不同添加劑對(duì)紫花苜蓿拉伸膜裹包青貯飼料品質(zhì)的影響

曹 蕾，王汝富，張萬(wàn)祥，朱 倩，張永輝，曹明崇，張 林，劉宗祥，馬彥彪，莫負(fù)濤

（甘肅省草原技術(shù)推廣總站，蘭州 730010）

紫花苜蓿原產(chǎn)于伊朗、外高加索和小亞細(xì)亞等近東和東亞地區(qū)。我國(guó)是在公元前126年，張騫出使西域時(shí)從烏孫（即現(xiàn)在的伊犁河南岸）帶入內(nèi)地種植，后種植范圍不斷得到擴(kuò)展［1］。苜蓿作為“牧草之王”，具有適應(yīng)性強(qiáng)、蛋白含量高、營(yíng)養(yǎng)價(jià)值好的特點(diǎn)，是我國(guó)廣泛種植的優(yōu)質(zhì)牧草之一。到目前為止，國(guó)內(nèi)外研究者對(duì)苜蓿育種、營(yíng)養(yǎng)價(jià)值及青貯特性等做了大量研究，結(jié)果均表明，苜蓿可溶性糖含量低、緩沖能值高，較難調(diào)制成優(yōu)質(zhì)青貯飼料［2-3］。本研究針對(duì)苜蓿含糖量低，不易調(diào)制青貯飼料這一實(shí)際問(wèn)題，在苜蓿裹包青貯飼料加工過(guò)程中添加葡萄糖、紅糖、果渣這3種添加劑，旨在探明提高苜蓿青貯物料中含糖量的最佳途徑，明確提高苜蓿青貯品質(zhì)的有效方法，為苜蓿裹包青貯飼料的生產(chǎn)提供理論和技術(shù)支持。

1 材料與方法

1.1 材料

試驗(yàn)所用紫花苜蓿產(chǎn)自甘肅省定西市寧遠(yuǎn)鎮(zhèn)紅土村。拉伸膜裹包青貯在定西市甘肅民祥牧草有限公司進(jìn)行。

1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

試驗(yàn)采用單因素試驗(yàn)設(shè)計(jì)，對(duì)照組為不加添加劑的紫花苜蓿原料裹包青貯，處理組分3組，分別按照紫花苜蓿原料重量的0.2%、0.4%、10%添加葡萄糖、紅糖和果渣進(jìn)行拉伸膜裹包青貯。青貯從2018年6月開始，至9月結(jié)束，青貯時(shí)間90 d。

1.3 試驗(yàn)方法

1.3.1 青貯制作 苜蓿用大型圓盤粉碎機(jī)粉碎后晾至水分含量為65%左右，按比例添加葡萄糖、紅糖和果渣后，用全自動(dòng)打捆機(jī)和懸掛式裹膜機(jī)制成直徑80 cm、高度100 cm的拉伸膜裹包青貯飼料，草捆密度650 kg/m3。青貯90 d后用30 cm×23 cm聚氯乙烯塑料袋裝青貯草樣抽真空、封口、冷凍后帶回實(shí)驗(yàn)室，保存于-20℃冰箱，及時(shí)處理樣品并測(cè)定其青貯指標(biāo)。

1.3.2 青貯指標(biāo)測(cè)定 將樣品解凍后，準(zhǔn)確稱取20.0 g青貯草樣，同時(shí)準(zhǔn)確量取180 mL蒸餾水按草水重量1∶9的比例用榨汁機(jī)榨汁后再用四層紗布過(guò)濾制備浸提液，測(cè)定其pH值并于-20℃保存部分浸提液用于可溶性糖和氨態(tài)氮的測(cè)定，同時(shí)，用50%硫酸溶液酸化剩余浸提液使其pH值降低至 2.0后于-20℃保存，用Aglient 1100高效液相色譜儀進(jìn)行有機(jī)酸的測(cè)定［4-5］?？扇苄蕴呛坑幂煦~-硫酸比色法測(cè)定；氨態(tài)氮含量用苯酚-次氯酸鈉比色法測(cè)定［6］。取適量青貯樣品于105℃烘干至恒重測(cè)定其干物質(zhì)含量。

1.3.3 微生物計(jì)數(shù) 在超凈工作臺(tái)取青貯樣品5.0 g放入滅菌三角瓶，加入45 mL滅菌生理鹽水后封口，搖床180 r/min室溫振蕩60 min后取上清作為細(xì)菌懸浮液，用滅菌生理鹽水按照10-1至10-5的稀釋梯度稀釋懸浮液，選取適當(dāng)濃度分別涂布MRS和PDA平板，MRS平板37℃厭氧培養(yǎng)48 h后計(jì)數(shù)，PDA平板37℃有氧培養(yǎng)后計(jì)數(shù)。

1.3.4 營(yíng)養(yǎng)指標(biāo)測(cè)定 取適量青貯苜蓿樣品，于65℃鼓風(fēng)干燥48 h烘干，微型粉碎機(jī)粉碎后過(guò)40目篩后備用。粗蛋白含量用凱氏定氮法測(cè)定，中性洗滌纖維和酸性洗纖維含量用范氏洗滌法測(cè)定［6］。

1.4 數(shù)據(jù)處理

采用Excel進(jìn)行基礎(chǔ)數(shù)據(jù)計(jì)算和圖表制作，用SPSS 15.0進(jìn)行單因素方差分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 苜蓿原料營(yíng)養(yǎng)成分含量

由表1和表2可知，苜蓿原料干物質(zhì)含量34.09%，水分含量65.91%，其水分含量適宜調(diào)制優(yōu)質(zhì)青貯飼料。苜蓿原料附著乳酸菌數(shù)量達(dá)6.31 log cfu/gFM。

表1苜蓿原料營(yíng)養(yǎng)成分含量%

表2苜蓿原料中微生物含量log cfu/gFM

2.2 不同添加劑對(duì)苜蓿裹包青貯飼料品質(zhì)的影響

從表3可知，與對(duì)照組相比，pH值紅糖處理組顯著高于對(duì)照組（P＜0.05）和其他處理組（P＜0.05）；干物質(zhì)含量葡萄糖處理組顯著高于對(duì)照組（P＜0.05）和其他處理組（P＜0.05）；乳酸含量葡萄糖和果渣處理組之間無(wú)顯著性差異（P＞0.05），但二者均顯著高于紅糖處理組（P＜0.05）；乙酸含量對(duì)照組和紅糖處理組間無(wú)顯著差異（P＞0.05），但二者均顯著低于葡萄糖處理組（P＜0.05）和果渣糖處理組（P＜0.05）；乳酸菌數(shù)3個(gè)處理組之間差異不顯著（P＞0.05），但均顯著高于對(duì)照組（P＜0.05）；酵母菌數(shù)各處理組均為0；霉菌數(shù)對(duì)照組和紅糖處理組為0，果渣處理組為3.00 log cfu/gFM，顯著高于葡萄糖處理組（P＜0.05）。

表3不同添加劑對(duì)苜蓿裹包青貯飼料品質(zhì)的影響

2.3 不同添加劑對(duì)苜蓿裹包青貯飼料營(yíng)養(yǎng)成分含量的影響

從表4可知，苜蓿裹包青貯飼料青貯90 d后，葡萄糖處理組的可溶性糖含量顯著高于對(duì)照組（P＜0.05）和果渣處理組（P＜0.05）；紅糖處理組氨態(tài)氮含量顯著高于其他各處理組（P＜0.05）；果渣處理組的粗蛋白含量顯著低于其他各處理組（P＜0.05）。

表4不同添加劑對(duì)苜蓿裹包青貯飼料營(yíng)養(yǎng)成分含量的影響（DM基礎(chǔ)）%

3 討論

本試驗(yàn)中紫花苜蓿含水量65.91%，這與Zhang等［7］的青貯飼料調(diào)制最適水分含量應(yīng)為65%～70%的結(jié)果相一致。張德玉等的研究表明，作物秸稈中的水溶性碳水化合物含量應(yīng)超過(guò)6%（DM）才可制成優(yōu)質(zhì)青貯飼料［8］，而紫花苜蓿作為一種優(yōu)質(zhì)豆科牧草，其可溶性糖含量低，緩沖能值高，不易調(diào)制成優(yōu)質(zhì)青貯飼料。但通過(guò)本試驗(yàn)的研究結(jié)果表明，添加一定量的添加劑對(duì)改善紫花苜蓿青貯飼料的品質(zhì)是有極大幫助的，這與蔣向君等［9］和萬(wàn)里強(qiáng)等［10］的研究結(jié)果相一致。

本試驗(yàn)結(jié)果表明，雖然對(duì)照組的pH值、乳酸、丙酸、氨態(tài)氮、粗蛋白、中性洗滌纖維和酸性洗滌纖維含量均與葡萄糖處理組間差異不顯著（P＞0.05），但其干物質(zhì)含量為34.38%，顯著低于添加葡萄糖處理組（P＜0.05）；乙酸含量為4.93%，顯著高于葡萄糖處理組（P＜0.05）；可溶性糖含量為0.35%，顯著低于葡萄糖處理組（P＜0.05）?？梢?jiàn)，青貯過(guò)程中異型乳酸菌最終活性較強(qiáng)，這與榮輝等［11］和 Shao 等［12］的研究結(jié)果相一致。本研究中添加葡萄糖處理組乳酸含量較高，乙酸含量較低，說(shuō)明添加葡萄糖提高了同型乳酸菌的發(fā)酵效率，這與榮輝等［13］的研究結(jié)果相類似。添加紅糖處理組的pH值顯著高于其他處理組（P＜0.05），說(shuō)明該處理組發(fā)酵程度較低，這可能與乳酸菌對(duì)紅糖利用率低導(dǎo)致后期發(fā)酵中發(fā)酵底物不足有關(guān)。

果渣中酚類物質(zhì)含量較高。Lee等［14］的研究表明，多酚中的單寧酸可通過(guò)使蛋白水解酶失活或與蛋白形成蛋白質(zhì)-多酚類化合物來(lái)抑制蛋白質(zhì)的降解。因此，在生產(chǎn)中常將果渣添加至青貯飼料中以抑制蛋白質(zhì)降解，從而提高飼料中粗蛋白含量。本研究結(jié)果表明，添加果渣處理組的粗蛋白含量12.87%，顯著低于其他處理組（P＜0.05）和對(duì)照組（P＜0.05），這與以上研究結(jié)果相反。另有研究表明，霉菌擁有強(qiáng)大的分解蛋白質(zhì)能力的蛋白酶系［15］，分泌的蛋白酶作用于蛋白質(zhì)，將其分解為多肽和氨基酸［16］。本試驗(yàn)中果渣添加組中霉菌數(shù)量為3.00 log cfu/gFM，顯著高于其他各處理組（P＜0.05），大量的霉菌導(dǎo)致果渣添加組蛋白質(zhì)降解，使得果渣抑制蛋白降解的作用不突出，所以在實(shí)際生產(chǎn)中應(yīng)采取相應(yīng)措施降低果渣中的霉菌數(shù)量，突出果渣有助于降低青貯飼料的pH值，促進(jìn)青貯發(fā)酵，同時(shí)還降低由霉菌造成的蛋白損失，以保證青貯飼料品質(zhì)。

4 結(jié)論

本研究結(jié)果表明，在紫花苜蓿裹包青貯飼料中添加葡萄糖有助于提高青貯品質(zhì)，降低青貯飼料pH值，保留更多的干物質(zhì)，提高乳酸含量，降低乙酸、丙酸及氨態(tài)氮含量，且其青貯品質(zhì)優(yōu)于添加紅糖和果渣兩個(gè)處理組，更優(yōu)于不做任何處理的對(duì)照組。因此，在今后的苜蓿裹包青貯制作過(guò)程中可以使用0.2%葡萄糖作為添加劑。