某規(guī)?；i場豬繁殖與呼吸綜合征免疫狀態(tài)血清學調(diào)查

王一東，徐 翡，于阿男，孫有朋，陳現(xiàn)偉，李永洙，韓照清

（臨沂大學農(nóng)林科學學院，山東 臨沂 276000）

豬藍耳病又稱豬繁殖與呼吸綜合征(PRRS)，由豬繁殖和呼吸綜合征病毒（PRRSV）引起的一種接觸性傳染病。以懷孕母豬和仔豬最易感，該病臨床發(fā)病特征主要表現(xiàn)為患病豬群臨床上具有病死率高、傳播快、治愈率低的特點；臨床上表現(xiàn)為體溫升高、耳朵發(fā)紺，有淤血、呼吸急促而痛苦不堪、倒地抽搐、腹瀉等；母豬懷孕后會發(fā)生流產(chǎn)、產(chǎn)死胎等臨床癥狀[1]。該病毒易侵害病豬的免疫系統(tǒng)，導致病豬出現(xiàn)免疫抑制的現(xiàn)象，進一步可誘導其他疾病的繼發(fā)及給養(yǎng)豬業(yè)帶來難以估量的損失。

該病毒于1987年首次在美國發(fā)現(xiàn)[2]，當時中歐的老鼠把體內(nèi)的動脈炎病毒傳播給了野豬，帶毒野豬被引進至美國，其后它們將體內(nèi)病毒散播到美洲，在美洲經(jīng)過多年的變異和進化，形成了不同于歐洲的豬繁殖與呼吸綜合征，即美洲型的豬繁殖與呼吸綜合征。20世紀80年代以來，PRRS陸續(xù)在世界各地被發(fā)現(xiàn)[3]。1992年該病被動物衛(wèi)生組織定為B類傳染病。如今2種類型的PRRS已在全世界范圍內(nèi)流行[4]。1996年我國首次檢測出豬繁殖與呼吸綜合征病毒。當前PRRS在我國各省均有不同程度的暴發(fā)[5]。1997年調(diào)查出青海省也有本病[6]。2006年以后，我國暴發(fā)了豬高致病性藍耳病，給我國養(yǎng)豬業(yè)造成了巨大的經(jīng)濟損失[7]。目前我國流行的PRRS基本上都是美洲型的豬藍耳病。到目前為止，豬繁殖與呼吸綜合征很難清除和凈化[8]。在山東，大多數(shù)仔豬在26日齡之后易發(fā)此病，而且容易與其他病原混合在一起，從而導致其他嚴重的呼吸道疾病的出現(xiàn)。

PRRS感染性很高，可經(jīng)多種途徑感染豬[9]，懷孕母豬通過胎盤垂直傳播、豬只之間密切接觸。在豬群中發(fā)現(xiàn)患病豬，若不采取積極有效的措施，整個豬群都會感染患病。并且，感染后的仔豬可長期帶毒排毒，對周邊環(huán)境持續(xù)造成污染，很難徹底被清除。飼養(yǎng)條件越差，越易發(fā)生此病。通常，常規(guī)消毒與滅活措施足夠滅活用具和設(shè)備中豬繁殖與呼吸綜合征病毒。豬群患病后發(fā)病率和死亡率都很高[10]，患有PRRS的豬群存在病毒血癥的現(xiàn)象，感染的病豬病毒效價高而抗體效價卻很低，甚至出現(xiàn)臨床癥狀突出卻不能檢測到抗體的現(xiàn)象[11]。因為本病尚未發(fā)現(xiàn)有良好的治療措施，因此免疫接種是預(yù)防和控制本病的主要措施[12]。早期的接種疫苗雖然在預(yù)防該病方面能起到一定的作用,但是豬藍耳病病毒侵害機體的免疫系統(tǒng)而導致免疫失敗，其次滅活疫苗安全性較好,但免疫原性較差,需要接種多次才能刺激機體產(chǎn)生足夠的免疫力，因此疫苗接種用量較大，成本較高，有時還可能導致注射部位出現(xiàn)不良反應(yīng)。文章通過調(diào)查臨沂地區(qū)某規(guī)?；i場PRRS感染狀況和PRRS免疫豬場的抗體水平，為臨沂地區(qū)規(guī)?；i場控制PRRS提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 樣本采集

從臨沂地區(qū)某規(guī)?；i場隨機采集174份樣本，其中公豬25份，母豬（妊娠30～60 d）30份，母豬（妊娠60～90 d）30份、哺乳母豬30份、豬瘟一免前仔豬29份、豬瘟二免前仔豬30份；從豬前腔靜脈采集血液，分離血清后保存?zhèn)溆谩?/p>

1.2 試劑及儀器

采血器、離心機、ELISA試劑盒、微量移液器、一次性移液器吸頭、酶標儀、去離子水、稀釋液、洗板機等。

1.3 檢測方法

1.3.1 實驗步驟

檢測步驟嚴格按照試劑盒自帶的說明書進行。

1.3.2 結(jié)果判定

PRRSV抗體的有無（陽性/陰性）通過計算每個樣品的S/P值判定，若S/P低于0.4，樣品判定為PRRSV抗體陰性；若S/P值大于或等于0.4，樣品判定為PRRSV抗體陽性。

2 結(jié)果與分析

從表1和圖1可以看出，公豬豬藍耳病抗體陽性率為44.00%，母豬（妊娠30～60 d）豬藍耳病抗體陽性率為93.00%，母豬（妊娠60～90 d）豬藍耳病抗體陽性率為87.00%，哺乳期母豬豬藍耳病抗體陽性率為86.00%，豬瘟一免前仔豬豬藍耳病抗體陽性率為48.00%，豬瘟二免前仔豬豬藍耳病抗體陽性率為83.00%。其中公豬抗體陽性率最低，母豬（妊娠30～60 d）抗體陽性率最高。

從圖2可以看出，公豬抗體離散度為0.68，抗體平均值為0.4。母豬（妊娠30～60 d）離散度為0.49，抗體平均值1.31。母豬（妊娠60～90 d）離散度為0.65，抗體平均值為1.04。哺乳母豬離散度為0.59，抗體平均值為1.12。豬瘟一免前仔豬離散度為0.88，抗體平均值為0.64。豬瘟二免前仔豬離散度為0.64，抗體平均值為1.11。其中，母豬（妊娠30～60 d）離散度最低，豬瘟一免前仔豬離散度最高。母豬（妊娠30～60 d）抗體平均值最高，公豬抗體平均值最低。

3 討論

豬繁殖與呼吸綜合征病毒（PRRSV）可以通過檢測血清中的抗體水平來評估豬群免疫效果。2015年，李記蕾等對從河南地區(qū)送檢的豬血清進行檢測，結(jié)果表明，未免疫PRRS豬場中，妊娠母豬陽性率為70%，自然感染率（S/P>2.50）為20.00%。 哺乳仔豬陽性率為55.00%，自然感染率（S/P>2.50）為4.00%、保育豬陽性率為47.00%，自然感染率（S/P>2.50）為2.00%、育肥豬陽性率為74.00%[13]。2010年，李國江等對吉林地區(qū)進行豬藍耳病血清學檢測，結(jié)果顯示，未免疫PRRS豬場中，生產(chǎn)母豬陽性率為63.16%，斷奶仔豬陽性率為48.58%和后備母豬陽性率為75.00%[14]。由此可見，豬藍耳病病毒感染在全國各地區(qū)普遍存在。應(yīng)加強規(guī)?；i場PRRS的免疫工作。當前主要以疫苗免疫為主。

2007年，楊貴樹等對從云南地區(qū)送檢的血清進行檢測，其調(diào)查結(jié)果顯示公豬陽性率為95.24%，母豬陽性率為86.96%，仔豬陽性率為92.30%以及自然感染率（S/P>2.5）為3.38%[15]。2013年，蔣歡等對楚雄地區(qū)進行豬藍耳病血清學檢測，其檢測結(jié)果顯示公豬陽性率為70.83%，自然感染率（S/P>2.5）為12.50%；同時母豬陽性率為77.22%，自然感染率（S/P>2.5）為14.44%[16]。本次檢測結(jié)果通過與前者對比，公豬抗體陽性率偏低，可能的原因是大多數(shù)公豬是陰性個體，檢測不到PRRS抗體。而本次檢測結(jié)果中公豬血清中出現(xiàn)陽性抗體但陽性率不高，其主要原因可能是公豬感染了本場流行的PRRS弱毒疫苗毒株。2012—2014年，劉承軍等在冀魯豫交接地區(qū)進行豬藍耳病血清學檢測，其調(diào)查結(jié)果顯示這3年母豬抗體合格率為82.80%、80.20%、75.00%；斷奶前仔豬抗體合格率分別為77.70%、71.20%、70.90%；斷奶后仔豬抗體合格率分別為 70.00%、50.90%、28.80%[17]。而本試驗檢測結(jié)果中懷孕母豬、哺乳期母豬抗體陽性率保持在80%以上，主要原因是對母豬進行了疫苗免疫，體內(nèi)產(chǎn)生了抗體。而哺乳母豬陽性率低于懷孕母豬，主要原因可能是與本場的豬藍耳疫苗免疫程序有關(guān)（本場母豬豬藍耳免疫為斷奶當天免疫）。同時應(yīng)引起注意的是本場哺乳期母豬出現(xiàn)了PRRS野毒感染，這可能會造成產(chǎn)房仔豬藍耳病的不穩(wěn)定，其原因可能是與該場環(huán)境及飼養(yǎng)管理等因素有關(guān)。豬瘟一免前仔豬（本場豬瘟疫苗28日齡首次免疫）抗體陽性率較低同時離散度最高，表明此階段仔豬存在被PRRSV感染的風險，其主要原因是此階段仔豬在斷奶前期無法獲得足夠的母源抗體，與此同時與哺乳母豬感染豬藍耳病野毒有關(guān)。豬瘟二免前仔豬（本場豬瘟63日齡二次免疫）體內(nèi)抗體比豬瘟一免前仔豬抗體水平高，主要原因是35日齡仔豬免疫豬藍耳病疫苗后，刺激機體免疫系統(tǒng)，產(chǎn)生免疫應(yīng)答?？贵w離散度與豬藍耳病在豬群的穩(wěn)定性有關(guān)。離散度越大，豬藍耳病在豬群中越不穩(wěn)定。本檢測結(jié)果中豬瘟一免前仔豬PRRSV抗體離散度最高，所以豬藍耳病在該豬群中穩(wěn)定性差，其主要原因是哺乳母豬感染PRRSV野毒導致仔豬獲得母源抗體差異大，同時可能引起部分仔豬PRRSV感染，加大了仔豬豬藍耳抗體的離散度。母豬（妊娠30～60 d）離散度最低，同時抗體平均值最高，表明豬藍耳病毒在該豬群中穩(wěn)定性及免疫保護最好，其原因是妊娠母豬已多次接種豬藍耳病毒疫苗從而抗體含量多。公豬抗體平均值最低，表明該豬群免疫保護較差，應(yīng)加強公豬場檢測與防控。

表1 某規(guī)?；i場不同豬群PRRSV抗體檢測結(jié)果

圖1 某規(guī)?；i場不同類別豬的PRRS陽性率

圖2 某規(guī)?；i場豬藍耳病離散度與抗體平均值

通過以上分析，得出結(jié)論：該豬場對PRRS的免疫比較到位，豬群自然感染率較之偏低，可能與豬場的凈化、飼養(yǎng)管理、免疫程序有關(guān)。但是，豬群之間離散度差異大，豬藍耳病在豬群穩(wěn)定性差，存在免疫失敗的風險，還需加強抗體檢測。總體而言，臨沂地區(qū)豬場免疫豬藍耳疫苗較為普遍，但還需加強監(jiān)測與防控PRRSV野毒的感染。