Dof轉(zhuǎn)錄因子在植物中的調(diào)控作用

郭彥秀 陳靜，2 王艷芳，3 孫春玉，2 王義，2 張美萍，2

（1. 吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院，長春 130118；2. 吉林省人參基因資源開發(fā)與利用工程研究中心，長春 130118：3. 吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)中藥材學(xué)院，長春 130118）

DNA binding with one finger（Dof）屬于鋅指蛋白家族中的一類亞家族，是植物中特有的一類轉(zhuǎn)錄因子，在酵母和線蟲中尚未發(fā)現(xiàn)有Dof蛋白的存在［1］。由于Dof轉(zhuǎn)錄因子是植物特有、而且是一個(gè)較大的基因亞家族，其結(jié)構(gòu)和功能具有多樣性，是研究轉(zhuǎn)錄因子結(jié)構(gòu)與進(jìn)化理想的材料。本文重點(diǎn)綜述Dof轉(zhuǎn)錄因子亞家族成員的結(jié)構(gòu)、進(jìn)化及在植物中的調(diào)控作用，以期對Dof轉(zhuǎn)錄因子深入研究奠定基礎(chǔ)。

1 Dof轉(zhuǎn)錄因子在植物中的數(shù)量

1993年，在玉米中首次發(fā)現(xiàn)了Dof轉(zhuǎn)錄因子，命名為ZmDof1（MNB1）［2］。截至目前，從簡單的綠色單細(xì)胞藻類到復(fù)雜的高等植物都有Dof轉(zhuǎn)錄因子的報(bào)道（表1）。

表1 Dof轉(zhuǎn)錄因子在植物不同物種中的數(shù)量

2 Dof轉(zhuǎn)錄因子的結(jié)構(gòu)特征

Dof轉(zhuǎn)錄因子一般由200-400個(gè)氨基酸組成，除了寡聚化位點(diǎn)和核定位信號外還具有兩個(gè)功能結(jié)構(gòu)域［24］：（1）位于N-末端的 DNA 結(jié)合區(qū)。在該區(qū)內(nèi)具有一個(gè)富含半胱氨酸（Cysteine，Cys）殘基的單鋅指保守結(jié)構(gòu)域［25］（圖1），此結(jié)構(gòu)域由52個(gè)氨基酸組成，其中包含4個(gè)保守的Cys殘基和一個(gè)Zn2+，它們通過共價(jià)結(jié)合形成CX2CX21CX2C基序（Motif）（圖2）［1］。該基序中4個(gè)半胱氨酸任何一個(gè)發(fā)生突變，都會(huì)影響鋅指結(jié)構(gòu)使其不能與DNA結(jié)合，導(dǎo)致Dof轉(zhuǎn)錄因子活性喪失［26］。（2）位于C-末端的轉(zhuǎn)錄調(diào)控區(qū)。該區(qū)由一個(gè)色氨酸的單鋅指保守結(jié)構(gòu)域組成，其穩(wěn)定性對DNA結(jié)合也非常重要。Dof轉(zhuǎn)錄因子的核心識別位點(diǎn)是AAAG序列（或它的互補(bǔ)序列，CTTT）［27-29］，但南瓜的識別位點(diǎn)是 AAGT 序列［30］。Dof核心識別位點(diǎn)兩側(cè)序列不僅可以與DNA相互作用，也可與蛋白質(zhì)相互作用，是雙重功能區(qū)域。如擬南芥的Dof蛋白OBP1（OBF binding protein）可以通過該功能區(qū)域促進(jìn)OBF4（Ocs element binding factor）與病原菌特異元件OCS（Octopine synthase）的結(jié)合［31］。在玉米中，Dof蛋白PBF（Prolamin-box binding factor）也可以通過該功能區(qū)域介導(dǎo)Dof與bZIP蛋白O2（Opaque 2）相互作用［32］。這些相互作用可能是Dof轉(zhuǎn)錄因子具有多種功能的因素［33］。

3 Dof轉(zhuǎn)錄因子的進(jìn)化

進(jìn)行Dof轉(zhuǎn)錄因子系統(tǒng)分類研究不僅可以揭示Dof轉(zhuǎn)錄因子的起源與進(jìn)化，還可以揭示它們相似的結(jié)構(gòu)和進(jìn)化關(guān)系，提供基因功能信息。因此，進(jìn)化分析對基因的的結(jié)構(gòu)和功能研究具有重要意義。

Yanagisawa等［34］對擬南芥中的 36個(gè) Dof轉(zhuǎn)錄因子進(jìn)行了進(jìn)化分析，根據(jù)它們的蛋白序列將這些Dof轉(zhuǎn)錄因子分成了7個(gè)組。這7個(gè)組除了高度保守的Dof結(jié)構(gòu)域外還存在其他的保守基序。從進(jìn)化樹上看蛋白結(jié)構(gòu)相似并且高度同源的Dof轉(zhuǎn)錄因子形成一簇（Cluster），如DAG1（Dof affecting germination，AtDof3.7） 和DAG2（Dof affecting germination，AtDof2.5），但是它們的功能相反，DAG1抑制種子萌發(fā)，DAG2促進(jìn)種子萌發(fā)［35-38］。這些研究說明結(jié)構(gòu)相似的基因，其功能有可能不同。因此用進(jìn)化樹鄰近同一簇的基因做未知基因功能預(yù)測時(shí)，有可能得不到理想的結(jié)果。

Moreno-Risueno等［4］對擬南芥、水稻、大麥、綠藻、苔蘚和裸子植物等6個(gè)物種的116個(gè)Dof轉(zhuǎn)錄因子進(jìn)行了系統(tǒng)分類。結(jié)果這些Dof轉(zhuǎn)錄因子分成了7個(gè)組，分別是A、B、C、D、E、F和G，其結(jié)果與Yanagisawa的研究結(jié)果相似。Moreno-Risueno等又進(jìn)一步分析了Dof轉(zhuǎn)錄因子的保守氨基酸序列，結(jié)果顯示各組內(nèi)具有相似的保守氨基酸序列，并且部分氨基酸序列在各組內(nèi)高度保守，說明組內(nèi)的基因在功能上有可能相似。內(nèi)含子分析結(jié)果表明：A、F和G組含有內(nèi)含子，而B、C和E組中沒有內(nèi)含子，D組中有2個(gè)基因（HvDof3和OsDof17）有內(nèi)含子。綠藻CrDof1有4個(gè)內(nèi)含子，其中有2個(gè)內(nèi)含子是綠藻特有的。這些研究說明Dof轉(zhuǎn)錄因子的內(nèi)含子隨著植物的進(jìn)化而逐漸減少或丟失。

由前人的結(jié)果筆者總結(jié)了36條擬南芥Dof蛋白的motif與進(jìn)化樹（圖3），找到motif共計(jì)5個(gè)，根據(jù)Yanagisawa等構(gòu)建進(jìn)化樹的結(jié)果將36條蛋白序列分為7個(gè)組，與Yanagisawa等不同的結(jié)果是第6組和第7組串在第5組之間。進(jìn)化樹與Motif的組合圖進(jìn)一步說明了各組內(nèi)具有相似的保守氨基酸序列，與Moreno-Risueno等結(jié)果一致。

圖1 Dof轉(zhuǎn)錄因子典型特征與鋅指結(jié)構(gòu)相關(guān)的4個(gè)半胱氨酸殘基

圖2 Dof蛋白結(jié)構(gòu)域模式圖（A）［25］和ZmDof1全序列結(jié)構(gòu)示意圖（B）［1］

4 Dof轉(zhuǎn)錄因子在植物中的調(diào)控作用

Dof轉(zhuǎn)錄因子在許多生理生化反應(yīng)中起著關(guān)鍵的調(diào)控作用并且其功能多樣化。尤其在種子發(fā)育、組織分化和代謝調(diào)控方面起著非常重要的調(diào)控作用（圖 4）［39］。

4.1 種子發(fā)育

圖3 擬南芥Dof蛋白的保守氨基酸序列及進(jìn)化關(guān)系（參考［34］修改）

赤霉素作為一種重要的植物激素，它能夠調(diào)控種子的萌發(fā)，經(jīng)研究證明一定量的赤霉素可以促進(jìn)種子的萌發(fā)，而Dof轉(zhuǎn)錄因子通過調(diào)控赤霉素的生物合成實(shí)現(xiàn)對種子萌發(fā)的影響。有研究證明，控制擬南芥種子萌發(fā)的基因?yàn)镈AG1（Dof affecting germination，AtDof3.7），該基因在脈管系統(tǒng)中特異表達(dá)，Papi等［35］在T-DNA插入突變體DAG1，結(jié)果發(fā)現(xiàn)種子一直保持休眠狀態(tài)，不能在黑暗中萌發(fā)。Gabriele等［36］發(fā)現(xiàn)DAG1基因位于主阻遏子PIL5的下游，通過直接抑制GA3ox1基因的生物合成從而減少赤霉素的含量，抑制了種子的萌發(fā)，證明了在種子光誘導(dǎo)的萌發(fā)過程DAG1基因中是一個(gè)阻遏子。Gualberti等［37］又在擬南芥中發(fā)現(xiàn)一個(gè)與DAG1高度同源并具有相似結(jié)構(gòu)特征的基因，將其命名為DAG2基因。DAG2基因的表達(dá)受到環(huán)境因素的影響，并且PIL5和DAG1可以抑制該基因的表達(dá)［38］。在大麥中，種子萌發(fā)的過程依賴激活組織蛋白酶基因，位于糊粉層中的Dof轉(zhuǎn)錄因子SAD通過激活該基因的表達(dá)促進(jìn)種子的萌發(fā)，而另外一個(gè)轉(zhuǎn)錄因子BPBF卻能抑制種子的萌發(fā)，其功能是通過抑制組織蛋白酶基因的表達(dá)而實(shí)現(xiàn)的［40］。此外，BPBF對于Amy32b基因（α-淀粉酶的功能基因）的調(diào)節(jié)過程與對組織蛋白酶基因的調(diào)節(jié)過程相似，Amy32b基因在種子發(fā)育階段被抑制，但是在種子萌發(fā)階段被激活［41］。擬南芥中的Dof轉(zhuǎn)錄因子AtDof6（AtDof3.2）基因能與TCP14蛋白相互作用，促進(jìn)種子的萌發(fā)［42］。水稻中的Dof轉(zhuǎn)錄因子OsDof3同樣可以促進(jìn)種子的萌發(fā)，該轉(zhuǎn)錄因子在赤霉素的作用下可以與CPD3（type3羧肽酶）基因啟動(dòng)子的AAAG序列結(jié)合，激活該基因的表達(dá)，促進(jìn)種子的萌發(fā)［43］。

圖4 Dof轉(zhuǎn)錄因子參加的主要的植物生物過程［39］

有些Dof蛋白不僅能夠調(diào)節(jié)貯藏蛋白的合成，還參與其他蛋白的表達(dá)。在水稻中，OsDof24和OsDof25能夠調(diào)節(jié)谷蛋白GluB-1基因的表達(dá)，該蛋白屬于種子貯藏蛋白［44］。有一些學(xué)者將某些Dof轉(zhuǎn)錄因子命名為PBFs，如玉米PBF、水稻RPBF、小麥WPBF、大麥BPBF，他們能夠特異識別醇溶蛋白基因（胚乳表達(dá)基因）啟動(dòng)子上的TGTAAAG序列，從而激活其表達(dá)。如大麥的Dof基因BPBF能反式激活大麥胚乳醇溶蛋白基因hordein的表達(dá)。Mena等［45］在小麥中克隆到Dof家族基因小麥醇溶-谷蛋白盒結(jié)合因子（Wheat prolamin-box binding factor，WPBF），該基因在胚乳中特異表達(dá)，能激活醇溶蛋白的表達(dá)；Dong等［46］研究表明WPBF與TaQM基因相互作用，參與小麥胚乳特異α-醇溶蛋白基因的表達(dá)調(diào)控；玉米的Dof蛋白PBF可以和胚乳特異表達(dá)玉米醇溶蛋白基因的啟動(dòng)子結(jié)合并激活其表達(dá)，從而調(diào)控玉米胚乳蛋白含量，影響種子的粒重和品質(zhì)。研究表明PBFs還能夠與Opaque-2（bZIPs轉(zhuǎn)錄因子）相互作用，并且PBFs在種子的發(fā)育階段能夠激活醇溶蛋白基因的表達(dá)［47］。PBFs和Opaque-2兩個(gè)基因除了能調(diào)節(jié)醇溶蛋白基因以外，還可以調(diào)節(jié)其他的胚乳表達(dá)基因，如賴氨酸-酮戊二酸還原酶基因LKR，該基因的表達(dá)需要PBF和Opaque-2兩個(gè)轉(zhuǎn)錄因子共同作用，而醇溶蛋白基因的表達(dá)只需要其中一個(gè)轉(zhuǎn)錄因子［48］。以上研究說明Dof轉(zhuǎn)錄因子對于植物種子的萌發(fā)和發(fā)育有著重要作用。

4.2 組織分化

在擬南芥中AtDof4.2能調(diào)控植物的分支發(fā)育，這種調(diào)控機(jī)制是AtDof4.2能與AtEXPA9啟動(dòng)區(qū)結(jié)合從而調(diào)控AtEXPA9基因的表達(dá)來參與植物分支發(fā)育的［49］。在擬南芥中REV基因能夠建立葉片遠(yuǎn)—近軸面極性，AtDof5.1基因可與REV基因的啟動(dòng)子區(qū)域結(jié)合，激活REV基因的表達(dá)，影響極性分化使葉片向上卷曲［50］。AtDof2.4和AtDof5.8能調(diào)控維管束的發(fā)育，其啟動(dòng)子分別在維管束形成初期的不同階段發(fā)揮功能，AtDof2.4在形成層細(xì)胞中表達(dá)，而AtDof5.8在葉脈和花蕾的維管組織中表達(dá)［51］。ZmD-of1通過負(fù)調(diào)控Zm401基因控制玉米的花粉發(fā)育［52］。

Dof轉(zhuǎn)錄因子可參與植物對激素應(yīng)答基因的表達(dá)調(diào)控和對生長調(diào)節(jié)物質(zhì)的響應(yīng)過程，Dof轉(zhuǎn)錄因子NtBBF1（rolB domain B factor 1）能夠特異性的結(jié)合到癌基因rolB啟動(dòng)子的ACTTTA基序，從而調(diào)控該基因在頂端分生組織和微管組織中的特異性表達(dá)和生長素誘導(dǎo)表達(dá)，促進(jìn)根的生長［53-54］。在生長素誘導(dǎo)的條件下，Dof蛋白可以結(jié)合到南瓜抗壞血酸鹽氧化酶基因（Ascorbate oxidase promoter-binding protein，AOBP）的啟動(dòng)子上，抑制該基因在生長組織中的表達(dá)［30］。生長素也可以調(diào)控?cái)M南芥中OBP3（AtDof3.6）的表達(dá)，在過表達(dá)該基因后，發(fā)現(xiàn)其能夠促進(jìn)擬南芥的生長。在煙草中過表達(dá)Dof轉(zhuǎn)錄因子GmDof17-1基因，煙草的生長緩慢［55］。

Dof轉(zhuǎn)錄因子還可以保衛(wèi)植物細(xì)胞的發(fā)育，在馬鈴薯中，StDof1可以激活與保衛(wèi)細(xì)胞K+流通道蛋白調(diào)控的關(guān)鍵基因KST1基因，使其在保衛(wèi)細(xì)胞中特異表達(dá)，從而調(diào)控保衛(wèi)細(xì)胞對CO2的吸收和水分的擴(kuò)散［56］。擬南芥中SCAP1基因在成熟的保衛(wèi)細(xì)胞中表達(dá)，調(diào)控與氣孔發(fā)育相關(guān)基因的表達(dá)，如K+通道蛋白、MYB轉(zhuǎn)錄因子、果膠甲酯酶等編碼基因［57］。擬南芥中Dof轉(zhuǎn)錄因子OBP1（OBP-binding factor-1）參與細(xì)胞周期的調(diào)控。OBP1與Dof轉(zhuǎn)錄因子的另一個(gè)基因AtDof2.3共同作用可以調(diào)控周期蛋白基因CYCD3，使細(xì)胞周期縮短，但同時(shí)也減少了細(xì)胞總分裂數(shù)。在擬南芥中過表達(dá)OBP1會(huì)導(dǎo)致植株矮?。?8］。擬南芥中的AtCDFs（Cycling Dof factor），它能夠參與光周期反應(yīng)調(diào)控過程，其中AtCDF1能夠結(jié)合到成花因子FLOWERING LOCUS T（FT）的調(diào)控因子CONSTANS（CO）的啟動(dòng)子區(qū)域，抑制CO的表達(dá)，進(jìn)而抑制FT的表達(dá)，最終抑制擬南芥的開花。AtCDF1是FKF1（Flavin-binding，Kelchrepeat，F(xiàn)-box-1）的靶基因，F(xiàn)KF1能夠通過泛素依賴的途徑抑制光反應(yīng)，因此CDF1與開花響應(yīng)過程有密切的關(guān)系［59］。在馬鈴薯中發(fā)現(xiàn)的Dof基因與CDF具有高度的同源性，研究表明它能夠調(diào)控馬鈴薯塊莖的發(fā)育。有報(bào)道稱，在擬南芥中過表達(dá)番茄Dof轉(zhuǎn)錄因子SlCDF3，它能通過調(diào)節(jié)成花基因如CO和FT推遲開花［60］。擬南芥中AtDof4.1作為一個(gè)轉(zhuǎn)錄阻遏子也能夠延遲開花，抑制生殖器官發(fā)育，并且能夠使葉片、花和角果等器官變?。?1］。AtDof4.7在植物的離區(qū)（Abscission zone）中高度表達(dá)，抑制了對花器官脫落非常重要的多聚半乳糖醛酸酶基因PGAZAT的表達(dá)。研究表明，AtDof4.7能夠與AtZFP2（鋅指類轉(zhuǎn)錄因子）相互作用，該轉(zhuǎn)錄因子也抑制了花器官的脫落，這兩個(gè)轉(zhuǎn)錄因子具有協(xié)同作用［62］。水稻Dof轉(zhuǎn)錄因子OsDof12能通過調(diào)控Hd3a和OsMADS14的表達(dá)來調(diào)節(jié)水稻的開花機(jī)制［63］。以上研究結(jié)果表明，Dof轉(zhuǎn)錄因子在花粉發(fā)育，葉片極性，維管系統(tǒng)發(fā)育，保衛(wèi)細(xì)胞發(fā)育，花器官的脫落及開花響應(yīng)等生理過程中具有重要作用。

4.3 Dof轉(zhuǎn)錄因子在初級代謝中的調(diào)控作用

在碳代謝過程中，Dof轉(zhuǎn)錄因子調(diào)控其相關(guān)基因的表達(dá)。在玉米中ZmDof1能夠結(jié)合OsCS4PPDK啟動(dòng)區(qū)的AAAG基序使細(xì)胞質(zhì)中的C4磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶和丙酮酸激酶基因的表達(dá)提高，但是ZmDof2抑制C4磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶基因的表達(dá)［64］。研究發(fā)現(xiàn)：將ZmDof1的轉(zhuǎn)錄水平降低到原來的80%，玉米中C4途徑特異性基因的表達(dá)也不會(huì)受到影響［65］。在獼猴桃中，AdBAM3L基因是Dof轉(zhuǎn)錄因子AdDof3的靶基因，AdBAM3L基因控制該水果在成熟過程中淀粉降解成單糖的過程，可提高甜度及口感［66］。在甘薯中，根中的SRF1基因超量表達(dá)時(shí)可顯著降低Ibβfruct2基因的轉(zhuǎn)錄水平從而使蔗糖轉(zhuǎn)化酶的積累量降低，并導(dǎo)致了單糖的濃度減少，增加了塊莖中淀粉含量，從而調(diào)控了碳代謝［67］。Dof蛋白不僅可以調(diào)控碳代謝還可以提高植物的氮利用率增加氮含量。在擬南芥中過表達(dá)ZmDof1基因后，陽性植株氮含量增加，能夠在低氮條件下良好生長，同樣，ZmDof1轉(zhuǎn)基因水稻在低氮條件下也生長良好，證明了ZmDof1基因在氮代謝中的作用［39，68］。在擬南芥中超量表達(dá)OsDof25基因，促進(jìn)了高親和、低親和銨轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白基因AtAMT1.1和AtAMT2.1的表達(dá)抑制了高親和硝酸鹽轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白基因AtNRT2.1的表達(dá)，結(jié)果總的氨基氮含量提高，丙酮酸激酶（PK1和PK2），磷酸烯醇丙酮酸羧基酶（PEPC1、PEPC2）及NADP依賴的和NAD依賴的異檸檬酸脫氫酶基因的表達(dá)量增加。同時(shí)，谷氨酸脫氫酶活性增強(qiáng)，導(dǎo)致總氨基酸含量增加［69］。以上研究結(jié)果表明，無論是碳代謝還是氮代謝，Dof轉(zhuǎn)錄因子都起著至關(guān)重要的作用。

4.4 Dof轉(zhuǎn)錄因子在次生代謝中的調(diào)控作用

Dof轉(zhuǎn)錄因子還參與植物次生代謝產(chǎn)物的合成。在擬南芥中，Dof轉(zhuǎn)錄因子與苯基丙酸合成途徑和類黃酮合成途徑兩個(gè)次生代謝過程有關(guān)。據(jù)Skirycz的研究報(bào)道，超量表達(dá)AtDof4.2可以增加植株在低溫下對光的敏感性，從側(cè)面反映了AtDof4.2能夠影響芥子酸酯和黃酮醇的變化。在正常條件下，轉(zhuǎn)基因植株中黃酮醇沒有發(fā)生顯著變化，但是將其轉(zhuǎn)移到4℃或者強(qiáng)光下，植物中積累的黃酮醇會(huì)越來越少，說明在低溫和強(qiáng)光下，AtDof4.2可以負(fù)調(diào)控黃酮類物質(zhì)的合成。之后該作者又在苯基丙酸合成途徑中發(fā)現(xiàn)AtDof4.2可以正調(diào)控肉桂酸的合成［49］。

Dof轉(zhuǎn)錄因子還可以調(diào)控油脂的合成，并控制脂肪酸的含量。擬南芥中超表達(dá)的OBP2可通過增加P450基因（CYP83B1）的表達(dá)調(diào)控吲哚芥子油的生物合成［49］。Tian等［70］從大豆中鑒定出了28個(gè)Dof轉(zhuǎn)錄因子，其中GmDof4和GmDof11基因在油脂合成過程中起著重要作用。GmDof4和GmDof11基因產(chǎn)物分別特異性結(jié)合到乙酰輔酶A羧化酶基因（Acetyl CoA carboxylase）和長鏈脂酰輔酶A合成酶（Long-chain-CoA synthase）基因的啟動(dòng)子上，激活這兩個(gè)基因的表達(dá)。乙酰輔酶A羧化酶和長鏈脂酰輔酶A合成酶是油脂合成過程的兩個(gè)關(guān)鍵酶。在大豆中超表達(dá)GmDof11，可以提高大豆種子的含油量，降低蛋白質(zhì)的含量，但對各脂肪酸組成沒有顯著影響［71］。在擬南芥中，超量表達(dá)GmDof4和GmDof11后，轉(zhuǎn)基因株系種子的總油脂含量和油酸含量與野生型相比都顯著提高，而種子貯藏蛋白基因CRA1的表達(dá)下調(diào)［72］。在橢圓小球藻（Chlorella ellipsoidea）中超量表達(dá)GmDof4基因后，細(xì)胞中油脂含量提高了44.4%-52.9%［73］。在油菜中干擾BnDof5.6基因的表達(dá)，后代種子胚變小，油分含量降低。轉(zhuǎn)錄組分析表明，干擾BnDof5.6基因的表達(dá)影響脂肪酸的合成和脂肪酸去飽和酶相關(guān)基因的表達(dá)［74］。

5 問題與展望

Dof轉(zhuǎn)錄因子廣泛參與植物種子發(fā)育和萌發(fā)、組織分化和代謝過程，這說明了Dof轉(zhuǎn)錄因子在植物的生長發(fā)育起著關(guān)鍵的作用。到目前為止，有關(guān)Dof轉(zhuǎn)錄因子的研究主要集中在模式植物和主要農(nóng)作物中，如擬南芥、大豆和玉米等，但在藥用植物中的研究少之甚少。研究領(lǐng)域主要集中在植物的發(fā)育及組織分化上，在次生代謝物合成中的作用僅報(bào)道了脂肪酸和類黃酮，其他的次生代謝物如甾醇類化合物并沒有相關(guān)報(bào)道。該轉(zhuǎn)錄因子的靶基因尚不明確，與其他轉(zhuǎn)錄因子或蛋白的相互作用機(jī)制尚不清楚，對植物代謝調(diào)控機(jī)制還需要進(jìn)一步研究。近幾年隨著基因組測序的陸續(xù)完成，Dof轉(zhuǎn)錄因子也依次在其他植物中被挖掘。因此，在今后的研究中可以在藥用植物中挖掘轉(zhuǎn)錄因子并預(yù)測其功能，并利用生物技術(shù)手段將克隆到的基因轉(zhuǎn)化到藥用植物中，用以研究Dof轉(zhuǎn)錄因子調(diào)控的次生代謝合成，這將有助于提高具有藥理活性的次生代謝產(chǎn)物的合成并闡明合成的分子機(jī)理及互作網(wǎng)絡(luò)機(jī)制。