病害生物學(xué)和綜合防治實(shí)驗(yàn)室提供。將致病菌株M228接種至LB固體培養(yǎng)基上，25℃下培養(yǎng)36 h。挑單菌落至LB液體培養(yǎng)基中，于25℃、200 r/min搖床上培養(yǎng)36 h，而后6 500 r/min離心6 min，收集菌體，以備用。

1.2 方法

1.2.1 接種試驗(yàn)

1.2.1.1 離體葉片接種Psa

參考黃其玲等[18]和Zhao等[19]的方法（略改動），采用真空滲透接種。接種菌液的配制：收集M228菌體，用無菌PBS緩沖液（pH7.0）沖洗M228菌體2～3次，配制OD值為0.2的菌液，再稀釋10-4，取30 mL菌液加入50 mL離心管中待用。將獼猴桃葉片用無菌水沖洗干凈，避開葉脈，用打孔器（d=15 mm）打取葉盤，將葉盤分別放入盛有菌液的離心管中，每管45～50片葉盤，以PBS緩沖液為對照，用真空泵抽真空1 h，取出葉片，吸干葉盤表面水分，將其背面朝下平貼在0.8%水瓊脂的培養(yǎng)皿上，每皿15片，置于L∥D=16 h∥8 h的人工氣候箱中，晝夜溫度16℃/10℃。并分別于接種后2、4、6、8和10 d觀察葉盤發(fā)病情況，計算病斑面積/葉盤面積（用F表示）。每皿3次重復(fù)。

葉盤發(fā)病程度分級：0級，無病斑;1級，F(xiàn)為1%～10%;2級，F(xiàn)為11%～25%;3級，F(xiàn)為26%～50%;4級，F(xiàn)為51%～75%;5級，F(xiàn)為76%～100%。

病情指數(shù)=100×Σ（各級葉盤數(shù)×相對級值）/（總?cè)~盤數(shù)×最高級值）;

抗性評價：病情指數(shù)0～10為高抗（HR）;11～25為抗病（R）;26～40為耐?。═）;41～65為感?。⊿）;65以上為高感（HS）。

1.2.1.2 離體枝條接種Psa

參考Zhao等[19]的致傷接種法（略改動）。接種菌液配制：收集M228菌體，用無菌水制成菌懸浮液，調(diào)整OD600至0.2。采集健康的當(dāng)年生獼猴桃枝條（d=8 mm，長15 cm），用0.6% NaClO表面消毒10 min，滅菌水清洗3～4次，自然晾干，用石蠟將兩端封口。用已滅菌的刀片劃傷樹皮至木質(zhì)部（寬1 mm）。以無菌水為對照，在傷口處接種M228菌液10 μL，每供試材料接種15根，3次重復(fù)。而后放入托盤，置于L∥D=16 h∥8 h，光照和黑暗時溫度分別為16℃和10℃的人工氣候箱中培養(yǎng)。于5、10、15、20和25 d分別測量病斑長度，并用Duncan法進(jìn)行方差分析。

1.2.2 供試材料接種Psa后相關(guān)酶活性測定

1.2.2.1 酶液制備

參照 Given等[20]和孫紅梅等[21]的方法（略有改動）制備離體枝條接種M228后0、5、10、15和20 d的酶液。稱取樣品0.5 g置于研缽中，加入0.05 mol/L PBS緩沖液（pH 7.8） 1 mL和少量PVP，冰浴，研磨成漿，轉(zhuǎn)至EP管，用3 mL PBS緩沖液沖洗研缽，沖洗液轉(zhuǎn)入EP管。在4℃、6 500 r/min離心30 min，取上清液（即酶液）。

1.2.2.2 PAL活性測定

參考易盼盼[16]和董漢松[22]的方法（略有改動）。以不加酶液為空白對照，將檢測液3.1 mL（即2 mL pH 7.8 PBS沖液+1 mL 0.02 mol/L L苯丙氨酸+100 μL酶液）放于水浴鍋內(nèi)，30℃下反應(yīng)30 min，在290 nm 處測OD值，計算PAL酶活性，以1 min內(nèi)OD變化0.01為1個酶活性單位。

1.2.2.3 CAT活性測定

采用紫外光吸收法[23]。取0.05 mol/L PBS （pH 7.0）緩沖液100 mL，加入30%過氧化氫160 μL，搖勻，避光4℃保存。取2.9 mL CAT反應(yīng)液，在30℃水浴鍋中預(yù)熱15 min，加入100 μL酶液，搖勻，快速盛入比色皿，在波長 240 nm下測OD初始值及3 min時的OD值，計算CAT酶活性，以1 min內(nèi)OD變化0.1為1個酶活性單位。

1.2.2.4 POD活性測定

采用愈創(chuàng)木酚法[24]。量取0.05 mol/L PBS （pH 6.0）緩沖液50 mL，加入0.05 mmol/L愈創(chuàng)木酚28 μL，磁力攪拌器上（30℃）攪動，溶解，冷卻后，加入30% H2O219 μL，搖勻，低溫保存以備用。取3 mL POD反應(yīng)液，加入30 μL酶液混勻，以加30 μL PBS緩沖液（pH 7.8） 為對照，在470 nm處測0、2 min的OD值，計算其POD酶活性，以1 min內(nèi)OD變化0.01為1個酶活性單位。

1.3 數(shù)據(jù)處理

試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用Excel和SPSS軟件進(jìn)行統(tǒng)計分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 供試材料離體葉片、枝條接種潰瘍病病菌后發(fā)病情況比較

從表1、圖1可以看出，供試材料的離體葉片、枝條接種M228后開始發(fā)病的時間、發(fā)病率明顯不同。其中，毛花獼猴桃‘M9808的離體葉片接種M228后10 d出現(xiàn)病狀，發(fā)病率4.4%，病情指數(shù)為2.2，高抗，離體枝條接種M228后20 d出現(xiàn)病癥，出現(xiàn)時間最晚，接種后25 d發(fā)病率僅為8.6%;對萼獼猴桃‘S9801、美味獼猴桃‘M06、‘米良1號離體葉片接種M228后6 d開始發(fā)病，10 d后的發(fā)病率分別為25.8%、30.0%、32.6%，病情指數(shù)分別為28.0、30.4、34.8，均為耐病，離體枝條接種M228后15 d出現(xiàn)病癥，接種后25 d的發(fā)病率分別為29.2%、34.8%、38.7%;中華獼猴桃‘Z12離體葉片接種M228后4 d開始發(fā)病，接種后10 d的發(fā)病率為52.2%，病情指數(shù)為50.7，感病，離體枝條接種后10 d出現(xiàn)病癥，接種后25 d發(fā)病率僅為59.8%;‘東紅、‘紅陽離體葉片接種M228后2 d開始發(fā)病，接種后10 d的發(fā)病率分別為57.1%、84.8%，病情指數(shù)分別為53.3、78.7，分別為感病、高感，離體枝條，接種M228后10 d出現(xiàn)病癥，接種后25 d的發(fā)病率分別為67.2%、81.4%。

2.2 供試材料離體葉片、枝條接種潰瘍病病菌后病斑大小比較

從圖2～圖5可知，供試材料離體葉片、枝條室內(nèi)接種M228后，各材料的病斑大小差異顯著（經(jīng)Duncans方差分析，P<0.05）。其中，離體葉片接種后10 d，毛花獼猴桃‘M9808發(fā)病最輕，其病斑面積/葉盤面積（F）最低，僅為2.8%，，約為對照的1/25;對萼獼猴桃‘S9801次之，F(xiàn)為27.8%，約為對照‘紅陽的2/5;‘紅陽感病最重，F(xiàn)為71.4%。離體枝條接種Psa后25 d，毛花獼猴桃‘M9808的病斑最短，為3.4 mm，約為對照的1/11;對萼獼猴桃‘S9801次之，為11.3 mm，約為對照的1/4;對照病斑最長，為44.3 mm。各材料以病斑大小排序，抗性大小依次為：毛花獼猴桃‘M9808>對萼獼猴桃‘S9801>美味獼猴桃‘M06>美味獼猴桃‘米良1號>中華獼猴桃‘Z12>中華獼猴桃‘東紅>中華獼猴桃‘紅陽（CK）。

2.3 供試材料離體枝條接種Psa后相關(guān)酶活性比較

從圖6～圖8可看出，供試材料離體枝條接種M228后，各材料的PAL、CAT、POD酶活性差異較大，抗病品種的相關(guān)酶活性均比感病品種高，且酶活性峰值出現(xiàn)時間也較早。其中，毛花獼猴桃‘M9808的PAL峰值最高，接種后5 d出現(xiàn)，出現(xiàn)時間最早，比對萼獼猴桃‘S9801、美味獼猴桃‘M06、‘米良1號提早5 d出現(xiàn)，比中華獼猴桃‘Z12、‘東紅、‘紅陽提早10 d出現(xiàn);其CAT、POD活性峰值也最高，接種后10 d出現(xiàn)，與對萼獼猴桃‘S9801、美味獼猴桃‘M06、‘米良1號峰值出現(xiàn)時間相同，但比中華獼猴桃‘Z12、‘東紅、‘紅陽提早5 d出現(xiàn)。

3 討論

獼猴桃潰瘍病致病性強(qiáng)、根除難、范圍廣、危害大。目前，對此病的防治主要采用化學(xué)藥劑與栽培措施相結(jié)合的方式。如Serizawa等[25]、陽廷密等[26]、秦虎強(qiáng)等[27]的田間試驗(yàn)結(jié)果表明，200 μg/mL鏈·土霉素1 g/L、80%乙蒜素EC 10倍液、72%農(nóng)用硫酸鏈霉素SPX 2.0 mg/mL等藥劑預(yù)防效果較好。30余年來，國內(nèi)外學(xué)者在栽培上對獼猴桃潰瘍病防治取得了一定成果，但防治效果均具有一定的局限性，生產(chǎn)中易受當(dāng)年氣候、地理位置、果園土質(zhì)及果農(nóng)管理水平的影響。近年來，由于長期頻繁過量使用化學(xué)藥劑，已引起病菌抗藥性增強(qiáng)、農(nóng)藥殘留物增多、果實(shí)品質(zhì)下降等一系列問題。因此，栽培抗病品種是防治Psa最經(jīng)濟(jì)、有效、實(shí)用的方法，選育抗病品種、利用抗性資源作為砧木防治Psa，是今后研究工作的重點(diǎn)。

前人研究表明，獼猴桃體內(nèi)相關(guān)酶活性與植株對Psa的抗性密切相關(guān)。李庚飛[13]、李淼[14]、石志軍等[15]通過測定獼猴桃枝條感病前后相關(guān)酶的活性，發(fā)現(xiàn)枝條感病后抗病品種的相關(guān)酶活性均高于感病品種，與本試驗(yàn)的結(jié)果一致。易盼盼[16]通過測定5個品種盆栽苗接種Psa后的相關(guān)酶活性，發(fā)現(xiàn)各品種酶活性均顯著增加，其中，抗病材料毛花獼猴桃‘M9808接種Psa后10 d其POD、PAL、CAT達(dá)到峰值，而中華獼猴桃‘紅陽接種Psa后15 d其POD、PAL達(dá)到峰值，但CAT活性變化不大，這與本試驗(yàn)結(jié)果不同，這可能與供試材料枝干部位、粗度及酶液提取過程中的處理方法有關(guān)，具體原因有待進(jìn)一步分析。

抗病資源是選育獼猴桃抗病品種的物質(zhì)基礎(chǔ)，獼猴桃種間對Psa敏感程度不同。石志軍等[15]通過室內(nèi)離體接種評價了3個獼猴桃種的24個不同品種及資源，發(fā)現(xiàn)3個毛花獼猴桃材料對Psa抗性強(qiáng)，而多數(shù)中華獼猴桃材料抗性較差;張慧琴等[28]通過室內(nèi)離體接種評價了3個種的18個不同品種及資源，發(fā)現(xiàn)中華獼猴桃抗性最差，而美味獼猴桃的供試材料抗性差異較大;劉娟[29]通過室內(nèi)離體接種，發(fā)現(xiàn)8個種25個雌性16個雄性獼猴桃資源及品種中，軟棗獼猴桃‘魁綠（雄）高抗，毛花獼猴桃‘毛花（雄）中感，中華獼猴桃‘紅陽（雌）中感，‘紅陽（雄）感病，這與石志軍等[15]的研究結(jié)論不一致，也與本試驗(yàn)的結(jié)果不同，這可能與接種菌株、接種方法和供試材料的枝干情況有關(guān)。幾十年來，國內(nèi)外關(guān)于獼猴桃品種對Psa的抗性研究較多，但多屬中華獼猴桃、美味獼猴桃或毛花獼猴桃的品種或資源，其他獼猴桃種較少。湘西地區(qū)獼猴桃種植歷史悠久，有美味、紫果、對萼、京梨等17個獼猴桃種[30]的野生資源，為獼猴桃抗性資源篩選和抗病育種工作的開展提供了豐富的材料來源。本試驗(yàn)選擇了4個種7個獼猴桃材料，從種來看，毛花獼猴桃對Psa抗性最強(qiáng)，對萼獼猴桃次之，中華獼猴桃抗性最差;從資源及品種看，毛花獼猴桃‘M9808對Psa的抗性最強(qiáng)，對萼獼猴桃‘S9801次之，中華獼猴桃‘紅陽最差。說明毛花獼猴桃‘M9808可作為今后抗病育種或抗性砧木的理想材料。但本試驗(yàn)選用的材料有限，下一步需擴(kuò)大獼猴桃鑒定范圍，進(jìn)一步篩選高抗獼猴桃Psa的種質(zhì)資源。

參考文獻(xiàn)

[1] SERIZAWA S， ICHIKAWA T， TAKIKAWA Y， et al. Occurence of bacterial canker of kiwifruit in Japan： description of symptoms， isolation of the pathogen and screening of bactericides [J]. Annals of the Phytopathological Society of Japan， 1989， 55（4）： 427436.

[2] FERRANTE P， SCORTICHINI M. Identfication of Pseudomonas syringae pv. actinidiae as causal agent of bacterial of yellow kiwifruit （Actinidia chinensis Planchon） in central Italy[J]. Journal of Phytopathology， 2009， 157： 768770.

[3] VANNESTE J， POLIAKOFF F， AUDUSSEAU C， et al. First report of Pseudomonas syringae pv. actinidiae， the causal agent of bacterial canker of kiwifruit in France [J]. Plant Disease， 2011， 95（10）： 1311.

[4] EVERETT K R. Pseudomonas syringae pv. actinidiae and other pathovars of Pseudomonas syringae[J]. Australasian Plant Disease Notes， 2011， 6（1）： 6167.

[5] 方炎祖，朱曉湘，王宇道，等.湖南獼猴桃病害調(diào)查研究初報[J].四川果樹科技，1990（1）：2829.

[6] 林文力，羅賽男，肖伏蓮.湘西自治州獼猴桃潰瘍病發(fā)生情況及防治措施探討[J].湖南農(nóng)業(yè)科學(xué)，2015（5）：4244.

[7] 胡黎華，楊燦芳，熊偉，等.重慶獼猴桃潰瘍病發(fā)生情況及影響因素調(diào)查[J].中國南方果樹，2018，47（3）：151152.

[8] 馬利，尹勇，封傳紅，等.四川省獼猴桃潰瘍病發(fā)生現(xiàn)狀及綠色防控技術(shù)體系的建立[J].中國植保導(dǎo)刊2017，37（11）：8083.

[9] 李淼，檀根甲，李瑤，等.不同獼猴桃品種對細(xì)菌性潰瘍病的抗病性及其聚類分析[J].植物保護(hù)，2004，30（5）：5154.

[10]申哲，黃麗麗，康振生.陜西關(guān)中地區(qū)獼猴桃潰瘍病調(diào)查初報[J].西北農(nóng)業(yè)學(xué)報，2009，18（1）：191193.

[11]張慧琴，李和孟，馮健君，等.浙江省獼猴桃潰瘍病發(fā)病現(xiàn)狀調(diào)查及影響因子分析[J].浙江農(nóng)業(yè)學(xué)報，2013，25（4）：832835.

[12]VAN LOON L C. Induced resistance in plants and the role of pathogenesisrelated proteins[J]. European Journal of Plant Pathology， 1997， 103： 753765.

[13]李庚飛.獼猴桃體內(nèi)酚含量保護(hù)酶活性與抗?jié)儾￡P(guān)系的初步研究[J].福建林業(yè)科技，2009，36（4）：131134.

[14]李淼.獼猴桃品種對細(xì)菌性潰瘍病的抗性機(jī)制[D].合肥：安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)，2003.

[15]石志軍，張慧琴，肖金平，等.不同獼猴桃品種對潰瘍病抗性的評價[J].浙江農(nóng)業(yè)學(xué)報，2014，26（3）：752759.

[16]易盼盼.不同獼猴桃品種潰瘍病抗性鑒定及抗性相關(guān)酶研究[D].楊凌：西北農(nóng)林科技大學(xué)，2014.

[17]王仁才，熊興耀，龐立.湖南獼猴桃產(chǎn)業(yè)發(fā)展的問題及建議[J].湖南農(nóng)業(yè)科學(xué)，2015（15）：124127.

[18]黃其玲，高小寧，趙志博，等.GFPuv標(biāo)記獼猴桃潰瘍病菌的生物學(xué)特性及其在土壤、根系中的定殖[J].中國農(nóng)業(yè)科學(xué)，2013，46（2）：282291.

[19]ZHAO Zhibo， GAO Xiaoning， HUANG Qiling， et al. Identification and characterization of the causal agent of bacterial canker of kiwifruit in the Shaanxi Province of China [J]. Plant Pathology， 2013， 95： 155162.

[20]GIVEN N K， VENIS N A， GRIERSON D. Phenylalanine ammonialyase activity and anthocyanin synthesis in ripening strawberry fruit [J].Journal of Plant Physiology，1988，133：2530.

[21]孫紅梅，李天來，李云飛.低溫解除休眠過程中蘭州百合鱗莖酚類物質(zhì)含量及相關(guān)酶活性變化[J].中國農(nóng)業(yè)科學(xué)，2004，37（11）：17771782.

[22]董漢松.植物誘導(dǎo)抗病性原理和研究[M].北京：科學(xué)出版社，1995.

[23]李合生，孫群，趙世杰，等.植物生理生化實(shí)驗(yàn)原理和技術(shù)[M].北京：高等教育出版社，2000.

[24]郝再斌，蒼晶，徐仲.植物生理實(shí)驗(yàn)技術(shù)[M].哈爾濱：哈爾濱工業(yè)大學(xué)出版社，2002.

[25]SETSUO SERIZAWA，趙寶權(quán).日本獼猴桃潰瘍病的癥狀、病原和防治藥劑[J].國外農(nóng)學(xué).植物保護(hù)，1992（1）：1113.

[26]陽廷密，王明召，張素英，等.獼猴桃潰瘍病防治藥劑藥效評價[J].南方農(nóng)業(yè)學(xué)報，2017，48（7）：12311236.

[27]秦虎強(qiáng)， 趙志博， 高小寧， 等. 四種殺菌劑防治獼猴桃潰瘍病的效果及田間應(yīng)用技術(shù)[J]. 植物保護(hù)學(xué)報， 2016， 43（2）： 321328.

[28]張慧琴，毛雪琴，肖金平，等.獼猴桃潰瘍病病原菌分子鑒定與抗性材料初選[J].核農(nóng)學(xué)報，2014，28（7）：11811187.

[29]劉娟.獼猴桃潰瘍病抗性材料評價及其親緣關(guān)系的ISSR聚類分析[D].成都：四川農(nóng)業(yè)大學(xué)，2015.

[30]陳一星.對湘西地區(qū)獼猴桃資源的調(diào)查[J].生物學(xué)雜志，2004，21（1）：3839.

（責(zé)任編輯：楊明麗）