特異性自身抗體對(duì)自身免疫性疾病的診斷價(jià)值

張婷 段云壽

661199 云南紅河哈尼族彝族自治州，紅河州婦幼保健院檢驗(yàn)科（段云壽）

近年來已知曉的自身免疫性疾病約100 種，其中以系統(tǒng)性紅斑狼瘡最為典型，隨著檢驗(yàn)技能的提高，許多以往機(jī)制不明的疾病被發(fā)現(xiàn)屬于自身免疫性疾病。老年人群胸腺和各種免疫細(xì)胞之間的聯(lián)系減弱，更易患自身免疫性疾病，其機(jī)體內(nèi)含有少量生理性自身抗體，一旦抗體過剩，就會(huì)發(fā)生免疫錯(cuò)誤，從而引起自身免疫性疾?。?］。由于女性的生理性自身抗體多于男性，故女性更易產(chǎn)生自身免疫性疾?。?］。本研究選取2017 年1 月—2018 年1 月在本院消化與風(fēng)濕免疫科住院治療的60 例自身免疫性疾病患者，觀察特異性自身抗體診斷自身免疫性疾病的敏感度、特異度、檢測(cè)滿意度和診斷效果，探討其在自身免疫性疾病中的診斷價(jià)值，現(xiàn)報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 研究對(duì)象 選取2017 年1 月—2018 年1 月在本院消化與風(fēng)濕免疫科住院治療的60 例自身免疫性疾病患者。所有患者均經(jīng)臨床確診，且無肢體功能障礙。

1.2 分組 將所有患者隨機(jī)分為常規(guī)檢測(cè)組和特異性自身抗體檢測(cè)組，每組各30 例。

1.3 倫理學(xué) 本研究符合醫(yī)學(xué)倫理學(xué)標(biāo)準(zhǔn)，經(jīng)醫(yī)院倫理委員會(huì)審批（審批號(hào)2019-01），所有患者均簽署知情同意書并自愿參加本次實(shí)驗(yàn)。

1.4 檢測(cè)方法 早期采集所有患者的靜脈血液進(jìn)行離心分離，常規(guī)檢測(cè)組采用間接免疫熒光法檢測(cè)抗核抗體，特異性自身抗體檢測(cè)組采用特異性自身抗體檢測(cè)模式檢測(cè)15 種特殊的自身抗體［3］。

1.4.1 常規(guī)檢測(cè)法 常規(guī)檢測(cè)組患者進(jìn)行常規(guī)自身免疫性疾病檢測(cè)，同時(shí)采用盲法對(duì)比間接免疫熒光法檢測(cè)模式。用pH 為7.4 的磷酸鹽緩沖液（含0.05%吐溫-20）11：100 稀釋血清標(biāo)本，選擇Hep-2 以及猴肝生物載片常溫反應(yīng)30 min，用磷酸鹽緩沖液清洗載玻片，之后浸泡5 min，加入異硫氰酸熒光素標(biāo)志的抗人球蛋白，避光反應(yīng)30 min，再用磷酸鹽緩沖液沖洗后浸泡5 min，待玻片完全干透后加甘油封片，熒光顯微鏡下鏡檢，采用說明書要求的特異性熒光模式進(jìn)行定性和抗體滴度的判定，抗體滴度≥1：100判定為實(shí)驗(yàn)結(jié)果陽性［4］。儀器為德國(guó)歐蒙公司提供的抗核抗體間接免疫熒光法試劑盒。

1.4.2 特異性自身抗體檢測(cè)法 采用特異性自身抗體檢測(cè)模式檢測(cè)特異性自身抗體檢測(cè)組患者的抗nRNP、抗Sm、抗SS-A、抗SS-B、抗Scl-70、抗Ro-52、抗PM-Scl、抗Jo-1、抗CENP-B、抗PCNA、抗dsDNA、抗核小體、抗組蛋白、抗核糖體P 蛋白和抗AMA-M2。小心將模條輕放入溫育槽中，加入1：101 稀釋血清15.0 mL，搖床中溫育30 min，再用1.5 mL 緩沖液沖洗3 次，每次5 min，之后加入1.5 mL酶結(jié)合物溫育30 min，沖洗3 次后加入1.5 mL 底物液，反應(yīng)10 min 后，用蒸餾水沖洗模條終止反應(yīng)，待完全干透后使用CANON 臺(tái)式掃描儀對(duì)模條進(jìn)行掃描，結(jié)果的判定采用EUROLineScan 軟件，著色強(qiáng)度≥11 為陽性。儀器為德國(guó)歐蒙公司提供的特異性自身抗體譜（IgG）檢測(cè)試劑盒。

1.5 檢測(cè)指標(biāo) 對(duì)兩組患者進(jìn)行自身免疫性疾病診斷，對(duì)比分析兩種檢測(cè)方法對(duì)自身免疫性疾病診斷的敏感度、特異度、患者及其家屬的檢測(cè)滿意度以及診斷效果等［5］。

1.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS 22.0 軟件處理數(shù)據(jù)，計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（s）表示，采用t 檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料以例（率）表示，采用χ2檢驗(yàn)。P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 一般資料 共納入60 例研究對(duì)象。常規(guī)檢測(cè)組男性和女性各15 例；年齡21～54 歲，平均（31.20±2.27）歲。特異性自身抗體檢測(cè)組男性和女性各15 例；年齡21～54 歲，平均（31.20±2.27）歲。兩組患者的性別、年齡、文化程度、疾病類型等一般資料比較差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P＞0.05），具有可比性。見表1。

2.2 兩組自身免疫性疾病患者檢測(cè)質(zhì)量比較 特異性自身抗體檢測(cè)組對(duì)活動(dòng)受限、皮肌炎、其他精神癥狀的檢測(cè)質(zhì)量均明顯高于常規(guī)檢測(cè)組（均P＜0.05）。見表2。

表2 兩組自身免疫性疾病檢測(cè)質(zhì)量比較

2.3 兩組自身免疫性疾病診斷檢測(cè)滿意度比較特異性自身抗體檢測(cè)組檢測(cè)滿意度均明顯高于常規(guī)檢測(cè)組（均P＜0.05）。見表3。

表3 兩組自身免疫性疾病診斷檢測(cè)滿意度比較

2.4 兩組自身免疫性疾病診斷的敏感度和特異度比較 特異性自身抗體組診斷的敏感度和特異度均明顯優(yōu)于常規(guī)檢測(cè)組（均P＜0.05）。見表4。

表4 兩組自身免疫性疾病診斷的敏感度和特異度比較

3 討論

自身免疫性疾病為機(jī)體針對(duì)自身抗原產(chǎn)生免疫反應(yīng)，大量免疫細(xì)胞和免疫蛋白在機(jī)體內(nèi)堆積，導(dǎo)致相應(yīng)器官損害的一類疾病，其主要病因目前有很多假設(shè)，主要?dú)w結(jié)為3 種：自身抗原釋放、自身免疫系統(tǒng)異常、交叉抗原出現(xiàn)。

目前對(duì)自身免疫性疾病的治療尚無根治措施，主要治療方法為控制病情、延緩相關(guān)器官的損傷，因此如何早期快速的發(fā)現(xiàn)并確診自身免疫性疾病，對(duì)及早開展臨床治療、改善患者生活質(zhì)量具有重要意義。在自身免疫性疾病的診斷中，血清學(xué)檢查為最常用、最簡(jiǎn)單宜行的方法，其中抗核抗體間接免疫熒光實(shí)驗(yàn)是篩選自身抗體的有效方法，被廣泛應(yīng)用于自身免疫性疾病的診斷，免疫熒光染色模型有助于確定相關(guān)自身抗原，具有重要的臨床意義。由于細(xì)胞組織成分復(fù)雜，不同組分的抗原產(chǎn)生相應(yīng)的自身抗體，不同抗體在臨床診斷和預(yù)后判斷中起到的作用不完全相同［6］，根據(jù)不同自身免疫性疾病，臨床將各類自身抗體進(jìn)行不同組合，形成具有特征性的抗體譜［7］，已進(jìn)行相應(yīng)疾病的篩查和診斷，為進(jìn)一步闡明自身抗體的靶抗原，必須進(jìn)一步提高自身抗體檢測(cè)的特異性。

針對(duì)自身免疫性疾病，線性免疫印跡技術(shù)應(yīng)用較多，具有簡(jiǎn)單快速的特點(diǎn)，可以在一次實(shí)驗(yàn)中檢測(cè)多種特異性自身抗體［8-9］，極大提高了檢驗(yàn)效率，在縮短臨床確診時(shí)間和患者就診時(shí)間以及降低患者就診費(fèi)用、緩解醫(yī)患矛盾中具有重要意義。本研究結(jié)果表明，針對(duì)自身免疫性疾病的特異性自身抗體檢測(cè)組在敏感度、特異度、患者及其家屬的檢測(cè)滿意度以及診斷效果均明顯優(yōu)于常規(guī)檢測(cè)組，可大幅提高檢驗(yàn)效率和權(quán)威性，對(duì)臨床確診、及早治療和提高患者生活質(zhì)量具有重要作用。免疫熒光篩查可以檢測(cè)大部分自身免疫性疾病，但其特異性不高，間接免疫熒光和線性免疫印跡聯(lián)合檢測(cè)可有效提高自身免疫性疾病診斷的特異性和準(zhǔn)確性，對(duì)自身免疫性疾病的診斷具有肯定的意義。

綜上所述，采取針對(duì)性檢測(cè)方法檢測(cè)自身免疫性疾病，可明顯提高臨床檢測(cè)質(zhì)量和檢測(cè)滿意度，改善患者的生活質(zhì)量，臨床應(yīng)用效果顯著，值得臨床推廣應(yīng)用。