納米脂肪及其衍生物在抗衰老領(lǐng)域的應(yīng)用進(jìn)展

汪正財 李華

[摘要]衰老是指隨著年齡的增長，機體結(jié)構(gòu)和功能出現(xiàn)退行性改變的過程，在皮膚軟組織中主要表現(xiàn)為皮膚質(zhì)地改變，脂肪萎縮、肌肉體積及彈性改變等。隨著研究的不斷深入，針對皮膚軟組織的抗衰老技術(shù)也越來越多。自2013年Tonnard P提出納米脂肪概念并將其應(yīng)用于改善細(xì)紋后，近年來出現(xiàn)了多種納米脂肪衍生物的報道，由于其含有更多高質(zhì)量的脂肪干細(xì)胞及其它活性成分而被迅速應(yīng)用于臨床。本文通過查閱近年相關(guān)文獻(xiàn)，對納米脂肪及其衍生物的制備、成分與其在抗衰老中的臨床應(yīng)用進(jìn)行綜述。

[關(guān)鍵詞]納米脂肪;乳糜化脂肪;脂肪干細(xì)胞膠;抗衰老;年輕化

[中圖分類號]R339.3+8? ? [文獻(xiàn)標(biāo)志碼]A? ? [文章編號]1008-6455（2019）06-0016-03

Abstract： Aging refers to the process of degenerative changes of structure and function in a body as growing older. The main manifestations of aging in soft tissues were changes in skin texture， atrophy of fat and muscle and elasticity decrease of muscle. Continuous research indicates that anti-aging technology for skin and soft tissue was also increasing. Since Tonnard P introduced the concept of nanofat in 2013 and applied it to improve wrinkles， many kinds of nanofat derivatives had been reported in recent years， which was being rapidly applied to clinic because it contains more high-quality adipose stem cells and other cytokines. In this review， the preparation， composition and clinical application of nanofat and its derivatives in anti-aging area were summarized by consulting related literatures in recent years.

Key words： nanofat; chylous fat; SVF-gel; anti-aging; rejuvenation

衰老是生命體發(fā)生發(fā)展所經(jīng)歷的必然過程。皮膚軟組織衰老主要表現(xiàn)為真皮變薄、皺紋形成、皮膚松弛、軟組織容量丟失，其原因主要為皮膚膠原纖維容積減少和結(jié)構(gòu)改變、肌肉與韌帶在骨骼上附著點的松弛，脂肪萎縮等[1]。皮膚軟組織抗衰老方法較多，比如光電治療、手術(shù)治療、注射填充治療等，其中自體脂肪移植填充治療因可填補軟組織容量的缺失，促進(jìn)真皮膠原纖維再生，改善皮膚質(zhì)地，且具有來源廣泛、取材容易、微創(chuàng)，移植物無免疫排斥反應(yīng)等特點而被廣泛應(yīng)用于臨床抗衰老當(dāng)中[2]。傳統(tǒng)自體脂肪移植由于顆粒脂肪體積較大，注射移植脂肪針頭直徑常為2mm，且注射量不易控制，對于皮膚淺層注射容易出現(xiàn)表面凹凸不平，脂肪顆粒中心壞死及注射區(qū)鈣化結(jié)節(jié)等并發(fā)癥[3]，因而限制了其在皮膚淺層的抗衰老應(yīng)用。

2013年比利時科學(xué)家Tonnard P[4]首次將顆粒脂肪通過機械力進(jìn)行乳糜化，并將乳糜化后的脂肪稱為納米脂肪。納米脂肪提取技術(shù)是一種簡單實用的脂肪干細(xì)胞提取技術(shù)[5]，含有的脂肪來源干細(xì)胞具有再生修復(fù)能力，且可通過27G細(xì)針頭，使皮膚淺層的注射更為精準(zhǔn)，一經(jīng)報道便被迅速應(yīng)用于臨床?；趯︻w粒脂肪的處理方式不同，近年來出現(xiàn)了多種納米脂肪衍生物如“活性納米脂肪”和“SVF-gel”等，由于含有更多的高質(zhì)量脂肪干細(xì)胞及其它活性成分而被應(yīng)用于臨床抗衰老中，效果良好，在醫(yī)學(xué)美容行業(yè)有巨大的發(fā)展前景。

1? 納米脂肪及其衍生物的制備

1.1 納米脂肪的制備：采用直徑為3mm的多孔尖頭吸脂針從腹部或大腿低壓抽吸獲取自體脂肪顆粒[6]，將其經(jīng)過生理鹽水漂洗后在孔徑為0.5mm無菌尼龍濾網(wǎng)上過濾，收集過濾后的顆粒脂肪至10ml螺口注射器內(nèi)，另一10ml螺口注射器通過魯爾連接器與其相連，反復(fù)推擠30次進(jìn)行乳化，此時可見黃色顆粒脂肪變成黃白色懸液。將乳化后的懸液再經(jīng)孔徑為0.5mm的尼龍濾網(wǎng)過濾，所得到的乳糜狀懸液即為納米脂肪[4]。

1.2 納米脂肪衍生物的制備：BI[7]認(rèn)為顆粒脂肪相互推擠的機械力會破壞大量脂肪細(xì)胞與基質(zhì)干細(xì)胞的活性，加劇細(xì)胞的炎癥反應(yīng)與凋亡過程。因此他探索出一種既可減小注射體積也可保持細(xì)胞活性的方法。具體為顆粒脂肪經(jīng)低濃度的Ⅰ型膠原酶消化15min，以330g離心力離心7min，取上層經(jīng)0.6mm細(xì)胞篩過濾，并將過濾后所獲得的細(xì)胞成分稱為“活性納米脂肪”。

魯峰團(tuán)隊[8]受納米脂肪啟發(fā)，研發(fā)出了“SVF-gel”，也稱脂肪干細(xì)胞膠，具體做法為將顆粒脂肪以1 200g離心力離心3min，取中層脂肪置入兩個通過魯爾連接器相連接的10ml注射器中，以10ml/s的速率，機械互推1min后獲得乳糜化脂肪，經(jīng)Tulip公司的Nano Transfer過濾器過濾（過濾的孔徑不大于0.2mm），再以2 000g離心力離心3min，去除上層油脂與下層少量的腫脹液，剩余部分即為“脂肪干細(xì)胞膠”。

2? 納米脂肪及其衍生物的成分

多項研究表明，納米脂肪除了含有細(xì)胞外基質(zhì)與豐富的基質(zhì)血管片段（stromal vascular fraction， SVF）細(xì)胞如脂肪來源干細(xì)胞外[9-11]，還包含大量的生物活性因子，如血管內(nèi)皮生長因子、肝細(xì)胞生長因子、堿性成纖維細(xì)胞生長因子、血小板源性生長因子和轉(zhuǎn)化生長因子β等，這些活性因子與脂肪干細(xì)胞共同參與組織修復(fù)與再生[12-13]。相比納米脂肪，活性納米脂肪含有更多比例的脂肪干細(xì)胞、活性SVF細(xì)胞，且還含有小體積的脂肪細(xì)胞。而脂肪干細(xì)胞膠則含有更多高質(zhì)量的脂肪干細(xì)胞和細(xì)胞外基質(zhì)，這些細(xì)胞成分在組織充填與再生修復(fù)過程中具有重要作用。

3? 納米脂肪及其衍生物在抗衰老中的應(yīng)用

自Tonnard P首次將納米脂肪應(yīng)用于臨床抗衰老以來，有關(guān)納米脂肪及其衍生物的抗衰老應(yīng)用研究逐漸增加，包括改善皮膚質(zhì)地、減輕皺紋、改善色素沉著和面部凹陷。

3.1 納米脂肪的抗衰老作用

3.1.1 改善皮膚質(zhì)地，減輕皺紋：有研究表明納米脂肪中包含的脂肪干細(xì)胞比例可達(dá)（18.77±6.2）%[14]，脂肪干細(xì)胞可通過刺激人真皮成纖維細(xì)胞合成膠原纖維、減少紫外線介導(dǎo)的細(xì)胞凋亡來達(dá)到抗皺的效果[15]。動物實驗也表明納米脂肪注射可促進(jìn)皮膚新生血管網(wǎng)的生成、細(xì)胞外基質(zhì)的分泌和膠原的合成，增加真皮層的厚度[16-18]。臨床研究證實納米脂肪淺層注射可有效改善局部的表淺細(xì)紋如口周與胸前細(xì)紋，術(shù)后4個月細(xì)紋變淺，患者對治療效果滿意[4，14]。梁志生[19]將納米脂肪注射到面部表淺皺紋區(qū)域的真皮深層，觀察到注射區(qū)域皮膚質(zhì)地和色澤均得到了明顯的改善，他在臨床應(yīng)用中發(fā)現(xiàn)，最佳的改善效果出現(xiàn)在術(shù)后2～6個月。Liang[20]等將納米脂肪與富含血小板纖維蛋白混合后注射到人體真皮內(nèi)，隨訪2年發(fā)現(xiàn)皮膚質(zhì)地明顯改善，皺紋減少，皮膚彈性及濕度增加，毛孔變小，斑點變淡，這些改善效果可能與納米脂肪中干細(xì)胞旁分泌各類細(xì)胞活性因子，促進(jìn)組織修復(fù)再生有關(guān)。

3.1.2 改善色素沉著：體外試驗表明脂肪干細(xì)胞可通過下調(diào)絡(luò)氨酸酶與絡(luò)氨酸酶關(guān)聯(lián)蛋白1的表達(dá)來抑制黑色素的合成而使皮膚變白[21]。多項臨床研究證實了納米脂肪改善色素沉著的有效性。Mailey[22]曾報道將SVF與顆粒脂肪1：1混合移植可改善皮膚色素沉著，主要是由于其所包含的細(xì)胞成分及活性因子具有抗氧化作用，可抑制黑色素的形成、介導(dǎo)色素的分布與黑色素的轉(zhuǎn)運，有利于減輕色素沉著[23]。Jan[24]將未過濾的納米脂肪應(yīng)用于改善燒傷后的色素沉著，術(shù)后6個月肉眼觀察與圖像掃描結(jié)果均顯示色素沉著明顯淡化。Oh[25]應(yīng)用納米脂肪治療下瞼皮膚色素沉著19例，隨訪2～4個月發(fā)現(xiàn)所有患者的色素沉著均有明顯改善，術(shù)后僅有輕度的瘀斑及腫脹，無任何其它并發(fā)癥。梁志生研究發(fā)現(xiàn)納米脂肪能夠淡化眼周的色素沉著，但治療過程中可能會出現(xiàn)1.5～2.0d的紅斑期[19]，這與Tonnard P[4]的報道一致，他們認(rèn)為這可能與軟組織修復(fù)更新有關(guān)。

3.1.3 改善面部凹陷：納米脂肪本身無明顯體積充填作用，但其混合結(jié)構(gòu)性脂肪顆粒移植，可獲得生物填充劑更好、更安全的治療效果。Yu[26]將人的顆粒脂肪混合或不混合納米脂肪移植到的小鼠體內(nèi)，12周后發(fā)現(xiàn)混合有納米脂肪的顆粒脂肪移植小鼠，其脂肪體積、重量、移植區(qū)血管的密度等均明顯大于單純的顆粒脂肪移植組。Wei[27]對比傳統(tǒng)自體顆粒脂肪移植與納米脂肪結(jié)合富含血小板纖維蛋白輔助自體顆粒脂肪移植治療面部軟組織凹陷，隨訪24個月發(fā)現(xiàn)相比于傳統(tǒng)移植組，納米脂肪輔助移植組脂肪體積保留率更高，對于面部凹陷改善效果更顯著，且具有更低的再次手術(shù)率及更高的滿意度。這些研究表明納米脂肪可以促進(jìn)移植區(qū)的血管化及顆粒脂肪的存活，減少脂肪移植后的吸收，有利于面部凹陷的改善。

3.1.4 促進(jìn)毛發(fā)再生，延緩脫發(fā)進(jìn)程：Festa[28]研究表明脂肪干細(xì)胞可激活毛囊干細(xì)胞促進(jìn)毛囊及毛發(fā)再生，臨床研究也證實脂肪干細(xì)胞可促進(jìn)毛發(fā)再生過程。Anderi[29]將斑禿患者的脂肪干細(xì)胞提取出來后自體注射移植到頭皮，隨訪6個月后發(fā)現(xiàn)相比于未治療區(qū)，經(jīng)脂肪干細(xì)胞注射的區(qū)域毛發(fā)密度更高，毛發(fā)直徑更大，毛囊更穩(wěn)固，不易脫落。而納米脂肪含有豐富的脂肪干細(xì)胞，提示納米脂肪可能對毛發(fā)再生具有積極作用，雖然已有研究證實脂肪移植可促進(jìn)脫落的眉毛再生[30]，也可改善由硬皮病導(dǎo)致的脫發(fā)[31]，但納米脂肪移植對于毛發(fā)的作用仍需要更多的研究證實。

3.2 納米脂肪衍生物抗衰老應(yīng)用

3.2.1 脂肪干細(xì)胞膠：脂肪干細(xì)胞膠含有高濃度的活性脂肪干細(xì)胞與完整的細(xì)胞外基質(zhì)，不僅具有成脂能力，且其脂肪遠(yuǎn)期保留率大于80%。陳信愷[32]等對比了脂肪干細(xì)胞膠與傳統(tǒng)的Coleman脂肪移植對于面部容量填充的治療效果，發(fā)現(xiàn)相比于傳統(tǒng)的脂肪移植，脂肪干細(xì)胞膠能獲得更長期穩(wěn)定的填充效果，術(shù)后術(shù)區(qū)腫脹程度更輕，二次手術(shù)率較低且病人滿意度更高。姚堯[33]將脂肪干細(xì)胞膠通過27g針頭皮內(nèi)注射治療頸部皺紋及下瞼皮膚色素沉著，臨床觀察發(fā)現(xiàn)治療效果于術(shù)后2～3周逐漸顯現(xiàn)，2～3個月效果最佳。雖然脂肪干細(xì)胞膠臨床治療效果穩(wěn)定良好，但其產(chǎn)量小于15%，對于BMI不高的患者，難以獲取足夠的脂肪來制備脂肪干細(xì)胞膠，因此更適合用于精細(xì)填充[32]。

3.2.2 活性納米脂肪：Bi[7]將活性納米脂肪注射治療頸紋，術(shù)后6個月頸紋明顯變淺，效果穩(wěn)定;他還通過體內(nèi)試驗證實“活性納米脂肪”成脂能力比納米脂肪要強，這有利于活性納米脂肪移植對面部凹陷的改善。雖然活性納米脂肪的細(xì)胞活性、成脂能力及臨床治療效果均較為理想，但由于其體外制備過程加入了外來蛋白質(zhì)（Ⅰ型膠原酶），即使?jié)舛容^低，消化時間較短，仍然存在生物污染的風(fēng)險，其臨床應(yīng)用的安全性還有待驗證。

4? 小結(jié)與展望

真皮膠原纖維減少與軟組織容量的丟失是皮膚軟組織衰老的重要原因之一，而納米脂肪及其衍生物作為一類富含脂肪干細(xì)胞的混合物，可刺激真皮膠原增生，促進(jìn)皮膚軟組織修復(fù)再生，填充缺損，恢復(fù)體積，可有效改善衰老引起的皮膚軟組織改變，具有創(chuàng)傷小、恢復(fù)快、效果確切等優(yōu)點。但由于納米脂肪無明顯的體積填充能力，對于面部凹陷患者，不適合單獨應(yīng)用納米脂肪，需要混合顆粒脂肪移植才能取得滿意效果;而脂肪干細(xì)胞膠產(chǎn)量較低，活性納米脂肪存在生物安全風(fēng)險，因此它們在抗衰老領(lǐng)域應(yīng)用較為局限。相信隨著基礎(chǔ)研究與臨床研究的不斷深入，納米脂肪及其衍生物將會在抗衰老領(lǐng)域發(fā)揮更重要的作用。

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[收稿日期]2019-03-12

本文引用格式：汪正財，李華.納米脂肪及其衍生物在抗衰老領(lǐng)域的應(yīng)用進(jìn)展[J].中國美容醫(yī)學(xué)，2019，28（6）：16-19.