胡磊

摘 要 紅玉海棠原產(chǎn)于北美，是一種優(yōu)良的園林化樹(shù)種。本種在原生地表現(xiàn)優(yōu)異，觀賞效果佳，是可以彌補(bǔ)我國(guó)北方地區(qū)綠化樹(shù)種品種單一的良種。本次實(shí)驗(yàn)主要在實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)上總結(jié)出紅玉海棠的組培快繁最佳數(shù)據(jù)，為在我國(guó)推廣紅玉海棠打下基礎(chǔ)。

關(guān)鍵詞 紅玉海棠;組培快繁;組培實(shí)驗(yàn)

中圖分類(lèi)號(hào)：S661.2 文獻(xiàn)標(biāo)志碼：B DOI：10.19415/j.cnki.1673-890x.2019.06.069

1 研究背景

紅玉海棠（拉丁學(xué)名：Malus ‘Red jade）為薔薇科落葉小喬木植物，樹(shù)形為垂枝形，花白色至淺粉色，果近球形，亮紅色，原產(chǎn)地為北美，在美國(guó)多地都有栽培。紅玉海棠在原生地美國(guó)樹(shù)高不超過(guò)5 m，屬垂枝型樹(shù)種，一般冠幅能夠達(dá)到3～5 m?；ㄆ诟鶕?jù)氣溫變化從3月下旬延伸至4月下旬，單瓣，花色淡粉色至白色，花朵比一般海棠花較大，能達(dá)到5 cm左右。果實(shí)直徑一般在1.5 cm左右，表皮呈紅色，反光效果強(qiáng)，原產(chǎn)地一般每年7月成熟，宿存期較長(zhǎng)，一般在來(lái)年春季發(fā)芽前都是觀果期[1-2]。紅玉海棠是不可多得的優(yōu)良園林綠化樹(shù)種，在原生地有非常好的適應(yīng)性，在冬季低溫和夏季高溫等極端天氣條件下都能表現(xiàn)出健康的生長(zhǎng)狀態(tài)。紅玉海棠的耐旱性表現(xiàn)也非常強(qiáng)，夏季伏旱期能安全過(guò)夏，另本種還有一定的抗逆性和抗病力。從原產(chǎn)地的優(yōu)良表現(xiàn)來(lái)看，應(yīng)是我國(guó)生長(zhǎng)條件差，在綠化樹(shù)種短缺的北方地區(qū)是不可多得優(yōu)秀綠化用樹(shù)。

安徽城市管理職業(yè)學(xué)院與安徽皖星生態(tài)園藝有限公司進(jìn)行深度校企合作，應(yīng)其要求進(jìn)行繁殖技術(shù)研究和抗逆性研究。海棠適應(yīng)性強(qiáng)，多數(shù)具有耐寒、抗病、觀賞特點(diǎn)突出及觀賞周期長(zhǎng)等特點(diǎn)。本次實(shí)驗(yàn)?zāi)康木褪翘剿骷t玉海棠在合肥地區(qū)的物候條件下引種繁殖和抗逆性研究，為紅玉海棠在合肥地區(qū)推廣進(jìn)行技術(shù)和經(jīng)驗(yàn)總結(jié)。

2 實(shí)驗(yàn)材料

為了保證實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的正確和有效性，我們特地前往上海苗木公司采購(gòu)了紅玉海棠種苗，還特意采集了在上海苗圃的成年紅玉海棠當(dāng)年生枝條中選擇粗壯枝條作為母體材料。

3 實(shí)驗(yàn)方法

3.1 外植體的消毒過(guò)程

在實(shí)驗(yàn)室條件下對(duì)母體進(jìn)行水培，可以適當(dāng)添加發(fā)芽劑促使萌芽，當(dāng)萌芽達(dá)到5 cm左右大小時(shí)，就可以剪切下來(lái)作為外植體進(jìn)行組培實(shí)驗(yàn)。在組培實(shí)驗(yàn)前，針對(duì)剪切下來(lái)的芽體，必須首先進(jìn)行滅毒處理。具體步驟如下。1）清洗。將外植體在流動(dòng)的自來(lái)水下洗凈。2）消毒。在無(wú)菌臺(tái)上，使用75%的酒精消毒2次以上，且每次時(shí)間要達(dá)到15 s以上，然后再用濃度為0.1%的氯化汞溶液進(jìn)行滅菌，滅菌時(shí)間必須達(dá)到30 min以上。3）用流動(dòng)的純凈水沖洗外植體，次數(shù)要達(dá)到5次以上，再用無(wú)菌布吸干外植體表面的多余水分。4）把處理好的葉片剪成0.5～1 cm左右的小方塊，待用。

3.2 愈傷組織的誘導(dǎo)及培養(yǎng)的方法

在實(shí)驗(yàn)室條件下，選用MS為基本培養(yǎng)基，選用濃度為0.7%的瓊脂，含有糖分配比濃度為3%，在溶液pH值為5.8的微酸環(huán)境下培養(yǎng)，培養(yǎng)前外植體在121 ℃下滅菌，時(shí)間控制在30 min以?xún)?nèi)。在培養(yǎng)時(shí)，光照時(shí)長(zhǎng)要達(dá)到每天10 h以上，光照強(qiáng)度保持在1 500～2 000 Ix，溫度控制在25 ℃左右[3-4]。

3.3 進(jìn)行初代培養(yǎng)

將經(jīng)過(guò)滅菌處理后的外植體接種在添加不同濃度植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)物質(zhì)的MS培養(yǎng)基上進(jìn)行芽誘導(dǎo)，分成A1、A2、A3、A4 4組，A1為對(duì)照組，不添加任何植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)物質(zhì)[5-8]。其他3組的生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑6-BA濃度依次為0.2 mg·L-1、0.5 mg·L-1、1.0 mg·L-1，NAA濃度都是0.1 mg·L-1。

3.4 不同濃度的調(diào)節(jié)物質(zhì)對(duì)初代培養(yǎng)芽誘導(dǎo)率的作用結(jié)果

在4組不同濃度的6-BA和NAA的培養(yǎng)基上培養(yǎng)20 d后，A3和A4兩組的培養(yǎng)基上均有芽出現(xiàn)，30 d后，統(tǒng)計(jì)4組培養(yǎng)基上的誘導(dǎo)率，以沒(méi)有污染的最低瓶數(shù)作為基準(zhǔn)。詳細(xì)結(jié)果見(jiàn)表1。

由表1進(jìn)行對(duì)比可以知道，誘導(dǎo)率最高的是A3培養(yǎng)基，A3培養(yǎng)基中的6-BA為0.5 mg·L-1、NAA為0.1 mg·L-1。

在沒(méi)有加入6-BA和NAA的A1培養(yǎng)基中，芽并沒(méi)有長(zhǎng)出，可以得出6-BA和NAA會(huì)影響芽生長(zhǎng)。在NAA量不變時(shí)，當(dāng)6-BA的濃度從0.2 mg·L-1增加到0.5 mg·L-1時(shí)，發(fā)芽數(shù)變多，芽的誘導(dǎo)率也變高，但當(dāng)6-BA濃度從0.5 mg·L-1增長(zhǎng)到1.0 mg·L-1時(shí)，發(fā)芽的個(gè)數(shù)反而開(kāi)始減少，誘導(dǎo)率也開(kāi)始降低。由此可以得出，6-BA的濃度對(duì)誘導(dǎo)率的影響呈倒U型曲線(xiàn)，有峰值，代表有最適宜的濃度。

3.5 不同濃度的激素對(duì)組培苗生根情況的影響

將組培苗培養(yǎng)20 d后，記錄苗的生根情況，分析并列成表格，如表2所示，然后進(jìn)行比較分析得出結(jié)論。在C1培養(yǎng)基中，IBA為0 mg·L-1，生根率為27.5%，其余5組培養(yǎng)基中IBA依次為0.1 mg·L-1，0.2 mg·L-1，0 .3 mg·L-1，0.4 mg·L-1，0.5 mg·L-1，C2-C6 5組培養(yǎng)基的生根率均高于C1培養(yǎng)基，說(shuō)明IBA對(duì)芽的生根有促進(jìn)作用。C2和C3兩組培養(yǎng)基中的IBA濃度升高，而生根率也逐漸增加。IBA的濃度增加到0.3 mg·L-1時(shí)，生根率達(dá)到100%，當(dāng)IBA的濃度大于0.3 mg·L-1時(shí)，生根率仍是100%，沒(méi)有降低，但平均生根數(shù)逐漸減少，所以IBA的最適宜濃度為0.3 mg·L-1，對(duì)芽的生根效果最好。

4 結(jié)果與分析

實(shí)驗(yàn)得出以下結(jié)論。1）選用0.1%氯化汞達(dá)8 min時(shí)的滅菌效果最好，隨著時(shí)間的增加雖然滅菌效果增加但萌芽率降低。2）在選用不同濃度的生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑誘導(dǎo)下，外植體的萌芽率呈U型導(dǎo)線(xiàn)布局，說(shuō)明培養(yǎng)基有適宜濃度配比，根據(jù)實(shí)驗(yàn)得出6-BA的濃度為0.5 mol·L-1、NAA的濃度為0.1 mol·L-1時(shí)，對(duì)芽的誘導(dǎo)效果最佳。3）在組培苗生根時(shí)，IBA的濃度增加到0.3 mg·L-1時(shí)，生根率達(dá)到100%，當(dāng)IBA的濃度大于0.3 mg·L-1時(shí)，生根率仍是100%，沒(méi)有降低，但平均生根數(shù)逐漸減少，所以IBA的最適宜濃度為0.3 mg·L-1，對(duì)芽的生根效果最好。

5 結(jié)論

通過(guò)本次實(shí)驗(yàn)研究，為紅玉海棠的組培快繁提供了基礎(chǔ)，總結(jié)出在實(shí)驗(yàn)室條件下紅玉海棠組培快繁的最佳營(yíng)養(yǎng)基配比，為紅玉海棠這一優(yōu)良園林綠化樹(shù)種在合肥地區(qū)大面積推廣打下基礎(chǔ)。

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（責(zé)任編輯：劉昀）