CIK聯(lián)合TP方案治療復(fù)發(fā)性卵巢癌的臨床療效觀察

段文麗，張 燕，張 瓊，周 航

(遵義醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院腹部腫瘤科,貴州遵義 563000)

2015年中國(guó)癌癥估測(cè)數(shù)據(jù)報(bào)告顯示[1]，我國(guó)當(dāng)年卵巢癌預(yù)計(jì)新發(fā)病例為52 100例，死亡病例為22 500例。超過70%的患者就診時(shí)已是臨床晚期，通過積極的手術(shù)及鉑類為基礎(chǔ)的聯(lián)合化療，60%～80%患者在一線治療后能得到臨床完全緩解，然而，70%的晚期患者終將復(fù)發(fā)[2]，有研究表明，腫瘤微轉(zhuǎn)移或腫瘤干細(xì)胞的存在是復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移的重要因素，而鉑類耐藥是導(dǎo)致治療失敗的主要原因[3-5]。細(xì)胞因子誘導(dǎo)的殺傷細(xì)胞(CIK)是腫瘤免疫治療的重要方法之一，可在不損害免疫系統(tǒng)結(jié)構(gòu)及功能的前提下，重建機(jī)體免疫系統(tǒng)，直接或間接殺傷腫瘤細(xì)胞，對(duì)耐藥腫瘤細(xì)胞亦有效果[6]。本研究分析比較經(jīng)手術(shù)和紫杉醇+順鉑(TP)方案化療后失敗的70例復(fù)發(fā)性卵巢癌患者，CIK聯(lián)合TP治療及單純TP方案化療之間療效，探討CIK與化療間相互關(guān)系，為卵巢癌的生物免疫治療提供理論依據(jù)及補(bǔ)充。

1 資料與方法

1.1一般資料 回顧性分析2009年1月至2016年11月本院腹部腫瘤科收治的復(fù)發(fā)性卵巢癌患者70例，分2組。其中，聯(lián)合治療組患者35例，年齡31～78歲，中位年齡50歲；單純化療組患者35例，年齡33～66歲，中位年齡51歲。納入標(biāo)準(zhǔn)：(1)均經(jīng)病理學(xué)確診為卵巢癌；(2)既往行手術(shù)和TP方案化療后獲得臨床緩解，停止化療到復(fù)發(fā)時(shí)間大于6個(gè)月；(3)卡氏評(píng)分(KPS)≥80分；(4)預(yù)計(jì)生存時(shí)間大于或等于2個(gè)月；(5)經(jīng)體格檢查和影像學(xué)檢查，至少有1處可測(cè)量的病灶。兩組患者臨床資料比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性，見表1。

表1 臨床資料

1.2方法

1.2.1化療方法 兩組患者均接受TP方案化療，其中聯(lián)合治療組在化療后加用CIK治療，單純化療組僅采用TP方案化療，具體化療劑量：紫杉醇135～175 mg/m2(靜脈滴注，第1天)，順鉑60～80 mg/m2(靜脈滴注，第2天)，第3周后再重復(fù)，3周為1個(gè)周期?；?～4個(gè)周期。兩組紫杉醇劑量變化范圍差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=2.574，P=0.462),見表2。

表2 兩組紫杉醇劑量范圍比較

1.2.2CIK治療 于化療前1天取外周血液約50 mL加入肝素抗凝，應(yīng)用Ficoll密度離心法取單個(gè)核細(xì)胞，然后應(yīng)用RPMI-1640培養(yǎng)基調(diào)整細(xì)胞密度，加入干擾素-γ(IFN-γ)，培養(yǎng)24 h后加入CD3單抗和白細(xì)胞介素-2(IL-2)，每3～4天更換1次液體，培養(yǎng)6 d后取CIK。然后抽取少量的CIK采用流式細(xì)胞儀進(jìn)行免疫學(xué)檢查，當(dāng)CD3+CD56+T細(xì)胞比例大于或等于50%，CD3+CD8+T細(xì)胞比例大于或等于30%，且CIK培養(yǎng)基真菌、細(xì)菌及內(nèi)毒素等均為陰性時(shí)，用生理鹽水將CIK洗滌3次，將其加入含1%人血清蛋白的生理鹽水中，在化療結(jié)束后第7天輸入到患者體內(nèi)，1次/d，連續(xù)輸注5 d。

1.3觀察指標(biāo)

1.3.1療效評(píng)價(jià) 近期觀察指標(biāo)為總有效率(RR)及疾病控制率(DCR)，每化療2個(gè)周期后通過CT和(或)MRI平掃+增強(qiáng)掃描進(jìn)行評(píng)價(jià)，參照2009年實(shí)體瘤反應(yīng)性評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)(RECIST1.1)[7]，治療療效分為完全緩解(CR)、部分緩解(PR)、病變穩(wěn)定(SD)和病變進(jìn)展(PD)，RR以CR率+PR率計(jì)算；DCR以CR率+PR率+SD率計(jì)算，遠(yuǎn)期觀察指標(biāo)為中位無進(jìn)展生存期(PFS)及總生存期(OS)，PFS定義為從開始化療至腫瘤進(jìn)展的時(shí)間；OS定義為從開始化療至死亡的時(shí)間。

1.3.2生活質(zhì)量評(píng)估 治療前、后KPS評(píng)分比較，以KPS評(píng)分下降百分比評(píng)價(jià)。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SPSS17.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，計(jì)數(shù)資料以率表示，比較采用χ2檢驗(yàn)，生存曲線采用Kaplan-Meier法繪制，Log-rank檢驗(yàn)比較PFS和OS。以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1RR及DCR 聯(lián)合治療組CR 0例，PR 23例，SD 8例，PD 4例；單純化療組CR 0例，PR 14例，SD 10例，PD 11例。聯(lián)合治療組和單純化療組的RR 分別為65.7%和40.0%，兩組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=4.644，P=0.031)。聯(lián)合治療組和單純化療組的DCR分別為88.6%和68.6%，兩組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=4.158，P=0.041)。

2.2OS及PFS 末次隨訪時(shí)間為2017年11月27日，隨訪時(shí)間2～80個(gè)月，中位隨訪時(shí)間為16個(gè)月。聯(lián)合治療組死亡23例，存活10例，失訪2例；單純化療組死亡24例，存活8例，失訪3例。聯(lián)合治療組及單純化療組患者中位OS分別為17個(gè)月(95%CI：20.9～42.8個(gè)月)和16個(gè)月(95%CI：15.7～28.5個(gè)月)，兩組患者中位OS差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.456)，見圖1A。聯(lián)合治療組和單純化療組患者中位PFS分別為8個(gè)月(95%CI：7.9～11.1個(gè)月)和 6個(gè)月(95%CI：5.6～8.6個(gè)月)，兩組患者中位PFS差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.048)，見圖1B。

A：OS；B:PFS;1：聯(lián)合治療組；2：?jiǎn)渭兓熃M

圖1 兩組OS、PFS比較

2.3生活質(zhì)量評(píng)估 治療后，聯(lián)合治療組的KPS評(píng)分上升或穩(wěn)定的患者有30例，下降5例；單純化療組的上升或穩(wěn)定患者有22例，下降13例，兩組KPS評(píng)分下降所占百分比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=4.786，P=0.029)，見表4。

表4 兩組KPS評(píng)分比較

3 討 論

卵巢癌是婦科惡性腫瘤中發(fā)病率位居第2，病死率位居第1的惡性腫瘤，嚴(yán)重威脅婦女健康。75%卵巢癌在治療后的18個(gè)月內(nèi)復(fù)發(fā)，復(fù)發(fā)后存活時(shí)間短，一般少于3 年，復(fù)發(fā)后卵巢癌很難治愈，往往對(duì)常規(guī)化療藥物耐藥，反應(yīng)差[8-9]，90%復(fù)發(fā)患者最終都發(fā)展為鉑類耐藥，而且晚期卵巢癌有強(qiáng)大的免疫逃逸能力，常常處于免疫抑制狀態(tài)，免疫抑制作用越強(qiáng)，越能促進(jìn)腫瘤逃逸[10]。

順鉑是第1個(gè)合成類的抗癌藥物，具有較強(qiáng)的抗癌作用和較廣的抗癌譜，可與其他多種抗癌藥物發(fā)揮協(xié)同作用且無明顯的交叉耐藥性，在臨床上應(yīng)用廣泛。紫杉醇則是從植物短葉紫杉中提取而來的純天然抗癌藥物，研究顯示，其通過促進(jìn)微管蛋白聚集并抑制其解聚干擾腫瘤細(xì)胞的動(dòng)力學(xué)，有效地抑制腫瘤細(xì)胞分裂和增殖，最終實(shí)現(xiàn)抗腫瘤作用，對(duì)卵巢癌具有較好療效，且與其他抗腫瘤藥物無交叉耐藥，兩者聯(lián)合化療，具有較好的協(xié)同作用[11-12]。

CIK 細(xì)胞是人單核細(xì)胞經(jīng)多種細(xì)胞因子誘導(dǎo)培養(yǎng)擴(kuò)增后獲得的一群NK樣T細(xì)胞，增殖速度快、抑瘤活性高和多重耐藥腫瘤細(xì)胞對(duì)其敏感，細(xì)胞實(shí)驗(yàn)表明CIK細(xì)胞能通過誘導(dǎo)卵巢癌耐藥株細(xì)胞凋亡，降低耐藥基因表達(dá)，提高耐藥細(xì)胞免疫原性，對(duì)卵巢癌耐藥細(xì)胞株具有較強(qiáng)的殺傷作用，且其與常規(guī)化療聯(lián)合具有協(xié)同抗腫瘤效應(yīng)[13]。越來越多的臨床數(shù)據(jù)證實(shí)，CIK細(xì)胞聯(lián)合化療具有重要的臨床價(jià)值，兩者之間互相協(xié)同，彌補(bǔ)了傳統(tǒng)療法或單獨(dú)CIK 細(xì)胞治療的不足，極大地鞏固治療效果，提高患者的生存時(shí)間及生活質(zhì)量[14-15]。目前CIK 對(duì)卵巢癌在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)及前期臨床試驗(yàn)中已取得了預(yù)期效果[16]，但仍缺乏高質(zhì)量、大樣本的研究證實(shí)CIK聯(lián)合化療治療卵巢癌的確切療效。

本研究回顧性分析70例經(jīng)手術(shù)和TP方案化療后失敗的復(fù)發(fā)性卵巢癌患者，結(jié)果顯示，聯(lián)合治療組和單純化療組均能在近期療效獲益，與單純化療組比較，聯(lián)合治療更具優(yōu)勢(shì)，提示對(duì)于卵巢癌患者CIK與化療存在某種協(xié)同作用。聯(lián)合治療能提高患者的PFS，較單純化療中位PFS延長(zhǎng)2個(gè)月，但是兩組中位OS比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，這可能與納入樣本數(shù)量少有關(guān)，還可能與治療療程及力度不夠有關(guān)，晚期腫瘤負(fù)荷重，腫瘤細(xì)胞逃逸及免疫抑制機(jī)制復(fù)雜多樣、輸注的有效細(xì)胞不足以充分發(fā)揮抗癌作用，不利于生成持續(xù)抗腫瘤效應(yīng)的記憶T細(xì)胞。雖然不具有可比性，但聯(lián)合治療仍延長(zhǎng)中位OS 1個(gè)月，提示存在更好地提高OS的趨勢(shì)，總體來說CIK聯(lián)合TP方案能夠使復(fù)發(fā)卵巢癌患者遠(yuǎn)期療效獲益。腫瘤治療的目的是在治愈腫瘤的同時(shí)還要提高腫瘤患者的生存質(zhì)量，本研究結(jié)果提示CIK細(xì)胞聯(lián)合TP方案化療治療復(fù)發(fā)卵巢癌較單純化療在提高患者生活質(zhì)量方面更有效?？傮w來說，CIK聯(lián)合TP方案化療綜合療效可能更好，由此推論，CIK可能具有一定的殺瘤作用且存在部分逆轉(zhuǎn)對(duì)順鉑耐藥的作用，同時(shí)有研究發(fā)現(xiàn)，絕大多數(shù)患者在輸注CIK過程中無不良反應(yīng)，提示CIK是一種安全可行的治療方式[17]。

本研究結(jié)果也存在一定的局限性：(1)CIK研究已經(jīng)在全國(guó)范圍內(nèi)停止，局限了該項(xiàng)治療的進(jìn)一步推動(dòng)，本研究后續(xù)開展受到制約；(2)該研究為回顧性研究，樣本量小，樣本內(nèi)部具有一定異質(zhì)性。因此，對(duì)于CIK與化療在卵巢癌治療上的關(guān)系還需要大樣本、前瞻性試驗(yàn)進(jìn)一步驗(yàn)證。

綜上所述，CIK作為一種安全有效的治療手段，與TP方案化療聯(lián)合治療綜合療效優(yōu)于單純化療組，在晚期卵巢癌的綜合治療中有一定的應(yīng)用價(jià)值。其作用機(jī)制可能與CIK本身殺瘤活性或部分逆轉(zhuǎn)順鉑耐藥有關(guān)，但仍需要更加深入的研究探討。