日糧肉堿和脂肪水平對(duì)鯉魚生長性能、血液生化指標(biāo)和抗氧化性能的影響

徐端紅，安芳芳，賈新彥，高紅梅

（河南農(nóng)業(yè)職業(yè)學(xué)院，河南鄭州 451450）

魚類日糧中最重要的能量來源是蛋白質(zhì)和脂肪，然而蛋白質(zhì)也是最昂貴的飼料成分。日糧中脂肪含量的增加可能會(huì)起到節(jié)約蛋白質(zhì)的作用，因?yàn)橹狙趸梢援a(chǎn)生大量能量，提高飼料利用率。但從營養(yǎng)角度來看，脂質(zhì)含量過高可能對(duì)魚肉感官性能產(chǎn)生負(fù)面影響，從而降低魚肉的產(chǎn)量及儲(chǔ)存的穩(wěn)定性（Cowey，1993）。此外，許多研究人員報(bào)道，肉堿與脂質(zhì)代謝的關(guān)系，日糧脂肪水平的變化意味著脂肪酸氧化能力的變化，從而影響肉堿的功能（Harpaz，2005）。但關(guān)于日糧添加肉堿與脂肪水平對(duì)魚類生長性能和肉質(zhì)影響的交互效應(yīng)研究不多。肉堿是一種季銨鹽化合物，是長鏈脂肪酸進(jìn)入線粒體必需的，L型異構(gòu)體具有生物活性，而D型異構(gòu)體幾乎沒有生理價(jià)值（Ozorio，2009）。在維生素C和體內(nèi)產(chǎn)生的其他代謝產(chǎn)物的條件下，肉堿由必需氨基酸賴氨酸和蛋氨酸合成，其相對(duì)分子質(zhì)量為161.2，是一種非常容易吸潮的化合物，很容易溶于水（Harpaz，2005）。有研究表明，肉堿可以提高幾種魚類生長速度，降低脂肪含量（Yang等，2009）。左旋肉堿的作用取決于環(huán)境條件、日糧成分（脂肪和賴氨酸水平）、添加水平及魚的生長階段等（Dias等，2001）?？寡趸饔每梢员Ｗo(hù)機(jī)體免受自由基和活性氧的影響，延緩許多慢性病和脂質(zhì)過氧化。因此，天然物質(zhì)作為潛在的抗氧化劑越來越受到人們的重視，其中就包括L-肉堿（Ma等，2008）。鯉魚是世界上第3種最常見的引進(jìn)物種，也是世界上最常見的魚類之一。但鯉魚過多的脂質(zhì)沉積影響其捕撈質(zhì)量，增加了肉質(zhì)的異味和加工程序（King和Dew，2003）。作者假設(shè)日糧添加肉堿可以改善魚肉質(zhì)量，將體內(nèi)或日糧中的大部分脂肪轉(zhuǎn)化為能量而不是在體脂沉積，因此，本試驗(yàn)研究不同脂肪水平日糧添加L-肉堿對(duì)鯉魚生長性能、血液生化指標(biāo)和抗氧化性能的影響。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)設(shè)計(jì)與飼養(yǎng)管理 試驗(yàn)選擇初始體重為（22.60±0.15）g的鯉魚180條，隨機(jī)分為6組，每組3個(gè)魚缸，每個(gè)魚缸10條魚。試驗(yàn)日糧采用6因子[2（5%和10%脂肪水平）×3（0、0.5和1 g/kg L-肉堿）]設(shè)計(jì)，試驗(yàn)共進(jìn)行10周，包括2周適應(yīng)期，各組日糧組成及營養(yǎng)水平見表1。試驗(yàn)期間，魚缸內(nèi)的水溫控制在（25±0.5）℃，溶解氧維持在（7±0.05）mg/L，pH在 7.5左右，光照采用自然光照（10 h光照，14 h黑暗）。飼喂前1 h對(duì)投喂量進(jìn)行稱重，每次緩慢投料，保證飼料總攝取量和未食用的顆粒能被放置在每個(gè)水箱的單獨(dú)排水管下的網(wǎng)狀收集器收集，采食量是總供給量減去未食用的飼料量。

表1 各組日糧組成及營養(yǎng)水平

1.2 生長性能和體成分 生長性能和體成分計(jì)算公式如下：

生長速率/%=（末重-初重）/試驗(yàn)天數(shù)×100，相對(duì)生長速度/%=（末重-初重）/初重×100，蛋白效率比=增重/蛋白攝入量，外形指數(shù) /%=體寬/體長3×100。

試驗(yàn)結(jié)束后，每個(gè)重復(fù)選擇2只魚屠宰后，用常規(guī)養(yǎng)分分析方法測定蛋白質(zhì)、脂肪、水分和灰分含量。

1.3 血液生化指標(biāo)和抗氧化性能 每個(gè)重復(fù)隨機(jī)選擇5條魚尾靜脈采血，3000 g離心10 min收集血漿。血漿用于測定血球容積、血紅蛋白、葡萄糖、甘油三酯、膽固醇、低密度脂蛋白和高密度脂蛋白含量。分析血漿丙二醛（MDA）含量，超氧化物歧化酶（SOD）、過氧化氫酶（CAT）和谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-Px）活力，所有試劑盒購自南京建成生物工程研究所。

1.4 統(tǒng)計(jì)分析 試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用SPSS（18.0版）多因素方差分析，試驗(yàn)日糧中的脂肪和肉堿水平為兩個(gè)主效應(yīng)，各組間的差異用Tukey法進(jìn)行多重比較，分析日糧脂肪和肉堿水平對(duì)各測定指標(biāo)的交互效應(yīng)，試驗(yàn)結(jié)果以“平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差”表示，P＜0.05判定為差異顯著。

2 結(jié)果與分析

2.1 日糧肉堿和脂肪水平對(duì)鯉魚生長性能的影響 由表2可以看出，各處理組對(duì)鯉魚末重、相對(duì)生長速率、生長率、飼料利用率和外形指數(shù)均無顯著影響（P＞0.05）。日糧肉堿和脂肪水平對(duì)上述指標(biāo)的影響也無顯著交互作用（P＞0.05）。

表2 日糧脂肪和L-肉堿水平對(duì)鯉魚生長性能的影響

2.2 日糧肉堿和脂肪水平對(duì)鯉魚體成分的影響由表3可以看出，日糧肉堿和脂肪水平對(duì)鯉魚機(jī)體蛋白質(zhì)、脂肪、灰分和水平的影響具有顯著交互作用（P＜0.05）。其中高脂肪日糧組添加1 g/kg肉堿較其他組顯著降低了鯉魚機(jī)體脂肪和灰分含量（P＜0.05），同時(shí)10%脂肪日糧添加1 g/kg肉堿組鯉魚蛋白質(zhì)含量最高（P＜0.05）。

表3 日糧脂肪和L-肉堿水平對(duì)鯉魚體成分的影響 %

2.3 日糧肉堿和脂肪水平對(duì)鯉魚體成分的影響由表4可以看出，日糧肉堿和脂肪水平對(duì)鯉魚血球容積和血紅蛋白含量無顯著影響（P＞0.05）。日糧肉堿水平對(duì)血漿甘油三酯含量無顯著影響（P＞0.05），但日糧脂肪水平顯著影響血漿甘油三酯含量（P＜0.05）。10%脂肪水平組血漿甘油三酯含量顯著低于5%脂肪水平組（P＜0.05）。日糧肉堿和脂肪水平對(duì)血漿葡萄糖、膽固醇、低密度脂蛋白和高密度脂蛋白含量的影響具有顯著交互效應(yīng)（P＜0.05）。不同脂肪水平日糧添加肉堿較單獨(dú)的對(duì)照組顯著提高了血漿葡萄糖和高密度脂蛋白含量（P＜0.05），顯著降低了膽固醇和低密度脂蛋白含量（P＜0.05）。

2.4 日糧肉堿和脂肪水平對(duì)鯉魚抗氧化指標(biāo)的影響 由表5可知，日糧肉堿和脂肪水平顯著影響鯉魚血漿抗氧化相關(guān)指標(biāo)，其中10%脂肪水平添加1 g/kg肉堿組較其他組顯著提高了血漿SOD、CAT和 GSH-Px的活力（P＜ 0.05），顯著降低了血漿MDA含量（P＜0.05）。

3 討論

左旋肉堿對(duì)魚類生長和脂質(zhì)代謝具有潛在的積極作用，引起許多研究者的興趣。一些科學(xué)家發(fā)現(xiàn)，左旋肉堿能提高幾種魚類的生長速度（Mohseni和 Ozorio，2014），但本試驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn)，不同脂肪水平日糧添加肉堿對(duì)鯉魚的生長性能無顯著影響。此外，關(guān)于日糧脂肪水平和添加肉堿對(duì)魚類生長或其他生理功能影響的互作效應(yīng)研究較少。據(jù)報(bào)道，肉堿對(duì)魚類生長和肉質(zhì)的影響可能與物種特異性有關(guān)，也取決于環(huán)境條件、魚類生長階段和日糧營養(yǎng)成分（賴氨酸含量和肉堿添加水平）（Dias等，2001）。Yang等（2012）研究表明，日糧添加肉堿可以降低鱸魚脂肪含量，但Dias等（2001）的報(bào)道結(jié)果卻顯示，肉堿對(duì)魚肉脂肪含量無顯著影響。因此，日糧添加肉堿在降低機(jī)體脂質(zhì)方面的這種差異性是否與日糧脂肪水平有關(guān)還尚不清楚。但我們的研究表明，日糧添加肉堿和脂肪水平對(duì)降低魚肉脂肪含量的影響具有顯著交互作用，其中10%脂肪水平日糧添加1 g/kg肉堿魚肉脂肪和灰分含量最低，蛋白質(zhì)含量最高，說明肉堿對(duì)脂肪在線粒體的氧化具有促進(jìn)作用（Du等，2006）。

表 4 日糧脂肪和 L- 肉堿水平對(duì)鯉魚血液生化指標(biāo)的影響 mg/dL

表5 日糧脂肪和L-肉堿水平對(duì)鯉魚抗氧化指標(biāo)的影響

飼喂10%脂肪水平日糧的鯉魚血漿甘油三酯和膽固醇含量顯著高于5%脂肪水平組，這與Du等（2006）研究結(jié)果一致。另一方面，有研究報(bào)道指出，在人和陸生動(dòng)物飲食或日糧中添加L-肉堿會(huì)降低血清甘油三酯、膽固醇、磷脂和游離脂肪酸含量（Rebouche，1992）。Yang等（2009）發(fā)現(xiàn)，日糧添加肉堿降低了血漿中甘油三酯、總膽固醇水平和非酯化脂肪酸水平，但對(duì)磷脂含量無顯著影響。研究結(jié)果表明，不同脂肪水平日糧添加肉堿降低了膽固醇、低密度脂蛋白含量，提高了葡萄糖和高密度脂蛋白濃度，其中10%脂肪日糧添加1 g/kg肉堿表現(xiàn)最顯著。肉堿可以調(diào)控輔酶A與乙酰輔酶A的比例，影響碳水化合物和脂肪代謝（Bell等，1992）。

脂質(zhì)過氧化是一種自然降解和細(xì)胞膜破壞的過程，谷胱甘肽過氧化物酶是一種有效的脂質(zhì)過氧化保護(hù)酶，此外過氧化氫酶和超氧化物歧化酶是抗氧化防御系統(tǒng)的另外兩種主要抗氧化酶。另一方面，血漿丙二醛的含量與谷胱甘肽過氧化物酶活性有很好的相關(guān)性，通常用來評(píng)價(jià)機(jī)體是否處于氧化應(yīng)激狀態(tài)。本試驗(yàn)研究了肉堿對(duì)鯉魚抗氧化性能的影響，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，日糧脂肪水平和添加肉堿對(duì)鯉魚抗氧化性能的影響具有顯著交互作用，這表明肉堿可以抑制脂質(zhì)過氧化，緩解鯉魚氧化應(yīng)激（Ma等，2008）。此外，在活性氧含量顯著下降的情況下，日糧添加肉堿可以降低草魚血漿丙二醛含量和細(xì)胞凋亡（Wang等，2016），同時(shí)L-肉堿可以抑制由鐵介導(dǎo)的脂質(zhì)過氧化（Ma等，2008）。

4 結(jié)論

本試驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn)，日糧脂肪和肉堿水平對(duì)鯉魚體成分、血液生化指標(biāo)及抗氧化性能的影響具有顯著交互效應(yīng)，其中10%脂肪水平日糧添加1 g/kg L-肉堿可以改善鯉魚機(jī)體體組成，降低脂質(zhì)過氧化水平。