無創(chuàng)基因檢測(cè)和血清學(xué)篩查在唐氏綜合征篩查中的應(yīng)用分析

盛 娟

（新疆喀什地區(qū)第一人民醫(yī)院，新疆 喀什 844000）

新生兒染色體異常是臨床上常見的一種出生缺陷類型，不僅會(huì)導(dǎo)致新生兒身體及智力發(fā)育異常，還會(huì)給家庭及社會(huì)但來沉重的負(fù)擔(dān)[1]。近年來，隨著廣大群眾優(yōu)生優(yōu)育意識(shí)的提高，越來越多的育齡期婦女及孕產(chǎn)婦選擇產(chǎn)前篩查來避免出生缺陷，以提高新生兒出生質(zhì)量。唐氏綜合征（DS）又稱為21-三體綜合征，屬于染色體異常范疇，盡管約有60%以上的唐氏綜合征在孕早中期胎死宮內(nèi)或流產(chǎn)，但仍有部分患兒存活至出生[2]。絨毛活檢、羊水穿刺、取臍帶血等方法均為DS診斷的金標(biāo)準(zhǔn)，但因其具有一定的創(chuàng)傷性，常不易被患者所接受[3]。因此臨床上常采用血清學(xué)篩查來診斷DS，但誤診率較高，為此本研究選取2017年1月至2018年3月120孕婦為研究對(duì)象，探討無創(chuàng)基因檢測(cè)和血清學(xué)篩查在唐氏綜合征篩查中的應(yīng)用價(jià)值，報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料：選取2017年1月至2018年3月120孕婦為研究對(duì)象，所有孕婦均單胎妊娠，知情同意，自愿參與本次研究，且排除傳染性疾病、腫瘤、心血管疾病、免疫系統(tǒng)疾病以及血液系統(tǒng)疾病等。根據(jù)硬幣投擲法將受試者分為對(duì)照組和研究組，每組60例，對(duì)照組孕婦最小年齡22歲，最大年齡36歲，平均（30.25±2.54）歲，孕周22～36，平均（31.24±2.26）周，孕次1～3次，平均（1.85±0.43）次；研究組孕婦最小年齡23歲，最大年齡37歲，平均（30.53±2.46）歲，孕周20～35，平均（31.38±2.17）周，孕次1～3次，平均（1.83±0.39）次。所有患者的年齡、孕周等基本資料比較，無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＞0.05），具有可比性。

1.2 方法：核酸提取或純化試劑和胎兒染色體非整倍體檢測(cè)試劑盒購自廣州市達(dá)瑞生物技術(shù)股份有限公司，DA8600半導(dǎo)體測(cè)序儀購自中山大學(xué)達(dá)安基因股份有限公司，Qubit定量?jī)x購自美國LifeTechnologies公司。對(duì)照組患者行血清學(xué)篩查（AFP＋β-HCG），取孕婦外周靜脈血10 mL，離心分離出血清后于-20 ℃保存待檢，采用時(shí)間分辨免疫熒光分析法及酶聯(lián)免疫法檢測(cè)AFP和F-βhCG濃度，結(jié)合孕婦的年齡、孕周、體質(zhì)量、孕次等，應(yīng)用配套軟件計(jì)算唐氏綜合征風(fēng)險(xiǎn)，唐氏綜合征高風(fēng)險(xiǎn)的截?cái)嘀禐?∶250；18-三體綜合征高風(fēng)險(xiǎn)截?cái)嘀禐?∶350[4]。研究組患者則取外周血中的游離 DNA 片段進(jìn)行無創(chuàng)基因檢測(cè)，取孕婦外周靜脈血10 mL，離心后取上層血漿，通過柱分離的方法獲取血漿中游離DNA，嚴(yán)格按照非整倍體檢測(cè)試劑盒的要求行基因組測(cè)序技術(shù)，結(jié)合孕婦的年齡、孕周、體質(zhì)量、孕次等及生物信息，計(jì)算胎兒唐氏綜合征風(fēng)險(xiǎn)，唐氏綜合征高風(fēng)險(xiǎn)：chr21的T值≥3；18-三體綜合征高風(fēng)險(xiǎn)：chr18的T值≥3[5]。最后對(duì)唐篩陽性者行羊水穿刺或取胎兒臍帶血進(jìn)行確診，比較兩組方法在唐氏綜合征篩查中的診斷準(zhǔn)確率。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法：采用SPSS19.0軟件包，建立Excel表格統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)，計(jì)數(shù)資料采用百分比（%）表示，行χ2檢驗(yàn)，P＜0.05表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

在對(duì)照組的60例患者中，血清學(xué)篩查出高風(fēng)險(xiǎn)孕婦8例，篩查陽性率13.33%。其中，唐氏綜合征高風(fēng)險(xiǎn)孕婦6例，唐篩陽性率10.00%，所有陽性孕婦均行羊水穿刺或無創(chuàng) DNA 檢測(cè)進(jìn)行確診，經(jīng)跟蹤隨訪僅有1例被證實(shí)為21-三體綜合征，唐篩假陽性率為8.33%。在研究組的60例患者中，無創(chuàng)基因檢測(cè)出高風(fēng)險(xiǎn)孕婦4例，篩查陽性率6.67%。其中，唐氏綜合征高風(fēng)險(xiǎn)孕婦3例，唐篩陽性率5.00%，所有陽性孕婦均行羊水穿刺進(jìn)行確診，其中21-三體綜合征3例，18-三體綜合征1例，唐篩假陽性率為0，研究組唐氏綜合征診斷準(zhǔn)確率顯著高于對(duì)照組，兩組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），見表1。

表1 兩組方法在唐氏綜合征篩查中的診斷準(zhǔn)確率[n（%）]

3 討 論

唐氏綜合征是由于配子形成過程中染色體不分離所致，以生長(zhǎng)發(fā)育遲緩、智力障礙、畸形為主要臨床表現(xiàn)，嚴(yán)重影響出生人口質(zhì)量[6]。目前臨床上主要通過檢測(cè)甲胎蛋白（AFP）、人絨毛膜促性腺激素（hCG）等血清生物學(xué)指標(biāo)來篩查唐氏綜合征，但臨床數(shù)據(jù)顯示，其準(zhǔn)確性僅為60%～70%，特異性差，仍有假陽性率較高的缺陷，從而影響出生質(zhì)量[7]。有研究表明，母血中攜帶了胎兒基因組 DNA 的全部遺傳信息，且因此在孕中期可通過DNA測(cè)序技術(shù)檢測(cè)胎兒游離DNA片段，利用生物信息學(xué)進(jìn)行序列比對(duì)，從而推算唐氏綜合征的發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)，且該方法敏感性及特異性較高，有效避免了絨毛活檢、羊水穿刺、取臍帶血等方法的創(chuàng)傷性，操作簡(jiǎn)便，快速，具有較高的應(yīng)用價(jià)值[8]。本研究結(jié)果表明，對(duì)照組篩查陽性率13.33%，唐篩陽性率10.00%，唐篩假陽性率為8.33%；研究組篩查陽性率6.67%，唐篩陽性率5.00%，唐篩假陽性率為0，研究組唐氏綜合征診斷準(zhǔn)確率顯著高于對(duì)照組，兩組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。

綜上所述，無創(chuàng)基因檢測(cè)可降低侵入性產(chǎn)前診斷的風(fēng)險(xiǎn)，在唐氏綜合征篩查中具有適應(yīng)范圍廣、準(zhǔn)確性及特異性高的特點(diǎn)，具有較高的應(yīng)用價(jià)值，值得臨床推廣使用。