應(yīng)用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)和磁微粒化學(xué)發(fā)光免疫法檢測孕婦乙型肝炎表面抗原的意義

藍(lán)唯

【摘 要】目的：分析酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)和磁微?；瘜W(xué)發(fā)光免疫法檢測孕婦乙型肝炎表面抗原的意義。方法：選取2018年1月至12月期間我院收治的80例乙型肝炎孕婦，均采取酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)和磁微粒化學(xué)發(fā)光免疫法檢測乙肝表面抗原，分析兩種檢測方法結(jié)果。結(jié)果：80份樣本中酶聯(lián)免疫吸附法檢出陽性64份，陽性率為80.0%，電化學(xué)發(fā)光免疫檢測出陽性77份，陽性率為96.25%，兩種檢出陽性率差異顯著（P<0.05）。結(jié)論：對(duì)于孕婦乙型肝炎表面抗原檢測中磁微?；瘜W(xué)發(fā)光免疫檢測法準(zhǔn)確性高于酶聯(lián)免疫吸附法，臨床可優(yōu)選使用。

【關(guān)鍵詞】酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn);磁微?；瘜W(xué)發(fā)光免疫法檢測;乙型肝炎表面抗原

【中圖分類號(hào)】R512.6【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】B【文章編號(hào)】1672-3783（2019）06-03--02

慢性乙型肝炎（HBV）為一種常見的傳染性疾病，相關(guān)部分統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)顯示我國目前具有約1億人受乙肝病毒影響[1]，使得慢性乙肝成為威脅人民生命健康的殺手。目前慢性乙肝的檢測方法主要為酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）、磁微?；瘜W(xué)發(fā)光免疫法（CLIA）等技術(shù)，ELISA用于HBsAg定性檢測，CLIA用于定量檢測，因此兩種檢測方法陽性率如何為本次研究重點(diǎn)。

1 資料與方法

1.1 基礎(chǔ)資料來源

2018年1月至12月期間在我院接受治療的80例乙型肝炎病人，患者相關(guān)診斷均符合2015版中華醫(yī)學(xué)會(huì)感染病學(xué)分會(huì)制定的《慢性乙型肝炎防治指南》的相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)[2]。80例孕婦年齡20-41歲，平均（32.0±2.6）歲，孕周16-33周，平均（22.3±5.2）周，本次患者均同意相應(yīng)的檢測方法并與我方簽訂相應(yīng)協(xié)議。

1.2 方法

抽取清晨空腹肘靜脈外周血5ml于具有抗凝劑的試管中，室溫下靜止約1h后離心，離心設(shè)置為4000r/min，離心5min，離心后吸取上清液，分為A、B試管中，-70℃保存。A試管使用ELISA檢測，所用試劑為上海榮盛生物藥業(yè)有限公司生產(chǎn)，酶標(biāo)儀及洗板機(jī)為瑞士帝肯，嚴(yán)格按照說明書操作。B試管使用CLIA方法檢測，儀器為鄭州安圖公司生產(chǎn)的A2000化學(xué)發(fā)光儀，試劑為鄭州安圖生物工程有限公司生產(chǎn)的磁微?；瘜W(xué)發(fā)光法乙肝表面抗原定量檢測試劑盒，檢測按照試劑盒方法及步驟。

1.3 陽性結(jié)果判斷標(biāo)準(zhǔn)

ELISA檢測法：標(biāo)本的OD值≥COV為陽性，CLIA法檢測后數(shù)值>0.05IU/ml為陽性，確認(rèn)試驗(yàn)以抑制率>50%為陽性。

1.4 數(shù)據(jù)分析

組間數(shù)據(jù)納入統(tǒng)計(jì)學(xué)分析軟件SPSS20.0中分析，X2檢驗(yàn)分析計(jì)數(shù)資料，組間數(shù)據(jù)比價(jià)后P<0.05為差異明顯。

2 結(jié)果

80份樣本中酶聯(lián)免疫吸附法檢出陽性64份，陽性率為80.0%，磁微粒化學(xué)發(fā)光免疫檢測出陽性77份，陽性率為96.25%，兩種檢出陽性率差異顯著（X2=1.16，P=0.026）。

3 討論

乙型肝炎病毒是一種具有強(qiáng)傳染性的病毒，一般母嬰為該種病毒傳染的主要途徑，嬰兒感染該種病毒后可能出現(xiàn)流產(chǎn)、早產(chǎn)以及胎兒畸形等嚴(yán)重結(jié)果，因此對(duì)于孕婦人人員進(jìn)行乙型肝炎病毒檢測尤其重要，其直接影響新生兒接受乙型肝炎疫苗免疫策略。

目前監(jiān)測乙肝的方法較多，使用頻率較高的方法為酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)、磁微?；瘜W(xué)發(fā)光免疫法檢測、膠體金免疫層析發(fā)等。在我國大部分醫(yī)院監(jiān)測乙型肝炎表面抗原一般采取酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)，但該種檢測方式要求樣品濃度較高，而臨床樣本濃度較低使得檢測敏感性低從而出現(xiàn)漏診對(duì)于患者治療帶來不良影響。膠體金免疫層析分析方法是檢測在酶聯(lián)免疫吸附基礎(chǔ)之上的一種檢測方式，該種檢測方式操作簡單，無需特殊設(shè)備支持均可獲得該項(xiàng)效果，因此在乙型肝炎表面抗原的檢測中較多使用，但該種檢測方式也存在一定短板，容易出現(xiàn)假陽性和假陰性，導(dǎo)致臨床檢測結(jié)果不穩(wěn)定。磁微?；瘜W(xué)發(fā)光免疫法檢測一般為儀器自動(dòng)完成檢測，具有較高靈敏度、準(zhǔn)確性且無輻射，對(duì)于檢測人員安全性高。該技術(shù)采用雙抗體夾心法原理進(jìn)行檢測，用抗-HBs抗體包被磁微粒，用辣根過氧化物酶標(biāo)記的抗-HBs抗體制備酶結(jié)合物，通過免疫反應(yīng)形成抗體-抗原-抗體-酶復(fù)合物，該復(fù)合物催化發(fā)光底物發(fā)出光子，發(fā)光強(qiáng)度與HBsAg含量成正比。檢測過程中樣品在儀器中具有緩沖液處理，利用表面活性劑能夠增加脂類和蛋白質(zhì)的溶解度的特點(diǎn)，減少非特異性物質(zhì)的結(jié)合，并清除未結(jié)合的物質(zhì)，利用緩沖液增強(qiáng)離子強(qiáng)度，并提供弱堿性環(huán)境，使吸附在載體上的非特異性抗體、抗原或其他蛋白質(zhì)成分遠(yuǎn)離它們的等電點(diǎn)，轉(zhuǎn)變?yōu)閹Ц嘭?fù)電荷的離子，有利于其溶解而被徹底沖洗干凈，使得檢測的陽性率獲得保證。酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)不及發(fā)光檢測法具有高靈敏度和可重復(fù)性，因此具有較高漏檢率及假陽性，加上酶的純度和反應(yīng)過程容易受到環(huán)境因素影響，使得結(jié)果準(zhǔn)確度不高。

在本次檢測分析中80例乙型肝炎孕婦分別采取酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)、磁微粒化學(xué)發(fā)光免疫法檢測，結(jié)果酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)陽性率為80.0%，磁微?；瘜W(xué)發(fā)光免疫法檢測陽性率為96.25%，提示磁微?；瘜W(xué)發(fā)光免疫法檢測更加理想，結(jié)果與前人報(bào)道基本一致[3]?？傊?jīng)本次對(duì)比分析我們認(rèn)為對(duì)于孕婦乙型肝炎表面抗原的檢測中使用磁微?；瘜W(xué)發(fā)光免疫法檢測陽性率明顯高于酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)，臨床可根據(jù)具體情況優(yōu)先選擇。

參考文獻(xiàn)

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