理想小鼠結(jié)直腸癌肝轉(zhuǎn)移模型的建立及研究進(jìn)展

文宇，張子建，顏世超，劉翔，周江蛟，熊力，李清龍

（中南大學(xué)湘雅二醫(yī)院 普通外科，湖南 長(zhǎng)沙 410011）

結(jié)直腸癌是世界上第三大常見惡性腫瘤。盡管不斷努力預(yù)防和改進(jìn)治療，其預(yù)后仍很差，大約35%～40%的局部進(jìn)展期直腸癌患者最終會(huì)發(fā)生遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移并死亡[1]，該病病死率與肝臟轉(zhuǎn)移的發(fā)生密切相關(guān)。結(jié)直腸癌的動(dòng)物模型是研究結(jié)直腸癌發(fā)生和發(fā)展機(jī)制實(shí)驗(yàn)物質(zhì)基礎(chǔ)。因此，通過動(dòng)物模型研究結(jié)直腸癌肝轉(zhuǎn)移的機(jī)制是控制疾病進(jìn)展的重要研究手段。目前人們已在體外和體內(nèi)開發(fā)了肝轉(zhuǎn)移模型。體外轉(zhuǎn)移模型易于操作，廉價(jià)且可重復(fù)。這些模型允許操縱轉(zhuǎn)移過程中的每個(gè)步驟，但是對(duì)整個(gè)轉(zhuǎn)移過程的綜合分析存在局限性[2-3]。相反， 使用動(dòng)物的體內(nèi)轉(zhuǎn)移模型可以更準(zhǔn)確地代表轉(zhuǎn)移過程并且可以模擬人體癌癥進(jìn)行相應(yīng)的基因操作。然而，它們也存在著相關(guān)的倫理問題和經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)[4-6]。目前，已經(jīng)開發(fā)了許多動(dòng)物模型用于評(píng)估肝轉(zhuǎn)移的機(jī)制和建立治療策略[4-9]。這些臨床前研究提供了與臨床應(yīng)用相關(guān)的證據(jù)，并且有助于改善具有肝轉(zhuǎn)移的結(jié)腸直腸癌患者的存活。本文就目前用于結(jié)直腸癌肝轉(zhuǎn)移的小鼠模型綜述如下。

1 小鼠結(jié)直腸模型的類型

目前小鼠模型是腫瘤轉(zhuǎn)移研究中應(yīng)該最廣泛的動(dòng)物模型。小鼠相比其他動(dòng)物在實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)上具有許多優(yōu)勢(shì)，小鼠基因組與人類基因組高度同源，在解剖和生理上具有相似性。小鼠的繁殖能力強(qiáng)，生殖周期短，飼養(yǎng)相對(duì)簡(jiǎn)單，體積小，十分有利于進(jìn)行大規(guī)模的實(shí)驗(yàn)。小鼠結(jié)直腸癌肝轉(zhuǎn)移動(dòng)物模型類型總結(jié)為圖1。

圖1 小鼠結(jié)直腸癌肝轉(zhuǎn)移模型的類型Figure 1 Types of mouse models of CRC liver metastasis

1.1 按腫瘤發(fā)生的角度分類

從腫瘤發(fā)生的角度出發(fā)，總的說可以分為三大類型：化學(xué)誘導(dǎo)模型、基因工程模型和種植模型?；瘜W(xué)誘導(dǎo)模型是指讓小鼠暴露在化學(xué)致癌物下，使其自發(fā)形成癌癥或者轉(zhuǎn)移的模型。基因工程模型通過基因組表達(dá)的改變而建立，例如癌基因的激活和抑癌基因的失活。種植模型是將來自人（異種）或鼠（同種異體）的移植物植入荷瘤小鼠體內(nèi)的模型。

1.2 按移植物的種屬分類

移植物的種屬和是否 保留的腫瘤異質(zhì)性決定選擇什么免疫活性的小鼠，通常有兩種選擇：在具備免疫活性的小鼠中移植同種異體移植物和在免疫缺陷小鼠中移植異種移植物。在具備免疫活性的小鼠中移植同種異體移植物的方法對(duì)于評(píng)估腫瘤與其微環(huán)境之間的相互作用有較大意義，移植物很少排斥，它們具有經(jīng)濟(jì)效益和方便性，然而這些模型不能反映人類腫瘤的遺傳異質(zhì)性。在免疫缺陷小鼠中移植異種移植物的方法盡管存在諸如免疫系統(tǒng)功能缺陷和移植成功率低的局限性，但是隨著精準(zhǔn)醫(yī)療的興起，是否能夠反應(yīng)人類腫瘤異質(zhì)性尤為重要，因此異種移植在人類腫瘤研究中也得到了廣泛的應(yīng)用，目前常見的異種移植模型有細(xì)胞系、類器官和病人源腫瘤移植（patient-derived tumor xenograft，PDX）[10]。將人結(jié)腸直腸癌細(xì)胞原位或者異位注射到免疫缺陷小鼠中通常會(huì)導(dǎo)致注射部位的腫瘤生長(zhǎng)，常用的小鼠品系包括裸鼠（無胸腺）和嚴(yán)重聯(lián)合免疫缺陷（SCID）小鼠。自2010年初以來，種植類器官的技術(shù)迅速發(fā)展，類器官是體外三維形成的器官的小型化和簡(jiǎn)化版，Matano等[11]使用CRISPR/Cas9技術(shù)編輯人結(jié)直腸癌類器官的APC，TP53，SMAD4，KRAS和/或PIK3CA等基因，然后用以上基因工程化的類器官建立腎被膜移植和實(shí)驗(yàn)性肝轉(zhuǎn)移的小鼠模型，結(jié)果顯示基因工程化的類器官成功在肝臟定植。PDX模型是將手術(shù)期間獲得患者腫瘤組織的部分并植入免疫缺陷小鼠，一旦腫瘤生長(zhǎng)就將其取出植入其他小鼠進(jìn)行傳代，此后重復(fù)這一過程，直到獲得足夠的動(dòng)物用于實(shí)驗(yàn)。PDX模型受到越來越多的關(guān)注，它能反映每一位患者的腫瘤異質(zhì)性，可用于個(gè)性化用藥指導(dǎo)、藥效篩選和生物標(biāo)志物的開發(fā)等。

1.3 按結(jié)直腸癌肝轉(zhuǎn)移的建立角度分類

從肝 轉(zhuǎn)移的建立角度出發(fā)，可分為自發(fā)性轉(zhuǎn)移模型和實(shí)驗(yàn)性轉(zhuǎn)移模型。目前，采用結(jié)直腸癌細(xì)胞系或者腫瘤組織移植到小鼠中建立結(jié)直腸癌肝轉(zhuǎn)移動(dòng)物模型是最為常見的造模方法。自發(fā)性肝轉(zhuǎn)移模型就是采用上述方法，在不經(jīng)過其他干預(yù)下經(jīng)腫瘤自由生長(zhǎng)后發(fā)生轉(zhuǎn)移的模型；而實(shí)驗(yàn)性轉(zhuǎn)移模型則是人為通過靜脈、脾臟或其他部位注射腫瘤細(xì)胞模擬血道轉(zhuǎn)移的模型，具體見后文。

2 化學(xué)誘導(dǎo)性模型、基因工程模型和PDX模型：完整腫瘤微環(huán)境的分歧

由 于腫瘤微環(huán)境對(duì)腫瘤進(jìn)展具有十分重要的作用，因此在有免疫活性的小鼠中建立結(jié)直腸癌肝轉(zhuǎn)移模型很有必要。有免疫活性的動(dòng)物表現(xiàn)出的健康狀態(tài)通常更穩(wěn)定，其完整的免疫系統(tǒng)可用于測(cè)試免疫療法的效果，而且將免疫機(jī)制作為癌癥的治療靶點(diǎn)進(jìn)行研究已成為熱點(diǎn)之一。在有免疫活性的小鼠中通過化學(xué)致癌物誘導(dǎo)和基因工程技術(shù)可以滿足在原發(fā)部位形成完整腫瘤微環(huán)境的特點(diǎn)，但其并不能體現(xiàn)腫瘤異質(zhì)性。而PDX模型雖然克服了前兩者缺乏腫 瘤異質(zhì)性的缺點(diǎn)，但是免疫系統(tǒng)受損，缺乏免疫細(xì)胞的參與，腫瘤微環(huán)境不完善。

2.1 化學(xué)誘導(dǎo)模型

自發(fā)和致癌物誘導(dǎo)的結(jié)直腸癌的小鼠模型是最早有相關(guān)報(bào)道的模型。小鼠自發(fā)形成結(jié) 直腸癌的發(fā)生率為1%[12-13]，因此無法對(duì)結(jié)直腸癌的進(jìn)展進(jìn)行有效地實(shí)驗(yàn)研究。為了增加結(jié)直腸癌的發(fā)病率，將小鼠暴露于致癌物下，大多數(shù)致癌物質(zhì)會(huì)引起多個(gè)器官的惡性腫瘤，但有些會(huì)主要誘發(fā)結(jié)直腸癌。經(jīng)常使用的致癌物質(zhì)有二甲肼（dimethylhydrazine，DMH）及其代謝產(chǎn)物氧化偶氮甲烷（azoxymethane，AOM），雜環(huán)胺（Heterocyclic amines，HCAs），甲基硝基亞硝基胍（N-Methyl-N-nitro-N-nitrosoguanidine，MNNG）和甲基亞硝基脲（N-methyl-N-nitrosourea，MNU）[14]。研究[15-16]通過皮下和腹膜下重復(fù)使用AOM，約30周后出現(xiàn)自發(fā)性結(jié)腸癌。MNU的直腸內(nèi)給藥導(dǎo)致結(jié)腸腫瘤發(fā)生率為100%，此外23%～31%的小鼠發(fā)生腸系膜淋巴結(jié)的轉(zhuǎn)移[17]。

致癌物誘導(dǎo)的結(jié)直腸癌模型在基因-環(huán)境相互作用和化學(xué)預(yù)防的研究中具有優(yōu)勢(shì)[18]，但是缺點(diǎn)是腫瘤發(fā)生率低，因此必須使用大量的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物。此外，該模型不適合結(jié)直腸癌晚期和轉(zhuǎn)移形成機(jī)制研究，因?yàn)檫@種模型轉(zhuǎn)移進(jìn)展非常緩慢且不常發(fā)生。

2.2 基因工程模型

通過研究家族性腺瘤性息肉?。‵AP）和遺傳性非息肉性結(jié)腸癌（HNPCC），揭示了結(jié)腸癌發(fā)生過程中存在基因突變[19]。具有某些基因突變的小鼠顯示出與人結(jié)腸癌和息肉相似的表型。從局部增生到腺瘤再到浸潤(rùn)性癌最后發(fā)生轉(zhuǎn)移，這多階段的過程需要各種基因的連續(xù)突變。因此人們開始使用基因 工程小鼠來研究結(jié)直腸癌肝轉(zhuǎn)移。

結(jié)直腸癌的基因工程小鼠模型通常使用特定種系或遺傳修飾，這樣可用于研究遺傳性結(jié)直腸癌[6]。然而，散發(fā)性結(jié)直腸癌發(fā)生的是體細(xì)胞突變，占所有結(jié)腸直腸癌約80%，因此需要體細(xì)胞工程小鼠模型來研究結(jié)直腸癌的發(fā)生[20]。結(jié)直腸癌的大多數(shù)基因工程小鼠模型是根據(jù)雜合性喪失時(shí)誘導(dǎo)APC突變而產(chǎn)生的，盡管APC突變可導(dǎo)致侵襲性結(jié)直腸癌的形成，但尚未在這些模型中證實(shí)肝轉(zhuǎn)移[21]。最近，建立了一個(gè)相當(dāng)高的肝轉(zhuǎn)移發(fā)展效率的結(jié)直腸癌基因工程小鼠模型。該模型是將Adeno-Cre注射到LSL-KRASG12V/APCflox/flox小鼠的結(jié)腸中產(chǎn)生，當(dāng)結(jié)腸感染腺病毒誘導(dǎo)APC缺失和致癌KRASG12V激活，然后散發(fā)性結(jié)腸直腸癌的產(chǎn)生，隨后肝轉(zhuǎn)移[22]。

基因工程小鼠模型具有顯著的優(yōu)點(diǎn)，該模型提供有關(guān)癌發(fā)生過程中特定基因突變的影響，有效地評(píng)估腫瘤發(fā)生的早期步驟，有助于與結(jié)腸癌的發(fā)病機(jī)制相結(jié)合。與種植模型相比，基因工程模型更準(zhǔn)確地代表了腫瘤進(jìn)展的自然過程以及腫瘤細(xì)胞與微環(huán)境之間的相互作用[5]。此外，這些模型具有完整的免疫系統(tǒng)和特異性的微環(huán)境[23]。

但是它們?nèi)秉c(diǎn)是通常不能完全重現(xiàn)人體腫瘤的遺傳復(fù)雜性。另外，從實(shí)驗(yàn)角度出發(fā)，總體而言肝轉(zhuǎn)移很少發(fā)生，并且它們的發(fā)生是不可預(yù)測(cè)的[24]，即使發(fā)生肝轉(zhuǎn)移，也需要等待很長(zhǎng)時(shí)間[25]，因此其潛在局限性在于難以評(píng)估治療反應(yīng)[26]；在研 究某些特定基因的突變可導(dǎo)致胚胎致死，嚴(yán)重的發(fā)育缺陷或不育[27]；實(shí)驗(yàn)的完成需要承擔(dān)昂貴經(jīng)濟(jì)壓力且工作量大[28]。

2.3 PDX模型

皮下移植的PDX模型很少發(fā)生肝轉(zhuǎn)移，最常用的PDX肝轉(zhuǎn)移模型是患者來源的原位移植模型。研究[29-30]發(fā)現(xiàn)，從患者手術(shù)獲得的組織學(xué)上完整的結(jié)腸癌組織在10次傳代后，隨后原位植入裸鼠盲腸的PDX模型能發(fā)生肝轉(zhuǎn)移。其他研究也報(bào)道了原位PDX模型發(fā)生結(jié)直腸癌的肝轉(zhuǎn)移[31-33]。

來自細(xì)胞系的異種移植雖然具有重復(fù)好、易于操作和良好表型的優(yōu)點(diǎn)，但是它們沒有表現(xiàn)出原始 腫瘤的腫瘤異質(zhì)性或組織病理學(xué)和遺傳特征[34-36]。相比之下，PDX模型更好地反映了原始腫瘤的特征和遺傳多樣性。因此，這些模型目前是用于測(cè)試藥物反應(yīng)的最佳臨床前模型，特別是對(duì)于患有難治性癌癥的患者。此外，PDX模型可進(jìn)一步用于個(gè)性化治療的基因組學(xué)和藥理學(xué)研究[31,35]。

PDX轉(zhuǎn)移模型的主要優(yōu)點(diǎn)是這些模型可以檢測(cè)患者對(duì)藥物的特異性治療反應(yīng)并預(yù)測(cè)疾病過程，提供關(guān)于個(gè)性化治療的關(guān)鍵信息[5,37]。與來自癌細(xì)胞系的異種移植模型相比，PDX模型還在細(xì)胞和遺傳水平上保持原始腫瘤的異質(zhì)性[34,31-32]。此外，PDX轉(zhuǎn)移模型提供了跟蹤轉(zhuǎn)移的起始和進(jìn)展的機(jī)會(huì)[37]。

盡管具有這些優(yōu)點(diǎn)，但PDX轉(zhuǎn)移模型在轉(zhuǎn)移研究中具有許多缺點(diǎn)。已經(jīng)表明，人腫瘤基質(zhì)最初在移植后可以保存，但隨著時(shí)間的推移會(huì)逐漸被鼠基質(zhì)取代[38]。盡管PDX是個(gè)性化醫(yī)療的希望，但PDX移植成功率并不高[39]，這可能會(huì)限制臨床效用。另外，腫瘤植入和篩選潛在療法可能需要6個(gè)月或更長(zhǎng)時(shí)間。最后，臨床上通過PDX模型來進(jìn)行診療價(jià)格十分昂貴，并且私人信息有時(shí)難以得到有效保護(hù)。

3 自發(fā)性肝轉(zhuǎn)移模型和實(shí)驗(yàn) 性肝轉(zhuǎn)移模型：模擬轉(zhuǎn)移途徑的分歧

3.1 自發(fā)性肝轉(zhuǎn)移模型

自發(fā)性肝轉(zhuǎn)移模型是指將癌細(xì)胞系或組織植入結(jié)腸（原位移植）或皮下層（異位移植），導(dǎo)致在注射部位形成原發(fā)性腫瘤，隨后自行發(fā)生肝轉(zhuǎn)移。異位移植是腫瘤移植最簡(jiǎn)單的方法。然而，這種模型大多不能發(fā)展肝臟轉(zhuǎn)移，因?yàn)槠は挛h(huán)境與結(jié)腸完全不同 。相比之下，原位移植模型在組織學(xué)，血管分布，基因表達(dá)和轉(zhuǎn)移過程方面類似于人體癌癥。有學(xué)者[40]提出該模型應(yīng)該滿足：首先，原發(fā)腫瘤必須定位在結(jié)腸；第二，原發(fā)性腫瘤必須來自結(jié)腸壁的黏膜層；第三，單個(gè)完整的腫瘤應(yīng)植入黏膜層（以保持腫瘤細(xì)胞與基質(zhì)細(xì)胞和細(xì)胞外基質(zhì)的相互作用）；第四，應(yīng)在肝、肺和淋巴結(jié)中檢測(cè)到轉(zhuǎn)移性病變。因此，自發(fā)性肝轉(zhuǎn)移模型主要選用原位移植模型。在該模型中，可以通過開放手術(shù)、灌腸、顯微注射和經(jīng)肛門低劑量電凝等手段將結(jié)腸癌細(xì)胞系或人腫瘤組織移植到免疫受損小鼠的結(jié)腸壁中[41]。

為確保肝轉(zhuǎn)移的有效進(jìn)展，體內(nèi)選擇高轉(zhuǎn)移性腫瘤細(xì)胞是一項(xiàng)重要的策略。通過連續(xù)傳代可以增加移植腫瘤的轉(zhuǎn)移潛力。在這種方法中，致瘤樣本擴(kuò)增后重新植入盲腸重復(fù)幾代，以獲得更高的致瘤性和轉(zhuǎn)移能力。這種具有高度轉(zhuǎn)移潛能的原位移植模型已被證明可有效進(jìn)展為肝轉(zhuǎn)移。然而，這種選擇過程和隨后的體外細(xì)胞培養(yǎng)導(dǎo)致腫瘤細(xì)胞在二維環(huán)境中更適應(yīng)生長(zhǎng)而不是在正常的三維環(huán)境中。

原位自發(fā)性肝轉(zhuǎn)移模型的主要優(yōu)點(diǎn)是轉(zhuǎn)移遵循自然過程并利用類似于人體的機(jī)制。因此，該模型適用于預(yù)測(cè)人體腫瘤中的藥物反應(yīng)。該模型代表著從原發(fā)部位形成到進(jìn)展為肝轉(zhuǎn)移的整個(gè)轉(zhuǎn)移過程。它能夠研究轉(zhuǎn)移級(jí)聯(lián)中的所有步驟，可以模仿人體腫瘤微環(huán)境，并在腫瘤細(xì)胞中提供真實(shí)水平的異質(zhì)性。此外，在自發(fā)轉(zhuǎn)移模型中分離的高轉(zhuǎn)移性腫瘤細(xì)胞所需的傳代次數(shù)少于實(shí)驗(yàn)性轉(zhuǎn)移模型所需的傳代次數(shù) 。

該模型的缺點(diǎn)是從結(jié)腸到肝臟的自發(fā)轉(zhuǎn)移為低預(yù)測(cè)性和差重復(fù)性。由于異種移植物中缺乏功能性免疫系統(tǒng)，因此該模型難以評(píng)估免疫系統(tǒng)對(duì)轉(zhuǎn)移進(jìn)展的作用。此外，發(fā)生肝轉(zhuǎn)移需要很長(zhǎng)時(shí)間，有時(shí)需要切除原發(fā)腫瘤以減輕腫瘤負(fù)荷從而使轉(zhuǎn)移發(fā)生。此外，盲腸注射在技術(shù)上存在困難，并且存在腫瘤細(xì)胞滲漏或管腔內(nèi)溢出的風(fēng)險(xiǎn)。

3.2 實(shí)驗(yàn)性肝轉(zhuǎn)移模型

實(shí)驗(yàn)性肝轉(zhuǎn)移模型是指實(shí)驗(yàn)性地誘導(dǎo)肝轉(zhuǎn)移。實(shí)驗(yàn)性轉(zhuǎn)移模型發(fā)生在不同器官中，取決于注射的部位和注射細(xì)胞的向性。在實(shí)驗(yàn)性肝轉(zhuǎn)移模型中，是將結(jié)腸癌細(xì)胞直接注射到脾臟或門靜脈中。腫瘤細(xì)胞在不經(jīng)歷原發(fā)性腫瘤生長(zhǎng)和血管內(nèi)滲出等步驟的情況下到達(dá)肝臟微循環(huán)，然后因大小或特定的因素而滯留。這些腫瘤細(xì)胞經(jīng)歷細(xì)胞外滲并進(jìn)入肝實(shí)質(zhì)，或者它們可能直接在脈管系統(tǒng)內(nèi)生長(zhǎng)。部分注射細(xì)胞最終形成肝轉(zhuǎn)移瘤。為了提高肝轉(zhuǎn)移的效率，先前描述的在自發(fā)模型中連續(xù)傳代方法在實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ椭惺潜匾?。有?bào)道稱，當(dāng)人體結(jié)腸癌細(xì)胞注入免疫受損小鼠的脾臟時(shí)，高度惡性的細(xì)胞會(huì)發(fā)生肝臟轉(zhuǎn)移[3,7,9,42-43]。

實(shí)驗(yàn)性轉(zhuǎn)移模型為轉(zhuǎn)移研究提供了許多優(yōu)勢(shì)。腫瘤細(xì)胞直接注入體循環(huán)，因此轉(zhuǎn)移發(fā)生需要的時(shí)間很短。此外，這些模型具有高度可重復(fù)性并且始終導(dǎo)致轉(zhuǎn)移形成。與自發(fā)轉(zhuǎn)移模型相比，這些模型中的轉(zhuǎn)移形成更有效。使用這些模型能夠控制引入循環(huán)中的腫瘤細(xì)胞的數(shù)量和類型，這對(duì)于實(shí)現(xiàn)實(shí)驗(yàn)終點(diǎn)十分重要。此外，轉(zhuǎn)移器官可以靶向特定部位[3,42,44-45]。

實(shí)驗(yàn)性轉(zhuǎn)移模型的主要缺點(diǎn)是這些模型不能代表整個(gè)轉(zhuǎn)移過程。 它們僅代表轉(zhuǎn)移級(jí)聯(lián)的晚期，因?yàn)樗鼈兝@過早期階段，包括原發(fā)性腫瘤生長(zhǎng)和腫瘤細(xì)胞的內(nèi)滲。應(yīng)通過連續(xù)傳代分離腫瘤細(xì)胞，以增強(qiáng)其組織特異性能力。轉(zhuǎn)移遵循人工途徑，而不是其自然過程[3,9,42]。

4 理想的小鼠 結(jié)直腸癌癌肝轉(zhuǎn)移模型

適合對(duì)腫瘤轉(zhuǎn)移研究的理想動(dòng)物模型應(yīng)該具備一些條件和因素，例如：不管是原發(fā)性腫瘤還是轉(zhuǎn)移性腫瘤都應(yīng)該可預(yù)測(cè)和重復(fù)，能夠得到廣泛應(yīng)用；保持腫瘤的異質(zhì)性和微環(huán)境；在動(dòng)物體內(nèi)能重建完整的腫瘤轉(zhuǎn)移過程；從模型的應(yīng)用價(jià)值出發(fā)，應(yīng)該可以用來做腫瘤患者的藥效學(xué)評(píng)價(jià)或者新治療手段的測(cè)試。但是目前很難同時(shí)滿足所有條件，應(yīng)當(dāng)根據(jù)具體實(shí)驗(yàn)需要選擇恰當(dāng)?shù)哪Ｐ?。例如?cè)重研究腫瘤微環(huán)境和免疫相關(guān)機(jī)制時(shí)，在免疫缺陷動(dòng)物中移植異種細(xì)胞則不適合；側(cè)重研究腫瘤的轉(zhuǎn)移途徑時(shí)，則應(yīng)該在結(jié)直腸原位形成腫瘤，讓其自發(fā)形成肝轉(zhuǎn)移，而不是在肝臟直接形成腫瘤。

5 小結(jié)與展望

各小鼠模型各自有優(yōu)缺點(diǎn)詳見表1。建立結(jié)直腸癌肝轉(zhuǎn)移的小鼠模型有助于對(duì)轉(zhuǎn)移過程和機(jī)制的了解。理想的肝轉(zhuǎn)移模型應(yīng)該建立可預(yù)測(cè)和可重復(fù)的條件上。此外，未來原發(fā)性腫瘤模型應(yīng)能同時(shí)擬合結(jié)直腸癌腫瘤（表觀）遺傳學(xué)、病理學(xué)、解剖學(xué)特性，其結(jié)直腸癌肝轉(zhuǎn)移模型具備短時(shí)間自發(fā)發(fā)生肝轉(zhuǎn)移的能力，以此來有效地代表人體腫瘤微環(huán)境，并可用于驗(yàn)證多種治療癌癥患者。雖然目前應(yīng)用于肝轉(zhuǎn)移的理想模型方面仍存在局限性，但幸運(yùn)的是，基因組編輯技術(shù)的發(fā)展，如CRISPR/Cas系統(tǒng)，已經(jīng)為肝轉(zhuǎn)移模型的發(fā)展提供了新的手段，關(guān)于腫瘤發(fā)生和轉(zhuǎn)移機(jī)制的表觀遺傳學(xué)研究也正是目前基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)研究的熱點(diǎn)之一，這些進(jìn)展未來必將會(huì)為結(jié)直腸癌肝轉(zhuǎn)移模型帶來革新?？傊?，此類動(dòng)物模型的目標(biāo)是通過對(duì)其潛在轉(zhuǎn)移機(jī)制研究為患有難治性結(jié)腸直腸癌的患者設(shè)計(jì)有效的治療方法。

表1 小鼠肝轉(zhuǎn)移模型的優(yōu)缺點(diǎn)Table 1 Advantages and disadvantages of models of different mouse models of CRC liver metastasis