寧春4號(hào)與河?xùn)|烏麥雜交F2代抗病性及分子標(biāo)記鑒定

王掌軍，劉 妍，張雙喜，劉鳳樓，李清峰，張曉崗，劉生祥，賈 彪，*

(1.寧夏大學(xué) 農(nóng)學(xué)院， 寧夏 銀川 750021； 2.寧夏優(yōu)勢(shì)特色作物現(xiàn)代分子育種重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室， 寧夏 銀川 750021； 3.黑龍江禾田豐澤興農(nóng)科技開發(fā)有限公司，黑龍江 哈爾濱 150028； 4.寧夏農(nóng)林科學(xué)院 農(nóng)作物研究所，寧夏 銀川 750001)

小麥(TriticumaestivumL.)是世界上最重要的糧食作物之一，其面積和產(chǎn)量均居谷類作物之首。由于長(zhǎng)期的人工選擇和栽培，導(dǎo)致大量小麥優(yōu)異基因丟失。同時(shí)，由于育種家一貫追求矮稈、高產(chǎn)的育種目標(biāo)，加之近年來水肥條件和群體密度提高且品種單一化種植，當(dāng)今栽培小麥遺傳基礎(chǔ)日趨狹窄、脆弱，使得小麥極易受到全球氣候變化和病蟲害的侵染，不能適應(yīng)高產(chǎn)、穩(wěn)產(chǎn)和可持續(xù)發(fā)展的需要[1-2]。我國(guó)小麥主要病害有銹病、白粉病、赤霉病、黑穗病、根腐病、黃矮病、紋枯病等。小麥病害是小麥生產(chǎn)中重要的制約因素之一[3]。寧夏屬于小麥條銹病流行區(qū)域，葉銹病也有加大的趨勢(shì)，連續(xù)4 a白粉病成為寧夏小麥生產(chǎn)上的第一大病害[4-5]。小麥白粉病是由小麥禾布氏白粉菌(Blumeriagraminisf. sp.tritici)引起的真菌性病害，在病害發(fā)生一般年份可使小麥減產(chǎn)5%～34%[6]。自Waterhouse首次報(bào)道了小麥Thew中的一對(duì)顯性抗白粉病基因以來，科學(xué)家們?cè)谄胀ㄐ←溂捌浣壏N屬中先后發(fā)現(xiàn)了多個(gè)抗性基因，國(guó)際上已正式命名了分布在60個(gè)位點(diǎn)的84個(gè)抗白粉病基因[7-15]。這些抗性基因在不同時(shí)期不同程度地提高了小麥抗白粉病的能力，尤其攜帶Pm8、Pm17、Pm20等抗白粉病基因的小麥-黑麥1RS/1BL易位系和攜帶Pm21基因的小麥-簇毛麥6VS/6BL易位系在世界小麥育種中應(yīng)用最為廣泛[16-19]。小麥銹病分條銹病、稈銹病、葉銹病3種，危害部位以葉片為主，葉鞘、莖稈和穗部也可受害。流行年份受害小麥可減產(chǎn)30%以上，甚至絕收[20-21]。條銹病是由專性寄生條形柄銹菌(Pucciniastriiformisf. sp.tritici)引起的真菌性病害，我國(guó)曾發(fā)生4次全國(guó)性條銹病大流行，1905年條銹病造成的損失最嚴(yán)重，使小麥減產(chǎn)60億kg[22]。目前，國(guó)際上正式命名的小麥條銹病抗性基因有80個(gè)[23-24]。由葉銹菌(Pucciniareconditaf. sp.tritici)引起的小麥葉銹病也是小麥的主要病害之一，已經(jīng)發(fā)現(xiàn)的小麥抗葉銹病基因有100多個(gè)，正式命名的有68個(gè)[25-26]。

由于小麥白粉病菌、銹病菌具有群體大、適應(yīng)范圍廣、生理小種變異快等特點(diǎn)，品種抗病性喪失問題嚴(yán)重[27-28]。在常規(guī)抗病育種的同時(shí)，利用分子標(biāo)記輔助選擇技術(shù)，實(shí)現(xiàn)了品種間優(yōu)異基因高效篩選[29-30]、基因聚合[31-33]，為抗病育種提供了可供利用的中間材料。寧夏主栽小麥品種寧春4號(hào)綜合農(nóng)藝性狀和產(chǎn)量表現(xiàn)好，但感白粉病、葉銹病和條銹??；育成于山西運(yùn)城的河?xùn)|烏麥高抗白粉病、中抗條銹病和葉銹病。在前期對(duì)這2個(gè)小麥品種遺傳性狀與分子標(biāo)記分析的基礎(chǔ)上[34-35]，構(gòu)建了雜交組合群體，對(duì)其F2代進(jìn)行抗病性和分子標(biāo)記鑒定，以期從后代中發(fā)掘?qū)幭男←溈共⌒愿牧嫉挠N中間材料和分子標(biāo)記。

1 材料與方法

1.1 材料

寧春4號(hào)為寧夏主栽小麥品種，河?xùn)|烏麥引自山西省運(yùn)城學(xué)院杜磊博士。2016年在寧夏大學(xué)教學(xué)實(shí)驗(yàn)農(nóng)場(chǎng)組配寧春4號(hào)與河?xùn)|烏麥正反交組合，同年將收獲的雜交種子在云南南繁加代，2017年將收獲的種子種植于寧夏大學(xué)實(shí)驗(yàn)農(nóng)場(chǎng)，單粒點(diǎn)播，每行10粒，行長(zhǎng)1.1 m，行寬0.2 m，獲得331個(gè)單株的F2后代群體，其中正交后代201株(編號(hào)001—007、013—206)，反交后代130株(編號(hào)008—012、207—331)。

1.2 小麥抗病性鑒定

種植寧夏古老地方品種紅禿子作為感白粉病、感銹病誘發(fā)圃，采用白粉菌混合小種(收集于寧夏當(dāng)?shù)?、條銹菌和葉銹菌的混合小種(來自西北農(nóng)林科技大學(xué)植物病理研究所)與馬鈴薯粉混合。在5月初，17:00左右接種于分蘗期小麥，之后覆膜并灌水，第2天早上揭膜。在小麥成株期調(diào)查田間白粉病、條銹病和葉銹病抗性。

成株期白粉病田間鑒定參照0～9級(jí)標(biāo)準(zhǔn)：0級(jí)為免疫(immune，I)，0i級(jí)為近免疫(nearly immune， NI)，1、2級(jí)為高抗(highly resistant，HR)，3、4級(jí)為中抗(moderate resistant，MR)，5、6級(jí)為中感(moderate susceptible，MS)，7、8級(jí)為高感(highly susceptible，HS)，9級(jí)為極感(extremely susceptible， ES)[36]。

銹病抗性鑒定采用0～5級(jí)標(biāo)準(zhǔn)：0、1、2、3、4、5級(jí)的抗病性和病情指數(shù)分別為免疫(I)、0，高抗(HR)、0～20，中抗(MR)、20～40，中感(MS)、40～60，高感(HS)、60～80，極感(ES)、80～100[37]。病情指數(shù)(DI)=x1a1+x2a2+……+xnan/nT×100。式中，x為普遍率，a為嚴(yán)重度，n為最大嚴(yán)重度，T為調(diào)查樣品數(shù)。

1.3 小麥抗病性分子標(biāo)記分析

根據(jù)小麥7個(gè)部分同源群小衛(wèi)星區(qū)設(shè)計(jì)SSR標(biāo)記，利用能夠在寧春4號(hào)與河?xùn)|烏麥間穩(wěn)定擴(kuò)增的49個(gè)SSR標(biāo)記[35]進(jìn)行QTL分析，其中對(duì)本研究材料抗病性有明確QTL定位結(jié)果的6個(gè)標(biāo)記名稱和序列見表1。3個(gè)分別與白粉病、條銹病和葉銹病相關(guān)的標(biāo)記Xgwm159-5B、WMC364和STS24-16參照文獻(xiàn)[38-40]，具體信息見表1。所有標(biāo)記均由生工生物工程(上海)股份有限公司合成。

基因組DNA的提取采用SDS法[41]。PCR反應(yīng)體系(10 μL)：10× reaction buffer 2 μL，MgCl2(25 mmol·L-1)0.8 μL，dNTPs(2.5 mmol·L-1)0.8 μL，上、下游引物(10 μmol·L-1)各0.2 μL，模板DNA 100 ng，TaqDNA聚合酶(5 U·μL-1)0.05 μL，加ddH2O至總體積10 μL。PCR擴(kuò)增程序：94 ℃ 3 min；94 ℃ 30 s，55～60 ℃ 45 s，72 ℃ 1 min，34個(gè)循環(huán)；72 ℃ 10 min，4 ℃保存。擴(kuò)增產(chǎn)物檢測(cè)：采用8%聚丙烯酰胺凝膠電泳檢測(cè)，電泳時(shí)總電壓為180 V，電泳1.5 h左右，經(jīng)銀染后觀察并照相，統(tǒng)計(jì)擴(kuò)增條帶。

表1 分子標(biāo)記序列信息

1.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)

采用Excel 2013對(duì)抗病性和分子標(biāo)記結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)。用MapManager QTXb 20進(jìn)行QTL定位，取概率值P<0.05的連鎖系數(shù)(logarithm of odds score， LOD值)作為判斷QTL存在的閾值；利用Kosambi函數(shù)中單標(biāo)記回歸分析的方法進(jìn)行QTL分析，檢測(cè)親本間有多態(tài)性的引物在F2群體中的分布，根據(jù)電泳譜帶結(jié)果，建立SSR標(biāo)記數(shù)據(jù)庫(kù)：與母本相同的帶型記為“B”，與父本相同的帶型記為“A”，雜合帶記為“H”，缺失記為“-”。將331個(gè)F2單株的分子標(biāo)記結(jié)果與抗病性數(shù)據(jù)相結(jié)合，運(yùn)用MapManager QTXb 20軟件檢測(cè)相關(guān)QTL位點(diǎn)，QTL命名公式為：小寫字母q+大寫英文字母目標(biāo)性狀的代稱+所在染色體號(hào)數(shù)。QTL全稱通常用斜體表示，如在2A染色體上，與穗長(zhǎng)相關(guān)的QTL位點(diǎn)命名為“qSL2A”。

2 結(jié)果與分析

2.1 寧春4號(hào)與河?xùn)|烏麥抗病性鑒定

對(duì)2個(gè)親本進(jìn)行了苗期白粉病和成株期白粉病、條銹病、葉銹病抗性鑒定，結(jié)果見圖1：寧春4號(hào)苗期感白粉病，成株期感白粉病、條銹病和葉銹??；河?xùn)|烏麥苗期和成株期均表現(xiàn)抗病。2016年、2017年2個(gè)親本成株期的田間抗病性見表2。河?xùn)|烏麥的田間白粉病抗性較寧春4號(hào)強(qiáng)，寧春4號(hào)的2年病級(jí)均為5～6級(jí)，屬于中感；河?xùn)|烏麥的2年病級(jí)分別為1～2、2～3級(jí)，分別為高抗、中抗至高抗類型。河?xùn)|烏麥表現(xiàn)出較強(qiáng)的抗條銹病，寧春4號(hào)2年的病級(jí)、抗病性均分別為3級(jí)、中感，病情指數(shù)分別為46.67、43.88；河?xùn)|烏麥2年病級(jí)、抗病性均分別為2級(jí)、中抗，病情指數(shù)分別為30.00～33.33、21.66～28.33。此外，田間葉銹病抗性表明，寧春4號(hào)為3級(jí)、中感，病情指數(shù)分別為41.48、49.33；河?xùn)|烏麥為2級(jí)、中抗，病情指數(shù)分別為23.33～26.66、30.00～35.00。

苗期1～3為寧春4號(hào)上白粉病， 4～6為河?xùn)|烏麥上白粉病。成株期1～3依次為寧春4號(hào)上白粉病、條銹病、葉銹病；4～6依次為河?xùn)|烏麥上白粉病、條銹病、葉銹病。Seedling stage， 1-3 were powdery mildew on Ningchun No.4， 4-6 were powdery mildew on Hedong black wheat. Adult stage， 1-3 were powdery mildew， stripe rust， leaf rust on Ningchun No.4， respectively， 4-6 were powdery mildew， stripe rust， leaf rust on Hedong black wheat.圖1 寧春4號(hào)與河?xùn)|烏麥成株期旗葉上的病情Fig.1 Disease on flag leaves of Ningchun No.4 and Hedong black wheat

2.2 寧春4號(hào)與河?xùn)|烏麥雜交F2代抗病性鑒定

對(duì)寧春4號(hào)與河?xùn)|烏麥雜交F2代群體331個(gè)單株進(jìn)行成株期白粉病、條銹病和葉銹病抗性鑒定，結(jié)果見表3。在F2代群體中分別有33(占9.97%)、3(0.91%)、2(0.60%)個(gè)單株表現(xiàn)為高抗白粉病(病級(jí)1～2級(jí))、條銹病和葉銹病(1級(jí))；分別有35(占10.57%)、51(15.41%)、50(15.11%)個(gè)單株表現(xiàn)為中抗白粉病(3～4級(jí))、條銹病和葉銹病(2級(jí))。50個(gè)(占15.11%)同時(shí)抗白粉病和條銹病，44個(gè)(13.29%)同時(shí)抗白粉病和葉銹病，32個(gè)(9.67%)同時(shí)抗條銹病和葉銹病，29個(gè)(8.76%)同時(shí)抗白粉病、條銹病和葉銹病。

表2 寧春4號(hào)與河?xùn)|烏麥田間抗病性統(tǒng)計(jì)結(jié)果

2.3 寧春4號(hào)與河?xùn)|烏麥雜交F2代分子標(biāo)記

2.3.1 抗病性相關(guān)分子標(biāo)記輔助選擇

利用白粉病基因Pm16等位基因標(biāo)記Xgwm159-5B(目標(biāo)片段197 bp)、條銹病基因Yr2標(biāo)記WMC364(201～207 bp)和葉銹病基因Yr2標(biāo)記STS24-16(180～190 bp)，檢測(cè)Pm16、Yr2和Yr2在F2代中的分布。表4表明，有239個(gè)單株(占總單株數(shù)72.21%)攜帶基因Pm16，其中有54個(gè)單株(占攜帶該基因單株數(shù)的22.59%)表現(xiàn)為中抗至高抗白粉病；202個(gè)單株(占總單株數(shù)61.03%)攜帶基因Yr2，有34個(gè)單株(占攜帶該基因單株數(shù)的16.83%)表現(xiàn)為中抗至高抗條銹病；246個(gè)單株(占總單株數(shù)74.32%)攜帶基因Lr24，有42個(gè)單株(占攜帶該基因單株數(shù)的17.07%)表現(xiàn)為中抗至高抗葉銹病。同時(shí)，有148個(gè)單株(占總單株數(shù)44.71%)攜帶基因Pm16和Yr2，16.22%攜帶這2個(gè)基因的單株表現(xiàn)為抗白粉病和條銹??；185個(gè)單株(占總單株數(shù)55.89%)攜帶基因Pm16和Lr24，16.76%攜帶這2個(gè)基因的單株表現(xiàn)為抗白粉病和葉銹??；155個(gè)單株(占總單株數(shù)46.83%)攜帶基因Yr2和Lr24，11.61%攜帶這2個(gè)基因的單株表現(xiàn)為抗葉銹病和條銹病。另外，119個(gè)單株(占總單株數(shù)35.95%)攜帶基因Pm16、Yr2和Lr24，有13個(gè)單株(占攜帶3個(gè)基因單株數(shù)的10.92%)表現(xiàn)為抗白粉病、條銹病和葉銹病。

表3 寧春4號(hào)與河?xùn)|烏麥F2群體抗病類型和數(shù)量

表4 等位基因標(biāo)記在寧春4號(hào)與河?xùn)|烏麥雜交F2代中的分布及抗病性

2.3.2 抗病性QTL分析

利用能夠在寧春4號(hào)與河?xùn)|烏麥間穩(wěn)定擴(kuò)增的49個(gè)SSR標(biāo)記對(duì)F2群體進(jìn)行檢測(cè)，結(jié)果見圖2。其中，有6個(gè)標(biāo)記對(duì)抗病性有明確的QTL定位結(jié)果(表5)。利用這6個(gè)SSR標(biāo)記共檢測(cè)到抗白粉病、條銹病和葉銹病相關(guān)的10個(gè)QTL，涉及2A、3B、5B、5D等4條染色體，對(duì)表型貢獻(xiàn)率為2%～4%，加性效應(yīng)為-0.15～0.08，LOD值最大為10.40。其中，抗白粉病檢測(cè)到2個(gè)QTL位點(diǎn)，分布在5A、3B染色體上，對(duì)表型貢獻(xiàn)率均為2%，LOD值最大為6.70；抗條銹病檢測(cè)到5個(gè)QTL位點(diǎn)，分布在2A、5A、3B、5D染色體上，對(duì)表型貢獻(xiàn)率為2%～4%，LOD值最大為10.20；抗葉銹病檢測(cè)到3個(gè)QTL位點(diǎn)，分布在5A、3B、5D染色體上，對(duì)表型貢獻(xiàn)率為2%～4%，LOD值最大為10.40。同時(shí)，5A、3B染色體上均檢測(cè)到抗白粉病、條銹病和葉銹病QTL，5D染色體上檢測(cè)到抗條銹病、葉銹病QTL，這3條染色體存在抗病的QTL富集區(qū)。

M， DL 2 000；P1，寧春4號(hào)；P2，河?xùn)|烏麥；1～20，F(xiàn)2單株，其中，1～7、13～20為正交，8～12為反交。M， DL 2 000; P1， Ningchun No.4; P2， Hedong black wheat; 1-20， F2 individual plants， 1-7 and 13-20 were orthogonal cross， 8-12 were inverse cross.圖2 三個(gè)分子標(biāo)記在寧春4號(hào)與河?xùn)|烏麥F2代部分單株中的擴(kuò)增結(jié)果Fig.2 Amplification of 3 molecular markers on partial individual plants in F2 hybrids of Ningchun No.4 × Hedong black wheat

表5 寧春4號(hào)與河?xùn)|烏麥雜交F2代抗病性QTL定位結(jié)果

3 結(jié)論與討論

世界小麥主產(chǎn)區(qū)長(zhǎng)期受到各種病害的威脅，雖然化學(xué)防治對(duì)小麥病害已取得一定的成效，但不僅浪費(fèi)人力、物力和財(cái)力，而且會(huì)造成環(huán)境污染。因此，培育和推廣抗病品種被公認(rèn)為是安全、經(jīng)濟(jì)、有效的防治方法[42]?？共』虼蟛糠衷从谄胀ㄐ←湥俨糠衷从诮壏N、屬。如抗白粉病基因Pm1(a-d)、Pm4(d-j)、Pm9、Pm10、Pm11、Pm14、Pm15、Pm18、Pm22、Pm23、Pm24、Pm28和Pm29等來源于普通小麥，Pm20來源于栽培黑麥[43]，Pm12來源于擬斯卑爾脫山羊草[44]，Pm21來源于簇毛麥[45-47]等。另外，已明確定位較多地抗小麥銹病基因，如Sr2、Lr27在3BS上[48]，Lr37在7DS上[49]，Lr20、Sr15、Sr22在7AL上[50]。抗病基因在不同時(shí)期不同程度地提高了小麥的抗病能力，所以，抗病品種的培育離不開抗性基因的挖掘[51]。同時(shí)，分子標(biāo)記作為一種小麥抗病基因檢測(cè)、發(fā)掘、聚合的有效技術(shù)被廣泛應(yīng)用，如：獲得含有Lr10+Lr34、Lr24+Lr37+Lr38或Lr24+Lr38基因聚合的中間材料[32]、Pm21和Pm13聚合的材料[33]，獲得含有Pm8+Pm21、Pm2+Pm4b、Pm4a+Pm21的抗病材料[44]，將YrSM139-1B和YrSM139-2D聚合到普通小麥品種陜麥139中[48]。本研究對(duì)寧春4號(hào)和河?xùn)|烏麥進(jìn)行連續(xù)2年成株期田間抗病性鑒定，寧春4號(hào)中感白粉病、中感條銹病和葉銹病，河?xùn)|烏麥中抗至高抗白粉病、中抗條銹病和葉銹病，與前期研究結(jié)果一致[34-35]。對(duì)F2代331個(gè)單株進(jìn)行抗病性鑒定，有68個(gè)單株抗白粉病、54個(gè)抗條銹病、52個(gè)抗葉銹病，其中，50個(gè)表現(xiàn)出同時(shí)抗白粉病和條銹病，44個(gè)抗白粉病和葉銹病，32個(gè)抗條銹病和葉銹病，29個(gè)表現(xiàn)出同時(shí)抗白粉病、條銹病和葉銹病?？共⌒孕枰诎l(fā)病充分的條件下，利用大群體進(jìn)行多年多點(diǎn)鑒定，同時(shí)要進(jìn)行單個(gè)生理小種鑒定，才能對(duì)資源的抗性和所用生理小種的毒性做出科學(xué)、可靠的評(píng)價(jià)。本研究在相同發(fā)病條件下，利用混合小種對(duì)F2群體進(jìn)行單株鑒定，能夠評(píng)價(jià)不同單株的抗病性，該結(jié)果具有一定參考依據(jù)，抗病單株也具有一定利用價(jià)值。

分別利用基因Pm16、Yr2和Lr24的等位基因標(biāo)記Xgwm159-5B、WMC364和STS24-16，在F2代中檢測(cè)到239個(gè)單株攜帶基因Pm16，202個(gè)單株攜帶基因Yr2，246個(gè)單株攜帶基因Lr24，148個(gè)單株攜帶基因Pm16和Yr2，185個(gè)單株攜帶基因Pm16和Lr24，155個(gè)單株攜帶基因Yr2和Lr24，119個(gè)單株攜帶上述3個(gè)基因，這一結(jié)果可為明確不同等位基因在群體中的分布提供理論依據(jù)。田間抗病分析發(fā)現(xiàn)，有22.59%攜帶基因Pm16的單株田間表現(xiàn)中抗至高抗白粉病，16.83%攜帶基因Yr2的單株表現(xiàn)中抗至高抗條銹病，17.07%攜帶基因Lr24的單株表現(xiàn)為中抗至高抗葉銹病，16.22%攜帶基因Pm16和Yr2的單株表現(xiàn)為抗白粉病和條銹病，16.76%攜帶基因Pm16和Lr24的單株表現(xiàn)為抗白粉病和葉銹病，11.61%攜帶基因Yr2和Lr24的單株表現(xiàn)為抗葉銹病和條銹病，10.92%攜帶這3個(gè)基因的單株同時(shí)表現(xiàn)為抗白粉病、條銹病和葉銹病。利用標(biāo)記鑒定出攜帶不同抗性基因的單株中高達(dá)77.41%～89.08%表現(xiàn)為感病，這可能是由于這些基因的抗性降低或喪失，真正發(fā)揮抗病的是其他抗性基因。就這一問題作如下解釋：(1)編號(hào)為010、065、093、150、152、218、237、240、242、268、275、279、292、311的14份材料表現(xiàn)為抗白粉病，而標(biāo)記Xgwm159-5B無擴(kuò)增結(jié)果；(2)編號(hào)為010、033、038、150、151、164、196、218、237、241、270、274、276、278、279、290、295、319、322、325的20份材料表現(xiàn)為抗條銹病，而標(biāo)記WMC364無擴(kuò)增結(jié)果；(3)編號(hào)為020、022、071、088、240、268、270、275、279、299的10份材料表現(xiàn)為抗葉銹病，而標(biāo)記STS24-16無擴(kuò)增結(jié)果；(4)編號(hào)為010、023、065、150、151、152、164、196、218、237、240、241、242、268、270、274、275、276、278、279、290、292、295、311、319、322、325的27份材料表現(xiàn)為抗白粉病和條銹病，而標(biāo)記Xgwm159-5B和WMC364無擴(kuò)增結(jié)果；(5)編號(hào)為020、065、071、093、218、240、242、268、270、275、279、292、311的13份材料表現(xiàn)為抗白粉病和葉銹病，而標(biāo)記Xgwm159-5B和STS24-16無擴(kuò)增結(jié)果；(6)編號(hào)為022、038、071、164、218、240、268、270、275、276、278、279、322、325的14份材料表現(xiàn)為抗條銹病和葉銹病，而標(biāo)記WMC364和STS24-16無擴(kuò)增結(jié)果；(7)編號(hào)為065、071、164、218、240、242、268、270、275、276、278、279、292、311、322、325的16份材料表現(xiàn)為抗白粉病、條銹病和葉銹病，而標(biāo)記Xgwm159-5B、WMC364和STS24-16無擴(kuò)增結(jié)果。

以上結(jié)果為進(jìn)一步利用其他抗病基因標(biāo)記和找新途徑發(fā)掘抗病基因提供了啟示。同時(shí)，需要選用能在育種上使用的標(biāo)記作為分子標(biāo)記輔助選擇的功能型標(biāo)記。隨著分子標(biāo)記研究工作不斷深入，育種家可以利用分子標(biāo)記發(fā)掘抗病QTL，以培育抗性品種，雖然小麥抗病性QTL定位研究很多，但是不同遺傳背景下的QTL聚合到同一遺傳背景存在諸多困難[52-55]。本研究利用新開發(fā)的6個(gè)SSR標(biāo)記檢測(cè)到10個(gè)QTL位點(diǎn)，LOD值最大為10.40，涉及2A、3B、5B、5D等4條染色體，加性效應(yīng)為-0.15～0.08，對(duì)表型貢獻(xiàn)率為2%～4%。5A、3B染色體上均檢測(cè)到抗白粉病、條銹病和葉銹病QTL，5D染色體上檢測(cè)到抗條銹病和葉銹病QTL，這3條染色體存在QTL富集區(qū)，可作為進(jìn)一步研究的重點(diǎn)。因所用標(biāo)記數(shù)目有限，抗白粉病僅檢測(cè)到2個(gè)QTL位點(diǎn)，抗銹病共檢測(cè)到8個(gè)QTL位點(diǎn)。今后，需開發(fā)高效的分子標(biāo)記，通過構(gòu)建密度較飽和的物理圖譜，使得與抗病性相關(guān)的QTL(尤其是主效QTL)得以精細(xì)定位，為小麥抗病性QTL發(fā)掘、研究、利用奠定基礎(chǔ)。