生物學(xué)標(biāo)志物聯(lián)合檢測在前列腺癌診斷及鑒別診斷中的價(jià)值研究

孫冉，李玉梅

（河南省南陽市第一人民醫(yī)院 病理科，河南 南陽 473000）

前列腺癌屬于一種好發(fā)于中老年男性的上皮性惡性腫瘤，由于該病早期缺乏典型癥狀，多數(shù)患者確診時(shí)已處于中晚期，錯(cuò)過了最佳治療時(shí)機(jī)[1]。目前生物學(xué)標(biāo)志物諸如高分子量角蛋白（34βE12）、P63、α-甲?；鵆oA消旋酶（P504S）、Ki-67等為前列腺癌診斷中常見免疫組化標(biāo)志物，但經(jīng)臨床實(shí)踐發(fā)現(xiàn)，將34βE12、P63、P504S、Ki-67單獨(dú)進(jìn)行檢測時(shí)存在與病理學(xué)診斷不符合現(xiàn)象[2]。因此有研究指出，將各生物學(xué)標(biāo)志物聯(lián)合檢測可能提升前列腺癌鑒別診斷效能[3-4]。鑒于此，本研究將進(jìn)一步分析 34βE12、P63、P504S、Ki-67聯(lián)合檢測在前列腺癌診斷及鑒別診斷中的價(jià)值，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

回顧性分析2017年10月- 2018年9月本院治療的137例前列腺疾病患者臨床資料，依據(jù)穿刺活檢檢查結(jié)果將其分為兩組，將65例前列腺癌患者臨床資料分為觀察組，72例良性前列腺疾?。郧傲邢傺?2例、前列腺增生患者30 例）患者臨床資料分為對(duì)照組。觀察組患者年齡45～86 歲，平均（62.41±3.17）歲；病程8個(gè)月～6年，平均（3.20±1.14）年。對(duì)照組患者年齡43～84歲，平均（62.34±3.15）歲；病程8個(gè)月～7年，平均（3.25±1.12）年。兩組一般資料比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P ＞0.05），具有可比性。

1.2 入選標(biāo)準(zhǔn)

1.2.1 納入標(biāo)準(zhǔn) ①入選者臨床資料、病理資料較為完整；②入組前均未接受手術(shù)、放化療等治療；③患者加入研究時(shí)知情研究內(nèi)容，并簽署知情同意書。

1.2.2 排除標(biāo)準(zhǔn) ①伴有精神疾病史，認(rèn)知、理解功能異常者；②患有其他惡性腫瘤者。

1.3 方法

采集入選者電切或穿刺活檢的前列腺標(biāo)本，通過二分步法（免疫組織化學(xué)法）測定34βE12、P63、P504S、Ki-67水平，其中石蠟標(biāo)本切片厚度4 μm，常規(guī)脫蠟，檢查各項(xiàng)操作嚴(yán)格依據(jù)抗體說明書進(jìn)行。鼠抗人多克隆抗體34βE12抗體及鼠抗人多克隆抗體P63抗體、兔抗人多克隆抗體P504S抗體、試劑兔抗人多克隆抗體Ki-67抗體分別由Abcam公司及北京中杉金橋生物技術(shù)開發(fā)有限公司提供。依據(jù)34βE12、P63、P504S、Ki-67于前列腺癌組織中的表達(dá)判定結(jié)果，其中細(xì)胞核出現(xiàn)棕黃色、棕褐色及黃色顆粒則可判定為陽性，若上述部位出現(xiàn)少部分著色或未著色則判定為陰性。

1.4 評(píng)價(jià)指標(biāo)

對(duì)比兩組34βE12、P63、P504S、Ki-67陽性率。判定標(biāo)準(zhǔn)：P63：陽性信號(hào)定位在基底細(xì)胞細(xì)胞核，呈褐色顆粒，有棕色顆粒為陽性（+），無棕色顆粒為陰性（-）；P504S：陽性信號(hào)定位在上皮細(xì)胞細(xì)胞質(zhì)中，呈棕黃色顆粒狀，著色細(xì)胞＜25%為棕色顆粒細(xì)小、稀少為灶性陽性；著色細(xì)胞≥25%，棕色顆粒粗大、密集為陽性（+），無著色細(xì)胞為陰性（-）；34βE12：陽性信號(hào)定位在基底細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞膜，基底細(xì)胞呈棕黃染色為陽性（+），無染色為陰性（-）；Ki-67：陽性信號(hào)定位在基底細(xì)胞細(xì)胞核，呈棕黃染色為陽性 （+），無染色為陰性（-）。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

應(yīng)用SPSS 22.0軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，計(jì)數(shù)資料以百分比（%）表示，比較采用χ2檢驗(yàn)；計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（）表示，比較采用t檢驗(yàn)。P ＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

與對(duì)照組比較，觀察組34βE12、P63陽性率較低，P504S、Ki-67陽性率較高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P ＜0.05）。見表 1。

表1 兩組34βE12、P63、P504S、Ki-67陽性率比較 例（%）

3 討論

前列腺癌作為男性泌尿生殖系統(tǒng)常見的惡性腫瘤，近年來由于診斷技術(shù)的提升、飲食結(jié)構(gòu)的改變及人均壽命的延長，臨床前列腺癌患病率逐年上升，而如何早期診斷、鑒別診斷前列腺癌已成為臨床關(guān)注的重點(diǎn)[5]。目前前列腺穿刺活檢為前列腺癌診斷中的金標(biāo)準(zhǔn)，但由于針吸活檢穿刺標(biāo)本直徑小，若組織標(biāo)本丟失或染色失敗，重做難度較大[6]。

目前部分良性病變與惡性病變間差異較小，兩者組織學(xué)特征相似，極易造成誤診或漏診現(xiàn)象，故為提升前列腺疾病診斷準(zhǔn)確率，結(jié)合一些免疫標(biāo)志物檢測結(jié)果作為輔助，對(duì)診斷、鑒別診斷前列腺疾病具有重要影響[7]。34βE12作為一種細(xì)胞角蛋白，其分子量較高，可穩(wěn)定于正常細(xì)胞膜上，在正常的前列腺基底細(xì)胞、腺泡上表達(dá)較高，由于多數(shù)前列腺癌患者具有基底細(xì)胞缺如現(xiàn)象，故前列腺癌患者組織中34βE12表達(dá)較少或不表達(dá)[8]。經(jīng)研究發(fā)現(xiàn)，34βE12利于辨別基底細(xì)胞（正常前列腺組織）且特異度較高，為目前基底細(xì)胞常用的標(biāo)記物，同時(shí)34βE12還可通過前列腺疾病組織基底細(xì)胞是否出現(xiàn)陽性著色或著色特點(diǎn)來判斷非癌、癌組織中是否存在基底細(xì)胞，進(jìn)而可對(duì)前列腺疾病良惡性進(jìn)行鑒別診斷[9]。P63為P53家族成員，多在前列腺組織基底細(xì)胞中表達(dá)，前列腺癌組織多以基底細(xì)胞缺如為主要表現(xiàn)，故可通過對(duì)基底細(xì)胞存在與否判定前列腺疾病良惡性[10]。經(jīng)研究證實(shí)，少數(shù)前列腺癌組織中存在P63不連續(xù)陽性表達(dá)，而這表明前列腺癌組織中存在殘留基底細(xì)胞，而慢性前列腺炎、前列腺增生組織基底細(xì)胞中P63表達(dá)可呈陰性，則反映出良性前列腺組織基底細(xì)胞伴有不連續(xù)或缺如現(xiàn)象，故P63表達(dá)陰性無法作為前列腺癌診斷指標(biāo)。P504S作為細(xì)胞質(zhì)蛋白，多存在于線粒體、過氧化物酶體內(nèi)，參與了脂肪酸β-氧化過程，P504S在前列腺癌患者中陽性表達(dá)率較高，且伴有彌漫性高表達(dá)，在前列腺癌診斷中發(fā)揮了重要作用[11]。Ki-67作為評(píng)估惡性腫瘤增殖活性抗原，其位于細(xì)胞核，Ki-67表達(dá)水平隨著細(xì)胞周期的改變而出現(xiàn)相應(yīng)變化，Ki-67于G0、G1期不表達(dá)，隨后表達(dá)水平上升，并于M期時(shí)達(dá)到頂峰，隨后于有絲分裂后期降解消失，目前Ki-67為影響前列腺癌預(yù)后的獨(dú)立因素，對(duì)評(píng)估患者生活質(zhì)量、預(yù)后具有重要影響。龔德霖等[12]研究中觀察了P504S、34βE12、CK5/6、P65聯(lián)合檢測在前列腺良惡性病變?cè)\斷中的應(yīng)用價(jià)值，結(jié)果得出，P504S、34βE12、CK5/6、P65作為前列腺良惡性疾病診斷中敏感指標(biāo)，但將P504S、34βE12、CK5/6、P65聯(lián)合檢測更有助于提升前列腺癌診斷的準(zhǔn)確性，降低漏診、誤診幾率，為前列腺良惡性病變?cè)\斷提供確切依據(jù)。本次研究結(jié)果顯示，與對(duì)照組相比，觀察組34βE12、P63陽性率較低，P504S、Ki-67陽性率較高，由此可見，34βE12、P63作為前列腺良惡性疾病診斷中的常用標(biāo)記物，P504S、Ki-67則為前列腺癌中特異度、敏感度較高的腫瘤標(biāo)記物，故將其單獨(dú)用于前列腺癌診斷、鑒別診斷中具有一定的局限性，應(yīng)將34βE12、P63、P504S、Ki-67聯(lián)合檢測以提升前列腺癌診斷效能，提高疾病檢出率，降低誤診、漏診幾率，進(jìn)而可為臨床治療方案的制定提供幫助。

綜上所述，34βE12、P63、P504S、Ki-67作為前列腺癌診斷中的重要生物學(xué)標(biāo)志物，聯(lián)合檢測利于提升前列腺癌診斷及鑒別的準(zhǔn)確性。