益氣滋陰通腑方對嗎啡所致便秘小鼠腸道傳輸功能的影響

郭占芳 張紅武 楊如意 曹昌霞 孫兆 徐海珍 王宏斌 王秋萍

摘要：目的? 研究益氣滋陰通腑方對嗎啡所致便秘小鼠腸道傳輸功能的影響。方法? 將昆明種小鼠90只，隨機(jī)分為6組，分別設(shè)為西沙比利組、模型組、空白組、中藥高、中、低劑量組，每組15只。除空白組外，其余5組均予皮下注射嗎啡，建立慢性傳輸型便秘（STC）模型。中藥高、中、低劑量分別給于7.2、3.6、1.8 mg/（kg·d）益氣滋陰通腑方顆粒劑濃縮液灌胃，模型組、空白組均予同等量次的蒸餾水注入胃內(nèi)，各組均灌胃10 d。實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，小鼠回盲部注入活性炭懸液，以檢測小鼠腸道傳輸功能，在無張力狀態(tài)下測量腸道全長及被墨汁染色的腸道長度，繼而計算腸道推進(jìn)率。結(jié)果? 益氣滋陰通腑方高、中、低各組均可改善腸動力障礙，與對照組比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05），但不同劑量組間比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）。中藥各組與西沙比利組比較，效果接近，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）。但同時我們觀察到，中藥組的小鼠在整個實(shí)驗(yàn)過程中，無論是皮毛、精神狀態(tài)、進(jìn)食量，均明顯好于西藥組。結(jié)論? 中藥益氣滋陰通腑方對嗎啡所致便秘小鼠腸道傳輸功能障礙有明顯改善作用，顯著改善腸道動力，并可提高小鼠生存質(zhì)量。

關(guān)鍵詞：益氣滋陰通腑方;腸道傳輸功能;小鼠;嗎啡

中圖分類號：R574.62? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? 文獻(xiàn)標(biāo)識碼：A? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? DOI：10.3969/j.issn.1006-1959.2019.09.052

文章編號：1006-1959（2019）09-0156-02

Abstract：Objective? To study the effect of Yiqi Ziyin Tongfu Recipe on intestinal transit function in mice with constipation caused by morphine.Methods? 90 Kunming mice were randomly divided into 6 groups， which were set to cisapride group， model group， blank group， Chinese medicine high， medium and low dose groups， 15 in each group. Except for the blank group， the other 5 groups were given subcutaneous injection of morphine to establish a chronic transit constipation （STC） model. The high， medium and low doses of traditional Chinese medicine were given to 7.2，3.6，1.8 mg/（kg·d）Yiqi Ziyin Tongfu Granules concentrated solution. The model group and the blank group were all injected into the stomach with the same amount of distilled water， and each group was intragastrically administered for 10 d. At the end of the experiment， the activated carbon suspension was injected into the ileocecal part of the mouse to detect the intestinal transit function of the mouse， and the length of the intestine and the length of the intestine stained by the ink were measured under no tension， and then the intestinal propulsion rate was calculated.Results? The high， middle and low groups of Yiqi Ziyin Tongfu Recipe could improve intestinal dysmotility. Compared with the control group， the difference was statistically significant （P<0.05）， but there was no significant difference between the different dose groups（P>0.05）. Compared with the cisapride group， the effects of the Chinese medicine group were similar，the difference was not statistically significant （P>0.05）. At the same time， we observed that the mice in the Chinese medicine group were significantly better than the western medicine group in terms of fur， mental state and food intake throughout the experiment. Conclusion? The Chinese medicine Yiqi Ziyin Tongfu Recipe can significantly improve intestinal transit dysfunction in mice with constipation caused by morphine， significantly improve intestinal motility and improve the quality of life of mice.

Key words： Yiqi Ziyin Tongfu Recipe;Intestinal transit function;Mouse;Morphine

嗎啡所致便秘屬慢傳輸型便秘（STC）的一種，目前發(fā)病機(jī)制尚不明確。新近研究認(rèn)為腸神經(jīng)系統(tǒng)（ENS）相關(guān)遞質(zhì)可能在其發(fā)生發(fā)展中起關(guān)鍵性作用。以往研究顯示自擬益氣滋陰通腑方治療硫酸嗎啡控釋片所致便秘患者，可有效緩解因口服嗎啡所致便秘患者的臨床癥狀，提升血清胃動素水平[1]，有效率達(dá)90%以上。基于此，本研究擬通過建立嗎啡誘導(dǎo)的小鼠便秘模型，觀察益氣滋陰通腑方治療嗎啡所致小鼠便秘的效果，進(jìn)而為嗎啡所致便秘的發(fā)病機(jī)制及臨床診治提供參考。本研究通過觀察益氣滋陰通腑方對嗎啡所致便秘小鼠腸道傳輸功能的影響，進(jìn)一步探討益氣滋陰通腑方對嗎啡所致便秘小鼠腸道傳輸功能的影響的防治作用。

1材料與方法

1.1實(shí)驗(yàn)動物? 選取檢疫合格小鼠90只，雌雄各半，體重23～29 g，購自西安交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)動物中心。實(shí)驗(yàn)動物質(zhì)量合格證編號：61001700002872，實(shí)驗(yàn)動物許可證編號SCXK（陜）2017-003。實(shí)驗(yàn)前分籠飼養(yǎng)，適應(yīng)性喂養(yǎng)3 d。

1.2藥品及試劑

1.2.1藥品? ①鹽酸嗎啡注射液（青海制藥廠，生產(chǎn)批號：161210-1，10 mg /支）1支，加9 ml滅菌注射用水配成1 mg/ml的嗎啡注射液溶液，貯存于4 ℃冰箱備用。②西沙比利（西安楊森制藥有限公司，生產(chǎn)批號：H10960289，5 mg/片），放入研缽中細(xì)研后，使用注射用水配置成2%的溶液，貯存于4℃冰箱備用。③益氣滋陰通腑方顆粒劑：白術(shù)30 g、黃芪30 g、地黃15 g、玄參10 g、木香10 g、麻仁15g、大黃10 g，由本院中藥房提供及鑒定，將藥物混合浸泡1 h后，分別制成1 g/ml、2 g/ml、4 g/ml的濃縮液，貯于4℃冰箱中備用。

1.2.2試劑? 印度墨水，購自西寧恒碩生物科技有限公司。用藥結(jié)束后，各組小鼠禁食水24 h，局部麻醉成功后，經(jīng)回盲部推入印度墨水0.5 ml。

1.3動物分組? 按照隨機(jī)數(shù)字表法將小鼠分成6組，即模型組、空白組、西沙比利組、中藥低劑量組、中藥中劑量組、中藥高劑量組，每組15只。

1.4模型制備? 空白組予正常喂養(yǎng)，另5組進(jìn)行STC模型制備。參照許海塵等的方法[2]。按2.5 mg/（kg·d）的劑量予1 mg/ml的嗎啡注射液皮下注射，1次/d，連續(xù)45 d建立STC模型。觀察小鼠第1次黑色大便排出時間、日均排便粒數(shù)和平均每粒糞便質(zhì)量等的測定結(jié)果，測定小鼠腸道動力減退，糞便重量減少，腸道推進(jìn)力減弱，符合慢傳輸型便秘的生理特點(diǎn)，評價STC模型制備成功。

1.5給藥方法? 按小鼠體表面積換算出每天所需劑量。中藥高、中、低劑量組分別予7.2、3.6、1.8 mg/（kg·d）益氣滋陰通腑方顆粒劑濃縮液灌胃，西沙比利組予2.9 mg/（kg·d）西沙比利溶液灌胃，空白組、模型組給同等量的蒸餾水灌胃，各組均灌胃14 d。

1.6標(biāo)本采集及指標(biāo)檢測? 使用印度墨水，運(yùn)用活性炭溶液推進(jìn)法檢驗(yàn)小鼠腸道傳輸功能。治療后所有小鼠禁食24 h。使用3%戊巴比妥鈉腹腔注射麻醉（40 mg/kg），仰臥固定在手術(shù)臺，剪去腹毛，常規(guī)消毒，縱行切開腹部正中約2.5 cm，用皮試注射器經(jīng)回盲部推入印度墨水0.8 ml。2 h后取出回盲部至肛門的腸道，在無張力情況下測量被墨汁染色的腸道長度及全部腸道的長度，計算腸道推進(jìn)率。腸推進(jìn)率=印度墨水推進(jìn)距離/腸道全長×100%。

1.7統(tǒng)計學(xué)方法? 采用SPSS 19.0統(tǒng)計學(xué)軟件進(jìn)行分析，計量資料使用（x±s）表示，正態(tài)分布資料的兩組組間比較采用配對樣本的LSD-t檢驗(yàn)，計數(shù)資料使用（%）表示，比較采用？字2檢驗(yàn)，檢驗(yàn)水準(zhǔn)α=0.05，P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2結(jié)果

中藥益氣滋陰通腑方各組與空白組比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。中藥高、中、高劑量組之間比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）;中藥各組與西沙比利組比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05），見表1。

3討論

STC屬于中醫(yī)“便秘”范疇，常見原因有飲食不節(jié)、情志失調(diào)以及年老體虛等[3]。中醫(yī)認(rèn)為，阿片溫燥，辛香走串，能引起大小腸氣機(jī)不暢導(dǎo)致便秘[4]。益氣滋陰通腑方由白術(shù)、黃芪、地黃、玄參、木香、麻仁、大黃組成，其中白術(shù)具有益氣健脾的療效，臨床多用于脾虛食少，腹脹泄瀉等，老中醫(yī)經(jīng)驗(yàn)重用生白術(shù)可治療便秘[5]。黃芪有非常好的益氣功效，臨床常用于氣虛證的治療;玄參滋陰清熱，用于熱病傷津;木香可行氣理氣，用于脾胃氣滯證;麻仁潤腸通便，用于腸燥便秘;大黃具有攻積滯、清濕熱、瀉火、涼血、祛瘀、解毒等功效，成分有多種蒽醌類化合物[6]。本研究通過建立嗎啡誘導(dǎo)的小鼠STC模型，觀察該方劑對便秘小鼠腸道傳輸功能的影響，進(jìn)而為STC的發(fā)病機(jī)制及臨床診治提供參考。

腸動力功能主要與腸道蠕動力量有關(guān)[7]，其受到多種因素的影響[8]，如不良的生活習(xí)慣、藥物因素等多因素作用的結(jié)果。腸推動率是觀察小鼠腸動力的重要指標(biāo)。本研究中，益氣滋陰通腑方高、中、低各組均可明顯改善腸動力障礙，并且各組之間無明顯差異，說明中醫(yī)藥治療該類疾病時，只要辯證準(zhǔn)確，即能受到良好的療效，與劑量無明顯的相關(guān)性。中藥各組與西沙比利組比較，效果接近，說明中藥組療效與西藥常規(guī)治療效果接近。

綜上所述，益氣滋陰通腑方高、中、低量組均可有效改善嗎啡所致便秘小鼠腸道傳輸功能障礙，并與傳統(tǒng)藥物西沙比利組相似，為今后臨床更好運(yùn)用益氣滋陰通腑方治療因服用嗎啡類制劑所致便秘患者提供了有力的證據(jù)。

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收稿日期：2019-1-6;修回日期：2019-2-14

編輯/宋偉

基金項目：青海大學(xué)中青年課題（編號：2016-QYY-8）

作者簡介：郭占芳（1974.11-），男，青海西寧人，本科，主任醫(yī)師，副教授，主要從事中醫(yī)腫瘤方向的研究