一起野豬豬瘟感染的診斷

廖 飛，楊先富，包濤濤，王家鵬，汪忠榮，劉小惠，趙孝木

（1.黔東南州動物疫病預防控制中心，貴州凱里 556000；2.雷山縣動物疫病預防控制中心，貴州雷山 522634；3.黔東南州動物衛(wèi)生監(jiān)督所，貴州凱里 556000）

豬瘟（classical swine fever，CSF）是由黃病毒科豬瘟病毒（classical swine fever virus，CSFV）引起豬的一種急性或慢性、高熱性和高度接觸性傳染病，俗稱“爛腸瘟”，不同品種的家豬、野豬都對其易感，一年四季均可發(fā)生，是威脅我國養(yǎng)豬業(yè)的主要傳染病之一。其主要特征是：急性病例主要呈敗血性變化，表現(xiàn)實質(zhì)性器官出血、壞死或梗死等癥狀，慢性病例呈現(xiàn)纖維素性壞死性腸炎[1]。目前針對本病，臨床上尚無特效藥物治療，即使臨床治愈，也會呈現(xiàn)愈后不良，并且可能成為帶病豬，從而感染同群健康豬。病豬和帶毒豬是該病的主要傳染源，其分泌物、排泄物、臟器及尸體、豬肉、血液，以及污染的廢水、飼料、用具、飲水等都可能散播病毒。CSF的主要傳播途徑通過直接接觸，經(jīng)消化道感染[2]。隱性感染或患病母豬也可以通過胎盤垂直感染胎兒，導致產(chǎn)死胎或木乃伊胎、弱仔等。CSF在世界各地普遍存在，在我國流行尤為嚴重。專家學者認為，CSF是造成我國養(yǎng)豬業(yè)經(jīng)濟損失最大的單一病種，幾乎所有的養(yǎng)豬場普遍存在CSFV，給我國養(yǎng)豬業(yè)帶來巨大經(jīng)濟損失[3-5]。目前，我國野豬飼養(yǎng)量逐漸增多，但關于野豬CSF病例的報道較少。本研究針對一野豬養(yǎng)殖場出現(xiàn)的疑似CSF疫情進行了診斷，以期為家養(yǎng)野豬CSF病例的早期發(fā)現(xiàn)提供技術支持。

1 流行病學調(diào)查

通過現(xiàn)場調(diào)查及詢問養(yǎng)殖場主方式，對該起野豬疫情進行了流行病學調(diào)查。該養(yǎng)殖場存欄野豬240頭，其中種母豬30頭、種公豬8頭、育肥豬72頭、仔豬130頭，堅持實行自繁自養(yǎng)方式，飼喂自配料。該養(yǎng)殖場按免疫程序進行了春秋集中CSF活疫苗免疫，但對該時間段以外的新生仔豬以及懷孕母豬未接種CSF疫苗。2018年8月初，該野豬養(yǎng)殖場仔豬開始發(fā)病，至9月底，共有100頭野豬發(fā)?。ň鶠樽胸i），死亡75頭，死亡率為75%（75/100）。發(fā)病仔豬表現(xiàn)體溫升高，并伴有食欲不振、先便秘后腹瀉、呼吸困難、逐漸消瘦等癥狀，病程為1周至1個月不等。發(fā)病期間，該養(yǎng)殖場獸醫(yī)曾用青霉素、恩若沙星、林可霉素等抗菌藥治療，但無效。

2 臨床癥狀

發(fā)病野豬主要表現(xiàn)體溫升高（41～41.5 ℃）、眼睛無神、精神萎靡、拱背、嗜睡（圖1-A）、運動失調(diào)；眼結膜發(fā)炎，有淚痕；病初出現(xiàn)少食或廢食，被毛粗糙；起立飲食時出現(xiàn)咳嗽，伴有呼吸困難；部分病豬先便秘后腹瀉，逐漸消瘦（圖1-B）。

圖1 野豬CSF病例臨床癥狀

3 病理變化

對病死仔豬進行剖檢發(fā)現(xiàn)：內(nèi)臟實質(zhì)器官黏膜及漿膜均呈現(xiàn)不同程度的出血性病變，全身淋巴結出血、腫大，特別是腹股溝淋巴結和腸系膜淋巴結（圖2-A、B），切面呈大理石樣；脾臟出現(xiàn)邊緣性梗死及不整齊，呈鋸齒狀（圖2-C），腫大不明顯；肺間質(zhì)增寬，腎臟表面有出血點，大腸有典型性“扣狀腫”（圖2-D）。

圖2 野豬CSF病例剖檢病理變化

4 實驗室診斷

4.1 細菌學診斷

將無菌采集的肝臟進行血涂片，革蘭氏染色后，在顯微鏡下未觀察到細菌。將無菌采取的血液以及肺、肝、脾及淋巴結等病料接種于培養(yǎng)基[4]，37 ℃培養(yǎng)20 h左右，均未觀察到有細菌生長。

4.2 分子生物學檢測

對采集的4份病死仔豬淋巴結組織樣品，采用實時熒光定量RT-PCR方法[4，6]，進行豬繁殖與呼吸綜合征病毒（PRRSV）及CSFV檢測。檢測試劑盒購于北京世紀元亨動物防疫技術有限公司。檢測結果顯示：4份樣品的PRRSV檢測均未出現(xiàn)特異擴增曲線，判為PRRSV核酸陰性；4份樣品的CSFV檢測均出現(xiàn)特異擴增曲線，并且CT值小于臨界值30（圖3），判斷為CSFV核酸陽性。結合臨床癥狀、病理變化和實驗室檢測結以及流行病學調(diào)查結果（新增仔豬未免疫CSF疫苗），綜合判斷為CSFV感染。

5 討論

該養(yǎng)殖場是野豬家養(yǎng)，病死豬主要是自繁的仔豬。該養(yǎng)殖場實行春秋集中免疫CSF疫苗，但還是出現(xiàn)了仔豬大面積發(fā)病，甚至死亡，主要原因是該養(yǎng)殖場未對新生仔豬及懷孕母豬及時補免，還有仔豬本來就對疫病抵抗力較差，在失去母源抗體保護后，更容易感染并暴發(fā)疫情[7]。本病只能采用預防為主的方針，制訂適宜本場的免疫措施和程序，有條件的養(yǎng)殖場在免疫后要定期監(jiān)測評估豬群免疫抗體，確保免疫抗體水平達到防控效果。條件好的豬場可以通過檢測逐漸淘汰帶毒豬、病豬，實施CSF凈化[4，8]。此外，還需要加強飼養(yǎng)管理，做好欄圈清潔衛(wèi)生，保持圈內(nèi)通風，保持合理的飼養(yǎng)密度，減少各種應激，同時做好種豬引進的隔離與檢測，嚴格落實各項生物安全制度，這樣可有效防止CSF疫情的暴發(fā)。

圖3 CSFV RT-PCR檢測特異擴增曲線