33157例患者血型不規(guī)則抗體篩查的結(jié)果分析

劉潺　李平　王樹(shù)亞　劉婷婷

【摘 要】目的：通過(guò)對(duì)本院住院患者血清不規(guī)則抗體篩查結(jié)果的分析，探討血型不規(guī)則抗體篩查在臨床輸血中的意義。方法：應(yīng)用微柱凝膠免疫檢測(cè)技術(shù)對(duì)本院2015年8月至2016年7月33157名住院患者進(jìn)行不規(guī)則抗體篩查，并將陽(yáng)性結(jié)果復(fù)查后再采用譜細(xì)胞分析，確定不規(guī)則抗體的特異性。結(jié)果：1）在33157名患者中共查出不規(guī)則抗體陽(yáng)性101例，占0.30%，其中女性患者陽(yáng)性率為0.420%，高于男性患者（0.181%），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）。2）61例患者接受了抗體類(lèi)型鑒定，其中檢出特異性抗體42例（68.85%），包括Rh系統(tǒng)患者31例（50.82%），MNS系統(tǒng)患者8例（13.11%），Lewis系統(tǒng)患者2例（3.28%），抗Ec合并抗Mur患者1例（1.64%）;非特異性抗體患者15例（24.59%），包括自身抗體7例（11.48%），冷抗體3例（4.92%），自身抗體合并同種抗體5例（8.20%）;性質(zhì)不明抗體4例（6.56%）。3）按臨床科室劃分，不規(guī)則抗體檢出率以風(fēng)濕免疫科患者最多，占4.67%，其次為血液科患者，占1.71%，內(nèi)科患者占0.49%，產(chǎn)科患者占0.33%。結(jié)論：輸血前血型不規(guī)則抗體的篩查與種類(lèi)鑒定非常必要，及早發(fā)現(xiàn)有臨床意義的不規(guī)則抗體，減少溶血性輸血反應(yīng)，保證患者輸血安全。

【關(guān)鍵詞】 不規(guī)則抗體;篩查;輸血安全

Analysis of irregular antibody screening results in 33157 hospitalized patients

Liu Chan， Li Ping， Wang Shuya， Liu Tingting

Department of Transfusion， Affiliated Hospital of Medical School of Nanjing University， Nanjing， Jiangsu 210000

[Abstract] Objective： Red blood cell irregular antibodies were analyzed in hospitalized patients to ensure safty of blood transfusion. The type of antibodies and distribution were investigated to explore the significance in clinical transfusion. Methods： Irregular antibodies screening was performed with microcolumn gel method in 33157 hospitalized patients between August 2015 and July 2016. The positive results were reviewed and further analyzed to identifiy the specificity of irregular antibodies. Results： 1） 101 cases of irregular antibodies were detected accounting for 0.30% with 72 females （0.402%） and 29 males （0.180%） Female patients had a significantly high positive rate compared with male（P<0.05）. 2） Of 61 positive samples for further antibody specificity， 42 cases were identified as specific antibodies， including 31 cases of Rh group （50.82%）， 8 cases of MNS group （13.11 %）， 2 cases of Lewis group （3.28%）， and 1 case of antiEc combined with antiMur， while 15 cases as nonspecific antibodies， including 7 cases of auto antibodies， 3 cases of cold antibodies， 5 cases of autoantibodies combined with specific antibodies and 4 cases of others. 3） The distribution of positive irregular antibodies in different clinical departments： rheumatology department with a highest rate at 4.67%， followed by hematology department （1.71%）， internal medicine department （0.49%） and obstetrical department （0.33%）. Conclusion： It is essential to perform irregular antibodies screening and identification for patients before transfusion， which is of great significance for ensuring blood transfusion safety and reducing adverse transfusion reaction.

[Key words]Irregular antibody;Screening;Blood transfusion safety

輸血前檢測(cè)是保證臨床用血安全的重要手段。隨著輸血技術(shù)的發(fā)展和完善，ABO和RhD血型鑒定作為常規(guī)檢測(cè)手段極大地減少了臨床輸血不良反應(yīng)的發(fā)生，而因紅細(xì)胞不規(guī)則抗體導(dǎo)致臨床輸血產(chǎn)生的溶血反應(yīng)還時(shí)有發(fā)生[12]。紅細(xì)胞血型不規(guī)則抗體是指ABO血型系統(tǒng)以外的其他血型系統(tǒng)抗體，如Rh、MNS、Lewis等血型系統(tǒng)的抗體。不規(guī)則抗體是導(dǎo)致臨床溶血性輸血不良反應(yīng)、新生兒溶血癥及紅細(xì)胞輸注無(wú)效以及實(shí)驗(yàn)室疑難交叉配型的主要原因[36]。近年來(lái)，人們對(duì)血型系統(tǒng)的認(rèn)識(shí)逐漸加深，不規(guī)則抗體篩查已經(jīng)成為輸血前相容性檢測(cè)的常規(guī)項(xiàng)目。尤其對(duì)于有輸血史和妊娠史的患者，避免了由于免疫性抗體引起的遲發(fā)型溶血等輸血不良反應(yīng)。不規(guī)則抗體的類(lèi)型在不同國(guó)家和地區(qū)分布有差異，對(duì)本地區(qū)人群不規(guī)則抗體的分布特征和頻率進(jìn)行考察，是臨床輸血安全和優(yōu)化用血管理的保證。為了解不規(guī)則抗體在本院住院患者中的分布特點(diǎn)，選取本院33157名患者進(jìn)行篩查和分析，現(xiàn)將結(jié)果報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取本院2015年8月至2016年7月收治的住院患者共33157例，其中男性16016例，女性17141例，年齡分布為1～100歲。EDTAK2抗凝血2mL，分離血漿，檢測(cè)。

1.2 儀器與試劑

抗體篩選紅細(xì)胞、微柱凝膠檢測(cè)卡及儀器由長(zhǎng)春博訊生物技術(shù)有限公司提供，專(zhuān)用孵育器、離心機(jī)由長(zhǎng)春博研科學(xué)儀器有限責(zé)任公司提供，抗體鑒定譜細(xì)胞由上海血液生物醫(yī)藥有限公司提供。以上試劑均批檢合格并在有效期內(nèi)使用。

1.3 方法

1.3.1 不規(guī)則抗體篩選的方法 分別取50μL 0.8%的I、II、III號(hào)篩選細(xì)胞與50μL患者血清，加入微柱凝膠卡反應(yīng)孔中，置于37℃專(zhuān)用孵育器孵育15min后，放入專(zhuān)用離心機(jī)900r/min離心2min，1500r/min離心3min。結(jié)果判讀：離心后，若紅細(xì)胞凝聚在凝膠表面或者中間為抗體陽(yáng)性，沉于反應(yīng)孔底部則為陰性?？贵w初步篩查為陽(yáng)性的標(biāo)本進(jìn)行復(fù)檢以排除人為因素和（或）操作失誤。復(fù)查結(jié)果仍為陽(yáng)性的標(biāo)本進(jìn)一步用抗體鑒定譜細(xì)胞進(jìn)行抗體特異性分析。

1.3.2 不規(guī)則抗體鑒定 通過(guò)鹽水法、抗人球蛋白法或聚凝胺法對(duì)不規(guī)則抗體進(jìn)行特異性鑒定。根據(jù)受檢血漿與譜細(xì)胞反應(yīng)格局以及相應(yīng)抗原測(cè)定判讀抗體特異性。當(dāng)受檢血漿與所有譜細(xì)胞和自身細(xì)胞的凝集強(qiáng)度一致時(shí)，判斷為非特異性自身抗體[7]。

1.3.3 冷抗體檢測(cè) 將患者自身紅細(xì)胞與血清在4℃進(jìn)行冷抗體吸收試驗(yàn)，重復(fù)吸收3次，將充分吸收后的血清與譜細(xì)胞在37℃反應(yīng)。若無(wú)凝集、無(wú)溶血，則排除同種抗體的存在，確定為單一冷抗體;冷抗體特異性鑒定通過(guò)患者血清與成人OI細(xì)胞、臍血Oi細(xì)胞及自身細(xì)胞的反應(yīng)格局進(jìn)行判斷[8]。

1.3.4 自身抗體檢測(cè) 將患者紅細(xì)胞放散后與患者血清進(jìn)行自身抗體吸收試驗(yàn)，將吸收后的患者血清與譜細(xì)胞進(jìn)行反應(yīng)，根據(jù)反應(yīng)格局確定抗體類(lèi)型，若無(wú)凝集、無(wú)溶血，則排除同種抗體的存在。將患者紅細(xì)胞放散液與譜細(xì)胞及自身細(xì)胞進(jìn)行反應(yīng)，若陽(yáng)性反應(yīng)強(qiáng)度一致，則判斷為單一非特異性自身抗體[9]。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

應(yīng)用SPSS 22.0軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)數(shù)資料采用例數(shù)或百分率（%）表述，組間比較采用χ2檢驗(yàn)，P<0.05表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 血型不規(guī)則抗體的陽(yáng)性率

33157例患者樣本中檢出不規(guī)則抗體陽(yáng)性101例，陽(yáng)性率為0.30%，其中女性72例，陽(yáng)性率為0.420%，男性29例陽(yáng)性率為0.181%。女性患者不規(guī)則抗體的陽(yáng)性率明顯高于男性，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）。具體結(jié)果見(jiàn)表1。101例抗體篩查陽(yáng)性患者中無(wú)輸血史且無(wú)妊娠史的29例，占28.71%，而有輸血史或妊娠史的為72例，占71.29%，明顯高于無(wú)輸血史無(wú)妊娠史患者。結(jié)果見(jiàn)表2。

2.2 血型不規(guī)則抗體的鑒定

對(duì)101例不規(guī)則抗體陽(yáng)性樣本中的61例進(jìn)行不規(guī)則抗體的鑒定（其余40例拒絕送檢）。根據(jù)鑒定結(jié)果，特異性抗體42例（68.85%）：包括Rh血型系統(tǒng)31例（50.82%），MNS系統(tǒng)8例（13.11%），Lewis系統(tǒng)2例（3.28%），抗Ec合并抗Mur 1例（1.64%）;非特異性抗體15例（24.59%）：包括自身抗體7例（11.48%），冷抗體3例（4.92%），自身抗體合并同種抗體5例（8.20%），以及性質(zhì)不明抗體4例（6.56%）。數(shù)據(jù)分析結(jié)果見(jiàn)表3和表4。

2.3 不同臨床科室患者不規(guī)則抗體陽(yáng)性率比較

不同臨床科室患者不規(guī)則抗體陽(yáng)性率不同，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01），風(fēng)濕免疫科檢出率最高，血液病患者、產(chǎn)期疾病患者不規(guī)則抗體陽(yáng)性率明顯高于外科、其他患者。見(jiàn)表5。

3 討論

本次對(duì)本院33157例住院患者進(jìn)行了血型抗體篩查，共檢測(cè)出不規(guī)則抗體陽(yáng)性101例，陽(yáng)性檢出率為0.30%，接近文獻(xiàn)報(bào)道的陽(yáng)性率（0.32%）[1012]。101例不規(guī)則抗體陽(yáng)性患者中，女性陽(yáng)性檢出率（0.420%）明顯高于男性（0.181%），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）。輸血和妊娠是導(dǎo)致患者產(chǎn)生不規(guī)則抗體的兩大因素，而女性同時(shí)存在著輸血和妊娠雙重被動(dòng)免疫機(jī)會(huì)，使得女性的不規(guī)則抗體陽(yáng)性檢出率遠(yuǎn)高于男性。

本次經(jīng)鑒定的61例不規(guī)則抗體中，Rh系統(tǒng)抗體31例，占50.82%，其次為MNS系統(tǒng)（13.11%），Lewis系統(tǒng)（3.28%）。Rh系統(tǒng)抗體在血型免疫抗體中所占比例較高，也是引起免疫性溶血反應(yīng)最常見(jiàn)的不規(guī)則抗體[13]。Rh系統(tǒng)的抗體多為IgG抗體。這類(lèi)抗體能與輸入患者體內(nèi)的、表面具有相應(yīng)抗原的紅細(xì)胞結(jié)合，產(chǎn)生抗原抗體反應(yīng)，破壞輸入體內(nèi)的紅細(xì)胞，產(chǎn)生溶血性輸血反應(yīng)。此外，IgG類(lèi)抗體能通過(guò)胎盤(pán)進(jìn)入胎兒血液循環(huán)。如果母嬰Rh血型不合，母親體內(nèi)因此產(chǎn)生的不規(guī)則抗體進(jìn)入胎兒血液循環(huán)，即導(dǎo)致較嚴(yán)重的新生兒溶血病。Rh系統(tǒng)抗體又以抗E為主（25例，40.98%）。我國(guó)漢族人群E抗原的分布頻率為47%，接近一半。在臨床輸血中，未對(duì)獻(xiàn)血者及受血者的E抗原作檢測(cè)，隨機(jī)輸血使得產(chǎn)生抗E的機(jī)會(huì)明顯增多。有研究表明，抗原陽(yáng)性與陰性的百分率越接近，產(chǎn)生抗體的機(jī)會(huì)就越多[14]。已有不少文獻(xiàn)報(bào)道由抗E引起的遲發(fā)型溶血反應(yīng)和新生兒溶血反應(yīng)。目前，一些醫(yī)院已將E抗原作為血型檢測(cè)常規(guī)，需高度重視。與此相反，我國(guó)漢族人群的D抗原的分布頻率高達(dá)99.6%，同時(shí)國(guó)內(nèi)實(shí)驗(yàn)室普遍進(jìn)行RhD抗原的檢測(cè)，并建立了RhD陰性獻(xiàn)血源的信息系統(tǒng)，保證RhD陰性血制品的供應(yīng)。本次還檢出1例Rh血型系統(tǒng)聯(lián)合其他稀有血型系統(tǒng)抗體，還有7例自身抗體及5例自身抗體合并同種抗體，對(duì)需要輸血的不規(guī)則抗體陽(yáng)性患者均進(jìn)行了交叉配血，選擇對(duì)應(yīng)抗原陰性或相合的血液進(jìn)行輸注，未發(fā)生輸血不良反應(yīng)。

從不規(guī)則抗體陽(yáng)性患者的科室分布來(lái)看，風(fēng)濕免疫科不規(guī)則抗體的檢出頻率最高，其次為血液科，內(nèi)科和產(chǎn)科。風(fēng)濕免疫科患者多存在自身免疫功能的改變，體內(nèi)循環(huán)免疫復(fù)合物增多，且反復(fù)輸注血制品。血液科、內(nèi)科患者一般要長(zhǎng)期反復(fù)輸血。有研究表明，慢性病患者反復(fù)輸血時(shí)，每輸1單位紅細(xì)胞、血漿，被動(dòng)免疫的風(fēng)險(xiǎn)增加1%～2%，多次輸血后機(jī)體內(nèi)所產(chǎn)生同種抗體概率上升至15%～20%[15]。產(chǎn)科患者則由于妊娠等原因產(chǎn)生不規(guī)則抗體的機(jī)會(huì)較高。這種分布特征也從側(cè)面表明了反復(fù)輸注血液制品和妊娠是產(chǎn)生不規(guī)則抗體的主要原因。

綜上所述，輸血前進(jìn)行不規(guī)則抗體篩查是十分必要的，對(duì)于有反復(fù)輸血史以及妊娠史的患者更應(yīng)該提高重視，及早發(fā)現(xiàn)有臨床意義的不規(guī)則抗體，選擇抗體對(duì)應(yīng)抗原陰性的同型血進(jìn)行輸注，以減少因此產(chǎn)生不規(guī)則抗體而導(dǎo)致的輸血不良反應(yīng)。同時(shí)，龐大而復(fù)雜的血型系統(tǒng)對(duì)處在輸血檢驗(yàn)日常的工作人員也提出了更高的要求：提高檢測(cè)技能，配備符合本地抗體分布特點(diǎn)的譜細(xì)胞，避免誤判漏檢，確保臨床用血安全。

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