血清抗繆勒氏管激素分析在多囊卵巢綜合征中的臨床應(yīng)用研究

張秋敏

深圳市坪山區(qū)人民醫(yī)院，廣東深圳 518118

多囊卵巢綜合征（polycystic ovary syndrome，PCOS）是常見的內(nèi)分泌紊亂綜合征，以慢性無排卵、卵巢多囊性改變、高雄激素改變?yōu)樘卣?，育齡婦女多發(fā)[1]。研究發(fā)現(xiàn)血清AMH（抗繆勒氏管激素）的水平與竇卵泡計(jì)數(shù)（AFC，antral follicle count）間有強(qiáng)相關(guān)性，患者顯著特征之一為AFC 增加，每個(gè)卵泡的AMH 表達(dá)量也升高[2]。為了進(jìn)一步研究AMH 在PCOS 中的臨床應(yīng)用，特選取我院100 例PCOS 患者進(jìn)行研究，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取我院2017年3月～2018年3月收治的PCOS 各年齡段患者100 例作為觀察組，患者年齡25～40 歲，平均（32.2±5.3）歲。入選標(biāo)準(zhǔn)采用2003年鹿特丹診斷標(biāo)準(zhǔn)[3]：（1）偶發(fā)排卵和（或）無排卵；（2）臨床和（或）生化指標(biāo)提示高雄激素血癥，并排除先天性腎上腺增生、分泌雄激素腫瘤、Cushing（庫(kù)欣）綜合征等其他可能病因；（3）卵巢多囊性改變（ovarian polycystic changes ，PCO）：B超檢查提示至少一側(cè)卵巢有≥12 個(gè)直徑2～9mm卵泡，和（或）卵巢體積增大＞10mL，符合其中兩項(xiàng)者診斷為PCOS，排除甲狀腺功能紊亂、高催乳素血癥、先天性腎上腺增生癥患者。選取100 例健康受檢者作為對(duì)照組，患者年齡24～39 歲，平均（31.0±5.1）歲。兩組患者年齡等一般資料比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），所有受檢者均自愿參與此次研究并簽署知情同意書。

表1 兩組患者各項(xiàng)指標(biāo)比較（±s）

表1 兩組患者各項(xiàng)指標(biāo)比較（±s）

組別 n E2（pg/mL） T（ng/mL） FSH（mU/mL） AMH（ng/mL） LH（mU/mL）對(duì)照組 100 34.23±10.02 0.43±0.14 6.42±1.34 4.35±2.11 4.43±2.14觀察組 100 45.35±13.27 0.84±0.31 5.53±1.48 12.35±3.30 6.58±3.09 t 5.255 6.264 6.330 5.154 5.384 P 0.001 0.000 0.000 0.002 0.000

1.2 方法

患者抽血前應(yīng)該安靜休息，月經(jīng)周期第2～5天晨起空腹采血（患者閉經(jīng)期抽血時(shí)間隨意），3000r/min 離心10min 取血清-20℃低溫保存，測(cè)試儀器為Beckman Coulter UniCel DXI800 化學(xué)發(fā)光分析儀，采用酶聯(lián)免疫配套試劑。從冰箱中取出AMH試劑盒后平衡至室溫，打開鋁箔袋包裝，取出需要數(shù)量的試劑船后將其余的試劑船及干燥劑硅膠裝入密封袋內(nèi)，排除空氣密封后2～8℃保存。在校準(zhǔn)品1-2 和質(zhì)控物中各加入1.0mL 去離子水，溶解10 分鐘，輕輕渦旋震蕩混勻備用。檢查位置4 中的底物，應(yīng)為無色，否則應(yīng)棄掉該試劑船。分別在每個(gè)試劑船的位置1 中加85μL 待測(cè)血清，或者加入85μL 校準(zhǔn)品或質(zhì)控物。每更換一個(gè)批號(hào)的試劑，應(yīng)重新進(jìn)行校準(zhǔn)。放置試劑船到儀器中，按照使用說明書進(jìn)行校準(zhǔn)（若有必要）和檢測(cè)。本研究采用AMH -ELISA 測(cè)定試劑盒，選購(gòu)獲得國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理局注冊(cè)登記的AMH 測(cè)定商品試劑盒，以保證檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確可靠。

若治療后8 周內(nèi)卵巢無排卵患者，給予50～100mg 氯米芬（cC）或rFSH 治療，用藥1～3個(gè)周期后出現(xiàn)排卵，則認(rèn)為治療有效，療效欠佳，為卵巢低反應(yīng)性；若治療后不管使用cC 與否卵巢均不能獲得排卵，則認(rèn)為治療失敗，無療效，為卵巢無反應(yīng)性，將低反應(yīng)性和無反應(yīng)性患者作為觀察組1。

若治療后8 周內(nèi)卵巢有排卵，則認(rèn)為治療有效，為卵巢高反應(yīng)性，這些患者為觀察組2。

1.3 觀察指標(biāo)

分析兩組患者雌二醇（E2）、睪酮（T）、卵泡刺激素（FSH）、抗繆勒氏管激素（AMH）、黃體生成素（LH）以及GLU（空腹血糖）、FINS（空腹胰島素）、HOMA-IR（homeostasis model assessment of insulin resistance），抗胰島素性穩(wěn)態(tài)模式評(píng)估法。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

應(yīng)用SPSS19.0 統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行分析，ROC 曲線分析用于AMH 診斷性能的評(píng)價(jià)，用（）表示計(jì)量資料，采用t和F檢驗(yàn)，以P＜0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 治療前兩組患者各項(xiàng)指標(biāo)比較

觀察組患者卵泡刺激素水平明顯低于對(duì)照組，雌二醇、睪酮、抗繆勒氏管激素、黃體生成素水平明顯高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），見表1。

2.2 兩組患者糖代謝指標(biāo)比較

試驗(yàn)組患者空腹血糖、空腹胰島素、HOMA-IR 明顯高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），見表2。

表2 兩組患者糖代謝指標(biāo)比較（±s）

表2 兩組患者糖代謝指標(biāo)比較（±s）

組別 n GLU（mmol/L） FINS（μU/mL） HOMA-IR指數(shù)對(duì)照組 100 4.32±0.35 9.31±1.78 1.99±0.27觀察組 100 5.54±0.36 14.03±2.57 3.35±0.65 t 6.258 5.337 5.001 P 0.001 0.014 0.021

2.3 治療后兩組患者AMH指標(biāo)比較

觀察組2 患者AMH 明顯低于觀察組1 患者，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），見表3。

表3 治療后兩組患者AMH指標(biāo)比較（±s，ng/mL）

表3 治療后兩組患者AMH指標(biāo)比較（±s，ng/mL）

注：與觀察組1 比較，△P ＜0.05

組別 n AMH對(duì)照組 100 4.35±2.11觀察組1 20 10.23±2.98觀察組2 80 5.08±1.91△F 7.662 P 0.001

3 討論

PCOS 是常見的婦科內(nèi)分泌疾病，育齡婦女多見且高度多樣化，對(duì)女性生殖健康造成嚴(yán)重影響[4]。PCOS 患者不孕的主要原因是小竇狀卵泡過多、卵泡募集異常、優(yōu)勢(shì)卵泡選擇障礙、小卵泡發(fā)育障礙等導(dǎo)致的不排卵，反復(fù)促排卵失敗的助孕成功的關(guān)鍵則是減少卵巢過度刺激、獲得適當(dāng)數(shù)量的優(yōu)質(zhì)卵子[5]。PCOS 患者血清AMH 水平與代謝紊亂、內(nèi)分泌間的關(guān)系成為研究的特點(diǎn)，多于糖代謝、激素代謝、慢性炎癥基因、肥胖基因等有關(guān)，干預(yù)患者激素代謝對(duì)于PCOS 治療有總要意義[6]。AMH 是糖蛋白激素，主要的作用為降低生長(zhǎng)卵泡對(duì)FSH 的敏感性、抑制原始細(xì)胞的募集、調(diào)控卵泡的正常發(fā)育[7]。血清AMH 的水平與AFC（竇卵泡計(jì)數(shù)）間有較強(qiáng)的相關(guān)性，PCOS 患者中最顯著的內(nèi)分泌特征之一就是竇卵泡數(shù)量的增加，PCOS 患者血清AMH 的水平通常是非PCOS 者的2～4 倍，并且每個(gè)卵泡的AMH 表達(dá)量也明顯增高[8]。AMH 在女性僅由卵巢分泌，由竇前卵泡和小竇卵泡產(chǎn)生，是生長(zhǎng)和分化因子超家族中轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β 家族（TGF-β）中的成員，是目前外周血中能檢測(cè)到的最早的卵泡產(chǎn)生的物質(zhì)[9]。

國(guó)內(nèi)外研究發(fā)現(xiàn)AMH 在PCOS 治療后有變化，AMH 在自然月經(jīng)周期各階段均無明顯波動(dòng)不受月經(jīng)周期和藥物等的影響，可以任意時(shí)間檢測(cè)[10-11]。本研究通過試驗(yàn)得出結(jié)果：觀察組患者卵泡刺激素水平明顯低于對(duì)照組，雌二醇、睪酮、抗繆勒氏管激素、黃體生成素水平明顯高于對(duì)照組，試驗(yàn)組患者空腹血糖、空腹胰島素、HOMA-IR 明顯高于對(duì)照組，觀察組2 患者AMH 明顯低于觀察組1 患者，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。PCOS 患者內(nèi)分泌失調(diào)，過量的雄激素在外周組織轉(zhuǎn)化為雌酮，抑制卵泡發(fā)育同時(shí)雌酮反饋導(dǎo)致FSH 減少，從而導(dǎo)致LH 升高，并且卵泡失去周期性、對(duì)LH 更為敏感，優(yōu)勢(shì)卵泡選擇受阻，發(fā)生跑路安障礙、多濾泡卵巢等[12-13]。而竇前卵泡產(chǎn)生的AMH 增加后會(huì)降低卵泡對(duì)FSH 的敏感性，從而加劇竇卵泡的聚集，因此AMH 濃度可作為準(zhǔn)確反映卵巢竇卵泡數(shù)目的替代指標(biāo)[14]。此次試驗(yàn)結(jié)果也進(jìn)一步證實(shí)，PCOS 治療有效的患者AMH 明顯下降。AMH 正常界值定為60pmol/L，不同研究中由于人群不同或不同亞型PCOS 病例混合導(dǎo)致AMH 診斷的界值也不同，不同類型的PCOS 患者AMH 水平差異較大。有研究顯示AMH 水平隨著PCOS 患者年齡的增長(zhǎng)而降低，其降低速度慢于健康的女性，成負(fù)相關(guān)性，但是PCOS 患者血清AMH 水平與年齡并沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義上的負(fù)相關(guān)性，因此此次研究患者均為20～40 歲的患者[15-16]。

綜上所述，血清AMH在PCOS 患者中明顯升高，較LH、E2、T、FINS 等具有更為穩(wěn)定、方便的特點(diǎn)，在PCOS 診斷中具有重要價(jià)值，給予相應(yīng)的早治療措施后能夠進(jìn)一步提高治療的效果，值得臨床推廣使用，但是AMH 與睪酮的代謝以及是否相互調(diào)節(jié)等問題還需要更進(jìn)一步的探討。