酵母培養(yǎng)物降低黃曲霉毒素和嘔吐毒素對豬生長性能、器官健康和免疫狀態(tài)影響的研究

胡永婷，李彥明，李穎靚

（山西農(nóng)業(yè)大學 動物科技學院，山西太谷 030800）

真菌毒素是真菌在飼料原料中常見的有毒次生代謝產(chǎn)物，對動物健康和生長性能有嚴重影響。在已知的300～400種霉菌毒素中，黃曲霉毒素和嘔吐毒素是飼料工業(yè)和養(yǎng)殖業(yè)中最常見且毒性最強兩種（黃廣明等，2010）。雖然產(chǎn)生黃曲霉毒素和嘔吐毒素的真菌生長在不同的環(huán)境條件下，使它們不太可能同時污染谷物，但在飼料加工過程中，兩種受黃曲霉毒素或嘔吐毒素污染的谷物來源很可能混合在一起，豬可能會采食含有霉菌毒素的飼料，這些霉菌毒素可能產(chǎn)生協(xié)同作用，進一步對動物造成負面影響（黃海青等，2005）。降低霉菌毒素污染有害影響的一種方法是使用飼料添加劑，如黏土類和酵母，它們可能通過結(jié)合方式來降低霉菌毒素的影響。這些添加劑的功效取決于霉菌毒素的種類及其在飼料中的濃度。蒙脫石是黏土的一種，是一種層狀硅酸鹽，通過陽離子交換吸附極性黃曲霉毒素化合物（葉盛群和諶剛，2012）。酵母在降低毒素有害風險也具有一定作用，干燥的啤酒酵母保存了酵母的部分發(fā)酵和吸附能力，具有霉菌毒素吸收能力，因為酵母細胞壁含有多糖、脂質(zhì)和具有吸附中心的蛋白質(zhì)，通過氫和離子鍵或疏水作用與霉菌毒素結(jié)合（候然然，2007）。本研究的目的是采用黃曲霉毒素B1和嘔吐毒素污染的飼料飼喂斷奶仔豬，并在飼料中添加蒙脫石和酵母培養(yǎng)物復合物，研究其對豬生長性能、器官健康和免疫狀態(tài)的影響。

1 材料與方法

1.1 試驗設(shè)計 試驗選擇體重（8.75±0.38）kg，28 d斷奶的三元雜交豬500頭，隨機分為5個組，每組5個重復（20頭/重復），試驗共開展42 d。對照組為未加毒素污染原料，處理1組含150 μg/kg黃曲霉B1毒素+1100 μg/kg嘔吐毒素，處理2組在處理1組中添加2 mg/kg蒙脫石，處理3組在處理1組中添加1.0 mg/kg蒙脫石和0.5 mg/kg酵母培養(yǎng)物復合物，處理4組在處理1組中添加0.5 mg/kg蒙脫石和0.5 mg/kg酵母培養(yǎng)物復合物。日糧組成及營養(yǎng)水平見表1。

1.2 樣品收集與測定

1.2.1 生長性能 試驗期間每周按照重復對豬只進行稱重、記錄飼料用量，試驗結(jié)束后計算各階段豬只日增重、采食量和飼料報酬（增重/飼料用量）。

表1 對照組和毒素污染組日糧組成及營養(yǎng)水平

1.2.2 血液指標 在42 d，每個重復選擇5頭豬進行頸靜脈采集血液樣本。血樣用于血液學、生化和免疫學分析。分離血清用于測定肝生化指標、免疫球蛋白分析。

1.2.3 組織學分析 試驗結(jié)束后收集肝臟、脾臟和腎臟，稱重后計算其相對重量。分析肝臟、脾臟和腎臟亮度（L）、紅度（a）和黃度（b）。顯微鏡鏡檢肝臟和腎臟組織損傷情況，0～5%正常，5%～15%輕微損傷，15%～40%中度損傷，大于40%嚴重損傷。

1.3 統(tǒng)計分析 數(shù)據(jù)分析采用SAS軟件單因素方差模型，以初始體重作為分組依據(jù)，組間均值采用Tukey法進行多重比較，當P＜0.05時，判定為統(tǒng)計學上差異顯著，當0.10＜P＜0.05時，判定為具有顯著差異的趨勢。

2 結(jié)果與分析

2.1 毒素污染日糧添加酵母培養(yǎng)物對豬生長性能的影響 由表2可知，在試驗第3周飼喂毒素污染日糧的豬日增重降低，但在后兩周未持續(xù)降低。整個試驗1～42 d毒素污染日糧較對照組有降低日增重的趨勢（P=0.08），但毒素污染日糧與對照組對1～42 d斷奶仔豬平均日采食量和飼料報酬均無顯著影響（P＞0.05）。毒素污染日糧添加2 mg/kg蒙脫石和1.0 mg/kg蒙脫石+0.5 mg/kg酵母培養(yǎng)物較毒素污染日糧組顯著改善了仔豬的生長性能（P＜0.05）。

表2 添加酵母培養(yǎng)物對豬生長性能的影響

2.2 毒素污染日糧添加酵母培養(yǎng)物對豬血液學指標的影響 由表3可知，仔豬飼喂毒素污染日糧較對照組顯著提高了血球容積、平均血紅蛋白含量和平均血紅蛋白濃度（P＜0.05）。毒素污染日糧添加2 mg/kg蒙脫石顯著降低了紅細胞體積（P ＜ 0.05）。

2.3 毒素污染日糧添加酵母培養(yǎng)物對豬免疫學參數(shù)的影響 由表4可知，與對照組和處理2組相比，處理1組顯著提高了IgG和IgM的含量（P＜0.05）。各組日糧對腫瘤壞死因子-α含量無顯著影響（P＞0.05）。

2.4 毒素污染日糧添加酵母培養(yǎng)物對豬血清生化指標的影響 由表5可知，處理1組和處理2組較對照組顯著提高了血清白蛋白含量（P＜0.05），對照組較處理2組和處理4組顯著降低了尿素氮含量和尿素氮與肌酸苷的比值（P＜0.05），處理1組和處理2組較對照組和處理3組顯著提高了血清鈣含量（P＜0.05）。

2.5 毒素污染日糧添加酵母培養(yǎng)物對豬組織器官重量及色度的影響 由表6可知，各組日糧對腎臟和脾臟重量無顯著影響（P＞0.05），但處理1組和處理2組較對照組和處理3組顯著提高了肝臟重量（P＜0.05）。毒素污染日糧添加蒙脫石和蒙脫石酵母培養(yǎng)物復合物有提高肝臟黃度的趨勢（P=0.08）。

表3 添加酵母培養(yǎng)物對豬血液學指標的影響

表 4 添加酵母培養(yǎng)物對豬免疫學參數(shù)的影響 mg/mL

表5 添加酵母培養(yǎng)物對豬血清生化指標的影響

表6 添加酵母培養(yǎng)物對豬組織器官重量及 色度的影響

2.6 毒素污染日糧添加酵母培養(yǎng)物對豬組織損傷的影響 由表7可知，處理1組提高了肝臟膽管增生、肥大和水腫變性損傷（P＜0.05），但處理3組顯著降低了毒素對肝臟的損傷（P＜0.05）。對照組和處理4組較處理1組顯著降低了腎臟的空泡損傷（P＜0.05）。

表7 添加酵母培養(yǎng)物對豬組織損傷的影響

3 討論

黃曲霉毒素和嘔吐毒素屬于真菌毒素，通常會污染谷物原料，如玉米、小麥和大麥。當豬攝入受毒素污染的飼料后，這些霉菌毒素會降低期生長速度和采食量，影響免疫系統(tǒng)，并造成器官損傷，給養(yǎng)殖戶帶來巨大的經(jīng)濟損失。黃曲霉毒素和嘔吐毒素在日糧中同時存在可能比單獨存在對豬造成更嚴重的負面影響，因為它們具有協(xié)同作用（Miazzo等，2005）。本研究未評估未受霉菌毒素污染的飼料中添加蒙脫石或酵母培養(yǎng)物對豬的影響，因為蒙脫石在沒有霉菌毒素的情況下不會對動物產(chǎn)生積極或消極的影響。Xia等（2005）研究表明，給斷奶仔豬飼喂蒙脫石并不會改變其生長性能。在未受霉菌毒素污染的豬飼料中添加酵母細胞物質(zhì)可產(chǎn)生不同效果，如增加日增重和日采食量，改善料肉比，增強免疫系統(tǒng)，防止細菌感染（Kogan和Kocher，2007）。然而也有研究表明，添加活酵母或酵母β-葡聚糖并不改變生長性能或具有免疫調(diào)節(jié)功能（Eicher等，2006）。在本研究中，毒素污染日糧添加2 mg/kg蒙脫石和1.0 mg/kg蒙脫石+0.5 mg/kg酵母培養(yǎng)物較毒素污染日糧組顯著改善了仔豬生長性能。

血液學分析顯示，蒙脫石和酵母培養(yǎng)物對各組指標存在一些差異，仔豬飼喂毒素污染日糧較對照組顯著提高了血球容積、平均血紅蛋白含量和平均血紅蛋白濃度，毒素污染日糧添加2 mg/kg蒙脫石顯著降低了紅細胞體積。紅細胞壓積在飼喂霉菌毒素的豬體內(nèi)也較高，紅細胞壓積是指在一定體積的血液中紅細胞的濃度，與機體脫水有關(guān)（Perkins，2009）。因此，本試驗結(jié)果表明，飼喂含黃曲霉毒素和嘔吐毒素的豬可能已經(jīng)出現(xiàn)脫水。免疫系統(tǒng)的正常功能對生長中的豬很重要，適應性免疫系統(tǒng)可提供一種特定的免疫反應，包括B淋巴細胞對特定病原體或外來物質(zhì)產(chǎn)生抗體，如IgG和IgM（Murphy等，2008）。本試驗結(jié)果顯示，與對照組和1.0 mg/kg蒙脫石+0.5 mg/kg酵母培養(yǎng)物復合物組相比，2 mg/kg蒙脫石顯著提高了IgG和IgM的含量。

與血液學分析結(jié)果相似，生化指標結(jié)果顯示，霉菌毒素污染日糧添加蒙脫石和酵母培養(yǎng)物的影響最小，顯著影響主要是血清中的白蛋白、鈣和氮水平。白蛋白是肝臟合成的一種主要蛋白，隨著霉菌毒素的降低而增加。然而，如前所述，飼喂霉菌毒素的豬也顯示出血細胞濃度升高，這是白蛋白升高的最常見結(jié)果，主要是由于脫水后血液中的濃縮作用（Limdi，和 Hyde，2003）。霉菌毒素污染日糧組提高了肝臟膽管增生、肥大和水腫變性損傷，但1 mg/kg蒙脫石+0.5 mg/kg酵母培養(yǎng)物組顯著降低了毒素對肝臟的損傷。高黃曲霉毒素日糧（3000 μg /kg）會導致肝臟病變，出現(xiàn)空泡、纖維化和膽管增生（Harvey等，1991）。而Chaytor等（2011）研究結(jié)果表明，飼喂低濃度黃曲霉毒素和嘔吐毒污染日糧的豬，肝臟纖維化是唯一觀察到的組織損傷。

4 結(jié)論

綜上所述，長期飼喂中等濃度黃曲霉B1和嘔吐毒素污染的日糧會對豬的健康造成危害。日糧添加2 mg/kg蒙脫石或1.0 mg/kg蒙脫石+0.5 mg/kg酵母培養(yǎng)物復合物對飼喂毒素污染日糧豬的健康和生長性能具有改善作用。