蟲(chóng)草頭孢提取物Fr.8組分對(duì)HepG-2胰島素抵抗的改善作用

韓一鳳， 耿 燕*， 孟照敏， 杜 妍， 許泓瑜， 史勁松， 許正宏，2

（1.江南大學(xué) 藥學(xué)院，江蘇 無(wú)錫214122；2.江南大學(xué) 工業(yè)生物技術(shù)教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，江蘇 無(wú)錫 214122）

胰島素抵抗（Insulin Resistance，IR）是 2型糖尿病的重要發(fā)病機(jī)制之一[1-3]，且伴隨疾病產(chǎn)生發(fā)展的整個(gè)過(guò)程，亦常出現(xiàn)于肥胖、高血壓、高血脂等代謝疾病中[2-3]。通常表現(xiàn)為胰島素敏感性下降且胰島素介導(dǎo)的葡萄糖利用率減弱。IR的發(fā)生部位主要有外周組織和肝臟，于外周組織中表現(xiàn)為：在脂肪組織和骨骼肌中，胰島素促進(jìn)其攝取、利用及儲(chǔ)存葡萄糖的能力減弱；于肝臟中則表現(xiàn)為：胰島素抑制肝糖輸出的能力降低[4]，而肝臟在機(jī)體的糖、脂代謝調(diào)節(jié)中起重要作用。肝臟胰島素抵抗亦是2型糖尿病治療的重要靶點(diǎn)，因此本實(shí)驗(yàn)主要針對(duì)肝細(xì)胞的胰島素抵抗進(jìn)行研究。

據(jù)國(guó)內(nèi)外文獻(xiàn)報(bào)道，蟲(chóng)草頭孢（Cephalosporium sinensis）及其菌粉中含有氨基酸 （Amino acid）、腺苷 （Adenosine）、 甘露 醇 （Mannitol）、 蟲(chóng)草多 糖（Polysaccharide）、蟲(chóng)草酸（Cordyceps acid）及蟲(chóng)草素（Cordycepin）[5-6]?，F(xiàn)代藥理及毒理實(shí)驗(yàn)已證明，蟲(chóng)草菌粉提取物在抗菌、抗癌、抗炎、抗腫瘤、降血脂等方面具有獨(dú)特功效[7]，但對(duì)于其在改善胰島素抵抗即減緩2型糖尿病方面的研究甚少[5，7]。

實(shí)驗(yàn)前期已從蟲(chóng)草頭孢正己烷提取物中經(jīng)硅膠柱層析分離得到Fraction 8（Fr.8）組分，體外實(shí)驗(yàn)初步評(píng)價(jià)其具有降糖活性。因此，作者以Fr.8組分為研究對(duì)象，采用穩(wěn)定的體外高胰島素誘導(dǎo)的HepG-2胰島素抵抗模型評(píng)價(jià)其降糖活性，檢測(cè)其作用于此細(xì)胞模型后相關(guān)基因轉(zhuǎn)錄水平及蛋白質(zhì)表達(dá)水平的變化，探討Fr.8組分具有降糖活性的作用機(jī)制，為蟲(chóng)草頭孢減緩2型糖尿病的研究提供可靠的理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)材料

1.1.1 材料 蟲(chóng)草頭孢菌粉：江蘇神華藥業(yè)有限公司提供；HepG-2細(xì)胞：江南大學(xué)金堅(jiān)教授實(shí)驗(yàn)室饋贈(zèng)。

1.1.2 試劑 胰島素：購(gòu)自阿拉丁；RPMI-1640細(xì)胞培養(yǎng)基、胎牛血清（FBS）：購(gòu)自美國(guó)Gibco公司；胰酶消化液、雙抗 （青霉素-鏈霉素100×）、10%SDS、1 mol/L Tris-HCl、pH 6.8、1.5 mol/L Tris-HCl，pH 8.8：購(gòu)自碧云天公司；MTT、葡萄糖檢測(cè)試劑盒、2-NBDG：購(gòu)自美國(guó)Sigma公司；細(xì)胞已糖激酶檢測(cè)試劑盒、細(xì)胞丙酮酸激酶檢測(cè)試劑盒：購(gòu)自上海杰美基因科技有限公司；Trizol試劑、SYBR Green Master、蛋白裂解液：購(gòu)自美國(guó)Roche公司；PAMPKα、P-AKT 抗體：購(gòu)自 Cell Signaling Technology公司；IR、IRS、Glut2抗體：購(gòu)自Abcam公司。

1.1.3 儀器 中低壓柱層析：Grace公司；Multiskan MK3型酶標(biāo)儀：德國(guó)Eppendorf公司；CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱：Thermo公司；倒置顯微鏡：Nikon公司；RT-PCR儀、化學(xué)發(fā)光成像儀：Bio-Rad公司。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1 Fr.8組分的制備 蟲(chóng)草頭孢菌粉（2 kg）與正己烷質(zhì)量體積比為1∶10浸提12 h后過(guò)濾得到澄清的濾液，重復(fù)浸提3次收集濾液，將濾液旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)去除正己烷后得到蟲(chóng)草頭孢正己烷提取物103.4 g。通過(guò)薄層層析法確定提取蟲(chóng)草頭孢正己烷的流動(dòng)相為正己烷、乙酸乙酯。用40 g硅膠柱，流速20 mL/min，流動(dòng)相正己烷和乙酸乙酯梯度洗脫，在乙酸乙酯洗脫比例為82%時(shí)收集餾分得到Fr.8組分1.29 g。1.2.2 HepG-2細(xì)胞培養(yǎng) 根據(jù)HepG-2細(xì)胞的生長(zhǎng)狀態(tài)，選擇含有10%胎牛血清（FBS）及1%抗生素 （100 U/mL青霉素，100 μg/mL鏈霉素） 的RPMI-1640細(xì)胞培養(yǎng)基，置于37℃、5%CO2濕潤(rùn)環(huán)境的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)細(xì)胞，待細(xì)胞融合至80%～90%時(shí)傳代鋪板，并選擇處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞進(jìn)行相關(guān)實(shí)驗(yàn)。

1.2.3 高胰島素誘導(dǎo)的HepG-2胰島素抵抗細(xì)胞模型的建立 選擇處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞，分別以2×104個(gè)/孔和5×105個(gè)/孔的密度鋪于 96孔板和 6孔板中，24 h后換無(wú)FBS培養(yǎng)基饑餓細(xì)胞24 h，每孔加含 0、0.01、0.1、1、5、10、50 μmol/L 胰島素（設(shè)有空白細(xì)胞對(duì)照）的培養(yǎng)基作用于細(xì)胞36 h后，換無(wú)FBS培養(yǎng)基孵育細(xì)胞12 h，96孔板取上清培養(yǎng)液用葡萄糖檢測(cè)試劑盒測(cè)每孔葡萄糖含量，與空白細(xì)胞組比較，計(jì)算各組的葡萄糖消耗量[8-9]；6孔板中的細(xì)胞加裂解液后于冰上裂解30 min，用細(xì)胞刮將細(xì)胞刮下，參照試劑盒說(shuō)明，根據(jù)酶偶聯(lián)反應(yīng)比色法定量檢測(cè)細(xì)胞己糖激酶和丙酮酸激酶的活性。

1.2.4 MTT法檢測(cè)細(xì)胞活力 選擇處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞，以2×104個(gè)/孔的密度鋪于96孔板，培養(yǎng)24 h 后換含有不同質(zhì)量濃度 Fr.8 組分（0、12、25、50、100 μg/mL）的培養(yǎng)基孵育細(xì)胞24 h （每組6個(gè)復(fù)孔），棄去培養(yǎng)液，每孔加入含0.5 mg/mL MTT的培養(yǎng)基100 μL孵育4 h后，棄去廢液，每孔加150 μL DMSO，用酶標(biāo)儀在570 nm處測(cè)OD值[10]。細(xì)胞存活率的計(jì)算公式為：

式中：A為細(xì)胞存活率，B為藥物組OD值，C為空白組OD值，D為對(duì)照組OD值。

1.2.5 2-NBDG法測(cè)細(xì)胞葡萄糖攝取 將處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞，以2×104個(gè)/孔的密度鋪于96孔黑色熒光板，24 h后用DPBS漂洗細(xì)胞三遍，換無(wú)血清的培養(yǎng)基饑餓細(xì)胞24 h，加不同濃度的胰島素（0、0.01、0.1、1、5、10、50 μmol/L）作用細(xì)胞 36 h，每孔加入含終濃度為50 μmol/L的2-NBDG （熒光標(biāo)記的葡萄糖類(lèi)似物）[11-12]孵育1 h，DPBS漂洗細(xì)胞三遍后，換無(wú)血清的培養(yǎng)基于激發(fā)波長(zhǎng)485 nm，發(fā)射波長(zhǎng) 530 nm 處測(cè)熒光值[11，13]。

1.2.6 實(shí)時(shí)熒光定量PCR （RT-PCR）法檢測(cè)相關(guān)基因的表達(dá) 采用Trizol試劑抽提細(xì)胞總RNA，將RNA反轉(zhuǎn)錄為cDNA，用SYBRGreen進(jìn)行熒光定量PCR 反應(yīng)， 用 2-△△t法[10]對(duì) IR、IRS1、IRS2、Glut2、AMPKα mRNA的轉(zhuǎn)錄水平進(jìn)行相對(duì)定量，采用的引物見(jiàn)表1。

1.2.7 蛋白免疫印跡 （Western Blotting）法檢測(cè)相關(guān)蛋白質(zhì)的表達(dá) 用預(yù)冷的DPBS漂洗細(xì)胞后，每皿加入100 μL蛋白質(zhì)裂解液 （含蛋白酶及磷酸酶抑制劑），于冰上裂解30～40 min后，用細(xì)胞刮將細(xì)胞刮下，吹打均勻后收集于1.5 mL離心管中，12 000 g低溫離心10 min，將蛋白質(zhì)上清液移至新的1.5 mL EP管中，用BCA試劑盒測(cè)定不同樣品的蛋白質(zhì)質(zhì)量濃度。經(jīng)SDS-PAGE電泳后將分布于蛋白膠上的蛋白質(zhì)濕法轉(zhuǎn)膜至PVDF膜上，封閉后，4℃孵育一抗過(guò)夜，TBST洗膜3次后，室溫孵育二抗1 h，ECL化學(xué)發(fā)光底物顯色后拍照，用Image J軟件分析蛋白質(zhì)條帶的灰度值，定量監(jiān)測(cè)胰島素抵抗相關(guān)蛋白 IR、IRS、Glut2及相關(guān)信號(hào)通路蛋白 p-AMPKα[14-15]、p-AKT[9，16]的表達(dá)。

表1 胰島素抵抗相關(guān)基因序列Table 1 Sequences of insulin resistance primers

1.2.8 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì) 用One-Way ANOVA統(tǒng)計(jì)學(xué)分析實(shí)驗(yàn)結(jié)果，每組數(shù)據(jù)以平均值±標(biāo)準(zhǔn)偏差表示，p＜0.05，與對(duì)照組相比，極顯著水平表示為***p＜0.01，與模型組相比，極顯著水平表示為###p＜0.01[10]。

2 結(jié)果與分析

2.1 高胰島素誘導(dǎo)的HepG-2胰島素抵抗細(xì)胞模型的建立

在無(wú)細(xì)胞毒性（＜5 μmol/L）的胰島素作用范圍見(jiàn)圖1（a）。通過(guò)檢測(cè)細(xì)胞的葡萄糖消耗量、葡萄糖攝取量?jī)蓚€(gè)指標(biāo)選擇建立胰島素抵抗細(xì)胞模型的胰島素最佳作用劑量，通過(guò)檢測(cè)胞內(nèi)已糖激酶活性和丙酮酸激酶活性，驗(yàn)證此模型的可靠性。如圖1（b）所示，不同濃度胰島素（0、0.01、0.1、1、5 μmol/L）作用于HepG-2細(xì)胞后檢測(cè)各組細(xì)胞的葡萄糖消耗量，5 μmol/L胰島素誘導(dǎo)的胰島素抵抗細(xì)胞（HepG-2/IR）與對(duì)照組細(xì)胞相比，葡萄糖消耗量有極顯著的降低（***p＜0.001）；采用2-NBDG法檢測(cè)各組細(xì)胞的葡萄糖攝取量，見(jiàn)圖1（c）。5 μmol/L胰島素誘導(dǎo)的胰島素抵抗細(xì)胞 （HepG-2/IR）與對(duì)照組細(xì)胞相比，葡萄糖攝取量有極顯著的減少 （***p＜0.001）；用酶偶聯(lián)反應(yīng)比色法試劑盒定量檢測(cè)胰島素誘導(dǎo)后的胰島素抵抗細(xì)胞 （HepG-2/IR）的胞內(nèi)已糖激酶活性和丙酮酸激酶活性見(jiàn)圖1（d）-（e）。5 μmol/L胰島素誘導(dǎo)的胰島素抵抗細(xì)胞（HepG-2/IR）與對(duì)照組細(xì)胞相比，己糖激酶和丙酮酸激酶的活性均顯著降低（**p＜ 0.01）；因此，選擇 5 μmol/L 胰島素為HepG-2胰島素抵抗細(xì)胞模型的最佳誘導(dǎo)濃度。

圖1 HepG-2胰島素抵抗細(xì)胞模型的建立Fig.1 Establishment of insulin resistance cell model in HepG-2

2.2 Fr.8組分的體外降糖活性評(píng)價(jià)

2.2.1 Fr.8組分對(duì)HepG-2細(xì)胞活力的影響 不同質(zhì)量濃度（0、12、25、50、100 μg/mL） 的 Fr.8 組分作用于HepG-2細(xì)胞24 h后，MTT法測(cè)各組細(xì)胞活力，見(jiàn)圖2。不同劑量的Fr.8組分對(duì)HepG-2細(xì)胞均無(wú)毒副作用，F(xiàn)r.8組分與胰島素共同作用于細(xì)胞后，僅100 μg/mL的Fr.8組分對(duì)HepG-2細(xì)胞的生長(zhǎng)有19%的抑制，可進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn)。

圖2 不同質(zhì)量濃度的Fr.8對(duì)HepG-2細(xì)胞存活率的作用Fig.2 Effects of different concentrations of Fr.8 on cell viability in HepG-2

2.2.2 Fr.8組分對(duì)HepG-2/IR細(xì)胞葡萄糖消耗及攝取的影響 不同質(zhì)量濃度（0、12、25、50、100 μg/mL）的Fr.8組分作用于胰島素抵抗細(xì)胞 （HepG-2/IR）后，通過(guò)檢測(cè)細(xì)胞對(duì)葡萄糖的消耗量及攝取量變化，評(píng)價(jià)Fr.8組分于體外細(xì)胞具有顯著的降糖活性。 如圖 3（a）-（b）所示，F(xiàn)r.8 組分作用于 HepG-2/IR細(xì)胞后，細(xì)胞對(duì)葡萄糖的消耗量及攝取量相比于模型組均顯著提高（##p＜ 0.01，###p＜ 0.001），且具有明顯的劑量依賴(lài)關(guān)系。

2.3 Fr.8組分改善HepG-2胰島素抵抗作用機(jī)制初步探討

胰島素在細(xì)胞水平上是通過(guò)與靶細(xì)胞膜上的特異受體結(jié)合而啟動(dòng)的，這一特異受體即胰島素受體（IR）；胰島素受體底物（IRS）是細(xì)胞內(nèi)胰島素反應(yīng)的重要配體，IR可與IRS鍵合，激活相應(yīng)的酶體，影響糖脂代謝；葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白2（Glut2）是一種跨膜轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白，主要存在于肝臟和胰腺β細(xì)胞膜上，是葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)的理想載體；AMPK即AMP依賴(lài)的蛋白激酶，是糖脂代謝調(diào)節(jié)的關(guān)鍵蛋白質(zhì)，目前也是糖尿病及其他代謝相關(guān)疾病的研究核心，其激活能改善由2型糖尿病引起的代謝失衡；AKT激酶是PI3K下游最重要的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)蛋白質(zhì)，分布在肝臟AKT的作用主要是促進(jìn)糖原合成、抑制糖異生、促進(jìn)Glut2轉(zhuǎn)位到細(xì)胞膜上，調(diào)節(jié)糖代謝。作者通過(guò)檢測(cè)胰島素抵抗相關(guān)基因轉(zhuǎn)錄及蛋白質(zhì)表達(dá)水平的變化，初步探討Fr.8組分改善HepG-2胰島素抵抗的作用機(jī)理。

2.3.1 Fr.8組分對(duì)HepG-2胰島素抵抗相關(guān)基因轉(zhuǎn)錄的影響 在基因水平上，采用qRT-PCR技術(shù)進(jìn)一步檢測(cè)Fr.8組分對(duì)于HepG-2胰島素抵抗相關(guān)基因（IR、IRS1、IRS2、Glut2、AMPKα）轉(zhuǎn)錄的影響，結(jié)果見(jiàn)圖4。5 μmol/L胰島素作用于HepG-2細(xì)胞后可顯著下調(diào) IR、IRS1、IRS2、Glut2、AMPKα 基因的表達(dá)（***p＜0.001）。 Fr.8 組分（12、25、50、100 μg/mL）顯著上調(diào) Glut2、AMPKα基因的表達(dá) （###p＜0.001）， 且具有劑量相關(guān)性。 50、100 μg/mL的Fr.8組分亦可顯著上調(diào)IR、IRS1及IRS2的表達(dá)（###p＜0.001），且具有劑量依賴(lài)性。

圖 4 Fr.8組分對(duì) IR、IRS1、IRS2、Glut2及 AMPKα 基因相對(duì)表達(dá)量的影響Fig.4 Effect of Fr.2 on the relative expression of IR、IRS1、IRS2、Glut2 and AMPKα mRNA

2.3.2 Fr.8組分對(duì)HepG-2胰島素抵抗相關(guān)蛋白質(zhì)表達(dá)的影響 在HepG-2/IR細(xì)胞中分別加入質(zhì)量濃度為 12、25、50、100 μg/mL 的 Fr.8 組分，檢測(cè) IR、IRS、Glut2及p-AMPKα、p-AKT的表達(dá)情況， 結(jié)果見(jiàn)圖5（a）。50 μg/mL的Fr.8組分可使IR蛋白質(zhì)表達(dá)上調(diào)，與對(duì)照組相比提高了66.6%；同樣，F(xiàn)r.8組分有上調(diào)IRS表達(dá)的作用，且具有良好的劑量依賴(lài)關(guān)系，見(jiàn)圖5（b）。隨著Fr.8組分濃度提高，IRS蛋白表達(dá)量逐步增加，當(dāng)Fr.8組分作用質(zhì)量濃度達(dá)到100 μg/mL時(shí)，IRS蛋白質(zhì)表達(dá)量提高到最大，與對(duì)照組相比提高了60.6%；Glut2占肝細(xì)胞葡萄糖載體蛋白的97%以上，Glut2在負(fù)責(zé)葡萄糖的轉(zhuǎn)運(yùn)的過(guò)程中起到非常重要的作用。如圖5（c）所示，HepG-2/IR細(xì)胞Glut2的表達(dá)量顯著下降（**p＜0.01），與對(duì)照組相比，下調(diào)了20.3%，而經(jīng)Fr.8組分作用后，Glut2的表達(dá)則上調(diào)8%～37.7%，從而達(dá)到改善胰島素抵抗的效果。 如圖 5（d）-（e）所示，模型組磷酸化蛋白p-AMPKα和p-AKT（Ser473）的表達(dá)與對(duì)照組相比顯著降低（***p＜0.001），這說(shuō)明細(xì)胞產(chǎn)生胰島素抵抗后，AMPKα和AKT蛋白質(zhì)的磷酸化水平下降，而Fr.8組分作用于細(xì)胞后，明顯提高了AMPKα和AKT（Ser473）磷酸化蛋白質(zhì)的表達(dá)水平（###p＜ 0.001）。

圖 5 Fr.8對(duì)HepG-2/IR細(xì)胞IR、IRS、Glut2、p-AMPKα及p-AKT蛋白質(zhì)表達(dá)的影響Fig.5 Effect of Fr.8 on protein expression of IR、IRS、Glut2、p-AMPKαand p-AKT in HepG-2/IR cells

已有文獻(xiàn)報(bào)道，蟲(chóng)草頭孢及其發(fā)酵產(chǎn)物可以改善化學(xué)誘導(dǎo)型大鼠糖尿病模型[17]，且蟲(chóng)草多糖對(duì)于糖尿病的體外及體內(nèi)治療已經(jīng)具有成熟的研究[18-20]；而對(duì)蟲(chóng)草頭孢中小分子化合物治療糖尿病的研究并不多見(jiàn)，本研究為蟲(chóng)草頭孢中小分子化合物治療糖尿病提供了一定實(shí)驗(yàn)依據(jù)。研究結(jié)果顯示，蟲(chóng)草頭孢正己烷分離組分Fr.8可通過(guò)調(diào)節(jié)多個(gè)相關(guān)蛋白質(zhì)的表達(dá)改善HepG-2胰島素抵抗，這也表明蟲(chóng)草頭孢正己烷分離組分Fr.8可能成為治療糖尿病的潛力藥物。

3 結(jié)語(yǔ)

2型糖尿?。═2DM）主要表現(xiàn)為胰島素抵抗或胰島素分泌不足，而胰島素必須與受體結(jié)合并固定在細(xì)胞膜上，才有可能將細(xì)胞周?chē)钠咸烟沁\(yùn)送到細(xì)胞中，葡萄糖一旦進(jìn)入細(xì)胞，即被細(xì)胞所利用。因此，在同等血漿胰島素水平時(shí)，胰島素受體越多，胰島素作用能力越強(qiáng)，組織細(xì)胞對(duì)胰島素越敏感；反之，當(dāng)胰島素受體減少，胰島素的作用能力會(huì)相應(yīng)減弱，進(jìn)而組織細(xì)胞會(huì)對(duì)胰島素產(chǎn)生抵抗作用。

肝臟是糖脂代謝的主要場(chǎng)所，對(duì)于維持血糖穩(wěn)定是必不可少的。因此，肝細(xì)胞的糖代謝紊亂對(duì)胰島素抵抗的發(fā)生具有十分重要的意義，著重于肝臟胰島素抵抗的研究具有一定的藥理價(jià)值。作者采用的HepG-2細(xì)胞雖來(lái)源于肝癌細(xì)胞，但很大程度上保留了肝細(xì)胞的許多特性，其表面亦存在胰島素受體，且受體數(shù)目與胰島素的調(diào)節(jié)水平息息相關(guān)，當(dāng)胰島素受體數(shù)目減少到一定水平后，細(xì)胞就會(huì)對(duì)胰島素產(chǎn)生抵抗作用。

作者構(gòu)建了高胰島素誘導(dǎo)的HepG-2/IR細(xì)胞模型，并運(yùn)用此模型研究了蟲(chóng)草頭孢正己烷提取物Fr.8組分的體外降糖活性。實(shí)驗(yàn)證明，F(xiàn)r.8組分不但可促進(jìn)HepG-2/IR細(xì)胞對(duì)葡萄糖的消耗，還可以提高HepG-2/IR細(xì)胞對(duì)葡萄糖的攝取，從而在一定程度上改善肝臟胰島素抵抗。研究結(jié)果表明，F(xiàn)r.8組分可使HepG-2/IR細(xì)胞對(duì)葡萄糖的消耗量和攝取量分別增加70.39%和83.70%。

通過(guò)對(duì)胰島素抵抗相關(guān)基因轉(zhuǎn)錄及蛋白質(zhì)表達(dá)的檢測(cè)、分析，推測(cè)Fr.8組分的降糖活性與上調(diào)IR、IRS、Glut2、p-AMPKα 及 p-AKT 的表達(dá)有關(guān)。研究表明，F(xiàn)r.8組分可顯著增加IR及IRS的表達(dá)量，兩者鍵合后再與胰島素結(jié)合并固定在細(xì)胞膜上，既直接增強(qiáng)了胰島素的作用能力，提高了胰島素的敏感性，又間接維持了細(xì)胞周?chē)钠咸烟欠€(wěn)態(tài)。另外，F(xiàn)r.8組分亦可上調(diào)p-AMPKα及p-AKT蛋白質(zhì)的表達(dá)，從而促進(jìn)Glut2的轉(zhuǎn)位，起到改善2型糖尿病引起的代謝失衡作用。

因此，對(duì)蟲(chóng)草頭孢提取物Fr.8組分進(jìn)行體內(nèi)降糖活性研究及進(jìn)一步分離純化，對(duì)2型糖尿病治療藥物的篩選意義重大。