HIF-1α和SIRT6在甲狀腺癌組織中的表達及其與腫瘤血管生成的關系

曾 勇，鄭克思，陳 聰，吳元肇，陳 碧

(溫州市人民醫(yī)院，浙江 溫州 325000)

甲狀腺癌是內(nèi)分泌系統(tǒng)常見腫瘤之一，該病起病較為隱匿，生物學特征多變，就現(xiàn)有影像學和病理診斷對良惡性腫瘤鑒別診斷均存在一定誤差，故研究甲狀腺癌組織形成和表達的分子機制，從微觀角度尋找輔助鑒別甲狀腺癌的分子診斷標志物，用以指導臨床選擇更為合理的治療方案具有重要意義[1]。HIF-1α在多種實體腫瘤中均檢測到高表達狀態(tài)，是一種重要轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子，可能參與了腫瘤浸潤和轉(zhuǎn)移過程，對患者預后有重要影響。SIRT6與多種腫瘤的進展有關，包括結(jié)直腸癌，小細胞肺癌，乳腺癌等，SIRT6可以通過調(diào)節(jié)多種通路來調(diào)節(jié)腫瘤的發(fā)生發(fā)展[2]。本研究探討HIF-1α和SIRT6在甲狀腺癌組織中的表達及其與腫瘤血管生成的關系，現(xiàn)報道如下。

一、對象與方法

1.研究對象。選取2017年9月-2019年3月我院收治的甲狀腺癌患者89例，其中男51例，女48例，年齡22-73歲，平均(39.67±4.82)歲。其中乳頭狀癌60例，濾泡狀癌16例，髓樣癌11例，未分化癌2例。所有患者術前均未行新輔助放療、化療、內(nèi)分泌治療及靶向治療，術前病理診斷明確，所有癌組織和癌旁組織均按常規(guī)標準制作石蠟對切片進行包埋。

2.研究方法。應用免疫組織化學Envision法檢測患者甲狀腺癌組織和癌旁組織中HIF-1α和SIRT6的表達，研究使用的是Envision染色超敏試劑盒和DAB顯色試劑盒，兔抗人SIRT6多克隆抗體和鼠抗人HIF-1α單克隆抗體。操作程序嚴格按照說明書進行。檢測結(jié)束后對甲狀腺癌組織和癌旁組織HIF-1α、SIRT6表達陽性率進行比較，并分析甲狀腺癌組織和癌旁組織HIF-1α、SIRT6表達相關性。

3.評價標準。在高倍鏡下對癌細胞數(shù)量進行觀察，高倍顯微鏡為某公司提供的SZ61型光學顯微鏡。HIF-1α和SIRT6均以細胞膜和細胞質(zhì)染色。評價標準如下：-：幾乎不染色；+：淺黃，弱陽性；++：棕黃色，陽性；+++：深棕色，強陽性。

4.統(tǒng)計學方法。使用SPSS 21.0進行統(tǒng)計分析。本研究HIF-1α、SIRT6表達陽性率為計數(shù)資料，采用χ2檢驗，以率/百分比表示。HIF-1α、SIRT6表達相關性采用Pearson相關性分析，以r表示，以P<0.05表示兩組之間差異有統(tǒng)計學意義。

二、結(jié) 果

1.甲狀腺癌組織和癌旁組織HIF-1α、SIRT6表達陽性率比較。89例甲狀腺癌患者中，HIF-1α、SIRT6在癌組織和癌旁組織均有表達，HIF-1α在癌組織中表達陽性率明顯高于癌旁組織(P<0.05)；SIRT6在癌組織中表達陽性率明顯高于癌旁組織(P<0.05)(見附表)。

附表 甲狀腺癌組織和癌旁組織HIF-1α、SIRT6 表達陽性率比較(n)

2.甲狀腺癌組織和癌旁組織HIF-1α、SIRT6表達相關性分析。兩者均在癌組織中呈現(xiàn)高表達，且在癌旁組織中呈現(xiàn)低表達，HIF-1α、SIRT6表達呈顯著正相關(r=0.867)，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。

三、討 論

甲狀腺腫瘤病灶發(fā)展較為緩慢，但癌瘤細胞早期容易發(fā)生頸部淋巴結(jié)遠處轉(zhuǎn)移，患者預后不理想且病死率高，但目前其對早期診斷準確率偏低，在甲狀腺癌中缺氧發(fā)揮著重要作用[3]。

HIF-1α基因定位于人的14號染色體，是HIF-1的活性亞基，也是調(diào)控細胞代謝途徑轉(zhuǎn)換過程的重要因子。HIF-1α可誘導血管內(nèi)皮生長因子表達，促進血管生成，在腫瘤細胞產(chǎn)生、浸潤和轉(zhuǎn)移過程中起到重要作用。

SIRT6是Sirtuin蛋白重要成員，是酵母細胞中沉默信息調(diào)節(jié)因子2同源物，主要定位于細胞核，具有ADP-核糖基轉(zhuǎn)移酶催化活性作用，與癌癥反映和多種代謝相關疾病存在相關，可與抑癌因子泛素特異性蛋白酶10發(fā)揮協(xié)同作用。SIRT6在癌癥發(fā)生中的作用最為復雜，可通過調(diào)節(jié)癌細胞中有氧糖酵解發(fā)揮腫瘤促進和腫瘤抑制因子的雙重作用，且轉(zhuǎn)化的SIRT6缺陷細胞顯示出糖酵解增加和腫瘤生長促進，甲狀腺癌細胞組織SIRT6蛋白表達水平明顯低于癌旁正常組織，說明SIRT6在基因轉(zhuǎn)錄階段就已經(jīng)出現(xiàn)表達缺失的情況。

本次研究結(jié)果顯示，HIF-1α和SIRT6在癌組織中表達陽性率均明顯高于癌旁組織，表明HIF-1α和SIRT6可能與甲狀腺癌侵襲轉(zhuǎn)移有相關性，過表達的HIF-1α和SIRT6可能對甲狀腺癌的進展過程起到一定作用，可能是甲狀腺癌患者預后不良的標志。HIF-1α、SIRT6在癌組織和癌旁組織中表達呈顯著正相關，提示兩者在甲狀腺癌發(fā)生發(fā)展過程中可能起到協(xié)同作用。