乳酸菌口服疫苗在豬病防治中的運(yùn)用研究

[摘 要] 在所有的工業(yè)菌株種類中，乳酸菌是非常特殊的一類，是一種食品級別的菌種。在口服類型疫苗制作過程中，常常以乳酸菌作為載體進(jìn)行相關(guān)制作，因?yàn)檫@種疫苗安全無毒。乳酸菌口服疫苗主要利用胃腸粘液增加機(jī)體的抗原，進(jìn)而誘導(dǎo)其產(chǎn)生相應(yīng)的免疫反應(yīng)。在乳酸菌口服疫苗制造過程中，需要重點(diǎn)管理菌類的應(yīng)用，才能充分發(fā)揮這項(xiàng)疫苗的作用，使其合理應(yīng)用于豬病防治。本文就乳酸菌口服疫苗在豬病防治中的運(yùn)用進(jìn)行相關(guān)分析和研究。

[關(guān)鍵詞] 乳酸菌口服疫苗;乳酸菌;豬病防治;抗原

[中圖分類號] S858.28 [文獻(xiàn)標(biāo)識碼] B [文章編號] 1674-7909（2019）23-102-3

乳酸菌屬于革蘭氏陽性菌，可以發(fā)酵碳水性質(zhì)的化合物，從而生成大量乳酸物質(zhì)。在人體的腸道和大部分動物的腸道中，乳酸菌是非常常見的一種細(xì)菌種類。這種細(xì)菌不存在致病性質(zhì)，經(jīng)常被應(yīng)用于食品工業(yè)等領(lǐng)域制造，是一種安全等級的微生物。其中，很多菌類與益生作用存在一定聯(lián)系，在研究過程中受到了人們的廣泛關(guān)注。但是，當(dāng)前在進(jìn)行乳酸菌疫苗研究的過程中存在諸多問題，需要全面分析這些問題，采取有效措施予以解決[1]。

1 乳酸菌表達(dá)系統(tǒng)特點(diǎn)

近幾年，我國開始研究疫苗的轉(zhuǎn)基因系統(tǒng)，需要尋找傳遞的載體，才能使其在機(jī)體內(nèi)長時(shí)間存活，且不會對機(jī)體產(chǎn)生損傷，使機(jī)體長時(shí)間產(chǎn)生免疫力。這項(xiàng)菌種屬于原核表達(dá)系統(tǒng)的一種類型。在進(jìn)行外援基因表達(dá)過程中，一些菌種自身攜帶大量的染色體外因子，比較容易發(fā)展新的載體，培養(yǎng)過程更加簡便，遺傳操作效率較高。這項(xiàng)技術(shù)的發(fā)展比較成熟，具有良好的重復(fù)率。這項(xiàng)菌種是食品級細(xì)菌，能夠構(gòu)建食品級的表達(dá)系統(tǒng)，可以進(jìn)行基因克隆，促進(jìn)基因技術(shù)的發(fā)展，提高產(chǎn)品的應(yīng)用安全性。在進(jìn)行本底表達(dá)的過程中，它具備的水平較低，但是表達(dá)量較高，純化相對簡單[2]。

這個(gè)系統(tǒng)能夠多方面調(diào)控子系統(tǒng)，而且能夠表達(dá)毒素基因，在細(xì)胞體內(nèi)和體外均能進(jìn)行表達(dá)，且能夠分泌到細(xì)胞外。這項(xiàng)菌種體內(nèi)沒有毒素，比較安全。表達(dá)過程中，外源蛋白不能進(jìn)行純化，可以與菌體一同服用。乳酸桿菌等類型的菌株粘附作用較強(qiáng)，可以作用于機(jī)體黏膜，可以在黏膜處生產(chǎn)存在免疫與治療作用的蛋白和乳酸菌表達(dá)，而且能夠持續(xù)向機(jī)體釋放抗原蛋白，能夠引起機(jī)體自身的免疫應(yīng)答反應(yīng)和耐受反應(yīng)，提高人體以及動物的免疫作用。因此，這種系統(tǒng)的應(yīng)用前景較好，具有良好的抗原效果[3]。

2 乳酸菌口服疫苗產(chǎn)生的作用機(jī)理

乳酸菌類型口服疫苗的制作，是將乳酸菌種作為載體菌，利用基因工程技術(shù)對病毒和細(xì)菌等基因進(jìn)行重組，構(gòu)建能夠表達(dá)抗原的重組乳酸菌。這種乳酸菌攜帶外援的DNA疫苗，能夠通過口服或者滴鼻的形式，在宿主的黏膜系統(tǒng)中進(jìn)行抗原傳遞，然后在黏膜處產(chǎn)生刺激反應(yīng)，使其能夠產(chǎn)生反應(yīng)，同時(shí)可以激發(fā)宿主的免疫反應(yīng)，使其產(chǎn)生體液免疫和細(xì)胞免疫。這種免疫過程與病源感染的過程比較相似，能夠在黏膜水平預(yù)防病原的感染問題。重組乳酸菌種在應(yīng)用過程中不僅可以預(yù)防疾病問題，而且能夠治療和抑制已經(jīng)發(fā)生的感染問題[4]。

3 乳酸菌口服疫苗在豬病防治中的具體應(yīng)用

3.1 流行性腹瀉

這種疫病是由腹瀉病毒引起的一種高度接觸性傳染病。這種病會導(dǎo)致豬食欲不振，出現(xiàn)嘔吐和腹瀉問題，而且不同年齡的豬在發(fā)病過程中產(chǎn)生的臨床癥狀存在差異。例如，幼齡的豬一旦發(fā)病，會因脫水出現(xiàn)死亡問題。當(dāng)前這項(xiàng)疫病的發(fā)病率非常高，產(chǎn)生的臨床癥狀越來越復(fù)雜，經(jīng)常會出現(xiàn)大規(guī)模感染問題，給豬的養(yǎng)殖帶來嚴(yán)重危害。因此，應(yīng)該針對這種疾病進(jìn)行疫苗研制。在進(jìn)行疫苗研制過程中，可以將攜帶病毒基因的復(fù)制子基因轉(zhuǎn)入乳酸菌種中，得到重組乳酸桿菌的疫苗，并且通過對照實(shí)驗(yàn)判斷這種口服疫苗是否存在效果。經(jīng)過研究發(fā)現(xiàn)，重組乳酸桿菌口服疫苗不僅能激發(fā)動物的免疫反應(yīng)，而且能夠刺激動物的腸道，使其產(chǎn)生局部免疫反應(yīng)。將健康豬體中的基因缺陷型乳酸桿菌進(jìn)行分離，融入乳酸菌中，構(gòu)建含有保護(hù)性質(zhì)抗原基因的非抗性乳酸桿菌作為表達(dá)的載體，將其轉(zhuǎn)入乳酸桿菌，可以制作口服疫苗[5]。

3.2 傳染性腸胃炎

傳染性胃腸炎是一種急性傳染病，屬于高接觸性傳染疾病，是由冠狀病毒引起的一種豬傳染病。它主要的臨床癥狀為患病的豬會發(fā)生嘔吐和腹瀉情況，而且會出現(xiàn)脫水現(xiàn)象。與流行性腹瀉病毒進(jìn)行感染后，不易對豬的臨床癥狀進(jìn)行判斷，且不同年齡和品種的豬都易產(chǎn)生感染問題，特別是年齡較小的幼豬，感染后死亡率非常高。這種疾病呈世界性分布趨勢，給不同國家的養(yǎng)殖業(yè)都帶來了嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失。在進(jìn)行疫苗研制過程中，可以將含有病毒基因的載體轉(zhuǎn)入乳酸桿菌中進(jìn)行表達(dá)，制作乳酸菌口服疫苗。將這種疫苗進(jìn)行試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，這種口服疫苗在應(yīng)用過程中具有比較良好的免疫效果[6]。

3.3 輪狀病毒

這種疫病屬于呼腸孤病毒科，是導(dǎo)致豬類發(fā)生腹瀉的主要疫病之一。這種病的分布范圍較廣，感染性強(qiáng)，引發(fā)的疾病問題非常復(fù)雜，是一種世界范圍內(nèi)的疫病，給各地的養(yǎng)殖業(yè)帶來了嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失。一般來說，年齡較小的幼豬一旦患上這種疫病，發(fā)病率超過80%，死亡率達(dá)到20%。研究過程中發(fā)現(xiàn)，含有這種病毒蛋白的重組乳酸菌，在應(yīng)用過程中產(chǎn)生的黏膜和血清抗體可以促進(jìn)實(shí)驗(yàn)動物的細(xì)胞免疫和體液免疫，因此可以通過乳酸菌口服疫苗的制作有效防治這項(xiàng)疫病[7]。

3.4 細(xì)小病毒

這種疾病屬于細(xì)小病毒科，主要的臨床癥狀為懷孕的母豬產(chǎn)生繁殖障礙，導(dǎo)致幼齡豬出現(xiàn)皮膚炎癥和腹瀉問題。這種疫病的臨床表現(xiàn)和病情特點(diǎn)存在一定差異。疫病研究過程中可以發(fā)現(xiàn)，因?yàn)槠渌《净旌细腥景l(fā)生的問題較多，導(dǎo)致很多患病的豬出現(xiàn)了疾病綜合癥。在進(jìn)行疫苗研究的過程中，可以將分泌型病毒基因作用于乳酸桿菌進(jìn)行重組，通過重組基因使實(shí)驗(yàn)動物產(chǎn)生明顯的抗體，提高自身的抗病水平。分泌型重組基因可以成為口服疫苗的載體，而且在應(yīng)用過程中具有較好的免疫原性，在進(jìn)行重組大腸桿菌與含有病毒蛋白的干酪乳酸桿菌構(gòu)建的過程中可以使這項(xiàng)病毒產(chǎn)生分泌表達(dá)系統(tǒng)。這種應(yīng)用方法可以增強(qiáng)粘膜的免疫反應(yīng)，而且存在較好的免疫原性和抗原性，在研制過程中可以增強(qiáng)疫苗的應(yīng)用效果，并為疫苗的進(jìn)一步發(fā)展奠定良好的基礎(chǔ)。因此，將其應(yīng)用于豬病防治，可以更好地發(fā)揮效果[8]。

3.5 口蹄疫

這種疫病會導(dǎo)致動物產(chǎn)生急性傳染病，臨床表現(xiàn)為患病的豬口腔黏膜和腿部皮膚出現(xiàn)潰爛，而且傳播速度非?？欤瑐鞑シ秶容^廣，給畜牧業(yè)帶來了嚴(yán)重?fù)p失。當(dāng)前豬養(yǎng)殖的養(yǎng)殖規(guī)模不斷擴(kuò)大，這項(xiàng)疫病給養(yǎng)殖業(yè)帶來的危害變得越來越大，預(yù)防也存在更大的困難，而傳統(tǒng)的預(yù)防措施已經(jīng)不能有效預(yù)防這種疫病。在進(jìn)行新的防控技術(shù)研發(fā)過程中，需要采用安全有效的新型疫苗，才能有效防治這項(xiàng)疫病。在進(jìn)行口服疫苗研制的過程中，可以通過乳酸桿菌進(jìn)行疫苗研制，將其應(yīng)用于免疫幼豬。研究發(fā)現(xiàn)，這種疫苗能夠產(chǎn)生較強(qiáng)的抗體水平，可以誘發(fā)導(dǎo)體液的免疫和細(xì)胞出現(xiàn)免疫。在進(jìn)行重組類型乳酸桿菌免疫構(gòu)建的過程中發(fā)現(xiàn)，這種疫苗的應(yīng)用可以增強(qiáng)動物自身的免疫水平，預(yù)防感染問題[9]。

3.6 鏈球菌病

這種疫病可以分為30多個(gè)血清型，而且存在二次感染問題，致病性質(zhì)較強(qiáng)，傳播速度非?？?，一旦患病死亡率非常高。這種疫病的存在沒有明顯的季節(jié)性特征，因此疫病控制過程中應(yīng)該以預(yù)防為主。需要研發(fā)新型疫苗，構(gòu)建乳酸菌作為表達(dá)載體，使其能夠在干酪乳酸菌中進(jìn)行表達(dá)，從而制作口服類型疫苗。將這種疫苗應(yīng)用于動物可以發(fā)現(xiàn)，重組的乳酸桿菌可以刺激實(shí)驗(yàn)動物產(chǎn)生特異性抗體。這項(xiàng)發(fā)現(xiàn)為口服疫苗的制作提供了實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)，促進(jìn)了口服疫苗的發(fā)展，提高了應(yīng)用效果[10]。

4 應(yīng)用效果

應(yīng)用乳酸菌口服疫苗防治豬病的效果顯著，對于減少病豬、死豬起到了重要作用。本次研究中共調(diào)查應(yīng)用乳酸菌口服疫苗病豬138頭。結(jié)果顯示，138頭病豬中，痊愈的有69頭，病情控制的有61頭，病死的有8頭，防控率為94.20%?？梢姡樗峋诜呙鐚τ谪i病防治療效顯著。

5 結(jié)語

乳酸菌可在人體黏膜部位和生殖系統(tǒng)中存活，且不會致病，可以利用這一特性制作活菌類型的口服疫苗，而疫苗研發(fā)已經(jīng)受到了社會各界人士的廣泛關(guān)注?？诜愋偷囊呙缰饕抢梦改c粘液遞呈抗原，經(jīng)過不同的免疫通道反應(yīng)后，可以產(chǎn)生與常規(guī)治療方式類似的反應(yīng)。在當(dāng)前技術(shù)不斷發(fā)展的背景下，口服類型的疫苗已經(jīng)開始運(yùn)用到豬病防治中。這種疫苗的應(yīng)用效果較好，而且研究取得了技術(shù)性突破，可以誘導(dǎo)機(jī)體產(chǎn)生相應(yīng)的免疫反應(yīng)，能夠有效防治現(xiàn)有的豬病。

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