直腸上皮細(xì)胞穩(wěn)定性FH檢測(cè)對(duì)直腸癌篩查診治的臨床研究

朱智宇 許國(guó)誠(chéng) 林曄 魏良寶 雷輝 袁閣林

[摘要] 目的 探討直腸上皮細(xì)胞穩(wěn)定性FH檢測(cè)在大腸癌篩查中的應(yīng)用價(jià)值。方法 方便選取福建中醫(yī)藥大學(xué)附屬南平人醫(yī)院2017年1月—2018年12月期間接受健康體檢的患者，進(jìn)行直腸癌篩查，共10 000例。對(duì)健康體檢者進(jìn)行直腸上皮細(xì)胞穩(wěn)定性FH檢測(cè)，檢測(cè)結(jié)果陽(yáng)性者再進(jìn)行結(jié)腸鏡檢查。 結(jié)果 在10 000例受檢者中，直腸滲液直腸上皮細(xì)胞穩(wěn)定性FH檢測(cè)陽(yáng)性62例（0.62%），進(jìn)一步行結(jié)腸鏡檢查發(fā)現(xiàn)直腸癌46例（0.46%）。陽(yáng)性符合率為74.2%。 結(jié)論 直腸滲液直腸上皮細(xì)胞穩(wěn)定性FH檢測(cè)是篩查直腸癌的適宜技術(shù)，能夠提高臨床治療效果，臨床推廣應(yīng)用價(jià)值顯著。

[關(guān)鍵詞] 直腸癌；直腸上皮細(xì)胞穩(wěn)定性FH；篩查

[中圖分類號(hào)] R711 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] A [文章編號(hào)] 1674-0742（2019）02（c）-0189-03

[Abstract] Objective To investigate the application value of FH detection of rectal epithelial cells in colorectal cancer screening. Methods A total of 10 000 patients were convenient enrolled in the Nanping People's Hospital affiliated to Fujian University of Traditional Chinese Medicine from January 2017 to December 2018 for screening for rectal cancer. For the healthy subjects， the FH test of rectal epithelial cell stability was performed， and the test results were positive for colonoscopy. Results Among 10 000 subjects， 62 cases （0.62%） were positive for FH in rectal exudate rectal epithelial cells， and 46 cases （0.46%） were found by colonoscopy. The positive coincidence rate was 74.2%. Conclusion The FH detection of rectal percolation of rectal epithelial cells is a suitable technique for screening rectal cancer， which can improve the clinical therapeutic effect and has a significant clinical application value.

[Key words] Rectal cancer； Rectal epithelial cell stability FH； Screening

直腸癌是最常見的消化道癌瘤之一，其流行病學(xué)的特點(diǎn)在于明顯的地域分布、發(fā)病率和死亡率一直在飆升、女性比例增加、發(fā)病年齡趨老年化、遺傳因素和飲食因素在發(fā)病中尤為突出。近年來(lái)，筆者采用直腸滲液直腸上皮細(xì)胞穩(wěn)定性FH檢測(cè)對(duì)體檢人群進(jìn)行直腸癌癌篩查，取得較好效果，為進(jìn)一步探討直腸上皮細(xì)胞穩(wěn)定性FH檢測(cè)對(duì)直腸癌篩查診治的臨床效果，以下將福建中醫(yī)藥大學(xué)附屬南平人醫(yī)院2017年1月—2018年12月期間接受健康體檢的10 000例患者作為研究對(duì)象，展開臨床研究與分析，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

該研究的患者全部來(lái)源于方便選取福建中醫(yī)藥大學(xué)附屬南平人醫(yī)院接受健康體檢的患者進(jìn)行直腸癌篩查，共10 000例。其中，男性6 000例，女性4 000例。全部患者均接受高危因素調(diào)查，對(duì)高危人群進(jìn)行篩選，并根據(jù)高危人群的就診順序進(jìn)行編號(hào)，基于隨機(jī)數(shù)字表的方法對(duì)患者進(jìn)行分組處理，即對(duì)照組與實(shí)驗(yàn)組，每組均為5 000例，并接受相應(yīng)檢查。對(duì)照組男性3 500例，女性1 500例，最大年齡64歲，最小年齡19歲，平均年齡（38.34±3.21）歲。實(shí)驗(yàn)組男性2 500例，女性2 500例，最大年齡65歲，最小年齡18歲，平均年齡（38.22±3.25）歲。

診斷標(biāo)準(zhǔn)：以《中國(guó)結(jié)直腸腫瘤篩查、早診早治和綜合預(yù)防共識(shí)意見》為參考依據(jù)，根據(jù)其中的早期結(jié)直腸癌診斷標(biāo)準(zhǔn)要求進(jìn)行診斷。

納入依據(jù)：①年齡不低于18歲；②與高危風(fēng)險(xiǎn)人群定義吻合；③患者家屬簽署知情同意書。

排除依據(jù)：①已知結(jié)直腸癌患者；②妊娠期婦女、哺乳期婦女、月經(jīng)期婦女；③全身合并癥患者；④病情嚴(yán)重且難以接受檢查。

1.2 方法

取受檢者的直腸滲液進(jìn)行直腸上皮細(xì)胞穩(wěn)定性FH檢測(cè)，對(duì)檢測(cè)結(jié)果陽(yáng)性者再進(jìn)行結(jié)腸鏡檢查。

1.2.1 臨床觀察表設(shè)計(jì) 在設(shè)計(jì)臨床觀察表的過(guò)程中，內(nèi)容應(yīng)包括一般情況、家族史與疾病史。其中，一般情況主要包括姓名、年齡、性別與電話號(hào)碼。家族史內(nèi)容包括是否有結(jié)直腸癌患者與結(jié)直腸息肉病史患者，如果有應(yīng)當(dāng)進(jìn)行詳細(xì)地說(shuō)明。在疾病史中，應(yīng)設(shè)置慢性闌尾炎、慢性腹瀉史、黏液膿血便史、不良生活事件、慢性便秘史或者是其他。是否有盆腔放療史、結(jié)直腸癌前病變疾病。

1.2.2 直腸上皮細(xì)胞穩(wěn)定性FH檢測(cè) （1）檢測(cè)試劑

直腸上皮細(xì)胞穩(wěn)定性FH檢測(cè)采用“上皮細(xì)胞FH染色試劑（直腸粘膜細(xì)胞型）”（東孚美倫生物科技有限公司，青島），單人份。

（2）檢測(cè)方法

①在采樣部位沒(méi)有進(jìn)行清洗、上藥、搔刮或活檢的前提下。戴好無(wú)菌乳膠手套，按常規(guī)對(duì)受檢者進(jìn)行肛門鏡檢查，通過(guò)肛門鏡蘸取直腸滲液。②取得直腸滲液后，打開樣本管，以手套食指指腹按在管口處顛倒樣本管2～3次，使蘸在手套食指頂部的直腸滲液與樣本保存液混勻，制得樣本液。③將待檢測(cè)樣本放入樣本瓶（C試劑）充分?jǐn)嚢栊纬蓸颖疽?，將A試劑加入測(cè)試池內(nèi)，添加樣本液，再加入B試劑，在120秒內(nèi)觀察顏色變化，與產(chǎn)品附帶的比色卡進(jìn)行比較。

（3）判定標(biāo)準(zhǔn)

測(cè)試池內(nèi)液體未顯色時(shí)為陰性（-）；如顯示淺藍(lán)綠色時(shí)為可疑陽(yáng)性（±），顯色為淺藍(lán)色時(shí)為弱陽(yáng)性（+）；顯色為藍(lán)色時(shí)為陽(yáng)性（++）；顯色為深藍(lán)色時(shí)為強(qiáng)陽(yáng)性（+++）；如測(cè)試池內(nèi)液體顯示為深藍(lán)色后即刻轉(zhuǎn)變?yōu)樽丶t色或深黃色，表示標(biāo)本液內(nèi)混有血液，應(yīng)視為強(qiáng)陽(yáng)性。

1.2.3 結(jié)腸鏡檢查 ①設(shè)備

電子結(jié)腸鏡（富士能3500高清系統(tǒng)）。

②操作方法

對(duì)陽(yáng)性患者進(jìn)行充分腸道準(zhǔn)備后，按常規(guī)行電子結(jié)腸鏡檢查，依次觀察肛管、直腸、乙狀結(jié)腸、結(jié)腸、回盲部黏膜狀態(tài)，必要時(shí)進(jìn)行活體的病理學(xué)或細(xì)胞學(xué)檢查。

患者需在接受檢查之前根據(jù)醫(yī)務(wù)工作人員的指導(dǎo)，積極開展腸道準(zhǔn)備工作，并在檢查之前1 d攝入容易消化的食物。在檢查當(dāng)天上午8∶00，在2 000 mL的水中加入聚乙二醇電解質(zhì)散，劑量控制在137.15 g，均勻攪拌以后，患者需在2 h之內(nèi)飲完。只有患者的排便為清水樣，才能夠接受腸鏡檢查。接受檢查的患者應(yīng)選擇左側(cè)臥體位，且雙膝屈曲，在檢查過(guò)程中，要緩慢進(jìn)行深呼吸，確保其腹部放松。腸鏡醫(yī)生將潤(rùn)滑劑涂抹在患者肛門位置，并進(jìn)行肛門指檢，對(duì)患者肛門與直腸末段的狀況形成相應(yīng)的了解。隨后，可以由肛門插入電子腸鏡。醫(yī)生需要對(duì)內(nèi)鏡進(jìn)行反復(fù)旋轉(zhuǎn)、短縮、吸氣、充氣和取直操作，逐漸向盲腸送達(dá)電子腸鏡，盡量進(jìn)入到小腸末段。隨后，即可緩慢退鏡，在此過(guò)程中需詳細(xì)觀察各個(gè)腸段?；颊呓邮芙Y(jié)腸鏡檢查的時(shí)候，腸鏡醫(yī)生需要開展腸鏡檢查，對(duì)病變活組織進(jìn)行確定并取出，進(jìn)行病理檢查。病變組織根據(jù)組織病理學(xué)檢查并確診成息肉或者是癌，則可以將其判定成陽(yáng)性。如果確診結(jié)果是炎性病變或者是腸鏡檢查不存在問(wèn)題，則可以將其判定成陰性。

1.3 評(píng)價(jià)指標(biāo)

①上皮細(xì)胞FH物質(zhì)檢測(cè)結(jié)果判定。標(biāo)本先為深藍(lán)色亦或是深藍(lán)色，隨后轉(zhuǎn)變成深黃色或者是棕紅色，判定為強(qiáng)陽(yáng)性；標(biāo)本呈現(xiàn)藍(lán)綠色亦或是藍(lán)色，判定為陽(yáng)性；標(biāo)本不著色，判定為陰性。強(qiáng)陽(yáng)性與陽(yáng)性統(tǒng)一歸納成陽(yáng)性結(jié)果。

②電子結(jié)腸鏡檢查。如果病變組織根據(jù)組織病理學(xué)檢查并確診成息肉亦或是癌，可以判斷成陽(yáng)性。如果被確診成炎性病變與腸鏡檢查沒(méi)有問(wèn)題，則判斷成陰性。

1.4 統(tǒng)計(jì)方法

該文研究的健康體檢患者所有數(shù)據(jù)均行SPSS 17.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件處理，兩組患者組間率用[n（%）]的形式表示，行χ2檢驗(yàn)，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

在10 000例受檢者中，直腸滲液直腸上皮細(xì)胞穩(wěn)定性FH檢測(cè)陽(yáng)性62例（0.62%）。進(jìn)一步行結(jié)腸鏡檢查發(fā)現(xiàn)直腸癌46例（0.46%），均經(jīng)活組織檢查證實(shí)，陽(yáng)性符合率為74.2%。

3 討論

近年來(lái)，結(jié)腸鏡、直腸腔內(nèi)超聲、CT、MRI、PET-CT等影像學(xué)診斷方法在臨床上得到廣泛的應(yīng)用，使得直腸癌術(shù)前不僅在病理診斷上更加明確、更加容易，而且在腫瘤浸潤(rùn)的深度、區(qū)域淋巴結(jié)以及全身其他部位的轉(zhuǎn)移情況也可以得到比較準(zhǔn)確的判斷，從而產(chǎn)生以各種診斷手段為依據(jù)的臨床術(shù)前分期，并對(duì)治療方案的制定和選擇產(chǎn)生重要的影響。但是由于各種診斷方法本身的的局限性，依據(jù)不同影像學(xué)診斷方法得出的術(shù)前臨床分期在敏感性和特異性方面各有一定的差異。而CT、MRI、PET-CT由于費(fèi)用等問(wèn)題，在我國(guó)推廣還有相當(dāng)難度。

FH是含亞鐵原卟啉蛋白的分解產(chǎn)物，具有強(qiáng)氧化作用，導(dǎo)致細(xì)胞自穩(wěn)調(diào)節(jié)功能紊亂。FH含量具有連續(xù)可測(cè)性，且與細(xì)胞癌變程度呈密切正相關(guān)。采用生物學(xué)介質(zhì)（組織滲液）進(jìn)行靶向定位檢測(cè)，即可顯示細(xì)胞惡變過(guò)程。

細(xì)胞游離亞鐵原卟啉檢測(cè)（FH 檢測(cè)）的適宜領(lǐng)域?yàn)槿后w性篩檢，可以是癌前期（可預(yù)防）、無(wú)癥狀早期癌（可長(zhǎng)期存活）、中晚期癌（不改變預(yù)后）。FH檢測(cè)采用一種脂溶性較強(qiáng)的物質(zhì)，使之很容易進(jìn)入細(xì)胞與細(xì)胞器中，其與FH物質(zhì)的氧化—還原產(chǎn)物是上皮細(xì)胞內(nèi)含有的內(nèi)源性過(guò)氧化物酶等染色。做為篩查手段，觀察組織滲液上皮細(xì)胞中FH物質(zhì)對(duì)細(xì)胞內(nèi)酶的染色情況，即可顯示上皮細(xì)胞是否存在惡變及其程度，故直腸上皮細(xì)胞穩(wěn)定性FH檢測(cè)具有連續(xù)可測(cè)性直腸上皮細(xì)胞穩(wěn)定性FH檢測(cè)屬于無(wú)創(chuàng)采樣、費(fèi)用低，操作簡(jiǎn)便及適用人群廣泛的優(yōu)點(diǎn)，以期通過(guò)FH檢測(cè)，單獨(dú)或聯(lián)合其他直腸癌篩查手段進(jìn)行檢查，對(duì)檢測(cè)陽(yáng)性結(jié)果進(jìn)行進(jìn)一步檢查診斷，評(píng)估FH檢測(cè)的靈敏性和特異性。（技術(shù)路線見圖1）

該項(xiàng)研究立足該院10 000例受檢者行直腸粘膜細(xì)胞滲液FH檢測(cè)，進(jìn)行直腸癌篩查，從而篩查出高危人群；將這部分高危患者和病房收治的相關(guān)病人在治療前進(jìn)行結(jié)腸鏡檢查檢測(cè)，以結(jié)腸鏡直視下活檢組織的病理診斷結(jié)果為金標(biāo)準(zhǔn)，評(píng)價(jià)直腸粘膜細(xì)胞滲液FH檢測(cè)在直腸惡性腫瘤診斷中的應(yīng)用價(jià)值。

游離亞鐵原卟啉會(huì)在發(fā)展的過(guò)程中析出亞鐵血紅素，并且參與到合成血紅蛋白的過(guò)程中，同樣在個(gè)細(xì)胞內(nèi)部也會(huì)參與多種酶的形成，調(diào)節(jié)功能十分多樣。在處于生態(tài)狀態(tài)之下，細(xì)胞內(nèi)所含的亞鐵血紅素會(huì)與蛋白結(jié)合并存在，而游離血紅素的濃度則始終能夠保證功能的有效發(fā)揮。通過(guò)對(duì)脫落腸道上皮細(xì)胞的FH檢測(cè)，以腫瘤發(fā)生學(xué)出發(fā)，結(jié)合細(xì)胞代謝學(xué)的基本原理，早期篩查結(jié)直腸癌，可行性十分明顯。根據(jù)相關(guān)學(xué)者在《直腸上皮細(xì)胞FH物質(zhì)檢測(cè)對(duì)結(jié)直腸癌早期篩查的臨床研究》的探究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，選取108例結(jié)直腸癌高危人群進(jìn)行直腸上皮細(xì)胞FH物質(zhì)檢測(cè)，檢測(cè)結(jié)果陽(yáng)性者再進(jìn)行結(jié)腸鏡檢查，陽(yáng)性符合率是33.3%，與該文研究結(jié)果一致，說(shuō)明直腸上皮細(xì)胞FH檢測(cè)在診治直腸癌方面具有可行性。

直腸上皮細(xì)胞穩(wěn)定性FH檢測(cè)直腸疾病臨床篩查無(wú)采樣創(chuàng)傷、無(wú)采樣漏診、無(wú)醫(yī)源性感染或檢測(cè)交叉污染的風(fēng)險(xiǎn)、無(wú)需儀器設(shè)備和專業(yè)實(shí)驗(yàn)室，可用于直腸癌及癌前病變患者隨訪復(fù)查。該法操作簡(jiǎn)單，花費(fèi)低，適合于大樣本篩查。有利于直腸疾病早發(fā)現(xiàn)、早診斷、早治療、早預(yù)防，有效地提高直腸疾病的治愈率、降低直腸癌的發(fā)病率、能夠改善直腸癌病人的生活質(zhì)量，進(jìn)一步優(yōu)化直腸癌病人的生存質(zhì)量與治療依從性，具有較高的臨床推廣與應(yīng)用價(jià)值。

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（收稿日期：2019-01-13）