武義縣兒童過敏原特異性IgE定量檢測分析及臨床意義

丁艷紅，陶小華

(武義縣第一人民醫(yī)院 1.檢驗(yàn)科；2.小兒科，浙江 金華 321200)

變態(tài)反應(yīng)性疾病俗稱I型變態(tài)反應(yīng)性疾病，是指機(jī)體通過多種方式接觸到含有特定過敏原(又稱變應(yīng)原)后，由B細(xì)胞生成過量免疫球蛋白E(immunoglobulin E，IgE)引起患者發(fā)生多種組織損傷或功能障礙[1-2]。一項(xiàng)世界性的研究數(shù)據(jù)顯示，從20世紀(jì)80年代至今，I型變態(tài)反應(yīng)性疾病兒童發(fā)病率更高[3-4]，且病變復(fù)雜多樣，范圍可累及多個系統(tǒng)，不同系統(tǒng)可同時出現(xiàn)癥狀，且難以防范。檢測過敏原可為臨床提供治療依據(jù)[5]，本研究對400例兒童進(jìn)行20項(xiàng)過敏原定量檢測，旨在調(diào)查本縣常見過敏原與人體各系統(tǒng)I型變態(tài)反應(yīng)性疾病的相關(guān)性。

1 對象與方法

1.1 研究對象 選取2015年2月—2017年6月在本院就診的過敏患兒315例，社區(qū)招募無癥狀兒童85名，400名觀察對象年齡7個月～14歲，均為本地區(qū)出生，并且一直在本縣所轄地區(qū)居??；排除自身免疫疾病、原發(fā)哮喘、感染性支氣管炎等。其中過敏患兒均表現(xiàn)有臨床癥狀：臨床表現(xiàn)以哮喘為主的患兒43例，占比10.75%；表現(xiàn)為濕疹的患兒87例，占比21.75%；以支氣管炎為主患兒58例，占比14.50%；表現(xiàn)為蕁麻疹患兒48例，占比12.00%；表現(xiàn)為過敏性皮疹患兒49例，占比12.25%。本研究經(jīng)本醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會批準(zhǔn)。

1.2 標(biāo)本采集 采集患兒肘靜脈血2～3 mL，若患兒過于年幼則盡量采集1 mL以上，經(jīng)3000 rpm離心后取血清采用酶聯(lián)免疫法檢測過敏原sIgE抗體。檢測項(xiàng)目包括肉類、動物毛、奶、蛋、堅果、魚、螨蟲、植物、蝦、蟹、淀粉、真菌孢子等共20項(xiàng)，委托杭州迪安檢驗(yàn)中心對過敏原進(jìn)行檢測。如有患兒疑似對多種過敏原產(chǎn)生反應(yīng)時，則待患兒血清sIgE降為正常，所有癥狀體征消失后分別再次取樣進(jìn)行試驗(yàn)，以確定種類。

1.3 sIgE抗體檢測結(jié)果判讀 判讀的方式均遵循國際進(jìn)行[6]：0～0.35 IU/mL判讀為0級；0.35～0.7 IU/mL判讀為1級；0.7～3.5 IU/mL判讀為2級；3.5～17.5 IU/mL判讀為3級；17.5～50 IU/mL判讀為4級；50～100 IU/mL判讀為5級；>100 IU/mL判讀為6級。檢測結(jié)果只要在1級以上(包含1級)即為陽性。

1.4 統(tǒng)計學(xué)分析 使用SPSS 18.0對所有檢測結(jié)果進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，用χ2檢驗(yàn)比較率之間的差異，sIgE的數(shù)值先通過Kolmogorov-Smirnov檢驗(yàn)是否為正態(tài)分布，若非正態(tài)分布則用Wilcoxon秩和檢驗(yàn)，正態(tài)分布采用t檢驗(yàn)。P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 過敏原sIgE陽性構(gòu)成比 在檢測的400例患兒中，315例患兒過敏原sIgE陽性，總陽性構(gòu)成比為78.75%。其中吸入性176例，陽性構(gòu)成比為44.00%；食入性233例，陽性構(gòu)成比為58.25%；86名患兒不止對一種過敏原產(chǎn)生反應(yīng)。在試劑盒包含的過敏原種類中，吸入性過敏原陽性中由高到低排名前三位的分別為交鏈孢霉(41例，10.25%)、粉塵螨(39例，9.75%)和屋塵螨(34例，8.50%)。食入性過敏原陽性構(gòu)成比中由高到低排名前三位的分別為雞蛋(56例，14.00%)、牛奶(53例，13.25%)和蝦(43例，10.75%)，見表1。

表1 過敏原sIgE陽性構(gòu)成比

表1(續(xù))

2.2 不同癥狀過敏原sIgE陽性構(gòu)成比 觀察吸入過敏原與食入過敏原分別排名前3位的過敏原在有癥狀者與無癥狀者之間sIgE含量是否存在統(tǒng)計學(xué)差異。結(jié)果表明雞蛋、牛奶、蝦過敏患兒血清sIgE水平與無癥狀兒童之間差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)；交鏈孢霉、粉塵螨和屋塵螨過敏導(dǎo)致的過敏性皮疹患兒與哮喘患兒的血清sIgE水平高于無癥狀兒童，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，但在支氣管炎與濕疹患兒中差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，見表2。

表2 不同癥狀過敏原sIgE陽性構(gòu)成比(%)

注：*與無癥狀兒童比較，P<0.05。

3 討論

I型變態(tài)反應(yīng)性疾病的發(fā)病人群主要是14歲以下的未成年人，對于預(yù)防、臨床診斷和治療，過敏原檢測一直不可替代。治療I型變態(tài)反應(yīng)性疾病的關(guān)鍵點(diǎn)在于了解過敏原為哪種物質(zhì)，及時脫離過敏原，并避免再次接觸此種物質(zhì)。機(jī)體產(chǎn)生的sIgE水平直接關(guān)系到預(yù)防I型變態(tài)反應(yīng)性疾病和治療。目前實(shí)驗(yàn)室常用的sIgE檢測方法較多，半定量常用免疫印跡法與ELISA，但I(xiàn)gE含量在正常人體內(nèi)極少，當(dāng)sIgE水平較低時，普通檢測方法靈敏度無法達(dá)到要求[7]；免疫熒光是另一種檢測方法，靈敏度高但成本高昂工序復(fù)雜。通過改進(jìn)，ELISA中的免疫捕獲法能夠有效提高靈敏度，且對于IgE的檢測，能夠去除其他免疫球蛋白干擾，提高特異性[8]，較為經(jīng)濟(jì)，也被用在本研究中。

本研究顯示在兒童I型變態(tài)反應(yīng)性疾病中，最常見的吸入性過敏原分別為交鏈孢霉、粉塵螨和屋塵螨，最常見的食入性過敏分別為雞蛋、牛奶和蝦。蛋白類物質(zhì)如牛奶和雞蛋等，因?yàn)榉肿恿看?，引起超敏反?yīng)的能力高于小分子物質(zhì)，小兒胃腸道功能不健全，處于生長發(fā)育時期，一旦腸道黏膜受到破壞，導(dǎo)致大分子物質(zhì)的通透性增高，因此更容易對蛋白質(zhì)類食物產(chǎn)生I型超敏反應(yīng)[7]。

本研究中，發(fā)現(xiàn)部分患兒對寵物毛皮過敏，因此需要慎重考慮養(yǎng)寵物。塵螨是最易致敏的過敏原，呈世界性分布，能夠誘發(fā)I型超敏反應(yīng)產(chǎn)生多種癥狀[9]，本縣氣候較為溫和，年均溫度與濕度十分適合塵螨等多種螨類寄生蟲繁衍。因此必須盡量保持房間內(nèi)衛(wèi)生，定時清洗晾曬被褥枕套，定期做徹底掃除，以有效減少過敏原。

國外有研究提出，sIgE檢測的臨界值需要根據(jù)不同種類過敏原、人群和研究目的，適當(dāng)?shù)剡M(jìn)行調(diào)整[10]。本縣轄區(qū)內(nèi)兒童過敏原與國內(nèi)其他地區(qū)統(tǒng)計數(shù)據(jù)[11]存在差異，說明生活與飲食等習(xí)慣都對過敏情況有影響，也可能是本身的權(quán)重不同。sIgE定量檢測也可用于風(fēng)險評估[12]。本研究中交鏈孢霉、粉塵螨和屋塵螨導(dǎo)致的過敏性皮疹患兒與哮喘患兒的血清sIgE水平高于無癥狀兒童，顯示過敏原sIgE水平的定量檢測能夠?yàn)榕R床提供產(chǎn)生癥狀風(fēng)險的預(yù)測參考。

本研究中僅針對本縣轄區(qū)范圍內(nèi)14歲以下兒童這一人群，未來仍需要擴(kuò)大年齡范圍，比較多地區(qū)統(tǒng)計數(shù)據(jù)，進(jìn)行更加全面的評估，以期為I型變態(tài)反應(yīng)性疾病提供更準(zhǔn)確的實(shí)驗(yàn)室評價標(biāo)準(zhǔn)。