郜李彬 曹征宇 顧韻莉 周亞輝 (上海市浦東新區(qū)農(nóng)業(yè)技術(shù)推廣中心 201201)
東云(Echeveria agavoidesLemaire)是景天科擬石蓮花屬多肉植物,原產(chǎn)于墨西哥多州。東云具有形狀鋒利的葉片,其葉片形狀、排列方式與龍舌蘭屬植物相似,因此,成為了近年來逐漸流行的一類觀賞植物,具有極高的觀賞價值和收藏價值。目前,東云大多采用葉插繁殖和分株繁殖的兩種繁殖方式,但存在繁殖系數(shù)低、擴(kuò)繁速度慢等問題,而利用植物組織培養(yǎng)技術(shù)[1],可建立東云組織培養(yǎng)和快速擴(kuò)繁體系,對滿足其市場需求具有現(xiàn)實意義。本文擬以東云組培苗為試驗材料,通過采用不同梯度的植物生長素NAA,并設(shè)定3個不同的培養(yǎng)溫度及3個不同的光照時間,對東云組培苗進(jìn)行生根試驗及培養(yǎng)條件研究,以期明確東云的生根技術(shù),達(dá)到快速繁殖的目的。
供試材料為東云組培苗。
1.2.1 接種操作
在超凈工作臺上將增殖所得的東云組培苗進(jìn)行切割,切去種苗殘葉、老葉和基部褐化、老化組織,按照2葉1心的標(biāo)準(zhǔn)把東云組培苗切割分離成單株,接入不同生根培養(yǎng)基中(加入3%的蔗糖和0.7%的瓊脂,pH 5.6~5.8),接種深度為0.5 cm,每瓶接種1株,放入培養(yǎng)室進(jìn)行生根培養(yǎng),培養(yǎng)42 d后進(jìn)行觀察比較。
1.2.2 培養(yǎng)條件
采用3個不同梯度的培養(yǎng)溫度,分別為20、24、28 ℃;采用3個不同的光照時間,分別為6、12、18 h/d,光照強(qiáng)度均為2 000 Lux;東云生根培養(yǎng)基配方為:(1)1/2 MS 對照;(2)1/2 MS+NAA 0.1 mg/L;(3)1/2 MS+NAA 0.5 mg/L;(4)1/2 MS+NAA 1.0 mg/L。每處理重復(fù)10次。
經(jīng)過42 d的生根培養(yǎng),每處理中隨機(jī)選取3瓶進(jìn)行生根率觀察統(tǒng)計,結(jié)果見表1。
表1 東云組培苗不同因素下平均生根率比較
由表1可知,在其他試驗條件不變的情況下,培養(yǎng)基配方2(1/2 MS+NAA 0.1 mg/L)的東云組培苗平均生根率最高,達(dá)39.37%;其次為培養(yǎng)基配方3,其平均生根率為29.59%;培養(yǎng)基配方4的平均生根率為9.78%;而培養(yǎng)基配方1的東云組培苗均未長出根系。光照時間12 h/d的東云組培苗平均生根率最高,達(dá)26.75%,高于光照時間6 h/d和18 h/d處理。培養(yǎng)溫度為24 ℃的東云組培苗平均生根率最高,達(dá)32.33%,明顯高于其他兩個培養(yǎng)溫度處理。
為進(jìn)一步研究培養(yǎng)基配方、光照時間和培養(yǎng)溫度對東云組培苗平均生根率的作用,用SPSS17作出主體間效應(yīng)檢驗。由表2可知,培養(yǎng)基配方、光照時間和培養(yǎng)溫度的P值均小于5%,說明這3個因素對東云組培苗的生根都起到作用;其中光照時間的P值大于培養(yǎng)溫度和培養(yǎng)基配方的P值(F值最?。?,說明不同培養(yǎng)基配方和不同培養(yǎng)溫度對東云組培苗平均生根率的影響大于光照時間。
表2 主體間效應(yīng)檢驗
選取生根率最高的10個處理進(jìn)行顯著性分析,分別為:(1)培養(yǎng)基配方2(1/2 MS+NAA 0.1 mg/L)、光照時間6 h/d、培養(yǎng)溫度24 ℃;(2)培養(yǎng)基配方2(1/2 MS+NAA 0.1 mg/L)、光照時間12 h/d、培養(yǎng)溫度20 ℃;(3)培養(yǎng)基配方2(1/2 MS+NAA 0.1 mg/L)、光照時間12 h/d、培養(yǎng)溫度24 ℃;(4)培養(yǎng)基配方2(1/2 MS+NAA 0.1 mg/L)、光照時間12 h/d、培養(yǎng)溫度28 ℃;(5)培養(yǎng)基配方2(1/2 MS+NAA 0.1 mg/L)、光照時間18 h/d、培養(yǎng)溫度24 ℃;(6)培養(yǎng)基配方3(1/2 MS+NAA 0.5 mg/L)、光照時間6 h/d、培養(yǎng)溫度24 ℃;(7)培養(yǎng)基配方3(1/2 MS+NAA 0.5 mg/L)、光照時間6 h/d、培養(yǎng)溫度28 ℃;(8)培養(yǎng)基配方3(1/2 MS+NAA 0.5 mg/L)、光照時間12 h/d、培養(yǎng)溫度24 ℃;(9)培養(yǎng)基配方3(1/2 MS+NAA 0.5 mg/L)、光照時間18 h/d、培養(yǎng)溫度24 ℃;(10)培養(yǎng)基配方4(1/2 MS+NAA 1.0 mg/L)、光照時間12 h/d、培養(yǎng)溫度24 ℃。
由表3可知,處理(3)[即培養(yǎng)基配方2(1/2 MS+NAA 0.1 mg/L)、光照時間12 h/d、培養(yǎng)溫度24 ℃]的東云組培苗生根率最高,達(dá)100%,在5%和1%水平下均顯著高于其他處理;處理(6)的東云組培苗生根率達(dá)67.00%,生根效果較好;處理(2)、(7)、(9)的東云組培苗生根率均為55.67%;其余處理的東云組培苗生根率均小于50%,生根效果不佳。
表3 不同處理東云組培苗生根率新復(fù)極差比較
試驗結(jié)果表明,對東云組培苗生根影響最大的因素是培養(yǎng)基配方和培養(yǎng)溫度,其中培養(yǎng)基配方2和培養(yǎng)溫度為24 ℃的東云組培苗平均生根率分別為39.37%和32.33%,生根效果較好;光照時間對東云組培苗平均生根率也有一定影響,以光照時間為12 h/d時,東云組培苗的平均生根率最高,為26.75%。植物生長素NAA對東云組培苗的生根培養(yǎng)非常重要,不同濃度的NAA對東云組培苗生根的影響不同,在東云組培苗生根培養(yǎng)過程中,以濃度為0.1 mg/L的NAA、光照時間12 h/d、培養(yǎng)溫度24 ℃條件下培養(yǎng)42 d,東云組培苗生根率最高,達(dá)100%。經(jīng)綜合考慮,東云組培苗的最佳生根培養(yǎng)基配方為1/2 MS+NAA 0.1 mg/L,最佳培養(yǎng)條件為光照時間12 h/d、培養(yǎng)溫度24 ℃。